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1、生物組織中還原糖脂肪和蛋白質(zhì)的檢測(cè), 楊啟虎,1、實(shí)驗(yàn)原理:,(1)斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液的顏色變化為:由藍(lán)色變成磚紅色(沉淀)。斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。葡萄糖、麥芽糖、果糖是還原糖。 (2)蘇丹染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為橘黃色,蘇丹染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為紅色。 (3)雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1 gmL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.01 gmL的硫酸銅溶液。蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)。,2、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?嘗試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì) 3、實(shí)驗(yàn)選材: (1)做可溶性還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn),應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨
2、。(因?yàn)榻M織的顏色較淺,易于觀察。) (2)做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡34小時(shí)(也可用蓖麻種子)。 (3)做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn),可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。,4、實(shí)驗(yàn)試劑 斐林試劑(包括甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液)、 蘇丹或蘇丹染液、 雙縮脲試劑(包括A液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液)、 體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水。,5、方法步驟: ()可溶性還原糖糖的鑒定,()脂肪的鑒定,()蛋白質(zhì)的鑒定,6、討
3、論:,(1)選取富含還原糖的生物材料時(shí),能用甘蔗或者橘子嗎?為什么? 答:不行.橘子本身富含色素,會(huì)掩蓋顏色反應(yīng)的結(jié)果;而甘蔗不含還原糖,蔗糖不是還原糖. (2)斐林試劑和雙縮脲試劑有哪些區(qū)別? a溶液濃度不同:斐林試劑中CuSO4溶液為0.05g/ mL, 雙縮脲試劑中CuSO4溶液為0.01g/ mL b使用原理不同:斐林試劑實(shí)質(zhì)是新制Cu(OH)2沉淀, 雙縮脲試劑實(shí)質(zhì)是堿性條件下的Cu2+ c使用方法不同: 斐林試劑使用時(shí),先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,然后立即使用;雙縮脲試劑是先加NaOH溶液,然后再加入3至4滴CuSO4溶液,7、練習(xí)與鞏固 (1)檢查尿液中有無(wú)葡萄糖,下列試劑中可選用的是( ) A.斐林試劑 B.碘液 C.雙縮脲試劑 D.二苯胺 (2)下列生
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