動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)1.ppt

1、動(dòng)物細(xì)胞工程,植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些？,那么動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段 呢？,暢想,植物組織培養(yǎng), 植物體細(xì)胞雜交,問(wèn)題探討,回憶,動(dòng)物細(xì)胞工程：,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、 動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等,是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ),教學(xué)過(guò)程,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。,原理：,細(xì)胞增殖,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),注意關(guān)鍵詞: 細(xì)胞貼壁 接觸抑制 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng),閱讀課文44-46面相關(guān)內(nèi)容,原代培養(yǎng)： 傳代培養(yǎng)：,解答概念,從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以?xún)?nèi)的細(xì)

2、胞稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)。,將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱(chēng)為傳代培養(yǎng)。,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官,細(xì)胞懸浮液,10代細(xì)胞,50細(xì)胞,無(wú)限傳代,剪碎,胰蛋白酶,洗滌、稀釋、分離,原代培養(yǎng),它們細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，分裂旺盛，分化程度低，容易培養(yǎng)。,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體,細(xì)胞貼壁,貼壁抑制,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件,1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液） 2、營(yíng)養(yǎng) （葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清、血漿等。） 3、溫度和PH 36.5 +0.5度 ；PH為7.2-7.4。 4、氣體環(huán)境： O2和CO2

3、（95%空氣和5% CO2 ）,補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì),（1）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 （2）獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮。 （3）用于檢測(cè)有毒物質(zhì) （4）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用,細(xì)胞的全能性,獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物,植物體或組織,培養(yǎng)結(jié)果,快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動(dòng)物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細(xì)胞增殖,原理,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項(xiàng)目,試一試,2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料？,1、動(dòng)物細(xì)

4、胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處？,3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞？,4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體？,主要成分：葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。 獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動(dòng)物血清等,因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng),成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng),不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體,思考？,供體細(xì)胞（供核）,細(xì)胞培養(yǎng),體細(xì)胞,卵巢卵母細(xì)胞（M中期：供質(zhì)）,去核,無(wú)核卵母細(xì)胞,注入,細(xì)胞融合,重組細(xì)胞,構(gòu)建重組胚胎,胚胎移植,代孕母體,生出與供體奶

5、牛遺傳基礎(chǔ)相同的犢牛,歸納: 1.共分成兩大階段： 2.取卵細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因是: 3.嚴(yán)格來(lái)說(shuō)新個(gè)體有 兩個(gè)親本的性狀,核移植過(guò)程,核移植 和 胚胎移植,它是最大的細(xì)胞,易操作,它發(fā)育可直接表達(dá)性狀,胚胎移植技術(shù),試管動(dòng)物（嬰兒）培養(yǎng)過(guò)程,受精卵,細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞核,細(xì)胞核移植,多莉羊的培育過(guò)程,多利的一生,姓名：多利 性別：雌 種族：哺乳綱、?？啤⒕d羊 生日：1996年7月5日 出生地：蘇格蘭 基因父親：無(wú) 基因母親：一只芬蘭白綿羊 線粒體母親：一只蘇格蘭黑臉羊 生育母親：另一只蘇格蘭黑臉羊 進(jìn)入社交圈時(shí)間：1997年2月23日 子女：生育6名，存活5名 去世時(shí)間：2003年2月14日,世界

6、上第一只克隆綿羊“多莉”的培育等程序如圖所示。請(qǐng)仔細(xì)看圖后回答問(wèn)題：,寫(xiě)出 、所指的細(xì)胞工程 名稱(chēng)：。 實(shí)施細(xì)胞工程時(shí)，所需的受體細(xì)胞大多采用動(dòng)物卵細(xì)胞的原因是： 。 多莉面部的毛色是 ，判斷依據(jù)： 。 繼植物組織培養(yǎng)之后，克隆綿羊培育成功，證明動(dòng)物細(xì)胞也具有 。,核移植,胚胎移植,卵細(xì)胞全能性較高,白色,遺傳物質(zhì)主要來(lái)自白面綿羊,全能性,多莉與“母親”,2000年，美國(guó)科學(xué)家成功地克隆出首例靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物一只恒河短尾猴“泰特拉”。 “泰特拉”未用細(xì)胞核移植技術(shù)，而是采用胚胎分解的方法，將受精卵培育卵裂至8個(gè)細(xì)胞時(shí)將其分離，每2個(gè)細(xì)胞分為一部分，共分為4部分，并分別植入4個(gè)“代理母親”子宮中，結(jié)果有一個(gè)“代理母親”成功a生下了“泰特拉”，這意味著克隆人類(lèi)已沒(méi)有技術(shù)障礙。,我國(guó)首例體細(xì)胞核移植豬(2005年8月5日中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)李寧),2006年12月26日，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因的克隆豬。,保護(hù)瀕危動(dòng)物,種間克隆白肢野牛,種間克隆摩弗倫野羊,克隆動(dòng)物的研究意義,1.克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白 2.改良動(dòng)物品種