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(五)生物技術(shù)與工程1.(2022·四川成都高三模擬)泡菜傳統(tǒng)自然發(fā)酵方式的發(fā)酵周期相對(duì)較長(zhǎng),生產(chǎn)效率低。研究人員欲從泡菜中分離篩選出高產(chǎn)酸乳酸菌,為泡菜工廠(chǎng)化生產(chǎn)提供依據(jù)。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題:(1)配制CaCO3-MRS培養(yǎng)基。成分:蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、磷酸氫二鉀、葡萄糖、瓊脂粉、碳酸鈣等。①根據(jù)物理性質(zhì)分類(lèi),該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基,為乳酸菌種提供氮源的成分是_______;②培養(yǎng)過(guò)程中,乳酸菌產(chǎn)生乳酸溶解碳酸鈣,形成溶鈣圈,便于_______________________。(2)高產(chǎn)酸乳酸菌的培養(yǎng)與分離。其部分實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c具體操作如下所示,請(qǐng)完成下表。實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮?jiǎn)要操作過(guò)程梯度稀釋在無(wú)菌條件下取樣品中泡菜汁1mL,加入①______________進(jìn)行10倍梯度稀釋?zhuān)来蔚玫?0-5、10-6、10-7的稀釋液接種培養(yǎng)取上述稀釋液1mL分別加入無(wú)菌培養(yǎng)皿中,然后將CaCO3-MRS培養(yǎng)基澆注混勻冷凝后,將培養(yǎng)皿②________,并連續(xù)培養(yǎng)48h分離純化挑?、踎_______________________進(jìn)行平板劃線(xiàn)培養(yǎng)長(zhǎng)期保存將菌種加入30%的甘油中在-20℃保存(3)高產(chǎn)酸乳酸菌的鑒定。提取篩選乳酸菌的DNA,通常采用16SrDNA(編碼rRNA對(duì)應(yīng)的DNA序列)的通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增并測(cè)序鑒定。以16SrDNA作為細(xì)菌分類(lèi)依據(jù)的原因是不同菌屬的16SrDNA具有________。(4)高產(chǎn)酸乳酸菌發(fā)酵效果檢測(cè)。研究人員研究了兩種高產(chǎn)酸乳酸菌(乳酸菌A50f7和A50b9)在發(fā)酵泡菜過(guò)程中pH的變化,結(jié)果如圖所示。據(jù)圖分析,該研究實(shí)驗(yàn)的自變量是___________,可以看出,接種兩種乳酸菌效果相近,其相近之處表現(xiàn)為_(kāi)_______________________。2.落葉是城市綠化廢棄物的主要組成部分,落葉中纖維素含量較高且難降解。某科研單位以本市常見(jiàn)落葉樹(shù)為原料,以農(nóng)家雞糞為菌劑來(lái)源對(duì)落葉進(jìn)行微生物降解,用剛果紅染色法分離獲得利于落葉堆肥化處理的纖維素高效降解菌種。其大致過(guò)程如圖1,圖2為兩種不同的接種方法。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題:(1)落葉中的纖維素是__________________的主要成分。②操作所用培養(yǎng)基中通常不加入瓊脂等凝固劑,該培養(yǎng)基的主要作用是_________________________________________________。(2)③操作為_(kāi)___________________________;④操作時(shí),為了避免降解色素的微生物造成假陽(yáng)性現(xiàn)象,可以采用的方法是____________________________。(3)若篩選獲得的菌株可產(chǎn)生纖維素酶,將這些酶進(jìn)行固定化,一般不采用包埋法,其原因是______________________________________________________________________________。(4)若對(duì)篩選獲得的菌株進(jìn)行計(jì)數(shù),應(yīng)選擇圖2中______圖對(duì)應(yīng)的操作方法,用此方法測(cè)定的原理是_________________________________________________________________________。但是,用此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比接種活菌的實(shí)際數(shù)目要低,原因是_____________________。3.(2022·河南鄭州高三檢測(cè))基因工程自20世紀(jì)70年代興起后,在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等方面,展示出廣闊的前景。如圖是通過(guò)基因工程獲得轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品的流程圖,請(qǐng)結(jié)合相關(guān)知識(shí)回答下列問(wèn)題:(1)轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器是指利用基因工程技術(shù)手段將外源基因轉(zhuǎn)化到受體中進(jìn)行高效表達(dá),從而獲得具有重要應(yīng)用價(jià)值的表達(dá)產(chǎn)物的生命系統(tǒng),包括轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因微生物。①若利用圖示流程構(gòu)建小鼠乳腺生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)人抗利尿激素,應(yīng)先從人體________細(xì)胞中獲取總RNA,通過(guò)反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,再PCR后獲得抗利尿激素基因。一條單鏈cDNA在PCR儀中進(jìn)行n次循環(huán),需要消耗________個(gè)引物。構(gòu)建的表達(dá)載體導(dǎo)入的受體細(xì)胞是________________________________________________________________________。膀胱反應(yīng)器有著和乳腺反應(yīng)器一樣的優(yōu)點(diǎn):收集產(chǎn)物蛋白比較容易,不會(huì)對(duì)動(dòng)物造成傷害。此外膀胱生物反應(yīng)器還具有的顯著優(yōu)勢(shì)在于不受轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的______________(答2點(diǎn)即可)的限制,而且從尿中提取蛋白質(zhì)比在乳汁中提取簡(jiǎn)便、高效。②若圖中的受體細(xì)胞是大腸桿菌,通常用Ca2+處理大腸桿菌,其目的是使大腸桿菌處于________________________________的生理狀態(tài)。理論上制備能分泌抗利尿激素的“工程菌株”時(shí),酵母菌比大腸桿菌更適合作為受體細(xì)胞,從細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的角度分析,原因是:___________________________________________________________________________。(2)全球新冠疫情形勢(shì)依然非常嚴(yán)峻,新冠病毒疫苗的研制和新冠病毒的快速檢測(cè)的研究具有重要作用。①目前新冠疫苗有滅活疫苗、基因疫苗、蛋白疫苗等。利用圖示流程制備新冠病毒S蛋白疫苗。圖中質(zhì)粒A上m、n分別是啟動(dòng)子和終止子,箭頭處是限制酶的切點(diǎn)(NcoⅠ:5′—C↓CATGG—3′;NheⅠ:5′—G↓GATCC—3′),根據(jù)S蛋白的RNA制備的目的基因S無(wú)法與載體A連接,需要在S基因兩側(cè)加接末端,若b鏈處加接末端5′—GATC,則在a鏈處加接末端5′—________。由圖推測(cè),目的基因S轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莀_______(填“a鏈”或“b鏈”)。②抗原檢測(cè)采用雙抗體夾心法,其原理如圖。結(jié)合墊處含有足量的、可移動(dòng)的、與膠體金結(jié)合的抗體1,T處固定有抗體2,抗體1和抗體2與新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位點(diǎn)發(fā)生特異性結(jié)合,呈紅色。C處固定有抗體1的抗體,與抗體1結(jié)合也呈紅色。檢測(cè)過(guò)程中反復(fù)進(jìn)行了抗原—抗體的特異性結(jié)合,若檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,則過(guò)程中此特異性結(jié)合共發(fā)生________次。若待測(cè)樣本中不含新冠病毒,顯色結(jié)果為_(kāi)_______________,結(jié)果為陰性。③利用單克隆抗體制備技術(shù)制備試劑盒中的抗體1。先給小鼠注射純化的N抗原蛋白,一段時(shí)間后,從小鼠的________(免疫器官)中獲取已免疫的B淋巴細(xì)胞,將獲得的細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,再經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選、________________________,獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,再經(jīng)體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng),最終獲得抗N抗原蛋白的單克隆抗體。4.2017年11月,世界上首例體細(xì)胞克隆猴在我國(guó)誕生,分別叫“中中”和“華華”,這一成功轟動(dòng)了全世界,相比較克隆羊和克隆鼠,克隆猴對(duì)于研究人類(lèi)疾病意義更大。如圖是克隆“中中”的相關(guān)示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)在采集卵母細(xì)胞之前,需要給卵母細(xì)胞供體注射適量的__________________,以增加排卵。選用去核卵母細(xì)胞作為核移植的受體細(xì)胞的原因有_________________________(答出2點(diǎn))。(2)從卵巢中吸取的卵母細(xì)胞,需在體外培養(yǎng)到__________________,再通過(guò)____________法去除細(xì)胞核,得到去核卵母細(xì)胞。(3)核移植形成的重組細(xì)胞需要用____________(物理方法)激活,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。體外培養(yǎng)早期胚胎時(shí),培養(yǎng)液的成分除了無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、激素和核苷酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還需額外
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