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PAGE13-第4講細(xì)胞工程[考綱展示]1.植物的組織培育(Ⅱ)2.動物細(xì)胞培育與體細(xì)胞克隆(Ⅱ)3.細(xì)胞融合與單克隆抗體(Ⅱ)考點(diǎn)一|植物細(xì)胞工程技術(shù)及其應(yīng)用1.細(xì)胞工程的概念(1)原理方法:細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法。(2)操作水平:細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平。(3)達(dá)到目的:依據(jù)人們的意愿來變更細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。(4)類型:依據(jù)操作對象的不同,可分為植物細(xì)胞工程和動物細(xì)胞工程。2.細(xì)胞的全能性(1)含義:具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。(2)物質(zhì)基礎(chǔ):細(xì)胞內(nèi)含有本物種全部的遺傳信息。(3)植物細(xì)胞全能性表達(dá)的條件:具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu),處于離體狀態(tài),供應(yīng)肯定的養(yǎng)分、激素和其他相宜的外界條件。3.植物組織培育技術(shù)(1)理論基礎(chǔ):植物細(xì)胞的全能性。(2)填寫操作過程圖eq\x(外植體)eq\o(→,\s\up10(①))eq\x(A)eq\o(→,\s\up10(②))eq\x(B)→eq\x(植物體)圖中①表示脫分化,②表示再分化,A表示愈傷組織,B表示叢芽或胚狀體。(3)培育條件①無菌:培育基滅菌、培育材料和培育器械消毒。②固體培育基:大多由無機(jī)養(yǎng)分成分、有機(jī)養(yǎng)分成分、激素、瓊脂四部分組成。③光照:脫分化階段不須要光照。④激素調(diào)控:培育基中生長素和細(xì)胞分裂素的比例調(diào)控組織培育進(jìn)程。4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)概念:將不同種的植物體細(xì)胞,在肯定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。(2)原理:體細(xì)胞雜交利用了細(xì)胞膜的流淌性,雜種細(xì)胞培育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。(3)過程(4)意義:克服不同種生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙、獲得雜種植株。5.植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑①微型繁殖:用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培育技術(shù)。②作物脫毒:選取作物莖尖、根尖等無毒組織進(jìn)行組織培育,獲得脫毒苗的技術(shù)。③人工種子:以植物組織培育得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料,經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子,可以解決某些植物牢固率低、繁殖困難的問題。(2)作物新品種的培育:單倍體育種和突變體的利用。(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):即利用植物組織培育技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料和生物堿等。eq\a\vs4\al([思索回答])1.通過植物體細(xì)胞雜交形成的雜交植株是否肯定可育?提示:是否可育看同源染色體能否正常聯(lián)會。若植物體細(xì)胞雜交過程得到的雜種植物存在同源染色體,能正常聯(lián)會,則可育。2.如圖表示植物分化、脫分化和再分化過程及其關(guān)系。試回答相關(guān)問題:(1)脫分化形成的愈傷組織細(xì)胞與正常體細(xì)胞相比,前者在結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)是什么?提示:高度液泡化、無定形、細(xì)胞壁薄。(2)經(jīng)脫分化形成愈傷組織為什么須要避光培育?提示:避光的作用是為了愈傷組織的形成,若賜予光照,則會不同程度的形成維管組織(處于已分化狀態(tài)),就不能接著分化,造成組織培育失敗。(3)利用紫草細(xì)胞脫分化形成的愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行培育提取紫草素,與常規(guī)的從植物體內(nèi)提取具有的明顯優(yōu)點(diǎn)是什么?(至少答出三點(diǎn))提示:可以克服地理、氣候等植物生長環(huán)境條件的限制,實(shí)現(xiàn)工業(yè)化、自動化生產(chǎn);產(chǎn)量大、純度高。(4)從分化、脫分化和再分化的結(jié)果看,它們的實(shí)質(zhì)都是什么?提示:基因在特定的時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá)的結(jié)果。1.激素比例與細(xì)胞分裂分化的關(guān)系(1)適當(dāng)提高生長素與細(xì)胞分裂素的比例簡單生根。(2)適當(dāng)提高細(xì)胞分裂素與生長素的比例簡單生芽。(3)比例適中誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織。如圖所示:2.對不同物種植物體細(xì)胞雜交和有性雜交的比較(1)結(jié)果不同①體細(xì)胞雜交:不管染色體數(shù)、基因組還是染色體組都采納干脆相加。②植物有性雜交:先減半再相加。(2)適用的定律不同①有性生殖過程中符合孟德爾遺傳定律。②植物體細(xì)胞雜交:屬于無性生殖,不符合孟德爾遺傳定律??挤?植物組織培育過程分析1.(2024·海南高考)甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料,利用植物組織培育技術(shù)繁殖該植物?;卮鹣铝袉栴}:(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體,在肯定條件下進(jìn)行組織培育,均能獲得試管苗,其原理是______________________。(2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培育基中,均加入肯定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到______________。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培育獲得幼苗,該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是____________________(填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。(3)圖中A、B、C所示的是不同的培育結(jié)果,該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培育基中兩種激素用量的不同造成的,這兩種激素是_________。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)________形成的。(4)若該種植物是一種雜合體的珍貴花卉,要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉,可用組織培育方法繁殖,在培育時(shí),________(填“能”或“不能”)采納經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體,緣由是_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析:(1)外植體在肯定條件下進(jìn)行組織培育獲得試管苗的原理是植物細(xì)胞的全能性。(2)蔗糖水解后可得到一分子的葡萄糖和一分子果糖;若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培育獲得幼苗,該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是應(yīng)當(dāng)具備整套遺傳物質(zhì),即具有完整的細(xì)胞核。(3)在植物組織培育過程中加入的細(xì)胞分裂素、生長素的比例不同,誘導(dǎo)形成的器官不同;外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織,再分化形成完整的植株。(4)依題意不能采納經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體,緣由是對雜合體的植株來說,其體細(xì)胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同,用花粉粒進(jìn)行組織培育得到的花卉基因型不同于原植株。答案:(1)植物細(xì)胞的全能性(2)葡萄糖、果糖具有完整的細(xì)胞核(3)細(xì)胞分裂素、生長素脫分化(4)不能對雜合體的植株來說,其體細(xì)胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同,用花粉粒進(jìn)行組織培育得到花卉基因型不同于原植株考法2考查植物細(xì)胞工程技術(shù)及應(yīng)用2.(2013·全國卷Ⅱ)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某探討小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物?;卮鹣铝袉栴}:(1)為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用________酶和________酶去除細(xì)胞壁,獲得具有活力的________,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培育形成________組織,然后經(jīng)過________形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為________________。(2)上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指__________________________________________________________________________________。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的,而上述雜種植株是可育的,造成這種差異的緣由是______________________________________________________________________________________________________。(3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培育得到的____________________________等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。解析:(1)植物體細(xì)胞雜交的過程包括植物細(xì)胞融合和植物組織培育,其過程依次為酶解法去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁、用物理或化學(xué)法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁、雜種細(xì)胞經(jīng)植物組織培育(脫分化形成愈傷組織,再分化形成幼根和芽進(jìn)而形成完整植株)培育成完整植株。其中,酶解法去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁利用了酶的專一性,選擇纖維素酶和果膠酶,水解植物細(xì)胞的細(xì)胞壁的主要成分——纖維素和果膠,暴露出有活力的原生質(zhì)體。(2)多倍體是指體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上的染色體組的個(gè)體。甲和乙均為二倍體植物,假設(shè)二者有性雜交的后代不行育,其緣由是該后代在進(jìn)行減數(shù)第一次分裂過程中,由于沒有同源染色體,聯(lián)會出現(xiàn)紊亂,不能產(chǎn)生可育的配子。而植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的雜種植株,細(xì)胞內(nèi)含有原物種體細(xì)胞內(nèi)的染色體,在減數(shù)第一次分裂過程中能夠進(jìn)行同源染色體配對,產(chǎn)生可育的配子。(3)經(jīng)植物組織培育得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等,用人工薄膜包裝后可得到人工種子。答案:(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(或分化)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體(其他合理答案也可以)在減數(shù)分裂過程中,前者染色體聯(lián)會異樣,而后者染色體聯(lián)會正常(其他合理答案也可以)(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽(答對其中一個(gè)即可)3.回答下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用有關(guān)的問題:(1)植物細(xì)胞工程可用于培育脫毒苗,這一方法的原理是__________________,所以再生的植株可能不帶病毒。(2)微型繁殖過程中,相宜濃度的生長素單獨(dú)運(yùn)用可誘導(dǎo)試管苗________,而與________配比相宜時(shí)可促進(jìn)芽的增殖。若要抑制試管苗的生長,促使愈傷組織產(chǎn)生和生長,須要相宜的生長調(diào)整劑是________(填“脫落酸”或“2,4-D”)。(3)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培育基中懸浮培育。請回答下列問題:在愈傷組織懸浮培育時(shí),細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變更如圖所示。細(xì)胞干重在12d后下降的緣由有______________________。解析:(1)利用莖尖等分生部位進(jìn)行組織培育獲得脫毒苗的原理是植物體細(xì)胞具有全能性。(2)相宜濃度的生長素單獨(dú)運(yùn)用可誘導(dǎo)試管苗生根。微型繁殖培育基中運(yùn)用的生長素與細(xì)胞分裂素比例不同,可以分別誘導(dǎo)根、芽的形成。運(yùn)用高濃度的植物生長素類似物(如2,4-D)可以抑制試管苗的生長。(3)由蔗糖濃度下降可知,外植體離體培育過程中須要消耗蔗糖,12天后蔗糖濃度變更不大;pH下降會影響酶的活性,愈傷組織細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用,對物質(zhì)的合成小于分解,故細(xì)胞干重下降。答案:(1)植物細(xì)胞的全能性(2)生根細(xì)胞分裂素2,4-D(3)蔗糖濃度下降,pH降低考點(diǎn)二|動物細(xì)胞培育與核移植技術(shù)1.動物細(xì)胞培育(1)地位:動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有動物細(xì)胞培育、動物細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞融合等。其中動物細(xì)胞培育是其他動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。(2)原理:細(xì)胞增殖。(3)培育過程(4)培育條件①無菌、無毒環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(培育液和培育用具進(jìn)行無菌處理,培育過程加抗生素,定期更換培育液,清除代謝產(chǎn)物))②養(yǎng)分:除糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素之外通常還需加入血清、血漿等一些自然成分。③相宜的溫度:36.5°C±0.5℃④氣體環(huán)境eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(95%的空氣:其中O2為細(xì)胞代謝必需,5%的CO2:維持培育液的pH))2.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物(1)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程eq\o(→,\s\up10(細(xì)胞),\s\do17(融合))重組細(xì)胞eq\o(→,\s\up10(發(fā)育))胚胎eq\o(→,\s\up10(胚胎移植))代孕母體→生出與細(xì)胞核供體遺傳性狀基本相同的個(gè)體(2)原理:動物體細(xì)胞核具有全能性。(3)應(yīng)用①加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。②愛護(hù)瀕危物種。③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。④作為異種移植的供體。eq\a\vs4\al([思索回答])1.動物細(xì)胞培育中兩次運(yùn)用胰蛋白酶的作用有何不同?提示:第一次運(yùn)用胰蛋白酶處理剪碎的組織使之分散成單個(gè)細(xì)胞,其次次用胰蛋白酶的目的是使貼壁細(xì)胞從瓶壁上脫落下來,分散成單個(gè)細(xì)胞。2.動物細(xì)胞工程技術(shù)推動了免疫學(xué)和畜牧業(yè)的發(fā)展。如圖為通過體細(xì)胞核移植過程得到克隆牛的流程圖。eq\b\lc\\rc\}(\a\vs4\al\co1(\a\vs4\al(高產(chǎn)奶牛,供體)→取體細(xì)胞,(受體→\a\vs4\al(去核的,卵母細(xì)胞))))eq\a\vs4\al(將供體細(xì)胞注入,去核卵母細(xì)胞)→eq\a\vs4\al(構(gòu)建重,組胚胎)→eq\a\vs4\al(將胚胎移入受體,代孕母牛體內(nèi))→犢牛(1)與去核卵母細(xì)胞融合的供體高產(chǎn)奶牛細(xì)胞培育一般不會超過10代,緣由是什么?激活受體細(xì)胞除了用電刺激的方法外,還可以用什么方法?(寫兩種實(shí)際方法)提示:保持細(xì)胞正常的二倍體核型;鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等。(2)動物體細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植的緣由是什么?提示:動物胚胎的細(xì)胞分化程度低,復(fù)原其全能性相對簡單,而動物體細(xì)胞分化程度高,復(fù)原其全能性非常困難。(3)在現(xiàn)有技術(shù)條件下,還不能將從動物體內(nèi)分別出來的成熟體細(xì)胞,干脆培育成一個(gè)新個(gè)體,而是將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體,你認(rèn)為最可能的緣由是什么?提示:卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性得到表達(dá)。動物細(xì)胞培育和核移植時(shí)留意的五個(gè)問題(1)在分散細(xì)胞時(shí),需用胰蛋白酶分散細(xì)胞,不能用胃蛋白酶,因?yàn)槲傅鞍酌缸饔玫南嘁藀H約為1.8,胰蛋白酶作用的相宜pH為7.2~7.8,而多數(shù)動物細(xì)胞培育的相宜pH為7.2~7.4。(2)取供體動物的體細(xì)胞培育,一般選用10代以內(nèi)的細(xì)胞,因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型,保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。(3)克隆動物是由重組的細(xì)胞經(jīng)培育而來的,該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞,細(xì)胞核基因來源于供應(yīng)細(xì)胞核的親本,其遺傳物質(zhì)來自兩個(gè)親本。(4)克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同,少數(shù)性狀與供應(yīng)卵母細(xì)胞的動物相同,與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。(5)從生殖方式的角度看,動物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)屬無性生殖,重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵,須要?jiǎng)游锛?xì)胞培育和胚胎工程技術(shù)的支持??挤?動物細(xì)胞培育過程分析1.某探討小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí),以動物肝細(xì)胞為材料,測定藥物對體外培育細(xì)胞的毒性。供培育的細(xì)胞有甲、乙兩種,甲細(xì)胞為正常肝細(xì)胞,乙細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞。請回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培育的問題:(1)動物細(xì)胞培育應(yīng)在含5%CO2的恒溫培育箱中進(jìn)行,CO2的作用是__________________________________________________________。(2)將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培育瓶中培育,培育液及其他培育條件均相同,一段時(shí)間后,視察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量________。(3)在兩種細(xì)胞生長過程中,當(dāng)甲細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),其生長______。藥物試驗(yàn)須要大量細(xì)胞,兩種細(xì)胞頻繁傳代,甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更________。若用動物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液,需用________消化處理。(4)某探討小組探討了血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培育的影響,試驗(yàn)結(jié)果如圖。從該圖供應(yīng)的信息可以獲得的正確結(jié)論有_____________________________________________________________________________。解析:(1)動物細(xì)胞培育時(shí)加入含5%CO2的目的是為了維持培育液的pH。(2)已知甲細(xì)胞為正常肝細(xì)胞,乙細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞。肝腫瘤細(xì)胞比正常肝細(xì)胞的分裂實(shí)力強(qiáng),細(xì)胞周期短,因此在其他條件相同時(shí),相同時(shí)間內(nèi)肝腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的子代細(xì)胞多。(3)甲細(xì)胞為正常肝細(xì)胞,存在接觸抑制,而乙細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞,已經(jīng)失去接觸抑制現(xiàn)象,因此在這兩種細(xì)胞生長過程中,當(dāng)甲細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),其生長停止。乙細(xì)胞能無限增殖,因此其傳代的次數(shù)比甲多;胰蛋白酶能消化組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì),使組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞。(4)從圖中曲線可看出培育基中有無血清對癌細(xì)胞的培育影響不大,即二者的細(xì)胞數(shù)在曲線上差別不大。正常細(xì)胞的培育過程中有血清的培育基在相同時(shí)間內(nèi)培育得到的細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于無血清的培育基所獲得的細(xì)胞數(shù)。癌細(xì)胞培育與正常細(xì)胞培育二者的差距比較大,正常細(xì)胞達(dá)到肯定的數(shù)目后不再增加,而癌細(xì)胞卻能不斷增加。答案:(1)維持培育液的pH(2)少(3)停止少胰蛋白酶(4)①有無血清對正常細(xì)胞培育的影響不同;②培育基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培育;③培育基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培育影響不大考法2細(xì)胞核移植技術(shù)及應(yīng)用2.(2024·全國卷Ⅱ)如圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?;卮鹣铝袉栴}:(1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為______。過程①表示去除細(xì)胞核,該過程一般要在卵母細(xì)胞培育至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,去核時(shí)常采納______的方法。②代表的過程是______。(2)經(jīng)過多次傳代后,供體細(xì)胞中________的穩(wěn)定性會降低。因此,選材時(shí)必需關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其緣由是_________________________________________________________________________________________________________。(4)與克隆羊“多莉(利)”培育勝利一樣,其他克隆動物的勝利獲得也證明白_________________________________________________________________________________________________________________。解析:(1)哺乳動物的正常細(xì)胞核中性染色體的組成為XX(雌性)或XY(雄性)。卵母細(xì)胞在培育至減數(shù)其次次分裂的中期時(shí),常采納顯微操作法去除細(xì)胞核。②過程是將早期胚胎移植到代孕個(gè)體的子宮中,即代表的是胚胎移植。(2)一般來說,動物細(xì)胞在傳代培育到10~50代時(shí),部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會發(fā)生變更,即遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會降低。因此,選材時(shí)一般選10代以內(nèi)的細(xì)胞,以保證細(xì)胞正常的二倍體核型。(3)獲得的克隆動物性狀與供體動物基本相同,但不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析,性狀不完全相同的緣由是:克隆動物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的性狀產(chǎn)生影響。(4)高度分化的動物體細(xì)胞的全能性受到限制,但其細(xì)胞核的全能性在卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的物質(zhì)的作用下仍能得以表達(dá)。故克隆羊“多莉(利)”以及其他克隆動物的培育勝利,證明白高度分化的動物體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性。答案:(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的性狀產(chǎn)生影響(4)動物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性考點(diǎn)三|動物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備1.動物細(xì)胞融合(1)原理:細(xì)胞膜的流淌性。(2)融合方法:聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電刺激等。(3)意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,也為制造單克隆抗體開拓了新途徑。2.單克隆抗體制備(1)單克隆抗體制備過程(2)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。(3)單克隆抗體的應(yīng)用:作為診斷試劑;制成“生物導(dǎo)彈”;用于治療疾病和運(yùn)載藥物。eq\a\vs4\al([思索回答])1.若僅考慮細(xì)胞的兩兩融合,B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞融合后產(chǎn)生的細(xì)胞有3種類型,緣由是什么?提示:出現(xiàn)不同種類型是因?yàn)榧?xì)胞融合是隨機(jī)的。2.下面兩幅圖是單克隆抗體制備的示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:(1)圖1和圖2所示的過程中,都必需用到的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段是什么?提示:動物細(xì)胞培育(或動物細(xì)胞融合)。(2)圖2中受體細(xì)胞A代表的是何種細(xì)胞?B所示的細(xì)胞特點(diǎn)是什么?提示:漿細(xì)胞(效應(yīng)B);既能無限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體。(3)圖1中Ⅱ過程與植物原生質(zhì)體融合的不同之處是用什么?Ⅱ過程的原理是什么?提示:Ⅱ過程用滅活的病毒誘導(dǎo);細(xì)胞膜的流淌性。單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析(1)對動物免疫的緣由:B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程,即接觸抗原,增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞,才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,所以與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞事實(shí)上是漿細(xì)胞。(2)雜交瘤細(xì)胞具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅具有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的實(shí)力,還具有骨髓瘤細(xì)胞在體外培育條件下大量增殖的實(shí)力,可以克服單純B淋巴細(xì)胞不能無限增殖的缺點(diǎn),而大量生產(chǎn)單克隆抗體。考法動物細(xì)胞融合技術(shù)及單克隆抗體的制備(2014·全國卷Ⅰ改編)某探討者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與體外培育的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按肯定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培育及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。回答下列問題:(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最少須要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是________小鼠,理由是____________________________。(2)細(xì)胞融合試驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有_________________________________________________________________,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的緣由是_______________________________________________________________________。(3)雜交瘤細(xì)胞中有________個(gè)細(xì)胞核。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培育后都不能存活,緣由是___________________________________________________________。解析:(1)據(jù)圖分析可知,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)幾乎都達(dá)到16000以上,小鼠Y的血清抗體的效價(jià)最高,最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外,還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞。細(xì)胞的融合是隨機(jī)的,并且不行能全部細(xì)胞都融合,故體系中會出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)動物細(xì)胞融合后形成的是具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。(4)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的,且經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞高度分化,不能無限增殖,而是經(jīng)多次傳代培育后漸漸蒼老死亡。答案:(1)4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%(3)1(4)不能無限增殖真題體驗(yàn)|感悟高考淬煉考能1.(2024·江蘇高考)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原,可在牛早期胚胎培育液中添加H-Y單克隆抗體,篩選胚胎進(jìn)行移植,以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是()A.H-Y單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌B.應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C.鑒別后的雄性胚胎可干脆做胚胎移植D.用H-Y抗原免疫母牛可獲得相應(yīng)抗體D[A錯(cuò):抗體是由漿細(xì)胞產(chǎn)生的。B錯(cuò):原腸胚分化程度較高,取原腸胚細(xì)胞做雌雄鑒別易損傷胚胎,影響胚胎發(fā)育,應(yīng)選用囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞。C錯(cuò):因題干中明確了利用的是乳腺生物

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