血培養(yǎng)采集的方法及注意事項(xiàng)課件

1、血培養(yǎng)采集的方法及注意事項(xiàng),2017-05-22,血培養(yǎng)的概念,血培養(yǎng)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查，是采集患者血液標(biāo)本并接種到培養(yǎng)瓶，用以發(fā)現(xiàn)、識(shí)別導(dǎo)致患者感染的病原微生物 是診斷菌血癥和真菌血癥的基本而重要的方法 對(duì)感染性疾病的診斷、治療和預(yù)后都有極為重要的臨床意義,血培養(yǎng)的目的,證實(shí)有感染性的病原體 鑒定病原體，做藥敏試驗(yàn) 指導(dǎo)抗菌藥物的使用,能夠更好的幫助醫(yī)生合理用藥，減少患者的死亡率,目前血培養(yǎng)存在的主要問(wèn)題-醫(yī)生,血培養(yǎng)重視程度不夠，送檢率低 血培養(yǎng)用處不大，治療費(fèi)用增加，有指征不送檢 血培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，不能適應(yīng)臨床需求 只做需氧培養(yǎng)，不同時(shí)做厭氧培養(yǎng)，病原菌檢出率低,目前血培養(yǎng)存在的主要問(wèn)題-檢驗(yàn)

2、員,血培養(yǎng)檢測(cè)運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)及接收標(biāo)準(zhǔn)不規(guī)范 應(yīng)室溫儲(chǔ)存的卻低溫儲(chǔ)存 標(biāo)本沒(méi)有及時(shí)檢驗(yàn)，導(dǎo)致微生物檢測(cè)延遲 實(shí)驗(yàn)室人員沒(méi)有認(rèn)真核查接收標(biāo)本（采血量不夠、培養(yǎng)瓶有破損等） 血培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的處理不夠及時(shí) 沒(méi)有及時(shí)將結(jié)果反饋給臨床 “時(shí)間就是生命”,目前血培養(yǎng)存在的主要問(wèn)題-護(hù)理人員,采血消毒不夠嚴(yán)格，導(dǎo)致污染率偏高 皮膚消毒不夠嚴(yán)格 培養(yǎng)瓶的消毒問(wèn)題 不規(guī)范的血培養(yǎng) 采血量、采血時(shí)間、采血套數(shù)不符合規(guī)范 不規(guī)范的血培養(yǎng)導(dǎo)致病原菌分離率低 難以判斷病原菌是污染造成還是感染造成的 標(biāo)本沒(méi)有及時(shí)送檢，導(dǎo)致檢測(cè)延遲,血培養(yǎng)標(biāo)本如何采集,？,血培養(yǎng)臨床實(shí)踐指南,CLSI是美國(guó)【臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)】的英文縮寫(xiě)，英

3、文名為Clinical and Laboratory Standards Institute 美國(guó)CLSI的抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)操作方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)，是國(guó)內(nèi)臨床細(xì)菌檢驗(yàn)遵循的標(biāo)準(zhǔn)。由于制訂該項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)需要投入大量的人力、財(cái)力和物力，所以大多數(shù)國(guó)家包括中國(guó)都還沒(méi)有建立自己的標(biāo)準(zhǔn)而依賴(lài)CLSI的方法和標(biāo)準(zhǔn) CLSI標(biāo)準(zhǔn)每年更新,關(guān)鍵要點(diǎn),采血指征 采血時(shí)間 采血套數(shù) 采血次數(shù) 接種血量 消毒滅菌,采血指征,不明原因的發(fā)熱(38)或體溫過(guò)低(36) 白細(xì)胞增多（ 10109/L），粒細(xì)胞減少（1.0109/L） 休克，寒顫 嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、腎盂腎炎、感染) 心率異常加快 低血壓或

4、高血壓 呼吸頻率加快(20次/分或CO2分壓32mmHg),懷疑血流感染時(shí)要做血培養(yǎng),發(fā)熱要做血培養(yǎng)！,0,30,60,時(shí)間 (分鐘),體溫,細(xì)菌濃度,采血時(shí)間,采集血培養(yǎng)時(shí)間的重要性?,9% +,14% +,9% +,11% +,發(fā)熱高峰前12-2.5小時(shí),發(fā)熱高峰前2.5-0.5小時(shí),發(fā)熱高峰期間,發(fā)熱高峰后1-12小時(shí),166 病人,105 病人,199 病人,258 病人,Thomson et al. 1991. ASCP. Mayo Clinic Study,采血時(shí)間,寒顫和發(fā)熱初起，心內(nèi)膜炎（持續(xù)性菌血癥）例外 在應(yīng)用抗菌藥物之前 如果患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物治療，應(yīng)該在下一次用藥之前

5、采集血培養(yǎng),采血套數(shù),基本概念 成人“一套” 血培養(yǎng)包括：需氧瓶和厭氧瓶各一個(gè) 注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應(yīng)從另一穿刺點(diǎn)獲得 “雙瓶雙側(cè)”，是指從一個(gè)部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，再?gòu)牧硪徊课?采血接種另一套培養(yǎng)瓶，一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單 個(gè)血培養(yǎng) 兒童一般只做需氧培養(yǎng)，特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng),采血套數(shù),指南中強(qiáng)調(diào)：血培養(yǎng)至少送2套 除外新生兒外，成人：任何時(shí)候，不能只送一瓶！,23套血培養(yǎng)，有助于污染的判斷,Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333,污染菌,致病菌,？,采集1套無(wú)法判斷是病原菌還是污染菌,Cockerill,

6、CID 2004,血培養(yǎng)套數(shù)與陽(yáng)性檢出率（）,65,80,96,99,Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548,血培養(yǎng)套數(shù)與檢測(cè)靈敏度（）,為何要送厭氧血培養(yǎng)瓶？,In this study, use of paired aerobic/anaerobic blood culture bottles yielded more staphylococci, members

7、 of the family Enterobacteriaceae, and anaerobes when compared to paired aerobic blood culture bottles.50 it is recommended that routine blood cultures include paired aerobic/anaerobic blood culture bottles.50-52 When less than the recommended volume of blood is drawn for culture, the blood should b

8、e inoculated into the aerobic vial first; any remaining blood should then be inoculated into the anaerobic vial.,這些研究中，使用“配對(duì)需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶”比用“兩個(gè)需氧血培養(yǎng)瓶”能檢出更多的金葡、腸桿菌科細(xì)菌和厭氧菌 推薦常規(guī)血培養(yǎng)要包括配對(duì)的需氧/厭氧血培養(yǎng)瓶,CLSI 2007 M47-A,厭氧瓶平均報(bào)陽(yáng)時(shí)間快于需氧瓶,h,厭氧瓶檢出致病菌時(shí)間更短,同樣檢出致病菌，BACTEC平均檢測(cè)時(shí)間比Bact/Alert少4.36小時(shí),Zadroga R et al. Clin Infe

9、ct Dis. 2013;56:790-797,厭氧瓶、需氧瓶互相補(bǔ)充：提高檢出率,J Microbiol Immunol Infect. 2007;40:445-449,采血次數(shù),對(duì)懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，推薦同時(shí)或短時(shí)間內(nèi)（10分鐘內(nèi)）從不同部位（如雙臂）采集 23 套血培養(yǎng)標(biāo)本，做到“雙瓶雙側(cè)”，如有必要可同時(shí)從下肢靜脈采血接種第三套培養(yǎng)瓶，采血后的 2 5 天內(nèi)不需要重復(fù)采集血培養(yǎng) 急性心內(nèi)膜炎：30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集，如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng) 亞急性心內(nèi)膜炎：每間隔30分鐘至1h采集1套，連續(xù)采集3套標(biāo)本，如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng),

10、接種血量,采血量與檢出率的關(guān)系,血量每增加1毫升，成年人菌血癥陽(yáng)性檢出率增加3,但并非越多越好，超過(guò)一定數(shù)量的采血量會(huì)稀釋培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的肉湯，使肉湯無(wú)法有效中和血中的抑制物質(zhì)（補(bǔ)體、抗體、抗生素），所以血液與肉湯的最佳比例為1：41：10,接種血量,成人一套標(biāo)本（需氧厭氧2個(gè)培養(yǎng)瓶），每瓶810ml，共20ml，雙側(cè)雙瓶即40ml 嬰幼兒推薦的采血量應(yīng)少于患兒總血容量的 1%，每瓶不少于2ml 采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染,利用瓶身刻度準(zhǔn)確采血,規(guī)范采集血培養(yǎng)標(biāo)本,您知道您有多重要！,無(wú)菌操作：污染率的指標(biāo)是3% 手衛(wèi)生 皮膚消毒 培養(yǎng)瓶的消毒,每次采

11、集血液標(biāo)本前一定要洗手 使用3-5ml抗菌皂液 保證所有手部皮膚接觸皂液的時(shí)間超過(guò)15秒 注意指尖及指甲內(nèi)側(cè) 不要遺忘拇指 紙巾干手并勿用手直接關(guān)閉水籠頭,你的手真得洗干凈了嗎？,嚴(yán)格執(zhí)行手衛(wèi)生,皮膚凝固酶陰性葡萄球菌定植于輸液管,嚴(yán)格執(zhí)行皮膚消毒程序,定植細(xì)菌“污染”血培養(yǎng),推薦使用碘酊、碘伏或洗必泰作為皮膚消毒劑 碘酊作用時(shí)間：1min 碘伏作用時(shí)間：1.5-2min 洗必泰作用時(shí)間：1min （但不能用于少于2個(gè)月嬰兒皮膚消毒）,皮膚消毒,70%乙醇擦拭靜脈穿刺部位，待干30秒,1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒，從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒,直徑1.5-2cm,用70%乙醇消毒 60秒

12、（脫碘），待酒精揮發(fā)干燥后采血,細(xì)菌是干死的，不是淹死的,皮膚消毒程序（三步法）,培養(yǎng)瓶的消毒程序,去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋 70%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒 自然待干 將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi) 5. 顛倒混勻標(biāo)本與肉湯，以避免血液凝集 （兒童采血量少，更應(yīng)注意顛倒混勻）,細(xì)菌是干死的，不是淹死的,蝶翼針采血程序,血培養(yǎng)采血注意事項(xiàng),血培養(yǎng)建議從外周靜脈采血，不建議采動(dòng)脈血 常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置裝置取血 注射器采血，采好后注入血培養(yǎng)瓶之前不需要更換針頭 標(biāo)本采集部位：從兩側(cè)上肢靜脈采血“雙瓶雙側(cè)”，必要時(shí)從下肢靜脈采血做第三套血培養(yǎng) 采多種血液標(biāo)本時(shí)一定最先采集血培養(yǎng)標(biāo)本,無(wú)需保留的：從獨(dú)立的外周靜脈采集2套血培養(yǎng)，無(wú)菌狀態(tài)下取出導(dǎo)管 并剪下5cm導(dǎo)管尖端或近心端于無(wú)菌試管內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng)