腸道神經(jīng)系統(tǒng)紊亂在克羅恩病中的意義2025

腸道神經(jīng)系統(tǒng)紊亂在克羅恩病中的意義2025腸道神經(jīng)系統(tǒng)(entericnervoussystem,ENS)是外周神經(jīng)系統(tǒng)的最大分支，整合在黏膜屏障和肌肉層之間[1]。根據(jù)分布部位不同，ENS主要分為肌間神經(jīng)叢和黏膜下神經(jīng)叢，含有功細(xì)胞(entericglialcell,EGC)Cajal,ICC)[2]。ENS是一個高度保守且復(fù)雜的胞網(wǎng)絡(luò)，能夠在沒有大腦或脊髓輸入的情況和腸道穩(wěn)態(tài)，例如控制腸道反射行為、黏膜展[3]。克羅恩病(Crohn'sdisease,CD)是一種透壁性炎癥反應(yīng)，表現(xiàn)為整個腸道的不連續(xù)跳躍損傷，黏膜下神經(jīng)程度的慢性炎癥改變和結(jié)構(gòu)異常[4]。本文綜述ENS在CD中的發(fā)生發(fā)一、單細(xì)胞測序圖譜中的ENS受益于組學(xué)技術(shù)發(fā)展，ENS的細(xì)胞異質(zhì)性和Morarach等[5]通過構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠模型，揭示了小腸肌間神經(jīng)叢發(fā)育中獨特的二元式有絲分裂模式。Drokhlyansky等[6]開發(fā)了RAISINRNA-seq(高ENS回收率、低污染)和MIRACL-seq(稀有細(xì)胞富集)2種單細(xì)胞測序技術(shù)，使用16例結(jié)直腸癌患者的癌旁正常結(jié)腸組織構(gòu)建人類結(jié)腸ENS圖譜，分析得到1445個神經(jīng)元，分屬14個亞群，其中4個Chat+Tac1+(Chat泛指膽堿能，Tac1為速激肽1)的擬興奮運動神經(jīng)元(putativeexcitatorymotorneurons,PEMN)、5個Nos1+ (Nos1泛指氮能)的擬抑制性運動神經(jīng)元(putativeinhibitorymotorneurons,PIMN)、2個Penk+(Penk為腦啡肽)的擬中間神經(jīng)元(putativeinterneurons,PIN)、1個CGRP+(CGRP為降鈣素基因相關(guān)肽)的擬感覺神經(jīng)元(putativesensGlp2r+(Glp2r為胰高血糖素樣肽-2受體)的擬分泌運動/血管舒張神而6054個結(jié)腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分析后聚集成3個共享亞群和3個患者富集亞群，其中黏膜神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞富集鐵蛋白基因(例如FTH1、FLT),肌間神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞黏附分子(例如NRXN1、CADM2)。小鼠ENS圖譜揭示不同腸段的顯著差異，如回腸富含PSN,缺失PSVN,且回腸神經(jīng)元高表達(dá)多種谷氨酸受體，這些差異可能反映腸道生理學(xué)特征。分析還發(fā)現(xiàn)，人類的ENS亞群與小鼠共享核心轉(zhuǎn)錄特征，但物種間仍存較少，且多樣性較低[6]。但May-Zhang等[7]對人類多個腸道腸肌神經(jīng)節(jié)和小鼠腸神經(jīng)元的轉(zhuǎn)錄進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，基于直系同源基因表達(dá)，和結(jié)腸的內(nèi)在初級傳入神經(jīng)元(intrinsicprimaryafferentneuron,IPAN)和神經(jīng)蛋白2(NXPH2)標(biāo)記的功能性神經(jīng)元亞型是保守的，其這些突破性進(jìn)展揭示了ENS的細(xì)胞類型多樣性、區(qū)域功能特異性及物種腸神經(jīng)元通過釋放炎性介質(zhì)和神經(jīng)遞質(zhì)增強(qiáng)或降低腸黏膜通透性來調(diào)節(jié)腸道屏障功能。研究發(fā)現(xiàn)，腸神經(jīng)元通過分泌白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-18可增強(qiáng)腸上皮杯狀細(xì)胞抗菌肽表達(dá)，減少致病菌入侵，維持腸黏膜通透性，從而保護(hù)腸道免疫功能[9]。支配腸黏膜的軸突還含有廣泛的神經(jīng)遞質(zhì)，如乙酰膽堿、血管活性腸肽、P物質(zhì)和神經(jīng)肽Y,它們參與腸黏膜屏障的功能調(diào)節(jié)和穩(wěn)態(tài)維持[10]。Ye等[11]利用葡聚糖硫酸鈉 (dextransulfatesodium,黏膜下層腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是最先與腸腔接觸的ENS成分[12]。膠質(zhì)細(xì)疾病的關(guān)鍵參與者，負(fù)責(zé)穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)[13]。Savidge等[14]發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)細(xì)飽和脂肪酸代謝物15-羥基二十碳四烯酸，其可以調(diào)節(jié)腸黏膜通透性有淋巴樣細(xì)胞(innatelymphoidcell,ILC)之間的密切調(diào)控上[16]。重塑ENS,并促進(jìn)其成熟[17]。腸道神經(jīng)元可以通過分泌b2腎上腺素以及I型集落刺激因子調(diào)控巨噬細(xì)胞功能，維持腸道穩(wěn)態(tài)[18]。在DSS胞等神經(jīng)節(jié)外因子，提示慢性炎癥中神經(jīng)免疫互作的關(guān)鍵機(jī)制[19]。ILC是先天免疫效應(yīng)系統(tǒng)的重要群體，主要定位于腸黏膜的上皮內(nèi)隔室和固有層[20]。研究發(fā)現(xiàn)，ILC2與表達(dá)神經(jīng)肽神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U(NMU)的膽堿能神經(jīng)元在腸道緊密共定位，在腸道黏膜性免疫反應(yīng)[21]。簇細(xì)胞分泌的IL-25激活I(lǐng)LC2,形成正反饋環(huán)路，促進(jìn)杯狀細(xì)胞增殖并增強(qiáng)黏膜防御[22]。此外，腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞通過釋放神經(jīng)營養(yǎng)因子刺激ILC3產(chǎn)生IL-22,驅(qū)動上皮修復(fù)[23]。CD患者小腸的腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)主要組織相容性復(fù)histocompatibilitycomplex,MHC)Ⅱ類抗原特別是人類白細(xì)胞抗原(humanleukocyteantigen-DR,HLA-DR),以維持免疫穩(wěn)態(tài)[24]。炎性刺激，有助于CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞活化，進(jìn)而導(dǎo)致腸系膜淋巴結(jié)CD4+T淋巴細(xì)胞群中Th17和Treg亞型活化[25]。研究者在CD和化學(xué)引誘因子，促進(jìn)淋巴細(xì)胞和腸神經(jīng)元經(jīng)叢炎[26]。3.ENS與腸道微生物：腸道微生物及其代謝物在ENS正常發(fā)育和功能中也發(fā)揮重要作用。Obata等[27]探討了腸道微生物-芳烴受體(arylhydrocarbonreceptor,AHR)-腸神經(jīng)軸的相互作用通路。通過比較特定病原體自由(SPF)小鼠和無菌小鼠的腸道神經(jīng)元細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄組，發(fā)現(xiàn)結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄譜254個基因表達(dá)上調(diào)，且SPF小鼠結(jié)腸神經(jīng)元表達(dá)更為豐富的基因，這表明腸神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄水的影響。同時，AHR作為一種生物傳感器，體結(jié)合，溝通腸道微生物與腸道神經(jīng)回路，維持腸道穩(wěn)態(tài)。在DS黏膜修復(fù)[28]。這些細(xì)胞分散在整個上皮并監(jiān)測腸腔。其中的特殊腸內(nèi)分泌細(xì)胞，可作為化學(xué)感受器向ENS傳遞管腔信息[29]。經(jīng)叢的結(jié)構(gòu)改變、神經(jīng)纖維肥大和增生以及神經(jīng)炎癥細(xì)胞浸潤(即神經(jīng)叢常肌間神經(jīng)叢；1B(HE×40):CD腸段黏膜下神經(jīng)叢；1C(HE×40):CD腸段肌間神經(jīng)叢；1D(HE×200):CD炎癥細(xì)胞包繞神經(jīng)CD神經(jīng)束內(nèi)可見淋巴細(xì)胞(黑色箭頭)和嗜酸性粒細(xì)胞(紅色箭頭);1G(HE×400):CD神經(jīng)束內(nèi)可見中性粒細(xì)胞(紅色箭頭);1H(HE1I(HE×200):CD肌間神經(jīng)叢CD45染色陽性(胞質(zhì)陽性，棕褐色顆粒)通過全腸壁標(biāo)本發(fā)現(xiàn)，在CD中存在特定的肌間神經(jīng)叢炎癥浸潤，包括單核細(xì)胞、B細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞[31]。神經(jīng)纖維肥大和增生表現(xiàn)為黏膜、黏膜下層和肌層可出現(xiàn)異常、不規(guī)則紡錘形"[32]。CD患者ENS細(xì)胞常呈現(xiàn)增殖失衡：腸道神經(jīng)元、腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及ICC的比例失調(diào)和數(shù)量異常增加，但亦有研究報道ICC數(shù)量減少和超微結(jié)構(gòu)破壞[33,34]。上述結(jié)果存在差異，可能是受癥狀的持續(xù)時間、疾病活動、染色方法的可靠性以及個體的遺傳/環(huán)境背景影響。同時經(jīng)元密度增加會加劇炎癥，而神經(jīng)元密度減少則減輕炎癥[35]。在斑馬這與動物模型和CD患者的臨床觀察結(jié)果相似[37]?；谏鲜鲎C據(jù)，可約50%的CD患者術(shù)后10年內(nèi)面臨復(fù)發(fā)，手術(shù)切除無法根治疾病[38]。緣的神經(jīng)叢炎或神經(jīng)節(jié)炎，即ENS神經(jīng)元或其周圍的免疫細(xì)胞浸潤可能是CD復(fù)發(fā)的組織學(xué)預(yù)測因素[39]。歐洲克羅恩和結(jié)腸炎組織(ECCO)共識也表明，神經(jīng)叢炎是復(fù)發(fā)的風(fēng)險因素，但其險的影響還需要進(jìn)一步研究[40]。CD患者術(shù)后復(fù)發(fā)與神經(jīng)從炎的關(guān)聯(lián)性已有報道，研究文獻(xiàn)匯總?cè)绫?所示。匯總12項研究中，5項明確顯示近端切緣肌間神經(jīng)叢炎可增加復(fù)發(fā)風(fēng)險[41,42,43,44,45,46,47,48,49,50,51,52]。黏膜下神經(jīng)叢炎的9項研究中，4項支持其預(yù)測價值[42,43,44,45,46, (如浸潤細(xì)胞類型、數(shù)量)及檢測手段不一致，多數(shù)研究依賴HE染色，僅少數(shù)采用免疫組化(如CD3、CD117標(biāo)記)[41,45]。在觀測神經(jīng)肌間神經(jīng)叢炎，只有部分研究報告伴有或不伴有黏偏倚。這里列舉出在研究中較為客觀的復(fù)發(fā)標(biāo)Rutgeerts評分，陽性結(jié)果為i2或更高[53]。臨床復(fù)發(fā)的定義為CD相關(guān)癥狀的存在，與放射學(xué)、內(nèi)鏡或?qū)嶒炇覚z查結(jié)果相關(guān)，嚴(yán)重者需要皮質(zhì)類固醇治療，或現(xiàn)有治療的增加。手術(shù)復(fù)發(fā)被癥狀或新的并發(fā)癥而行的進(jìn)一步手術(shù)，即再次手術(shù)[47,51,52]。最后是樣本量與研究設(shè)計差異，回顧性研究(83.3%)易受混雜因素干擾，而前瞻性研究(如Ferrante等[44])