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PAGEPAGE7傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和微生物的利用一、選擇題1.(2025屆高三·蘇州調(diào)研)下列有關(guān)微生物發(fā)酵技術(shù)的敘述,錯誤的是()A.傳統(tǒng)的發(fā)酵過程受技術(shù)條件限制,通常不進(jìn)行無菌操作B.成品腐乳表面的皮膜是由毛霉等真菌的菌絲形成的,對人體無害C.制備果酒、果醋和腐乳時,都是以建立種群優(yōu)勢作為發(fā)酵的基本條件D.果醋的制備可以建立在果酒發(fā)酵的基礎(chǔ)上,也可以干脆利用葡萄汁發(fā)酵解析:選A傳統(tǒng)的發(fā)酵過程受技術(shù)條件限制,通常滅菌不嚴(yán)格,但也進(jìn)行無菌操作。成品腐乳表面的皮膜是由毛霉等真菌的生長,產(chǎn)生的菌絲進(jìn)入豆腐塊的深層而形成,對人體無害。制備果酒、果醋和腐乳時,建立的優(yōu)勢種群依次是酵母菌、醋酸菌、毛霉,以此作為發(fā)酵的基本條件。當(dāng)氧氣、糖源都足夠時,醋酸菌將果汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)氧氣足夠、缺少糖源時,醋酸菌可以先將酒精變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿?,因此果醋的制備可以建立在果酒發(fā)酵的基礎(chǔ)上,也可以干脆利用葡萄汁發(fā)酵。2.下列有關(guān)制作果酒、果醋和腐乳的敘述,錯誤的是()A.果酒的制作過程中既涉及有氧呼吸又涉及無氧呼吸B.果醋發(fā)酵溫度較高,且發(fā)酵過程要特殊留意氧氣的供應(yīng)C.變酸的酒表面的菌膜含醋酸菌,腐乳的“皮”為毛霉菌絲D.發(fā)酵過程中全部的相關(guān)反應(yīng)都是在微生物的細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的解析:選D腐乳制作過程中,蛋白質(zhì)和脂肪的水解反應(yīng)發(fā)生在毛霉的細(xì)胞外。3.(2024·鹽城三模)下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述,正確的是()A.果酒、果醋和腐乳制作中,利用的都是微生物胞內(nèi)酶B.制作果醋的醋酸菌,屬于嚴(yán)格厭氧的微生物C.青霉、毛霉、曲霉等均參加了腐乳的發(fā)酵D.制作果酒、果醋和腐乳所需時間基本相同解析:選C果酒、果醋是微生物的代謝產(chǎn)物,須要的酶為胞內(nèi)酶;腐乳制作是利用毛霉產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶分解蛋白質(zhì)、脂肪,蛋白酶、脂肪酶是胞外酶。制作果醋須要醋酸菌,它是一種好氧的微生物。青霉、毛霉、曲霉等真核生物均參加了腐乳的發(fā)酵。制作果酒的時間一般為10~12d,制作果醋的時間一般為7~8d,制作腐乳的時間稍長。4.如圖裝置可用于生物技術(shù)實(shí)踐的相關(guān)試驗(yàn)。下列有關(guān)敘述正確的是()A.制作果酒、果醋或腐乳時,所需限制的溫度都是相同的B.乙裝置可以先用于果酒的制作,后用于果醋的制作C.用裝置甲制作腐乳時,自下而上隨著豆腐塊加高漸漸削減用鹽量D.裝置乙中b為排氣口,c為充氣口,可防止空氣中微生物的污染解析:選B制作果酒、果醋或腐乳時,限制的溫度分別是18~25℃、30~35℃、15~18℃;用裝置甲制作腐乳時,越接近瓶口微生物感染機(jī)會越多,所以加鹽量應(yīng)增大;裝置乙中b為充氣口,c為排氣口,排氣口長而彎曲可防止空氣中微生物的污染。5.下列有關(guān)微生物培育的敘述,錯誤的是()A.培育基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌B.各種微生物培育基的配方中必需包含碳源、氮源、水、無機(jī)鹽及瓊脂等成分C.純化培育微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法D.以尿素為唯一氮源的培育基可以選擇培育分解尿素的微生物解析:選B各種微生物培育基的配方中一般都包含碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等,但由于各種微生物生長特點(diǎn)不同,培育基中添加的養(yǎng)分物質(zhì)也不相同,如以CO2為碳源的自養(yǎng)型生物,培育基中不必添加碳源,而一些能以N2為氮源的微生物,培育基中也不必加氮源;另外只有固體培育基中才常添加瓊脂做凝固劑。6.養(yǎng)殖池中存在的有毒物質(zhì)主要是氨及亞硝酸,這兩種物質(zhì)可被硝化細(xì)菌汲取利用。若要對養(yǎng)殖池底泥中硝化細(xì)菌分別與計(jì)數(shù),則()A.須要配制添加肯定濃度氨鹽的牛肉膏蛋白胨培育基,以篩選硝化細(xì)菌B.應(yīng)對采集底泥運(yùn)用的工具進(jìn)行滅菌,全部接種過程均需在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.可以采納平板劃線法進(jìn)行計(jì)數(shù),還需與未接種的空白培育基同時培育D.應(yīng)將培育基置于30℃恒溫下培育12h后,統(tǒng)計(jì)培育基中全部菌落數(shù)解析:選B牛肉膏蛋白胨本身含有氮源,很多微生物都可以其作為氮源,因此加入牛肉膏蛋白胨無法篩選硝化細(xì)菌;平板劃線法可以分別菌種,但不能用于計(jì)數(shù);培育過程中應(yīng)每隔一段時間視察,直到菌落穩(wěn)定起先計(jì)數(shù)。7.(2025屆高三·南通調(diào)研)下列檢測某熟制食品中大腸桿菌是否超標(biāo)的試驗(yàn)操作,不合理的是()A.待檢測食品須要經(jīng)過滅菌操作后取樣檢測B.應(yīng)設(shè)置未接種的培育基,作為試驗(yàn)的比照C.用稀釋涂布平板法接種、計(jì)數(shù)大腸桿菌的活菌數(shù)D.接種后將培育皿倒置并在相宜溫度下培育解析:選A待檢測食品滅菌后會將大腸桿菌殺死,無法檢測大腸桿菌是否超標(biāo);應(yīng)設(shè)置未接種的培育基作為試驗(yàn)的比照;應(yīng)用稀釋涂布平板法接種、計(jì)數(shù)大腸桿菌的活菌數(shù);接種后應(yīng)當(dāng)將培育皿倒置,并在相宜溫度下培育。8.在分別、純化大腸桿菌試驗(yàn)中,劃線接種(甲)、培育結(jié)果(乙)如右圖。有關(guān)敘述錯誤的是()A.接種前應(yīng)對培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落C.接種過程中至少須要對接種環(huán)灼燒5次D.甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置解析:選D在分別、純化大腸桿菌試驗(yàn)中,接種前應(yīng)對培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌;連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落;接種過程中,對接種環(huán)在接種前要灼燒,每次劃線后均需灼燒,因此至少須要灼燒5次;據(jù)乙中菌落分布特點(diǎn)可推知甲中d區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置。9.(多選)下列有關(guān)“微生物的分別與培育”試驗(yàn)的敘述,錯誤的是()A.高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時應(yīng)按順時針方向依次旋緊螺栓B.選擇培育基可以鑒定某種微生物的種類C.待培育基冷卻至室溫時倒平板D.統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)量時,接種方法可采納稀釋涂布平板法解析:選ABC高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時,將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi),再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓,使螺栓松緊一樣;鑒別培育基可以鑒定培育基中某種微生物的種類;待培育基冷卻至50℃左右時倒平板;稀釋涂布平板法可用于活菌數(shù)量的計(jì)數(shù)。10.(2024·南通二模,多選)下列有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作的比較,正確的是()A.主要菌種不肯定是真核生物B.溫度限制必需保證微生物繁殖最快C.發(fā)酵過程會釋放熱量D.可通過色、香、味等對產(chǎn)品進(jìn)行評價解析:選ACD果醋制作利用的菌種是醋酸菌,是原核生物;發(fā)酵溫度和微生物繁殖最快的溫度不肯定相同,如腐乳制作的發(fā)酵溫度為15~18℃,此溫度并不是毛霉繁殖最快的溫度;三種發(fā)酵過程中,菌種都會進(jìn)行細(xì)胞呼吸釋放熱量。二、非選擇題11.(2024·江蘇六市二模)圖1表示探討人員為篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株進(jìn)行的相關(guān)試驗(yàn)流程,其中透亮圈是微生物在固體培育基上消耗特定養(yǎng)分物質(zhì)形成的。請回答下列問題:(1)本試驗(yàn)中,選擇蘑菇培育基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源,這是因?yàn)開___________________________________________________________________________________________________。(2)篩選用的培育基應(yīng)以___________作為唯一碳源,并在配制培育基時加入___________作為凝固劑。篩選時應(yīng)選擇D/d較大的菌株,因?yàn)檫@一指標(biāo)值越大說明_______________________________________________________________________________。(3)圖2、圖3是探討纖維素酶的最適溫度和熱穩(wěn)定性的結(jié)果。①探討纖維素酶的熱穩(wěn)定性時,首先將纖維素酶液置于35~65℃的不同溫度條件下保溫2h,再取上述不同溫度處理的纖維素酶液和______________________,并在________℃下測定纖維素酶的催化速率,計(jì)算酶活性殘留率。②生產(chǎn)中運(yùn)用該纖維素酶時,最好將溫度限制在40℃左右,依據(jù)是________________________________________________________________________________________。解析:(1)蘑菇培育基質(zhì)中富含纖維素,會聚集較多的纖維素分解菌,因此本試驗(yàn)中選擇蘑菇培育基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源。(2)篩選纖維素分解菌,用的培育基應(yīng)以纖維素作為唯一碳源,這樣纖維素分解菌能正常生長,其他微生物則不能生長。篩選用的培育基是固體培育基,應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑(絕大多數(shù)微生物不能利用瓊脂)。篩選時應(yīng)選擇D/d較大的菌株,因?yàn)檫@一指標(biāo)值越大說明單個菌體產(chǎn)生的纖維素酶的活性越強(qiáng)。(3)①依據(jù)比照試驗(yàn)的基本原則,應(yīng)選擇上述不同溫度處理的纖維素酶液和經(jīng)相應(yīng)保溫處理的纖維素液,又據(jù)圖2可知,在50℃酶的活性最高,因此在50℃下測定纖維素酶的催化速率,計(jì)算酶活性殘留率。②據(jù)圖3可知,在40℃左右,纖維素酶的熱穩(wěn)定性高,作用時間長久,且酶活性相對較高,因此生產(chǎn)中運(yùn)用該纖維素酶時,最好將溫度限制在40℃左右。答案:(1)蘑菇培育基質(zhì)中富含纖維素,會聚集較多的纖維素分解菌(2)纖維素瓊脂單個菌體產(chǎn)生的纖維素酶的活性越強(qiáng)(3)①經(jīng)相應(yīng)保溫處理的纖維素液50②該溫度下,纖維素酶的熱穩(wěn)定性高,作用時間長久,且酶活性相對較高12.(2015·江蘇高考)人工瘤胃仿照了牛羊等反芻動物的胃,可用來發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的養(yǎng)分價值。為了增加發(fā)酵效果,探討人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對其降解纖維素實(shí)力進(jìn)行了探討。請回答下列問題:(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項(xiàng)不須要的是________(填序號)。①酒精燈②培育皿③顯微鏡④無菌水(2)在涂布平板時,滴加到培育基表面的菌懸液量不宜過多的緣由是_______________________________________________________________。(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培育基時,若試管口粘附有培育基,須要用酒精棉球擦凈的緣由是________________________________________________________________________________________________。(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。探討人員在剛果紅培育基平板上,篩選到了幾株有透亮降解圈的菌落(見下圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的____________有關(guān)。圖中降解纖維素實(shí)力最強(qiáng)的菌株是______(填圖中序號)。(5)探討人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵,測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖,推想菌株________更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析:(1)在樣品稀釋和涂布平板過程中,須要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行操作,培育皿用于盛放培育基并培育細(xì)菌,無菌水做稀釋的溶劑,此處唯一用不到的是顯微鏡。(2)在涂布平板時,要取少量菌懸液滴加到培育基表面,因?yàn)榧偃绲渭泳鷳乙毫窟^多,菌懸液就會積累在培育基表面影響分別效果。(3)在向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培育基時,假如試管口粘附有培育基,就很簡單使棉塞受到污染,因此,須要用無菌的酒精棉球?qū)⒃嚬芸诓潦酶蓛簟?4)因?yàn)閯偣t可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但不與纖維素降解產(chǎn)物反應(yīng),所以在剛果紅培育基平板上菌落四周有透亮降解圈是纖維素被降解的結(jié)果。降解圈大小由纖維素酶的活性和量確定,圖中菌落①四周的降解圈最大而菌落較小,因此其降解纖維素的實(shí)力最強(qiáng)。(5)考慮到人工瘤胃的發(fā)酵過程會使發(fā)酵液酸性增加,溫度上升,在這個前提下視察在不同溫度和pH條件下測得的發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果圖可以看出,在高溫柔低pH條件下都是J4菌株中的纖維素酶的活性較高,因而該菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。答案:(1)③(2)培育基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體積累,影響分別效果(3)避開培育基污染棉塞(4)量與活性①(5)J4發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高13.下圖為果酒、果醋工廠化生產(chǎn)流程。請據(jù)圖回答問題:(1)家庭自制葡萄酒所用菌種常來自______________,圖中的候選菌A、B經(jīng)篩選和純化分別獲得________和________菌種。(2)圖中所用的培育基都須要在接種前用____________法進(jìn)行滅菌。(3)在純化菌種A時接種了5個平板,每個平板均接種0.1mL樣品并培育。其中乙平板的菌落分布如圖,純化菌種A的接種方法是______________,推想出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是________________。其余的甲、丙、丁、戊平板操作正常,其菌落數(shù)分別是210、230、470、190,則樣品中菌種A的數(shù)量為________個/mL。(4)果酒發(fā)酵罐與果醋發(fā)酵罐須要限制的溫度條件差異是________________________。解析:(1)家庭自制葡萄酒所用菌種常來自葡萄皮表面的酵母菌。候選菌A、B篩選和純化后可以分別用于制作果酒和果醋,所以分別獲得的是酵母菌和醋酸菌。(2)培育基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。(3)分析乙平板的菌落分布結(jié)果,可推知采納的純化菌種的接種方法是稀釋涂布平板法。出現(xiàn)乙平板結(jié)果可能的操作失誤是涂布不勻稱。平板上菌落數(shù)量在30~300之間可以用于計(jì)算,所以有效的菌落數(shù)是210、230、190,平均值為210。因?yàn)榻臃N了0.1mL,所以菌種A的數(shù)量為2100個/mL。(4)果酒發(fā)酵的相宜溫度是18~25℃,果醋發(fā)酵的相宜溫度是30~35℃。答案:(1)葡萄皮表面的酵母菌酵母菌醋酸菌(2)高壓蒸汽滅菌(3)稀釋涂布平板法涂布不勻稱2100(4)前者18~25℃,后者30~35℃14.(2024·徐州考前模擬)圖1為某同學(xué)設(shè)計(jì)的用于制作果酒和果醋的發(fā)酵裝置。圖2為某探討小組的同學(xué)在對楊梅酒和楊梅醋的生產(chǎn)工藝進(jìn)行考察后,繪制出的基本工藝流程圖。請據(jù)圖回答下列問題:(1)圖示發(fā)酵過程中所需的酵母菌可以從自然界中分別出來,要得到較純菌種,應(yīng)配制________培育基(按培育基的功能分),常采納________________法對培育基進(jìn)行滅菌。滅菌后用平板劃線法或稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(2)用圖1裝置制作果酒過程中,要關(guān)閉________(填“充氣”或“排氣”)管上的夾子。(3)用圖1裝置制作果酒過程中,因某一步驟操作失誤導(dǎo)致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開,該操作
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