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第3章基因工程、第4章生物技術(shù)的安全性與倫理問(wèn)題第1節(jié)重組DNA技術(shù)的基本工具[必備知識(shí)]1.基因工程是指按照人們的愿望,通過(guò)_________等技術(shù),賦予生物新的_________,創(chuàng)造出更符合人們需要的__________________和__________________。從技術(shù)操作層面看,由于基因工程是在_________水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫作__________________。(P67)2.1944年,艾弗里等人通過(guò)肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),不僅證明了遺傳物質(zhì)是DNA,還證明了____________________________________。(P68“科技探索之路”)3.切割DNA分子的工具是限制性內(nèi)切核酸酶,簡(jiǎn)稱限制酶,這類酶主要是_________中分離純化出來(lái)的。它們能夠__________________的特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的__________________斷開(kāi),產(chǎn)生_______________或_________兩種形式的末端。(P71)4.DNA連接酶主要有兩類,一類是_________DNA連接酶,另一類是_________DNA連接酶。后者既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的_________,又可以“縫合”雙鏈DNA片段的_________,但連接平末端的效率相對(duì)_________。(P72)5.質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外,并具有自我復(fù)制能力的__________________。(P72)6.載體必須具備的條件:(1)能在受體細(xì)胞中保存下來(lái)并能_________;(2)具有一個(gè)或多個(gè)__________________,以便與外源基因連接;(3)具有__________________。(P72)7.在基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外,還有__________________等。它們的來(lái)源不同,在大小、結(jié)構(gòu)、復(fù)制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差別。(P73)8.DNA不溶于_________,但某些蛋白質(zhì)溶于_________,利用這一原理,可以初步分離DNA與蛋白質(zhì)。DNA在_________的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2mol/L的NaCl溶液。在一定溫度下,DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)_________,因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。(P74“探究·實(shí)踐”)[重要圖解]1.限制酶切割DNA分子產(chǎn)生兩種不同末端的示意圖(箭頭表示酶的切割位置)(P71)下圖中的圖1和圖2分別表示的是EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意圖,從圖示可以看出,EcoRⅠ限制酶識(shí)別的堿基序列是_________,切割位點(diǎn)在_________之間;SmaⅠ限制酶識(shí)別的堿基序列是_________,切割位點(diǎn)在_________之間。圖1說(shuō)明,EcoRⅠ發(fā)揮作用是在____________________________________________________,所以產(chǎn)生的是_________末端,圖2說(shuō)明SmaⅠ發(fā)揮作用是在_____________________________________________,所以產(chǎn)生的是_______末端。(P71“圖3-3”改編)2.大腸桿菌及質(zhì)粒結(jié)構(gòu)模式圖(P72)第2節(jié)基因工程的基本操作程序[必備知識(shí)]1.培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉主要需要四個(gè)步驟:___________________________、___________________________、___________________________、___________________________。(P76)2.PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫(xiě)。它是一項(xiàng)根據(jù)__________________的原理,在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件,對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。(P77)3.PCR反應(yīng)過(guò)程可以分為_(kāi)_________________三步。(P78)4.PCR反應(yīng)過(guò)程可以在__________________(PCR儀)中自動(dòng)完成,完成以后,常采用__________________來(lái)鑒定PCR的產(chǎn)物。(P79)5.構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的:__________________________________________________________________________________________________________________________。(P80)6.基因表達(dá)載體要包括以下四個(gè)基本的結(jié)構(gòu):_________、_________、_________、__________________。(P80)7.啟動(dòng)子位于基因的_________,它是__________________識(shí)別和結(jié)合的部位。(P80)8.標(biāo)記基因的作用:________________________________________________________________________________________________________________________。9.花粉管通道法有多種操作方式。例如,可以用__________________將含目的基因的DNA溶液直接注入子房中;可以在植物受粉后的一定時(shí)間內(nèi),剪去柱頭,將DNA溶液滴加在花柱切面上,使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入胚囊。除此之外,將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法還有__________________法。(P80~81)10.轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持__________________的過(guò)程。(P81“資料卡”)11.農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物,能在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物,而對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有侵染能力。農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒,當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后,能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并且將其整合到該細(xì)胞的________________。根據(jù)農(nóng)桿菌的這種特點(diǎn),如果將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中,通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞。(P81“資料卡”)12.檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉是否培育成功,首先是_________的檢測(cè),包括通過(guò)_________等技術(shù)檢測(cè)棉花的染色體DNA上是否插入了Bt基因或檢測(cè)Bt基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA;從轉(zhuǎn)基因棉花中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行_________雜交,檢測(cè)Bt基因是否翻譯成Bt抗蟲(chóng)蛋白等。其次,還需要進(jìn)行_________水平的鑒定。例如,通過(guò)采摘抗蟲(chóng)棉的葉片飼喂棉鈴蟲(chóng)來(lái)確定Bt基因是否賦予了棉花抗蟲(chóng)特性以及抗性的程度。(P82)13.在獲得轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的過(guò)程中,還可以通過(guò)構(gòu)建_________來(lái)獲取目的基因。(P82)14.將目的基因?qū)雱?dòng)物受精卵最常用的一種方法是利用__________________將目的基因注入動(dòng)物的受精卵中,這個(gè)受精卵將發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。在基因工程操作中,常用原核生物作為受體細(xì)胞,其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用_________處理大腸桿菌細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。(P82)[重要圖解]1.PCR反應(yīng)過(guò)程示意圖(P78~79)下圖為PCR反應(yīng)原理示意圖,圖中①表示_________,該物質(zhì)是_______________________________________________________________;②表示___________________________;dCTP、dATP、dGTP、dTTP的中文名稱依次是__________________、___________________________、_______________________________、____________________________________;③表示__________________,發(fā)生該過(guò)程的條件是__________________;④表示______________________________________________________,發(fā)生該過(guò)程的條件是___________________________;⑤表示_______________________________________________________________________________________________,發(fā)生該過(guò)程的條件是_________左右。2.基因表達(dá)載體構(gòu)建模式圖(P80)(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程,甲、乙、丙表示相關(guān)酶,甲、乙應(yīng)是_____________________________________________,甲酶作用形成了一個(gè)切口,______個(gè)__________________,乙酶作用形成了兩個(gè)切口,____個(gè)____________;丙酶是________________,丙酶作用后若考慮DNA片段的兩兩相連情況,則會(huì)出現(xiàn)____________________、____________________、____________三種情況,因此,需通過(guò)________才可獲得________________的重組質(zhì)粒。(2)上圖為基因表達(dá)載體模式圖,圖中①表示________,它是一段有________________的DNA片段,位于基因的________緊挨________________,它是RNA聚合酶________________的部位,其作用是________________________,最終表達(dá)出人類所需要的蛋白質(zhì)。有時(shí)為了滿足應(yīng)用需要,會(huì)在載體中人工構(gòu)建________________________,當(dāng)誘導(dǎo)物存在時(shí),可以_______________________________。②表示________,位于________________,是一段有________________的DNA短片段,其作用是能夠________________________________。③表示________基因,其作用是________________________________________________________________,如抗生素抗性基因就可以作為這種基因。3.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖(P81)第3節(jié)基因工程的應(yīng)用第4節(jié)蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用[必備知識(shí)]1.科學(xué)家將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的________等調(diào)控元件重組在一起,通過(guò)________________的方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中,由這個(gè)受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在進(jìn)入泌乳期后,可以通過(guò)分泌乳汁來(lái)生產(chǎn)所需要的________,這稱為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器。(P90)2.目前,科學(xué)家正嘗試?yán)没蚬こ碳夹g(shù)對(duì)豬的器官進(jìn)行改造,采用的方法是在器官供體的基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子,以抑制________________________,或設(shè)法除去_______________,然后再結(jié)合克隆技術(shù),培育出不會(huì)引起________________反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。(P91)3.用基因工程的方法,使外源基因得到高效表達(dá)的菌類一般稱為_(kāi)_______________。(P91“相關(guān)信息”)4.蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的________________及其________________作為基礎(chǔ),通過(guò)________________,來(lái)改造現(xiàn)有蛋白質(zhì),或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。(P93)5.基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界中________的蛋白質(zhì),這些天然蛋白質(zhì)是生物在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成的,它們的結(jié)構(gòu)和功能符合特定物種生存的需要,卻不一定完全符合人類生產(chǎn)和生活的需要。(P93)[重要圖解]蛋白質(zhì)工程的基本思路蛋白質(zhì)工程的基本思路是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→________________→推測(cè)應(yīng)有的_____________→找到并改變相對(duì)應(yīng)的________________(基因)或合成________→獲得所需要的蛋白質(zhì)。(P94)第4章生物技術(shù)的安全性與倫理問(wèn)題[必備知識(shí)]1.對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域,這是因?yàn)槲⑸锞哂衉___________和____________、____________、對(duì)環(huán)境因素________和容易進(jìn)行________操作等優(yōu)點(diǎn)。(P101)2.在轉(zhuǎn)基因研究工作中,科學(xué)家會(huì)采取很多方法防止________。例如,我國(guó)科學(xué)家將來(lái)自玉米的α-淀粉酶基因與目的基因一起轉(zhuǎn)入植物中,由于α-淀粉酶基因可以阻斷淀粉儲(chǔ)藏使花粉失去活性,因而可以防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播。(P102“相關(guān)信息”)3.生殖性克隆是指通過(guò)克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的________。治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官,用它們來(lái)____________、____________,從而達(dá)到治療疾病的目的。兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。(P106)4.有的倫理學(xué)家認(rèn)為,生殖性克隆人是在人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人,嚴(yán)重地違反了人類________________,是克隆技術(shù)的濫用。(P107)5.我國(guó)政府一再重申四不原則:不贊成、不允許、不支持、________任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。(P10

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