TCS-發(fā)用產(chǎn)品控油、蓬松功效評價方法

Q/LB.□XXXXX-XXXXII目次TOC\o"1-1"\h前言 II1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14評價原則 15評價方法 16數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 57結(jié)果判定 58評價報告 6前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由世衛(wèi)國華（北京）醫(yī)療科技研究院有限公司提出。本文件由中國商品學(xué)會歸口。本文件起草單位：世衛(wèi)國華（北京）醫(yī)療科技研究院有限公司。本文件主要起草人：。發(fā)用產(chǎn)品控油、蓬松功效評價方法范圍本文件規(guī)定了發(fā)用產(chǎn)品控油、蓬松功效評價的評價原則、評價方法、數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析、結(jié)果判定、評價報告。本文件適用于發(fā)用產(chǎn)品控油、蓬松功效的評價方法。規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。

控油功效oil-controleffects發(fā)用產(chǎn)品減少頭皮或頭發(fā)油脂分泌、降低油脂含量的能力。

蓬松功效volume-enhancingeffects發(fā)用產(chǎn)品使頭發(fā)呈現(xiàn)更飽滿、增加發(fā)根支撐力和頭發(fā)體積，提升視覺上蓬松感的效果。評價原則科學(xué)性原則評價方法應(yīng)基于科學(xué)原理，綜合運(yùn)用生物學(xué)、化學(xué)、物理學(xué)等多學(xué)科知識，確保評價結(jié)果準(zhǔn)確可靠。試驗設(shè)計、測試流程、數(shù)據(jù)分析等環(huán)節(jié)需遵循科學(xué)研究的基本規(guī)范，采用經(jīng)過驗證的試驗方法和技術(shù)手段?？陀^性原則評價過程應(yīng)盡量減少人為因素的干擾，測試數(shù)據(jù)應(yīng)客觀、真實、可追溯。使用標(biāo)準(zhǔn)化的儀器設(shè)備和試劑，嚴(yán)格控制試驗條件，確保不同測試人員、不同時間的測試結(jié)果具有可比性。全面性原則從多個維度對發(fā)用產(chǎn)品的控油、蓬松功效進(jìn)行評價，包括體外試驗、人體試驗和發(fā)束測試等。綜合考慮產(chǎn)品對頭皮油脂分泌、頭發(fā)油脂含量、頭發(fā)蓬松度、梳理性能等方面的影響，全面評估產(chǎn)品的功效。可靠性原則評價方法應(yīng)具有良好的重復(fù)性和再現(xiàn)性，在相同條件下，不同實驗室或同一實驗室不同時間進(jìn)行測試，應(yīng)能得到相近的結(jié)果。對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行嚴(yán)格的統(tǒng)計分析，確保結(jié)果的可靠性和有效性。評價方法體外功效評價試驗實驗原理人皮質(zhì)腺細(xì)胞在體外呈不規(guī)則多邊形，且在誘導(dǎo)分化后的成熟皮脂腺細(xì)胞中可發(fā)現(xiàn)大量脂滴。因此，人皮脂腺細(xì)胞體外培養(yǎng)模型可用于模擬人體皮膚的皮脂分泌，通過尼羅紅染料對皮脂腺細(xì)胞的脂質(zhì)進(jìn)行染色，從而評估待測樣品的控油功效。實驗材料實驗材料為以下：實驗樣品；人皮脂腺細(xì)胞；實驗主要試劑：DMEM培養(yǎng)基；青鏈霉素；胎牛血清；胰酶；PBS緩沖液；尼羅紅；亞油酸；視黃酸；4%多聚甲醛。試驗主要儀器：生物安全柜；二氧化碳培養(yǎng)箱；倒置相差顯微鏡；酶標(biāo)儀；分析天平；流式細(xì)胞計數(shù)儀；熒光顯微鏡。試驗方法細(xì)胞活性細(xì)胞接種：將細(xì)胞懸液接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，培養(yǎng)過夜。試驗分組：試驗設(shè)置調(diào)零組、空白對照組（BC）與樣品組。樣品組中，每個樣品設(shè)置8個濃度梯度，每個濃度梯度下設(shè)置6個重復(fù)孔。給藥：對照組每孔加入100μL的細(xì)胞培養(yǎng)基；樣品組每孔加入100μL含有相應(yīng)濃度樣品的培養(yǎng)基；調(diào)零組無細(xì)胞接種，僅加入100μL細(xì)胞培養(yǎng)基。加入受試物完成后將96孔板放置在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。細(xì)胞活性檢測：棄去上清液，每孔加入含有MTT的培養(yǎng)基，二氧化碳培養(yǎng)箱中避光孵育3h。孵育結(jié)束后棄去上清，每孔加入100μLDMSO，在酶標(biāo)儀570nm波長處測定吸光度。脂質(zhì)染色細(xì)胞接種：細(xì)胞接種于培養(yǎng)皿，培養(yǎng)過夜。試驗分組：試驗設(shè)置空白對照組（BC）、模型組（M）、陽性對照組（PC）及樣品組（TA）。樣品組設(shè)置3個濃度梯度，每個濃度梯度下設(shè)置3個重復(fù)。誘導(dǎo)與給藥：空白對照組僅加入2mL細(xì)胞培養(yǎng)基，模型組加入2mL含有亞油酸的細(xì)胞培養(yǎng)基，陽性對照組加入2mL含有亞油酸和視黃酸的細(xì)胞培養(yǎng)基，樣品組加入2mL含有亞油酸及測試濃度樣品的細(xì)胞培養(yǎng)基，在二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育48h。染色：孵育結(jié)束后棄上清，滴加1mL的PBS清洗細(xì)胞層，加入500μL的多聚甲醛于室溫下固定5min，用1mL的PBS清洗2次，加入500μL尼羅紅染料，37℃避光孵育15min。熒光顯微鏡觀察：用1mL的PBS清洗兩次，然后在倒置相差熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照記錄。數(shù)據(jù)分析細(xì)胞活性按式（1）計算： 細(xì)胞活性=樣品組OD-調(diào)零組OD空白對照組脂質(zhì)熒光強(qiáng)度應(yīng)進(jìn)行圖像分析，以模型組（M）為100%，計算各組的相對熒光強(qiáng)度。根據(jù)細(xì)胞活性結(jié)果，選擇正式試驗測試濃度，分別為：1.50μg/mL、0.15μg/mL、0.015μg/mL。人體功效評價試驗受試者選擇納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡在18-60歲（特殊產(chǎn)品可根據(jù)實際情況調(diào)整年齡范圍），身體健康，無頭皮疾病或其他可能影響測試結(jié)果的疾??；油性頭皮（油脂含量符合特定標(biāo)準(zhǔn)，如≥100μg/cm2）且有頭發(fā)扁塌問題的人群；自愿參加評價并簽署知情同意書，愿意遵守所有評價要求。排除標(biāo)準(zhǔn)：測試前30天內(nèi)有染發(fā)、燙發(fā)或漂白頭發(fā)行為者；既往有化妝品、發(fā)用品過敏史者；由特定疾?。ㄈ玢y屑病等）引起頭皮問題的患者；患有炎癥性皮膚病臨床未愈者；正在接受可能影響測試結(jié)果的治療（如抗癌化療、胰島素依賴性糖尿病治療等）的患者；哺乳期或妊娠婦女等。測試方法測試前準(zhǔn)備：受試者信息登記，完成知情同意書簽署；在溫度（21±1）℃、濕度（50±10）%RH的實驗室中靜坐30min，測試頭皮油脂含量、頭屑剝脫指數(shù)、頭發(fā)蓬松度（如顱頂高度測量值）等基礎(chǔ)值。產(chǎn)品使用：受試者按照產(chǎn)品使用說明使用待測發(fā)用產(chǎn)品，一般每3d使用一次，連續(xù)使用6d（可根據(jù)產(chǎn)品特性調(diào)整使用頻率和時長）?；卦L測試：在使用產(chǎn)品后即刻、3d、6d（可根據(jù)實際情況設(shè)置回訪時間點(diǎn)）進(jìn)行回訪。每次回訪前48h內(nèi)受試者不洗頭，測試頭皮油脂含量、頭屑剝脫指數(shù)、頭發(fā)蓬松度、頭皮酸堿度、皮膚經(jīng)表皮水分流失率等指標(biāo)，并讓受試者填寫自評問卷，評價頭發(fā)的易梳理程度、靜電程度、光澤程度、強(qiáng)韌度、易斷裂程度、分叉程度、柔順程度、頭皮瘙癢程度、頭皮泛紅程度等主觀感受。測試項目及儀器頭皮油脂含量：使用Sebumeter等儀器直接測量頭皮上油脂分泌量，測量時間為30秒，透光度代表測量區(qū)域皮膚表面的油脂含量，測量值越小，皮膚油脂含量越低。頭發(fā)蓬松度：通過數(shù)碼相機(jī)測量發(fā)際線最高點(diǎn)處與頭發(fā)最高點(diǎn)處的垂直距離定義顱頂高度數(shù)值（也可采用其他經(jīng)認(rèn)可的測量頭發(fā)蓬松度的方法），測量值越大，頭發(fā)越蓬松；或使用專業(yè)的頭發(fā)蓬松度測量設(shè)備，如SMS體積測試儀（Volscan）借助360度激光掃描技術(shù)量化頭發(fā)的蓬松度。其他項目：頭屑剝脫指數(shù)使用VisioScanVC20plus-Corneofix儀器測量；頭皮酸堿度使用pHmeter測量；皮膚經(jīng)表皮水分流失率使用TewameterTMNano測量；臉部視覺比例通過IPP軟件計算臉部測量面積與（臉部測量面積+頭發(fā)測量面積）的比值評估視覺小臉效果；皮膚成像使用Antera3D進(jìn)行分析。發(fā)束測試頭發(fā)梳理測試原理通過測量發(fā)梳在梳理頭發(fā)過程中的阻力（以梳理力或梳理功衡量）來評估頭發(fā)的梳理性，間接反映產(chǎn)品對頭發(fā)整體狀態(tài)（包括控油、蓬松效果影響下）的改善情況。儀器、試劑與材料儀器、試劑與材料如下：梳理測試儀器（有發(fā)梳及發(fā)束固定裝置，能使發(fā)梳從發(fā)根至發(fā)梢等速移動并持續(xù)記錄位移、時間、力（或載荷），有效量程和精確度滿足測試需求，力（或載荷）分辨力至少達(dá)到5mN）；恒溫恒濕箱：（25±0.5）℃，（60±5）%RH；恒溫水系統(tǒng)：（38±1）℃；中國人輕度受損扁平發(fā)束，可測試長度≥10cm，凈重≥6g；10%（w/w）K12（十二烷基硫酸鈉，化學(xué)純）水溶液；電子天平（分度值0.01g）；無粉乳膠手套。試驗環(huán)境及條件測試環(huán)境有溫濕度控制系統(tǒng)和數(shù)顯溫濕度監(jiān)控，測試環(huán)境溫度（23±2）℃、相對濕度（60±10）%。測試過程中，任何一個測試時間點(diǎn)的測試條件都保持一致，如測試者、場所、儀器等。測試方法測試前準(zhǔn)備測試前對發(fā)束進(jìn)行篩選和預(yù)處理，確保發(fā)束尺寸無顯著性差異，優(yōu)選未經(jīng)測試的發(fā)束。每組選取3～6個發(fā)束，清洗后在恒溫恒濕箱中平衡至干發(fā)狀態(tài)。儀器開機(jī)預(yù)熱并校正，設(shè)定合適參數(shù)?；€測試濕發(fā)梳理測試用流動恒溫清水充分潤濕發(fā)束，按每克發(fā)束0.2g清洗液的用量，在發(fā)束表面均勻使用，使用時間約30s，靜置約1min，然后沖洗約30s。將處理后的發(fā)束固定在測試位置，開始梳理循環(huán)測試。干發(fā)梳理測試濕發(fā)梳理測試后的發(fā)束放入恒溫恒濕箱靜置4h以上至干發(fā)狀態(tài)后取出，去除靜電后固定在測試位置，開始梳理循環(huán)測試。測試后的發(fā)束放置在恒溫恒濕箱待用。加樣處理測試濕發(fā)梳理測試取出已完成基線測試的發(fā)束，按樣品使用方法或以下步驟處理：流動恒溫清水充分潤濕，按每克發(fā)束0.2g樣品在發(fā)束表面均勻使用，使用時間約30s，靜置約1min，然后沖洗約30s。將處理后的發(fā)束固定在測試位置，開始梳理循環(huán)測試。干發(fā)梳理測試濕發(fā)梳理測試后的發(fā)束放入恒溫恒濕箱靜置4h以上至干發(fā)狀態(tài)，取出并固定在測試位置，開始梳理循環(huán)測試。結(jié)果計算梳理性改善率按式（2）計算： 梳理性改善率=C0-C式中：C0CS頭發(fā)蓬松測試原理基于頭發(fā)在無外力作用下自然膨脹或擴(kuò)展所占據(jù)的空間體積來評估其蓬松度，通過對影響發(fā)束膨脹的因素（如水分吸收、靜電效應(yīng)等）進(jìn)行控制，測試發(fā)束的蓬松效果。儀器、試劑與材料儀器、試劑與材料如下：相機(jī)；恒溫恒濕箱：（25±0.5）℃，（60±5）%RH；恒溫水系統(tǒng)：（38±1）℃；采用中國人自然黑圓柱形發(fā)束，可測試長度≥16cm，凈重≥10g；電子天平（分度值0.01g）；無粉乳膠手套。試驗環(huán)境及條件測試環(huán)境有溫濕度控制系統(tǒng)和數(shù)顯溫濕度監(jiān)控，測試環(huán)境溫度（25±2）℃、相對濕度（60±10）%。測試過程中，任何一個測試時間點(diǎn)的測試條件都保持一致，如測試者、場所、儀器等。測試方法測試前對發(fā)束進(jìn)行篩選和預(yù)處理，確保發(fā)束尺寸無顯著性差異，優(yōu)選未經(jīng)測試的發(fā)束。每組選取3～6個發(fā)束，清洗后在恒溫恒濕箱中平衡至干發(fā)狀態(tài)。儀器開機(jī)預(yù)熱并校正，設(shè)定合適參數(shù)。取出預(yù)處理后的發(fā)束，按樣品使用方法處理，處理后再次在恒溫恒濕箱中平衡至干發(fā)狀態(tài)，然后固定發(fā)束進(jìn)行拍照和讀數(shù)。結(jié)果判定樣品組的清洗前后發(fā)束寬度差值顯著大于空白對照組發(fā)束清洗前后差值（≥2cm），說明被測樣品有改善頭發(fā)蓬松性功效；反之，若差值無顯著性差異（＜2cm）或樣品組差值小于空白對照，則為陰性結(jié)果。數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析應(yīng)用SPSS等統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。統(tǒng)計分析均為雙尾檢驗，顯著性水平為α=0.05。儀器測量數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布要求時，自身前后的比較采用配對t檢驗；否則采用兩個相關(guān)樣本秩和檢驗。受試者主觀評價（如十分制問卷）自身前后對比采用兩個相關(guān)秩和檢驗。計算各項指標(biāo)的均值、標(biāo)準(zhǔn)差、最大值、最小值等描述性統(tǒng)計量，對于功效評價相關(guān)指標(biāo)（如控油率、蓬松度提升率、梳理性改善率等）進(jìn)行重點(diǎn)分析和呈現(xiàn)。結(jié)果判定控油功效判定與使用前相比，使用產(chǎn)品后任一回訪點(diǎn)（如3d、6d）頭皮油脂含量有顯著性下降（P＜0.05），判定產(chǎn)品具有控油功效；否則判定產(chǎn)品不具有控油功效。在體外測試中，樣品在特定濃度下能顯著降低皮脂腺細(xì)胞中性脂質(zhì)含量，也可輔助判斷產(chǎn)品的控油潛力。蓬松功效判定與使用前相比，使用樣品后任一回訪點(diǎn)（如3d、6d）顱頂高度值等頭發(fā)蓬松度測量指標(biāo)有顯著性改善（P＜0.05），判定樣品具有蓬松效果；在發(fā)束測試中，樣品組發(fā)束清洗前后寬度差值滿足陽性結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)（≥2cm），也可認(rèn)定產(chǎn)品具有改善頭發(fā)蓬松性功效；否則判定樣品不具有蓬松效果。綜合判定結(jié)合人體功效評價試驗、發(fā)束測試以及體外功效評價試驗（如有）的結(jié)果，全面評估產(chǎn)品的控油、蓬松功效。若各項測試結(jié)果均支持產(chǎn)品的功效宣稱，則可判定產(chǎn)品具有相應(yīng)的控油、蓬松