儀器分析03原子吸收光譜與原子熒光光譜.

1、第三章 原子吸收光譜與原子熒光光譜,原子吸收分光光度法是基于從光源輻射出待測元素的特征譜線通過樣品的蒸氣時，被蒸氣中待測元家的基態(tài)原子所吸收，根據(jù)特征譜線的光被樣品的吸收程度，來測定出樣品中待測元素含量的方法。當原子被外界能量(熱能、電能、光能等)所激發(fā)時，最外層電子吸收一定的能量，從基態(tài)躍遷到較高能級上，而使原子處于激發(fā)態(tài)，稱為激發(fā)態(tài)原子。但這種處于較高能級的電子是不穩(wěn)定的，在極短的時間內(約10-8s)，以某一波長的光輻射出原吸收的能量，同時又躍回到原來的能級上。,名詞解析: 利用物質的氣態(tài)原子對特定波長的光的吸收來進行分析的方法。 基本原理:當適當波長的光通過含有基態(tài)原子的蒸氣時，基態(tài)原

2、子就可以吸收某些波長的光而從基態(tài)被激發(fā)到激發(fā)態(tài)，從而產生原子吸收光譜。,原子吸收分光光度法的優(yōu)點: 1.靈敏度高?；痧W原子吸收法靈敏度在ppm級以上，非火焰原子吸收法靈敏度是火焰原子吸收法的幾十倍到幾百倍。 2. 選擇性高。在大多數(shù)情況下不需要分離共存元素,共存元素對測定干擾??；即便某些共存元素有干擾作用,但也可用一定的方法加以消除。 3. 重現(xiàn)性較好。火焰原子吸收法的相對偏差列控制在以2%以內，非火餡原子吸收法的相對偏差一般可控制在15以內。 4. 測定元素廣泛。原于吸收法能測定幾乎全部金屬元素和一些半金屬元素，現(xiàn)能測定的元素己超過70種。 5. 操作簡便，分析快速，易于自動化,第一節(jié) 基本

3、原理,一. 共振線和吸收線 原子受外界能量的激發(fā)，其外層電子可躍遷到不同的能級，因此有不同的激發(fā)態(tài)。電子從基態(tài)躍遷到能量最低的激發(fā)態(tài)(稱為第一激發(fā)態(tài))時要吸收一定頻率的光。當它再躍回基態(tài)時，則輻射出同樣頻率的光(譜線)，這種譜線稱為共振發(fā)射線(簡稱為共振線)。,電子從基態(tài)躍遷到第一激發(fā)態(tài)所產生的吸收譜線稱為共振吸收線 (也簡稱共振線)。各種元素的原子結構和外層電子排布不同，它們從基態(tài)激發(fā)列最低激發(fā)態(tài)(或由最低激發(fā)態(tài)躍迂回基態(tài))時，吸收(或輻射)的能量也不同，因此各種元素的共振線都不相同，各具有一定的特征性，稱之為元素的“特征譜線”。原子吸收現(xiàn)象只能在每種元素的“特征波長”中觀察到，這就是原子吸

4、收分光光度法具有較好的選擇性的根本原因。,二原子吸收線的形狀（或輪廓） 若將吸收系數(shù)對頻率作圖，所得曲線為吸收線輪廓。,K為吸收系數(shù)，表示單位體積內原子對光的吸收值；為頻率；吸收最大處所對應的頻率叫中心頻率；最大吸收值叫峰值吸收；最大吸收值的一半處所對應的寬度叫譜線寬度，用表示；,原子的吸收光譜線具有一定寬度的原因有以下幾個： 1譜線的自然寬度： 自然寬度（約在10-5nm數(shù)量級）。 2多普勒變寬（熱變寬）： 由于多普勒效應而導致的譜線變寬。其寬度約為10-3nm數(shù)量級。,3壓力變寬：由于同類原子或與其它粒子（分子、原子、離子、電子等）相互碰撞而造成的吸收譜線變寬。其寬度也約為10-3nm數(shù)量

5、級。,三. 原子吸收與分析物濃度的關系 1、積分吸收與原子濃度的關系： 某一頻率的吸收不能代表所有原子的總吸收，因此要準確測定原子吸收值，必須測定圖中曲線和橫坐標軸所包圍的總面積。用積分吸收表示：,2、峰值吸收與原子濃度的關系,在一定條件下：,四原子吸收的測量： 需測量的是原子的峰值吸收。為了測定K0值，使用的光源必須是銳線光源。,（一）銳線光源：光源發(fā)射線的中心頻率與吸收線的中心頻率一致，而且發(fā)射線的半寬度比吸收線的半寬度小得多時，則發(fā)射線光源叫做銳線光源。,1、光源的能量能被原子充分吸收，測定的靈敏度較高。 如果用連續(xù)光源，則吸收的光的強度只占入射光強度的極小部分，使測定的靈敏度極差：如圖

6、所示,2、在銳線光源半寬度范圍內，可以認為原子的吸收系數(shù)為常數(shù)，并等于中心波長處的吸收系數(shù)。,(二),朗伯一比耳定律,在使用銳線光源的條件下原子蒸氣的吸光度與峰值吸收有如下關系： A=lgI0/I=0.4343KCL； 式中：I0 入射光的強度， I 透射光的強度， K 原子蒸氣對共振線的吸收系數(shù)， L 一 原子蒸氣的寬度(即火焰的長度) c 一 分析物的濃度， A 一中心頻率處的吸光度,由此式可知，只要測定吸光度并固定L，就可求得K0，而K0與原子蒸氣中原子的濃度成正比。并且在穩(wěn)定的測定條件下，被測定試液中待測元素的濃度與原子蒸氣中的原子濃度也成正比。,所以，吸光度與試液中待測元素的C也成正

7、比，可簡單的用下式表示： A=KC K包含了所有的常數(shù)。此式就是原子吸收光譜法進行定量分析的理論基礎。,第二節(jié) 原子吸收分光光度計 原子分光光度計由光源、原子化系統(tǒng)、分光系統(tǒng)及檢測顯示系統(tǒng)四個部分構成。,一光源： 1光源應滿足的條件： 1）能輻射出半寬度比吸收線半寬度還窄的譜線，并且發(fā)射線的中心頻率應與吸收線的中心頻率相同。 2）輻射的強度應足夠大。 3）輻射光的強度要穩(wěn)定，且背景小。,2空心陰極燈： 空心陰極燈是一種氣體放電管，其結構如圖：,鎢棒構成的陽極和一個圓柱形的空心陰極，空心陰極是由待測元素的純金屬或合金構成，或者由空穴內襯有待測元素的其它金屬構成。 當在正負電極上施加適當電壓（一般

8、為200500伏）時，在正負電極之間便開始放電，這時，電子從陰極內壁射出，經電場加速后向陽極運動。,電子在由陰極射向陽極的過程中，與載氣（惰性氣體）原子碰撞使其電離成為陽離子。帶正電荷的惰性氣體離子在電場加速下，以很快的速度轟擊陰極表面，使陰極內壁的待測元素的原子濺射出來，在陰極腔內形成待測元素的原子蒸氣云。,蒸氣云中的待測元素的原子再與電子、惰性氣體原子、離子發(fā)生碰撞而被激發(fā)，從而發(fā)射出所需頻率的光。陰極發(fā)射出的光譜，主要是陰極元素的光譜（待測元素的光譜，另外還雜有內充惰性氣體和陰極雜質的光譜）。,工作過程： 高壓直流電（300V）-陰極電子-撞擊隋性原子-電離(二次電子維持放電)-正離子-

9、轟擊陰擊-待測原子濺射-聚集空心陰極內被激發(fā)-待測元素特征共振發(fā)射線。,二. 原子化器 原子化器是將樣品中的待測組份轉化為基態(tài)原子的裝置。 （一）火焰原子化器：火焰原子化法是利用氣體燃燒形成的火焰來進行原子化的?；鹧嫘偷脑踊到y(tǒng)我們把它叫做火焰原子化器。,1結構：火焰原子化器的結構如圖所示：,a）噴霧器：將試樣溶液轉為霧狀。 b）霧化室：內裝撞擊球和擾流器（去除大霧滴并使氣溶膠均勻）。 c）燃燒器：產生火焰并使試樣蒸發(fā)和原子化的裝置。,2原子化過程： MeX 脫水（溶液） MeX 蒸發(fā)（固體微粒） MeX 分解（氣態(tài)分子） Me X (基態(tài)原子),3火焰：火焰的作用是將試液中的待測元素原子化

10、。 1）火焰的組成： 空氣乙炔火焰：溫度在2500K左右； N2O乙炔火焰：溫度可達到3000K左右； 空氣氫氣火焰：最高溫度2300K左右。,2）火焰的類型： 貪燃：燃氣較少，（燃助比小于化學計量，約為1比6），燃燒完全，溫度較高 富燃焰：燃氣較多。燃燒不完全，溫度較低。但具有還原性 。 化學計量焰：,（二）非火焰原子化法：常用的非火焰原子化法主要有電熱高溫石墨管原子化法和化學原子化法。 1. 石墨爐原子化器,包括電源、保護系統(tǒng)和石墨管三部分。 電源：1025V，500A。用于產生高溫。 保護系統(tǒng)： 保護氣（Ar）分成兩路。 管外氣防止空氣進入，保護石墨管不被氧化、燒蝕。,管內氣流經石墨管兩

11、端及加樣口，可排出空氣并驅 除加熱初始階段樣品產生的蒸汽 冷卻水金屬爐體周圍通水，以保護爐體。 石墨管：多采用石墨爐平臺技術。,原子化過程可分為四個階段，即干燥、灰化、原子化和凈化。 干 燥：去除溶劑，防樣品濺射； 灰 化：使基體和有機物盡量揮發(fā)除去； 原子化：待測物化合物分解為基態(tài)原子，此時停止通 Ar，延長原子停留時間，提高靈敏度； 凈 化：樣品測定完成，高溫去殘渣，凈化石墨管。,石墨爐原子化器與火焰原子化器比較有如下優(yōu)點： 1）原子化效率高，可達到90%以上，而后者只有10%左右。 2）絕對靈敏度高（可達到10-1210-14），試樣用量少。適合于低含量及痕量組分的測定。 3）溫度高，在

12、惰性氣氛中進行且有還原性C存在，有利于易形成難離解氧化物的元素的離解和原子化。,2. 化學原子化（低溫原子化） 包括汞蒸汽原子化和氫化物原子化。 1）汞蒸汽原子化（測汞儀） 將試樣中汞的化合物以還原劑（如SnCl2）還原為汞蒸汽，并通過Ar 或N2 將其帶入吸收池進行測定。,2）氫化物原子化 特點：可將待測物從在一定酸度條件下，將試樣以還原劑（NaBH4）還原為元素的氣態(tài)氫化物，并通過Ar或N2將其帶入熱的石英管內原子化并測定。,三光學系統(tǒng)： 分光系統(tǒng)一般用光柵來進行分光。 光譜通帶： W=DS10-3 其中：W為光譜通帶（單位nm）；D為光柵的倒線色散率（單位nm/mm）；S為狹縫寬度（單位

13、m）。,四檢測系統(tǒng)： 檢測系統(tǒng)包括檢測器、放大器、對數(shù)轉換器、顯示器幾部分。,原子吸收光譜法的分析過程：,五原子吸收分光光度計的主要性能參數(shù)： 1靈敏度：有相對靈敏度和絕對靈敏度兩種。 1）相對靈敏度 火焰原子吸收法采用相對靈敏度，其定義為：能產生1%吸收或0.0044吸光度時，試液中待測元素的濃度（以g /mL/1%吸收為單位），也叫特征濃度：,式中：S為相對靈敏度；C為試液中待測元素的濃度（g /mL）；A為試液的吸光度。,2）絕對靈敏度 石墨爐原子吸收法采用絕對靈敏度，其定義為：能產生1%吸收或0.0044吸光度時，所對應的待測元素的質量（以g /1%吸收為單位），也叫特征質量，其計算式

14、為：,式中：S為絕對靈敏度；C為試液中待測元素的濃度（g/mL）；V為試液的體積mL；A為吸光度。,2檢測極限：指儀器所能檢出的元素的最低濃度或最小質量。 定義為：能給出信號強度等于3倍噪聲信號強度標準偏差時所對應的元素濃度或質量。,計算式為：,式中D為檢出極限（g/mL或g）；為對空白溶液進行不少于10次測量時的標準偏差；A為吸光度；g為質量（g）。,第三節(jié) 原子吸收光譜法定量分析,原子吸收光譜法是一種元素定量分析方法，它可以用于測定60多種金屬元素和一些非金屬元素的含量。 一、 定量分析方法,1. 標準曲線法：具體做法是配制一組合適的標準溶液，由低濃度到高濃度，依次噴入火焰，分別測定其吸光

15、度A。以測得的吸光度為縱坐標，待測元素的含量或實驗濃度為橫坐標，繪標準曲線。在相同的實驗條件下，噴入待測試樣溶液，根據(jù)測得的吸光度，由標準曲線找出試樣中持測元素的含量。 標準曲線法簡便、快速，適用于樣品組成簡單或共存元素沒有干擾的試樣。,但在實際分析中，由于各種因素的影響，有時會出現(xiàn)標準曲線彎曲的現(xiàn)象。為保證測定的正確性，在使用本方法時應當注意以下幾點； 1)配制標準溶液時，應盡量選用與試樣組成接近的標準樣品，并用相同的方法處理。如用純待測元素溶液作標準溶液時，為提高測定的準確度?？煞湃攵康幕w元素。 2)應盡量使得測定范圍在T=3090%之間（即A=0.050.5），此時的測量誤差較小。,

16、3)每次測定前必須用標準溶液檢查，并保持測定條件的穩(wěn)定。 4)應扣除空白值，為此可選用空白溶液調零。,2. 標準加入法：一般說來，待測試樣的確切組成是不完全確知的，這就為配制與待測試樣組成相似的標準溶液帶來因難。在這種情況下若待測試佯的量足夠的話，用標核加入法可以克服這一困難。,其具體做法如下：取若干份(例如四份)體積相同的試樣溶液，從第二份開始分別按比例加入不同區(qū)的待測元素的標準溶液，然后用溶劑稀釋至一定體積(設試洋中待測元素的濃度為Cx，加入標準溶液后濃度分別為（Cx十C。），（Cx十2 C。），（Cx十4Co）；分別測其吸光度(Ax、A1、A2、A3)，以A對加入量作圖，這時曲線并不通過

17、原點。顯然相應的截距所反映的吸光度值正是試樣中待測元素所引起的效應。如果外延此曲線便與橫坐標相交，相應于原點與交點的距離，即為所求試樣中待測元索的濃度Cx.,使用標準加入法應注意以下幾點： 測元素的濃度與其對應的吸光度應呈線性關系 為了得到較為精確的外報結果，最少應采用四個點來作外推曲線，并且第一份加入的標準溶液的濃度與試樣溶液的濃度應當接近。這可通過試噴試樣溶液和標準溶液，比較兩者的吸光度來判斷 本法只能消除基體干擾，而不能消除背景吸收的影響 如形成斜率太小的曲線，容易引起較大的誤差。 標準加入法比較麻煩，適用于基體組成未知或基體復雜的試樣的分析。,3. 濃度直讀法：濃度直讀法是在工作曲線的

18、范圍內，應用儀器中的標尺擴展或數(shù)字直讀裝置進行測量。 例如，將5mg/L溶液的吸光度值調為5.00，同時測定試樣溶液，若試樣溶液的吸光度指示為2.30，則表示待測元素的濃度為2.30g/L。 這種方法省去了繪制標推曲線等手續(xù)，分析速度快。但在使用此法時必須使試樣溶液的濃度在工作曲線的范圍之內，且要用標準溶液反復校準，同時做23次的讀數(shù)，求平均值，以取得較為準確的結果。,二、干擾及其消除 （一）譜線干擾： 如：在Ni的分析線232.0nm附近還存在231.6nm的譜線， 如：用308.22nm的譜線測定鋁時，如果存在釩，釩對308.21nm的譜線要產生吸收，,（二）背景吸收：由于原子化器（火焰和

19、石墨爐）中存在的氣體分子和鹽類所產生的吸收以及存在的固體顆粒對光的散射引起的干擾，叫背景吸收。,1）鄰近線背景校正 用分析線測量原子吸收與背景吸收的總吸光度，因非共振線（鄰近線）不產生原子吸收 用它來測量背景吸收的吸光度。兩者之差值即為原子吸收的吸光度。,因為共振線（此時為分析線）的總吸光度AT包括基態(tài)原子的吸收A和背景吸收AB，即AT=A+AB 通過測量共振線旁的“鄰近線”的吸收，得到AB 此時得到凈吸收度A=AT-AB,2）連續(xù)光源背景校正（氘燈或氫燈校正法 ） 先用銳線光源測定分析線的原子吸收和背景吸收的總和。再用氘燈在同一波長測定背景吸收（這時原子吸收可忽略不計）計算兩次測定吸光度之差

20、，即為原子的吸光度。,（三）化學干擾：化學干擾是指在溶液中或氣相中由于待測元素與其它組分之間的化學反應而引起的干擾。,1加入釋放劑：在測定時加入一種能與干擾組分生成更穩(wěn)定或更難揮發(fā)化合物的試劑，而使待測元素釋放出來，從而消除干擾。 如：在測定鈣時，加入鍶，它能與磷酸根形成更穩(wěn)定的化合物而使鈣釋放出來。,2加入保護劑：加入一種能與待測元素生成穩(wěn)定增長化合物的試劑，使得待測元素不與干擾組分反應。而生成的化合物又很容易揮發(fā)和原子化，對測定不干擾。如：測定鈣時，加入EDTA使其生成穩(wěn)定化合物CaY，CaY又很容易揮發(fā)和原子化，從而消除了磷酸根對鈣測定的干擾。,3化學分離：將待測組分和干擾組分分離。 4

21、提高火焰溫度也可以抑制或避免某些干擾。,（四）物理干擾： 是指試樣在轉移、蒸發(fā)和原子化過程中由于試樣任何物理因素的變化而引起的吸光度下降的效應。如：試液的粘度影響取樣速度，表面張力影響霧滴的大小等。,對于物理干擾，最好的消除方法就是配制與試樣溶液組成相似的標準溶液。也可用標準加入法來進行測定。,（五）電離干擾： 電離干擾是指待測元素的原子電離而引入的干擾。 消除方法是采用較低的溫度和加入消電離劑。消電離劑是一些易電離的元素，它增加了火焰中的自由電子的濃度，可有效地抑制和消除電離干擾。如：測定鋇時，加入鉀就可消除電離干擾。,三、測定條件的選擇： 1分析線的選擇：一般選用共振線作分析線。 2燈電流

22、：保正穩(wěn)定和適當光強度輸出的條件下，盡量選用較低的工作電流。,3原子化條件： 火焰法主要是選擇適當?shù)幕鹧?。對于分析線在200nm以下的元素，不宜選用乙炔火焰。對于易電離的元素，宜選用低溫火焰。而對于易生成難離解化合物的元素，則宜選用高溫火焰。 石墨爐法則應選擇合適的干燥、灰化和原子化溫度。,原子吸收法中常用的火焰是空氣一乙炔火焰和笑氣一乙炔火焰。對于化合物在火焰中難離解為原子的元素，如A1、Ti、B、W等及稀土元素，可使用火餡溫度高的笑氣(N2O)一乙炔火餡，以促使化合物的離解；對于一般的無素，如Pb、Cd、Ce、Mg、Cu、Hg等元素，可使用空氣一乙炔火餡。 選定火焰類型后，應通過實驗進一步

23、確定燃氣與助燃氣流量的合適比例。應根據(jù)所測定的元素以及每臺儀器的火焰原子化裝置結構的不同來選擇合適的燃助比，通常調節(jié)空氣和乙炔的流量使火餡在呈藍色狀態(tài)下進行測定。,4燃燒器高度： 對于不同的元素，自由原子的濃度隨火焰高度的分布是不同的。所以測定時，應調節(jié)其高度使光束從原子濃度最大處通過。,5狹縫寬度：由于原子吸收光譜法譜線的重疊較少，一般可用較寬的狹縫，以增強光的強度。但當存在譜線干擾和背景吸收較大時，則宜選用較小的狹縫寬度。,四、原子吸收法操作過程中應注意的一些問題 燃氣與助燃氣：乙炔是使用最多的燃氣，極易燃燒容易爆炸，且能和Cu、Hg、Ag等生成易爆炸的金屬炔化物，應予以注意。乙炔的質量標

24、準是；含量應在98以上，其中不含PH3、H2S等雜質，貯藏場所要通風良好，溫度要保持在35以下。當乙炔鋼瓶壓力下降至490，3325kPa時就要更換。 氧化亞氮(N2O)又叫笑氣，具有麻醉興奮作用，因此要特別注意通風。液態(tài)的N2O在20時其蒸氣壓為506625MPa。使用時應特別注意點火及關火順序：應先用乙炔一空氣點火，然后將空氣調換成N2O，關火時也應將N2OC2H2中的N2O調換成空氣，然后再關乙炔快，最后關空氣。燃燒時應將廢液排放管出口處浸入水中、以防噴霧室的排水閥吸入空氣而引起爆炸。,樣品的配制：用來配制標范溶液的試劑，由于待測元素在標準溶液中一般含量較低，而且用量也少，故不要求純度持

25、別高的試劑，一般為分析試劑。對于用量較大或配制濃溶液使用試劑必須是高純度的(包括溶劑及輔助試劑)，最起碼是A.R級試劑。盡管采用了高純度的試劑，但在分析過程中對試劑進行空白值檢查和校正仍然是必要的。 防止污染：原子吸收分光光度法通常用來測定微量元素，同其它微量分析一樣，要嚴防污染，一般認為周圍的氣氛、容器、水、試劑等部是影響測定結果的重要因素。,氣氛污染：實驗室空氣中的有害氣體、塵埃等均能造成污染。 容器污染：容器的質料不同，污染程度也不同，要注意容器的選擇、清洗及貯存，一般易用溫硝酸或溫鹽酸清洗，不用鉻酸清洗。 試劑污染：分析試劑或酸化溶液用的酸類也能造成污染。一般不使用長期擱置的試劑；有機

26、試劑有時也會含有金素雜質，因此必須蒸溜精制。水必須是高純度的，一般蒸餾水必須再通過離子交換樹脂除去其中的離子，否則水中會有相當多的重金素元素。,對貯備溶液的要求：低濃度(110-6mol/L的溶液，由于吸附等原因，不宜作為貯備溶液，最好使用時間不超過2天。故一般貯備液應配成濃度較大的(1.0010-6 mol/L)溶液。無機貯備液應放置在聚乙烯瓶中，保存在清潔、低溫、陰暗的地方；有機溶劑貯存在玻璃瓶中，要避免與塑料、膠木瓶蓋直接接觸。,標準樣品的配制： 標準樣品的組成要求盡可能接近未知試樣的組成，而且標準樣品總含鹽量也應接近于試樣總含鹽量。因為含鹽量對霧珠的形成和蒸發(fā)速度都有影響。當樣品中總含

27、鹽量0.1時，在標準溶液中應加入等量的同一含鹽類。吸光度應在0.1一0.5之間。,待測試樣預處理：液體樣品一般不需要很多的預處理工作。若樣品的濃度過大，對于無機樣品可用水稀釋，有機樣品可用甲基異丁酮或石油溶劑系列稀釋；無機固體樣品的處理應先進行溶解，然后再稀釋成合適的濃度供測定。,固體樣品般用酸進行溶解，盡量避免堿熔法，因為堿熔法會帶入大量鹽類，使基體元素的濃度增加，引起干擾；有機固體樣品是檢驗工作者常常遇到的分析樣品。這種樣品的處理可采用濕法消化和干法消化兩種方法。 濕法消化：濕法消化適用于少量試樣的處理。它是用適當?shù)乃峄蜓趸瘎┭趸袡C物。將一定量的干燥試樣置于凱氏烷瓶中，加入一定體積的混合

28、酸(一般用硝酸一高氯酸，其比例一股為HN03：HClO43：1)，加熱分解，待樣品分解完全后，用水稀釋到一定的體積。 干法消化：物質經灰化后治于溶劑制成液體樣品，然后稀釋成合適的濃度供測定。,第四節(jié) 原子熒光光譜法 原理： 發(fā)光現(xiàn)象通常被分為熒光、磷光、生物發(fā)光、化學發(fā)光、摩擦發(fā)光和電發(fā)光等。 當用紫外線照射樣品時，樣品能發(fā)射出反映該物質特性的熒光光譜及熒光強度，以此來進行物質約定性和定量分析的方法稱為熒光分析法。 當用紫外光照射某種物質時，該物質能發(fā)射出不同顏色和不同強度的可見光，若停止照射，其發(fā)射光也隨之消失，這種光稱為熒光。產生熒光的過程很快，約在10-8s內完成。如光照停止后，還會繼續(xù)

29、發(fā)射一段時間的熒光，那么這種光就是磷光。,熒光的產生，是由于粒子中價電子的躍遷引起的。在室溫下，大多數(shù)原子中的電子都處于基態(tài)的最低振動能級，當物質受到光的照射時，該物質分子如吸收了與本身特征頻率相一致的光子，則其中某些電子就會由原來的基態(tài)能級躍遷到第一電子激發(fā)態(tài)或更高電子激發(fā)態(tài)的振動能級。 躍遷以后，能量較大的激發(fā)粒子，由于振動加劇，彼此碰撞失去部分能量，亦即通過內轉換過程把部分能量轉移給周圍粒子(如溶劑分子)，自己躍回第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級，這種躍遷不伴隨光的輻射，稱為無輻射躍遷。,（a）共振熒光 (b) 直躍線熒光 (c) 階躍線熒光 (d)階躍激發(fā)熒光 敏化熒光：A +hv A*;

30、 A*+B A+B* B* B+hv (原子熒光),各個不同振動能級上，則所發(fā)出的光即是熒光。由于發(fā)生熒光時所釋放的能量比吸收的激發(fā)光能量要小一些，由Eh及c/，所以熒光波長比激發(fā)光波長稍長些，而且當光照停止后，熒光立即消失（稱為光致發(fā)光，或者稱為二次發(fā)光，屬于發(fā)射光譜）。某些物質的分子在被激發(fā)至較高的能級并通過無輻射躍遷降落到第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動能級之后，并不足直接降落到基態(tài)的各個振動能級，而是再一次通過無幅射躍遷，降落至一個中間亞穩(wěn)定能態(tài)三重線態(tài)，在這一能態(tài)上作一短暫的停留，然后輻射出一定波長的光而躍進至基態(tài)的各個扳動能級上，所發(fā)出的這種輻射就是磷光。由于這種輻射的能量比產生熒光相對的

31、能量要小些，故磷光的波長比熒光的波長要略長。,任何能產生熒光的物質都具有兩個光譜特征：激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。 激發(fā)光譜是引起熒光的激發(fā)輻射在不同波長下的相對效率。其測定方法是將盛有樣液的液槽放入光路中，連續(xù)改變中，連續(xù)改變激發(fā)單色器的波長，讓不同波長的單色光激發(fā)樣液中的熒光物質使之產生熒光，并讓所產生的熒光通過波長固定不變的單色器照射到檢測器上，由檢測器測出熒光強度。以激發(fā)光的波長為橫坐標，以熒光強度為縱坐標，繪制出的圖譜，稱為熒光激發(fā)光譜。,激發(fā)光譜的形狀與測量時選擇的發(fā)射波長無關，但其相對強度與發(fā)射波長有關。通常用激發(fā)光譜中最大的峰值波長輻射樣品。發(fā)射波長固定在它的峰值時，所得的激發(fā)光譜最大

32、 。,熒光發(fā)射光譜又稱熒光光譜，它是由于分子吸收了輻射后再發(fā)射的結果。其測定方法是把熒光樣品放人光路中，選擇適當?shù)募ぐl(fā)波長和狹縫寬度，并使之固定不變，讓發(fā)射單色器的波長連續(xù)改變，由檢測器測出相應的熒光強度。以發(fā)射波長為橫坐標，以熒光強度為縱坐際，繪制出的圖譜稱為熒光發(fā)射光譜。,對于大多數(shù)熒光物質來說，發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長的選擇無關。由于在發(fā)射熒光以前就有一小部分能量已被消耗。所以發(fā)射的熒光能量要比吸收的能量小，也就是發(fā)射的波長總是比激發(fā)的波長要長，且發(fā)射光譜與激發(fā)光譜呈鏡像對稱關系。,熒光物質的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜的形狀和熒光最大峰的位置，對熒光物質來說是特征的。因此，既可依據(jù)特征發(fā)射光譜又可以按照激發(fā)光譜來鑒別有機物質。若共幾種物質的發(fā)射光譜相似，則可以從激發(fā)光語的差異把它們區(qū)分開；若幾種物質的激發(fā)光譜相似，就可用發(fā)射光譜的差異把它們區(qū)分開。,熒光的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜在定量分析中用以選擇波長。測定純物質時，把激發(fā)單色器的波長選在激發(fā)光譜最大峰值相應的波長處，把發(fā)射單色器的波長選在發(fā)射光譜最大峰波長處，這時的熒光強度最大。測定混合物中某一組分時，應選擇激發(fā)和發(fā)射單色器波長使干擾熒光物質的熒光強度比待測組分的熒光強度小以至忽略不計。為此，則應先了解干擾物質的熒光光譜。當混合物