瘧疾厚薄血膜的制做和染色方法.ppt

1、瘧疾厚薄血膜的制做和染色方法,浙江省疾病預(yù)防控制中心,厚薄血膜的制做和染色方法一 載玻片的清潔二 玻片的執(zhí)持方法三 刺血針四 取血的部位五 取血的適當時間六 厚薄血膜的位置七 厚薄血膜的血量、形狀和大小八 厚薄血膜的涂制方法,取血的時間,間日瘧：一般患者發(fā)作數(shù)小時至十余小時。 惡性瘧：一般患者發(fā)作后20小時左右，此時環(huán)狀滋養(yǎng)體發(fā)育至最高峰。初發(fā)時，一般需要在發(fā)作8日后才能在末梢血液中出現(xiàn)配子體。,厚薄血膜的位置形狀和大小,將玻片劃成三等分，厚血膜應(yīng)位于靠右側(cè)處，薄血膜從中間起至左格中部止。右端空格供記錄姓名、編號或貼標簽。,厚血膜,血量為5立方毫米左右（一小滴），自內(nèi)向外回轉(zhuǎn)擴大，涂成直徑0.

2、8-1.0厘米大小,厚薄均勻血膜。,薄血膜,薄血膜血量只需0.5-1.0立方毫米左右(約半顆粒大?。砍缮酄?，長約3厘米，寬約2厘米。,吉氏染液配制法、染色,吉氏染劑粉 0.5克 甘油 25毫升 甲醇 25毫升 先用甲醇固定薄血膜，然后用2-5%吉氏染液，染色30分鐘，水洗2-3分鐘，鏡檢。,瑞氏染液配制法、染色,1、瑞氏染劑粉 0.1-0.5克 2、甘油 3毫升 3、甲醇 97毫升 用蠟筆在厚薄血膜之間劃一道界限，再用滴管加瑞氏液5-8滴于薄血膜上，另加蒸餾水2-3滴于厚血膜上，經(jīng)2分鐘后，添加等量的蒸餾水(PH7.0)于薄血膜的染液中,用吸管和勻或傾側(cè)搖勻,再引制厚血膜上,過約5至15分

3、鐘,待干鏡檢。未稀釋的(未加入前的)染色液,切不可沾及厚血膜（因血紅蛋白被酒精固定,致厚血膜呈不透明的污綠色而無法鏡檢)。,染色的 注意事項,1、染液的壽命與染色力的變異 2、染色時間與溫度的關(guān)系 3、染液濃度與染色結(jié)果的關(guān)系 4、稀釋液的PH與染色結(jié)果的關(guān)系 5、染液稀釋后的使用時間 6、在進行大量血膜染色前，對染液的稀釋度、PH 值和染色時間的長短是否適宜，應(yīng)先用少數(shù)血膜進行染色測定。 7、鏡油易使血膜褪色，所以鏡檢無蓋片的血膜后，應(yīng)用中性二甲苯完全洗掉血膜上的鏡油。,薄血片中四種人體瘧原蟲主要鑒別要點,1、受染的紅細胞大小、顏色。 2、環(huán)狀體（小滋養(yǎng)體）體積、細胞質(zhì)、細胞核。 3、大滋養(yǎng)體（色素顆粒、形狀） 4、裂殖體（數(shù)目、排列、顆粒） 5、大、小配子體（形狀、細胞核、細胞質(zhì)、顆粒）,厚血膜瘧原蟲鑒別要點,1、早期滋養(yǎng)體（環(huán)狀體） 2、晚期滋養(yǎng)體（大滋養(yǎng)體） 3、裂殖體 4、配子體,間日瘧原蟲環(huán)狀體,間日瘧原蟲滋養(yǎng)體,間日瘧