氣相色譜法測(cè)定環(huán)氧乙烷

1、氣相色譜法測(cè)定明膠空心膠囊中環(huán)氧乙烷摘要：目的：對(duì)生產(chǎn)的明膠空心膠囊中環(huán)氧乙烷測(cè)定氣相色譜法進(jìn)行方法驗(yàn)證；方法：定性除了采用傳統(tǒng)的對(duì)照品保留時(shí)間定性又采用了供試品加標(biāo)定性和雙柱定性，定量采用加標(biāo)回收率驗(yàn)證方法準(zhǔn)確性，方法精密度采用RSD%驗(yàn)證；結(jié)論：定性采用保留時(shí)間定性、DB-624色譜柱和PLOT/Q色譜柱雙柱定性和加標(biāo)定性，方法定性互相驗(yàn)證正確。定量加標(biāo)回收率為98.4499.98%，方法準(zhǔn)確。方法精密度RSD%為3.64.1，方精密度好可靠。引言：依據(jù)中國藥典（2010版）正文第二部分1204頁明膠空心膠囊中環(huán)氧乙烷的測(cè)定氣相色譜法，實(shí)驗(yàn)人員照殘留溶劑測(cè)定法（附錄P第二法附錄61頁）實(shí)驗(yàn)

2、。采用了HP-5、 DB-WAX、DB-624和PLOT/Q色譜柱實(shí)驗(yàn)（都是方法規(guī)定的色譜柱）。其中HP-5和 DB-WAX均難以有效分離廣生生產(chǎn)的供試品中的干擾峰，改用固定液為（6%）氰丙基苯基（94%）二甲基聚硅氧烷DB-624毛細(xì)管柱實(shí)現(xiàn)了基線分離，試驗(yàn)了供試品加標(biāo)定性，加標(biāo)回收率，加標(biāo)RSD%。之后，依照殘留溶劑測(cè)定法“附注（3）干擾峰的排除”又在另一根截然不同的氣-固色譜柱做了實(shí)驗(yàn)。PLOT/Q色譜柱固定相為聚苯乙烯二乙烯基苯型的高分子多孔小球。兩者檢驗(yàn)結(jié)果一致，排除了測(cè)定中有共出峰的干擾。1 實(shí)驗(yàn)部分1.1 儀器與試劑Agilent 7890A GC/FID ; GC Chemst

3、ation (B.04.01) 工作站；Agilent 7694E頂空進(jìn)樣器。對(duì)照品：環(huán)氧乙烷（濃度5mg/ml，美國Accustandard）；溶劑：水（實(shí)驗(yàn)室超純水）；供試品：明膠空心膠囊（廣生膠囊提供）。1.2色譜條件色譜條件色譜柱：DB-624毛細(xì)管柱（30m*0.53mm*3.0um），固定相：（6%）氰丙基苯基（94%）二甲基聚硅氧烷；柱溫：40保持5min，升溫速率25/min，上升到150終止程序升溫，后運(yùn)行溫度230，后運(yùn)行時(shí)間3 min；載氣流速：5mL/min。汽化室：汽化室110，分流比1:1。檢測(cè)器：260，氫氣40mL/min，空氣400mL/min，尾吹33 mL

4、/min。 色譜柱：HP-PLOT/Q毛細(xì)管柱（30m*0.32mm*20um），固定相：聚苯乙烯二乙烯基苯型的高分子多孔小球；柱溫：110保持5min，升溫速率6/min，上升到120終止程序升溫，后運(yùn)行溫度230，后運(yùn)行時(shí)間3 min；載氣流速：6mL/min。汽化室：汽化室110，分流比1:1。檢測(cè)器：260，氫氣40mL/min，空氣400mL/min，尾吹33 mL/min。進(jìn)樣方法自動(dòng)頂空進(jìn)樣器，取10mL溶液置于20mL頂空瓶中壓蓋密封搖勻。頂空瓶溫度80，平衡時(shí)間15 min，定量環(huán)溫度90，傳輸線溫度100，取液上汽進(jìn)樣1mL。1.3對(duì)照品溶液和供試品溶液的配制1.3.1對(duì)照

5、品溶液的配制根據(jù)中國藥典2010版二部明膠空心膠囊中環(huán)氧乙烷的測(cè)定氣相色譜法把濃度5mg/ml的環(huán)氧乙烷逐級(jí)稀釋至2 mg/L，吸取1mL濃度為2 mg/L的環(huán)氧乙烷置于20mL頂空瓶中，加入9mL超純水使溶液最終濃度為0.2 mg/L。1.3.2供試品溶液的配制精密稱取供試品種2.0g，置20mL容量瓶中加10mL溫度為60超純水密封不斷震搖使溶解，制成供試品溶液。2 方法學(xué)驗(yàn)證2.1 水溶劑的空白試驗(yàn)按1.2節(jié)色譜條件，取水溶劑液上氣1mL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，表明水溶劑對(duì)待測(cè)的環(huán)氧乙烷無干擾。色譜圖見附件2.2 專屬性按1.2節(jié)色譜條件，分別將環(huán)氧乙烷高濃度和對(duì)照品1mL注入氣相色

6、譜儀，記錄色譜圖，考察環(huán)氧乙烷專屬性保留時(shí)間、分離度，理論塔板數(shù)。結(jié)果見表1，色譜圖見圖2。表1A DB-624氣相色譜法參數(shù)待測(cè)組分高濃度保留時(shí)間（min）對(duì)照品保留時(shí)間（min）理論板數(shù)分離度環(huán)氧乙烷2.3092.311272974.65表1B HP-PLOT/Q氣相色譜法參數(shù)待測(cè)組分高濃度保留時(shí)間（min）對(duì)照品保留時(shí)間（min）理論板數(shù)分離度環(huán)氧乙烷2.9933.0072220324.25結(jié)果表明，5個(gè)待測(cè)的溶劑專屬性保留時(shí)間對(duì)應(yīng)準(zhǔn)確、分離度，理論板數(shù)均符合中國藥典2010版規(guī)定。5該條件可滿足各溶劑殘留的有效測(cè)定。2.3精密度按1.2節(jié)色譜條件，吸取1mL濃度為2 mg/L的環(huán)氧乙烷

7、置于20mL頂空瓶中，加入9mL超純水使溶液最終濃度為0.2 mg/L。取液上氣1mL，注入氣相色譜儀，.連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，依據(jù)色譜峰峰面積求其精密度，結(jié)果見表2。色譜圖見附件表2A DB-624精密度平行樣123456RSD%環(huán)氧乙烷1.20041.16261.20131.09061.16731.10284.1表2B HP-PLOT/Q精密度平行樣123456RSD%環(huán)氧乙烷1.13051.06421.19281.11491.13141.12853.6結(jié)果表明連續(xù)進(jìn)樣,6次，測(cè)定的峰面積RSD均小于10%。本色譜條件精密度良好。2.4樣品的測(cè)定按1.3.2供試品溶液的配制方法配制6個(gè)

8、供試品，取液上氣1mL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，依據(jù)色譜峰峰面積外標(biāo)法定量測(cè)定結(jié)果，結(jié)果均為未檢出。2.5準(zhǔn)確度精密稱量6個(gè)測(cè)定過的供試品各2.0g置于20mL頂空瓶中然后加入9mL溫度為60超純水密封不斷震搖使溶解，待冷卻至室溫后加入濃度為2 mg/L的環(huán)氧乙烷1mL，制成加標(biāo)供試品溶液，按1.2節(jié)色譜條件，取液上氣1mL，注入氣相色譜儀，.連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，依據(jù)色譜峰峰面積外標(biāo)法定量求其加標(biāo)回收率，以加標(biāo)回收率驗(yàn)證方法準(zhǔn)確度。測(cè)定結(jié)果見表3，色譜圖見附件。表3A DB-624 明膠空心膠囊回收率測(cè)定結(jié)果加入量回收率（%）平均值（%）RSD(%)平行1平行2平行3平行4平行5平行

9、62mg/Kg90.93101.40104.5797.7498.66106.5899985.6表3B HP-PLOT/Q 明膠空心膠囊回收率測(cè)定結(jié)果加入量回收率（%）平均值（%）RSD(%)平行1平行2平行3平行4平行5平行62mg/Kg9671985092601045810546927798445.7結(jié)果表明：6個(gè)供試品在對(duì)照品出峰的保留時(shí)間均沒有色譜峰檢出，而加標(biāo)后的供試品在對(duì)照品出峰的保留時(shí)間均有色譜峰檢出，并且檢出量與加入量基本一致，方法準(zhǔn)確度驗(yàn)證本方法的回收率好。通過比較驗(yàn)證兩種不同的色譜柱檢驗(yàn)結(jié)果一致，依照殘留溶劑測(cè)定法“附注（3）干擾峰的排除” 排除了測(cè)定中有共出峰的干擾,采用本方法進(jìn)行定性正確，定量準(zhǔn)確。3 結(jié)論方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果表明，明膠空心膠囊測(cè)定環(huán)氧乙烷所選的氣相色譜條件符合中華人民共和國藥典2010年版二部要求系統(tǒng)適用性