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文檔簡介

1、免疫規(guī)劃所實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測情況及生物安全,河南省疾控中心免疫規(guī)劃所實(shí)驗(yàn)室 徐瑾,實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測內(nèi)容提要,AFP 麻疹 流感 流腦 肝炎 綜合監(jiān)測 標(biāo)本采集與運(yùn)送,河南省脊灰實(shí)驗(yàn)室,成立于1966年 1992年加入國家脊灰實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò) 通過每年國家脊灰實(shí)驗(yàn)室組織的職能考核(盲樣) 1997、1999、2000、2002、2004、2007和2009年通過世界衛(wèi)生組織現(xiàn)場認(rèn)證 目前成員3人,AFP實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測,歷年標(biāo)本檢測情況,河南省2010年AFP監(jiān)測情況,報(bào)告AFP病例612例,非AFP病例9例 15歲以下兒童報(bào)告發(fā)病率2.47/10萬 采集AFP標(biāo)本600例 接觸者病例8例 外省病例4例,2010年合格標(biāo)

2、本采集情況,共采集600例AFP標(biāo)本,單份便9例,采雙份便591例,其中合格標(biāo)本501例,不合格標(biāo)本90例,2010年實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測指標(biāo),7天內(nèi)上細(xì)胞分離培養(yǎng)率(%) 96.5 糞便標(biāo)本28天內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告率(%) 94.4 糞便標(biāo)本中PV 分離陽性率(%) 2.7 糞便標(biāo)本中NPEV分離陽性率(%) 21 PV分離物14天內(nèi)送國家脊灰實(shí)驗(yàn)室率(%) 100 PV分離定型結(jié)果與國家脊灰實(shí)驗(yàn)室符合率(%) 100,河南省脊灰實(shí)驗(yàn)室歷年數(shù)據(jù)比較,2010年P(guān)V陽性分離物月份分布圖,2010年P(guān)V型別分布圖,非脊灰病毒,近年來非脊灰樣病變增多 2010年共分離到51例71株 地區(qū)上無聚集性分布,脊灰抗體

3、水平監(jiān)測結(jié)果,脊灰抗體水平結(jié)果分析,當(dāng)連續(xù)多年無病例發(fā)生時(shí), 人群中抗體的獲得主要是依靠疫苗的免疫接種, 且抗體陽性率及幾何平均滴度(GMT )取決于相應(yīng)疫苗的免疫接種率及接種質(zhì)量。我省健康人群I,II,III 型脊灰中和抗體陽性率均保持在較高水平,這是不斷提高脊灰疫苗常規(guī)接種率和連續(xù)多年開展強(qiáng)化免疫的成效。尤其是5 6歲以下各年齡組的脊灰中和抗體陽性率與GMT 處于較高水平, 這與免疫程序有關(guān)( 1 歲內(nèi)開 展3 次脊灰疫苗基礎(chǔ)免疫, 18 月齡、4 足歲開展2 次加強(qiáng)免疫),免疫成功率監(jiān)測結(jié)果,免疫成功率結(jié)果分析,安陽縣33對血清樣品,免疫前抗體GMT(I、II、III)分別為17.04、

4、22.87、14.40;免疫后抗體GMT(I、II、III)分別為302.84、358.26、74.14。 原陽縣30對血清樣品,免疫前抗體GMT(I、II、III)分別為9.62、14.25、6.06;免疫后抗體GMT(I、II、III)分別為82.52、125.08、18.38。,OPV監(jiān)測結(jié)果,OPV效價(jià)監(jiān)測分析,根據(jù)國內(nèi)配比3價(jià)脊髓灰質(zhì)炎糖丸疫苗出廠合格總劑量為5.7 logTCID50 /粒 ,以上監(jiān)測單位的OPV效價(jià)均達(dá)標(biāo)。,討論,PV分離率較08年以前有大幅度降低,并且在所有16例AFP病例脊灰病毒分離物中,31.25%(5例)是兩種以上型別疫苗株病毒的混合物,且集中在冬季強(qiáng)化免

5、疫活動(dòng)以后,很可能是在AFP病例發(fā)病后給病人口服OPV再采集糞便標(biāo)本,這樣會(huì)導(dǎo)致人為提高了PV分離率,加大了實(shí)驗(yàn)室的工作量,并給臨床確診帶來一定的困難。為提高采集糞便標(biāo)本的質(zhì)量必須進(jìn)一步加強(qiáng)基層工作人員的培訓(xùn)工作,增強(qiáng)AFP 病例報(bào)告意識和主動(dòng)監(jiān)測能力,增強(qiáng)及時(shí)發(fā)現(xiàn)AFP病例并采集、送檢合格糞便標(biāo)本的意識,杜絕在麻痹后采便前給病人服用脊灰疫苗的做法,提高合格糞便標(biāo)本的采集率及送檢率,確保實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測的準(zhǔn)確性和可靠性。,Isolation Rate of poliovirus and NPEV from AFP cases during 2000 2011.4 2000-2011年4月AFP病例中

6、PV和NPEV的分離率,21,2010年分離株和疫苗株相比VP1編碼區(qū)核苷酸變異數(shù),22,Type I,Type II,Type III,AFP病例監(jiān)測目的,及時(shí)發(fā)現(xiàn)輸入性脊灰野病毒,采取措施防止病毒傳播,保持無脊灰狀態(tài)。 及時(shí)發(fā)現(xiàn)脊灰疫苗衍生病毒(以下簡稱VDPV)及其循環(huán),采取措施控制病毒進(jìn)一步傳播。 評價(jià)免疫工作質(zhì)量,發(fā)現(xiàn)薄弱環(huán)節(jié)。 監(jiān)測脊灰病毒變異情況,為調(diào)整疫苗免疫策略提供依據(jù)。,監(jiān)測系統(tǒng)及時(shí)性評價(jià)指標(biāo),2010年國家級監(jiān)測系統(tǒng)所有指標(biāo)均達(dá)到衛(wèi)生部和WHO的要求 AFP病例監(jiān)測報(bào)告(包括“零”病例報(bào)告)及時(shí)率80%; AFP病例報(bào)告后48小時(shí)內(nèi)調(diào)查及時(shí)率80%; AFP病例14天內(nèi)雙

7、份合格大便標(biāo)本采集率80%; AFP病例大便標(biāo)本7天內(nèi)送達(dá)省級脊灰實(shí)驗(yàn)室及時(shí)率80%; 省級脊灰實(shí)驗(yàn)室28天內(nèi)完成AFP病例大便病毒分離及時(shí)率80%; 陽性分離物在14天內(nèi)送國家脊灰實(shí)驗(yàn)室的及時(shí)率80%; 國家脊灰實(shí)驗(yàn)室7天內(nèi)完成省級送達(dá)的陽性分離物型內(nèi)鑒別的及時(shí)率80%; 需進(jìn)行核酸序列分析的陽性分離物應(yīng)在完成病毒型內(nèi)鑒別后14天完成序列檢測; AFP病例麻痹60天內(nèi)完成病毒型內(nèi)鑒別及時(shí)率80%; AFP病例麻痹75天內(nèi)隨訪及時(shí)率80%;,1959-1961,發(fā)明了口服脊灰活疫苗。,Albert B. Sabin, M.D. 發(fā)明了口服減毒活疫苗。,脊灰病毒分類,“型”指脊灰毒株的血清型,通

8、過血清抗體中和試驗(yàn)方法定型 目前,根據(jù)與同型Sabin株VP1區(qū)核苷酸序列差異,將脊灰病毒劃分為三類: Sabin-like(SL):與Sabin株VP1區(qū)核苷酸序列相比,變異率1% 脊灰疫苗高變異株病毒:病毒與原始疫苗株相比,衣殼蛋白1區(qū)(VP1區(qū))核苷酸序列變異介于0.5%1%之間(有58個(gè)堿基發(fā)生變異)。 VDPVs:與原始疫苗株病毒相比,VP1區(qū)核苷酸序列變異介于1%15%。 脊灰野病毒:與原始疫苗株病毒相比,VP1區(qū)全基因序列變異超過15%,或者是既往國內(nèi)外流行過或與既往國內(nèi)外流行過的脊灰病毒高度相似的病毒。 -脊髓灰質(zhì)炎野病毒輸入性疫情和疫苗衍生病毒相關(guān)事件應(yīng)急預(yù)案(試行),脊灰病

9、毒引起的病例分類,VAPP VDPVs病例:從AFP病例糞便、咽部或腦脊液、脊髓組織標(biāo)本分離到VDPVs,經(jīng)省級專家診斷小組鑒定,臨床不能排除脊灰診斷的病例。 cVDPVs:由相關(guān)的脊灰疫苗衍生病毒引起的2例或以上脊灰疫苗衍生病毒病例的事件。 脊灰野病毒病例:糞便、咽部或腦脊液、脊髓組織標(biāo)本脊灰野病毒檢測陽性,臨床診斷符合脊灰的病例。脊灰野病毒由境外傳入者,為輸入性脊灰野病毒病例。,循環(huán)的VDPVs(cVDPVs) 指在人與人之間傳播著的VDPVs; 免疫缺陷VDPVs(iVDPVs) 患者長期向外環(huán)境中排出VDPVs,分離于患有免疫缺陷的慢性排毒者; 未歸類VDPVs(aVDPVs) 指分離

10、自非免疫缺陷患者或與爆發(fā)無關(guān)的單個(gè)VDPV,或從環(huán)境中分離到的VDPV,這些VDPV暫時(shí)無法歸類到第1、2類VDPV中。,已經(jīng)證實(shí)有3種VDPVs,所謂VDPV,是指那些有明確證據(jù)表明,循環(huán)的時(shí)間顯著超過OPV在服苗者體內(nèi)正常繁殖的時(shí)間的脊灰病毒。 I型OPV-最長14天 II型OPV-最長72天 III型OPV-最長72天 VDPV只能依賴于VP1區(qū)核苷酸序列測定來確定(所以劃分標(biāo)準(zhǔn)有些武斷); 對于所有來源于OPV的脊灰病毒,都必須進(jìn)行VDPV的篩查,并做進(jìn)一步的生物學(xué)特征鑒定。,29,尼日利亞和剛果發(fā)生II型cVDPVs,循環(huán)病毒的數(shù)量(百分比),與Sabin2相比,VP1區(qū)核苷酸 變異

11、的個(gè)數(shù),30,II型疫苗株病毒數(shù)次被發(fā)現(xiàn)與cVDPV相關(guān),但是不滿足現(xiàn)行的cVDPV的標(biāo)準(zhǔn); 一些國家或地區(qū)(AFP病例或接觸者)中分離到的脊灰疫苗變異株VP1區(qū)核苷酸變異在0.5%-1%之間,但在時(shí)間或空間上呈現(xiàn)聚集性,VP1區(qū)核苷酸序列顯示這些病毒是單一來源進(jìn)化的,有明顯的相關(guān)性,即病毒學(xué)證據(jù)提示這些病毒發(fā)生了循環(huán)。,31,WHO建議更改II型VDPV的定義,與Sabin2株相比,VP1區(qū)核苷酸序列變異個(gè)數(shù)大于等于6,應(yīng)該被報(bào)告為VDPV; 對cVDPV或iVDPV的評估和控制措施不變; 實(shí)驗(yàn)室檢測方法不變; I型和III型VDPV 的定義不變。,一變?nèi)蛔?32,The Sequenci

12、ng Result of 2010 by NPL,1996-2010年中國II型脊灰病毒的序列分析,病毒分離株的數(shù)量,與Sabin2相比,VP1區(qū)核苷酸 變異的個(gè)數(shù),34,WHO在對眾多國家和地區(qū)對II型脊灰疫苗病毒VP1區(qū)核苷酸變異在0.5%-1%的毒株循環(huán)進(jìn)行了深入研究和總結(jié),發(fā)現(xiàn)II型更容易發(fā)生循環(huán),建議更改II型VDPV定義標(biāo)準(zhǔn),為早期發(fā)現(xiàn)和阻斷II型病毒的循環(huán)爭取寶貴的時(shí)間。 對脊灰消滅計(jì)劃的影響:對實(shí)驗(yàn)室檢測和報(bào)告沒有影響;對報(bào)告病例(未引起循環(huán))的后續(xù)追蹤調(diào)查影響沒有明顯提升。,35,2007年脊髓灰質(zhì)炎病毒VP1區(qū)核苷酸序列分析,接觸者標(biāo)本的采集,(1)AFP病例接觸者 (2)

13、VDPV病例、輸入性脊灰野病毒病例接觸者 (3)高危AFP病例和聚集性臨床符合病例,接觸者標(biāo)本的采集- AFP病例接觸者,以下情況應(yīng)采集AFP病例的5名接觸者(原則上5 歲以下)大便標(biāo)本。 1)每年AFP病例大便標(biāo)本數(shù)少于150份的省; 2)未采集到合格大便標(biāo)本的AFP病例; 3)根據(jù)臨床或流行病學(xué)資料高度懷疑為脊灰的AFP病例; 4)死亡的AFP病例。,原始標(biāo)本運(yùn)送,(1)標(biāo)本采集后要在7天內(nèi)送達(dá)省級脊灰實(shí)驗(yàn)室,標(biāo)本應(yīng)冷藏運(yùn)送,在送達(dá)省脊灰實(shí)驗(yàn)室時(shí)帶冰且包裝完整。標(biāo)本的運(yùn)送要符合國家對標(biāo)本運(yùn)送的有關(guān)要求。 (2)采集的標(biāo)本應(yīng)有完整的登記資料,一并送達(dá)省脊灰實(shí)驗(yàn)室。標(biāo)本標(biāo)簽登記要清楚,標(biāo)本送檢

14、表項(xiàng)目要填寫完整 。,AFP糞便標(biāo)本采集注意事項(xiàng)-1,采集標(biāo)本需使用統(tǒng)一配發(fā)的一次性無菌采樣管。不要使用玻璃容器、藥瓶、塑料袋、紙盒等其它容器,這些容器容易泄漏造成生物安全事故。請各地市及時(shí)檢查采樣管數(shù)量,不足時(shí)及時(shí)補(bǔ)充。 采樣管需標(biāo)識清楚。采樣管上需標(biāo)識病人姓名,采樣時(shí)間,第一份或第二份。 采集標(biāo)本量需足夠且適量。大便標(biāo)本需采集5-8克,采樣管半管即夠,不要裝滿,防止冷凍后體積膨脹溢出。,AFP糞便標(biāo)本采集注意事項(xiàng)-2,帶冰運(yùn)送和保存。脊灰病毒耐冷怕熱,為提高病毒檢出率,采集標(biāo)本后需及時(shí)帶冰送至省疾控中心脊灰實(shí)驗(yàn)室,如不能及時(shí)運(yùn)送,需保存在-20條件下。運(yùn)送時(shí)必須用冷藏包或保溫筒/杯運(yùn)送,建

15、議使用非水性保冷袋,防止冰塊融化后污染標(biāo)本,請根據(jù)各地市路程遠(yuǎn)近及所需時(shí)間帶足夠量冰袋(塊),如使用冰塊,請將冰塊用自封袋(雙層)密閉包裝,標(biāo)本也需單獨(dú)密封包裝(推薦使用自封袋)。,AFP糞便標(biāo)本采集注意事項(xiàng)-3,發(fā)病后不要服苗。確需服苗的采集標(biāo)本后再服苗。 采雙份糞便標(biāo)本。雙份便采集間隔時(shí)間為24-48小時(shí)內(nèi),即超過24小時(shí),不超過48小時(shí)。 接觸者標(biāo)本需及時(shí)采集并送至河南省疾病預(yù)防控制中心。如可能請同時(shí)采集,不能同時(shí)采集的請及時(shí)通知病例所在地疾控中心。,麻疹實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測,我們需要實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)來做麻疹監(jiān)測工作嗎?Do we need lab to do the surveillance work

16、?,Measles case definition 麻疹病例的臨床診斷 Case with fever of 38OC, maculopapular rash, with either cough, coryza or conjunctivitis or any case which a physician thinks is measles 發(fā)熱38OC,出現(xiàn)斑丘疹和至少伴有以下一種癥狀:咳嗽,鼻炎或結(jié)膜炎或醫(yī)務(wù)人員疑為麻疹,Echoviruses Echo病毒,Measles麻疹,Parvovirus B19微小病毒B19,Dengue登革熱,HHV-6,Rubella 風(fēng)疹,Others

17、 其它,實(shí)驗(yàn)室在麻疹診斷和鑒別診斷中的作用消除階段越顯重要 The important role of laboratory in measles diagnosis and differentiate diagnosis,在麻疹控制和消除中扮演重要的角色 可疑麻疹病例血清學(xué)診斷 麻疹疫苗相關(guān)病例的診斷 血清流行病學(xué)研究 麻疹疫苗質(zhì)量和免疫效果的評定 通過分子流行病學(xué)研究,鑒定病毒的傳播來源,傳播路線,是本土,還是輸入 實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)在麻疹強(qiáng)化控制和消除中提供有效的科學(xué)支持,實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)職能,中國麻疹實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)的建立 2001年,在中國衛(wèi)生部、中國CDC、IVDC、WHO和US-CDC的支持下,建立

18、了中國麻疹實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)。 中國的麻疹實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)覆蓋了31個(gè)省份(直轄市)、 331個(gè)地市。2003年國家麻疹實(shí)驗(yàn)室被任命為西太區(qū)地區(qū)參比實(shí)驗(yàn)室。,河南省麻疹實(shí)驗(yàn)室及網(wǎng)絡(luò)的建立,1999年我省開始WHO/CDC協(xié)作項(xiàng)目;2000年全省裝備市級麻疹實(shí)驗(yàn)室,配備實(shí)驗(yàn)器材及設(shè)備. 2001年全省18市級麻疹實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)通過省級實(shí)驗(yàn)室考核認(rèn)證,承擔(dān)起各市麻疹防治的常規(guī)運(yùn)轉(zhuǎn)監(jiān)測任務(wù)。 2002-2007年省級負(fù)責(zé)對市級麻疹實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行每年一次的職能考核,公布盲樣血清考核及血清復(fù)檢再證實(shí)結(jié)果 并頒發(fā)合格證書。,31個(gè)省級實(shí)驗(yàn)室,國家麻疹實(shí)驗(yàn)室 WHO西太區(qū)參比實(shí)驗(yàn)室,331個(gè)地市級實(shí)驗(yàn)室,我國三級麻疹監(jiān)測

19、實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)框架,執(zhí)行WHO西太去麻疹風(fēng)疹參比實(shí)驗(yàn)室職能和國家麻疹實(shí)驗(yàn)室職能,實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)在麻疹強(qiáng)化控制和消除中扮演重要的角色,部分縣級疾控機(jī)構(gòu)也開展了血清學(xué)檢測工作,我國各級麻疹網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室各司其職,為消除麻疹提供實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺(tái)和科學(xué)保障,50% 麻疹散發(fā)疑似病例為實(shí)驗(yàn)室證實(shí)的,2010年疑似麻疹 散發(fā)病例的血清學(xué)證實(shí),數(shù)據(jù)來源: 麻疹監(jiān)測信息報(bào)告管理系統(tǒng),全國麻疹監(jiān)測方案要求: 麻疹散發(fā)疑似病例血標(biāo)本采集率應(yīng) 80%(79.62%),2010年疑似麻疹 爆發(fā)病例的血清學(xué)證實(shí),全國麻疹監(jiān)測方案要求: 麻疹爆發(fā)疫情血清學(xué)確診率應(yīng)90% 采集病原學(xué)標(biāo)本的爆發(fā)疫情應(yīng)80%,數(shù)據(jù)來源: 麻疹監(jiān)測信息報(bào)告管

20、理系統(tǒng),麻疹監(jiān)測方案的制定 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 生物安全規(guī)范 各級實(shí)驗(yàn)室職能 血清和病毒庫 信息數(shù)據(jù)庫 技術(shù)儲(chǔ)備,系統(tǒng)運(yùn)作,執(zhí)行WHO西太去麻疹風(fēng)疹參比實(shí)驗(yàn)室職能和國家麻疹實(shí)驗(yàn)室職能,全國20062012年消除麻疹行動(dòng)計(jì)劃 要求,當(dāng)以省為單位麻疹發(fā)病率較高時(shí),有條件可以開展麻疹疑似病例監(jiān)測,重點(diǎn)進(jìn)行麻疹暴發(fā)疫情的監(jiān)測。 當(dāng)發(fā)生麻疹暴發(fā)疫情時(shí),應(yīng)按相關(guān)要求采集患者出疹早期鼻咽拭子、尿液或血液等標(biāo)本,及時(shí)送省級麻疹實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離。,麻疹實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)的運(yùn)轉(zhuǎn),-麻疹可疑病例的血清學(xué)診斷 -麻疹的血清流行病學(xué) -省級麻疹病毒學(xué)監(jiān)測情況 -省級對地市級實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)質(zhì)量控制和考核認(rèn)證 -國家實(shí)驗(yàn)室對省級實(shí)驗(yàn)室的血

21、清再證實(shí)情況,麻疹控制的不同階段對實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)診斷和病毒監(jiān)測的要求,背景麻疹流行地區(qū)的麻疹基因型分布,C2,B3,D2,Rota, P. A. 2003. Update on the global distribution of genotypes of wild type measles viruses. J Infect Dis 187 Suppl 1:S270-6.,河南省麻疹網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證或認(rèn)可情況,2000年、2002年、2004年、2007國家CDC/WHO專家對河南省級實(shí)驗(yàn)室及鄭州、濮陽、安陽、洛陽等市級麻疹實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場進(jìn)行評審,均順利通過。 2000年-2006年我省送往國家級麻

22、疹血清標(biāo)本證實(shí)工作,六年中有五年符合率100%. 2001年-2006年接受國家級麻疹盲樣考核連續(xù)六年成績均為100分,并發(fā)給了證書. 2000-2008 年每年省級對18市級麻疹實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行職能考核認(rèn)證和血清抽檢再證實(shí)工作,并發(fā)放成績單或合格證書.,麻疹、風(fēng)疹散發(fā)病例IgM檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì),麻疹、風(fēng)疹散發(fā)病例IgM檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì),麻疹、風(fēng)疹暴發(fā)疫情血清學(xué)確診分析,2010年分地區(qū)發(fā)病數(shù)及血清采集情況,麻疹血清學(xué)監(jiān)測標(biāo)本采集后7日內(nèi)報(bào)告率(%),0,7,14,21,28,35,42,-7,-14,-21,0,2,4,6,8,10,Rash,Onse 出疹t,Days after rash onset

23、出疹天數(shù),Infection 感染,Relative levels of antibody 相對抗體水平,消除階段:麻疹病例和接觸者的隔離,必要日期: 最后接種日期 出疹日期 出生日期,標(biāo)本的采集: IgM:單份血清,出疹0-28天 分離: 尿液, N/S,出疹0-5天,麻疹病毒感染人體后抗體動(dòng)態(tài)和病毒的排泄,有最近免疫史的IgM陽性可疑病例,麻疹消除階段-疫苗相關(guān)病例會(huì)顯現(xiàn)出來,疫苗相關(guān)病例:容易誤診為麻疹病例,病毒基因序列是金標(biāo)準(zhǔn),可疑麻疹病例血清學(xué)檢測策略-強(qiáng)化控制階段,出疹天內(nèi)單份血清,可疑麻疹病例 suspected measles cases 麻疹I(lǐng)gM measles 陽性pos

24、itive陰性negative 證實(shí)麻疹confirmed M 風(fēng)疹I(lǐng)gM rubella 陽性P 陰性N 證實(shí)風(fēng)疹confirmed R 排除discard,風(fēng)疹I(lǐng)gM spected Case 可疑病例的血清 陽性 陰性 證實(shí)為風(fēng)疹 麻疹I(lǐng)gM 陽性 陰性 證實(shí)為麻疹 丟棄,可疑麻疹病例血清學(xué)檢測策略-在接近或達(dá)到麻疹消除階段: 先檢測風(fēng)疹,或同時(shí)檢測麻疹和風(fēng)疹,麻疹病毒學(xué)監(jiān)測 1993-2010年麻疹病毒分離株,1993-2010年麻疹病毒學(xué)監(jiān)測結(jié)果,自2009年起,連續(xù)發(fā)現(xiàn)6起麻疹輸入事件:1D4,2D9,3D11; 其中D11是我國于2009年首次在全球發(fā)現(xiàn)并命名的新基因型,該新基因

25、型的鑒定已經(jīng)得到了WHO和US CDC的認(rèn)可; 該新基因型麻疹病毒于2009年12月引起了我國云南孟連縣的麻疹爆發(fā),流行病學(xué)上證實(shí)是從緬甸輸入的,由于緬甸所在的東南亞區(qū)尚未開展麻疹病毒的監(jiān)測工作,D11新基因型麻疹病毒的首次發(fā)現(xiàn)對于WHO東南亞區(qū)及其相鄰的我國所屬的西太區(qū)的麻疹病毒的監(jiān)測工作具有非常重要的意義。,A-VL,A-VL,麻疹病毒學(xué)監(jiān)測的意義 通過鑒定病毒的分子特征對流行病學(xué)方法進(jìn)行補(bǔ)充,特別是無流行病學(xué) 資料時(shí). 確認(rèn)/鑒別病毒的來源(野毒的基因型來源,本土或輸入; 疫苗病例) 確定病毒的傳播途徑 提供評估控制策略效果的方法 輔助分析不尋常的或嚴(yán)重的病例,例如SSPE,MIE,CR

26、S。 評估病毒的傳播模式、為阻斷病毒傳播提供科學(xué)依據(jù) 提供評估控制策略效果的有效指標(biāo)。 幫助建立診斷方法 幫助抗病毒制劑的研制(中和抗體) 建立麻疹毒株庫及基因數(shù)據(jù)庫 發(fā)展疫苗(篩選毒株,和中和位點(diǎn)),充分的技術(shù)儲(chǔ)備和人力資源參與 對中國疫苗全基因組的序列測定和全球所有麻疹疫苗序列的對比分析,迅速平息了有關(guān)“中國疫苗被外國插入不明基因片段的“的謊言。 參加衛(wèi)生部組織的現(xiàn)場技術(shù)指導(dǎo)和督導(dǎo),提供技術(shù)支撐。 及時(shí)對XX省 “疑為麻疹疫苗異常反應(yīng)死亡” 病例的病因?qū)W進(jìn)行了快速鑒定,證實(shí)為EV71引起,為疫苗順利完成接種計(jì)劃提供了科學(xué)保障。 成功應(yīng)對和阻斷了”國外輸入D11病毒基因型“帶來的挑戰(zhàn) 提出需

27、要關(guān)注麻疹疫苗相關(guān)病例的診斷和鑒別診斷,應(yīng)對消除麻疹,免疫一億兒童帶來的挑戰(zhàn),圍繞麻疹消除的指標(biāo)-在保證監(jiān)測質(zhì)量,1.發(fā)病率 95% 4. 爆發(fā) 80%爆發(fā)12月沒有本土麻疹病毒株引起的麻疹病例 *麻疹疑似病例發(fā)病3日內(nèi)病原學(xué)標(biāo)本(咽拭子)采集率達(dá)到60%,實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制,每年組織省轄市麻疹實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)職能考核 血清盲樣考核(下發(fā)麻疹、風(fēng)疹質(zhì)控血清) 血清抽樣復(fù)核 -共有18家網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室參加考核,2009綜合監(jiān)測健康人群麻疹I(lǐng)gG抗體水平,2009綜合監(jiān)測健康人群麻疹I(lǐng)gG抗體水平,2009綜合監(jiān)測麻疹疫苗免疫成功率檢測,分年齡健康人群風(fēng)疹I(lǐng)gG抗體水平,麻疹監(jiān)測存在問題,可疑麻疹病例報(bào)告率和實(shí)

28、驗(yàn)室檢測率待提高(大于等于2/10萬)。 數(shù)據(jù)庫填報(bào)不完整,存在缺項(xiàng)漏項(xiàng)。 麻疹疑似病例血標(biāo)本和咽拭標(biāo)本采集率、血標(biāo)本送檢及時(shí)率、實(shí)驗(yàn)室報(bào)告及時(shí)率有待進(jìn)一步提高。 麻疹暴發(fā)病例均需采集血清標(biāo)本和咽拭標(biāo)本,每個(gè)散發(fā)病例都要采集標(biāo)本鑒定病毒來源 每次爆發(fā)每個(gè)可能的傳播鏈都要采集標(biāo)本,以鑒別是否是同一株病毒在持續(xù)傳播 各省要提高散發(fā)和爆發(fā)疫情病原學(xué)標(biāo)本采集率,病毒分離率和基因型別的及時(shí)鑒定率 各項(xiàng)指標(biāo)嚴(yán)格按照麻疹監(jiān)測方案執(zhí)行 一個(gè)要消除的傳染?。哼_(dá)到高質(zhì)量的監(jiān)測投入經(jīng)費(fèi)嚴(yán)重不足!,病毒學(xué)監(jiān)測存在問題,采樣及送檢要求1,血/血清標(biāo)本:醫(yī)療機(jī)構(gòu)在發(fā)現(xiàn)麻疹病例或疑似病例時(shí),應(yīng)負(fù)責(zé)采集血標(biāo)本。基本要求是:采

29、血量為23毫升,無溶血,無污染;標(biāo)本送檢表填寫完整;血標(biāo)本或分離血清(0.5毫升)應(yīng)放置4冷藏,并立即通知或24小時(shí)內(nèi)送達(dá)轄區(qū)縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)??h級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)收到標(biāo)本后,48小時(shí)內(nèi)將血清(冷藏條件下)和標(biāo)本送檢表送至市級麻疹血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室。 鼻咽拭子:在患者出疹早期采集。 采集后4冷藏條件下,48小時(shí)送省CDC;如不能及時(shí)送檢,放- 70保存,一周內(nèi)盡快安排送檢。,采樣及送檢要求2,鼻咽拭子、尿液或血液等標(biāo)本:在患者出疹早期采集。 采集后4冷藏條件下,48小時(shí)送省CDC;如不能及時(shí)送檢,放- 70保存,并盡快安排送檢。,流感實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測,美國CDC通過基因比對分析,宣布病毒來源于豬 MM

30、WR, 21 April 新型重配甲型H1N1流感病毒:含有人流感、豬流感和禽流感病毒基因 Nature, 26 June, Science Express 2009 不是來自中國,不是來源于實(shí)驗(yàn)室,甲型H1N1流感病毒,63家網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室197家哨點(diǎn)醫(yī)院,203家網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室356家哨點(diǎn)醫(yī)院,411家網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室 556家哨點(diǎn)醫(yī)院,擴(kuò)大流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò),2009年5月前,2009年7月,2009年12月后,流感監(jiān)測方案相關(guān)文件,全國流感/人禽流感監(jiān)測實(shí)施方案(20052010年度) 甲型H1N1流感監(jiān)測方案(第一版) 衛(wèi)生部關(guān)于擴(kuò)大全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)的通知 衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于印發(fā)甲型H1N1流感監(jiān)測方案(

31、第二版)的通知 衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于印發(fā)全國流感監(jiān)測方案(2010年版)的通知2010年9月3日 中國疾病預(yù)防控制中心關(guān)于印發(fā)全國流感檢測技術(shù)指南的通知2011年8月9日,一、2010版監(jiān)測方案-明確目標(biāo),二、2010年版監(jiān)測方案-監(jiān)測目的,監(jiān)測流感活動(dòng)水平和流行動(dòng)態(tài); 及時(shí)發(fā)現(xiàn)流感病毒變異并作出預(yù)警; 為全球及我國流感疫苗毒株的預(yù)測和推薦提供依據(jù)。,三、2010年版方案-監(jiān)測內(nèi)容改變,病例定義 監(jiān)測時(shí)間 樣本量 標(biāo)本運(yùn)送及保存 時(shí)限,各級實(shí)驗(yàn)室主要工作任務(wù),河南省流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測概況,網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室構(gòu)成 網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室流感病毒監(jiān)測情況 網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室流感病毒核酸監(jiān)測能力考核情況 培訓(xùn)和督導(dǎo) 工作不足 工作

32、要求,河南省流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室構(gòu)成,2009年5月以前只有河南省疾控中心流感實(shí)驗(yàn)室一家全國流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室,之后擴(kuò)大到19家,各地市疾控中心檢驗(yàn)室開始開展流感病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測工作。 目前開展病毒分離工作的僅有省中心實(shí)驗(yàn)室,各地市均在積極籌備建設(shè)病毒分離實(shí)驗(yàn)室,濮陽、商丘等地已具有病毒分離能力。,2009-2011河南省流感實(shí)驗(yàn)室工作量統(tǒng)計(jì)-核酸檢測,2010-2011年河南省ILI標(biāo)本檢測情況,2005-2011年省中心流感實(shí)驗(yàn)室流感病毒分離情況,2005-2011年省中心流感實(shí)驗(yàn)室流感病毒分離情況,河南省流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)ILI標(biāo)本送檢及時(shí)性,河南省流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)培訓(xùn)班,時(shí)間:2010年12月1

33、317日 地點(diǎn):省中心流感實(shí)驗(yàn)室 目的:建立地市級流感病毒分離能力 對象:各地市流感實(shí)驗(yàn)室技術(shù)骨干 內(nèi)容:流感病毒的細(xì)胞分離技術(shù)、雞胚分離培養(yǎng)技術(shù)、流感病毒的血清鑒定技術(shù),培訓(xùn)一,河南省流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)手把手培訓(xùn)班,培訓(xùn)二,時(shí)間:2010年3月131日 地點(diǎn):省中心流感實(shí)驗(yàn)室 目的:提高地市級流感實(shí)驗(yàn)室核酸檢測能力 對象:各地市流感實(shí)驗(yàn)室技術(shù)骨干 內(nèi)容:流感病毒核酸檢測的RT-PCR技術(shù)、Real-time PCR技術(shù),流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場督導(dǎo),2010年12月對新鄉(xiāng)、三門峽、信陽、駐馬店進(jìn)行了網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的現(xiàn)場督導(dǎo) 2011年1-8月,對洛陽、濮陽、南陽、鶴壁流感實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了現(xiàn)場督導(dǎo),指導(dǎo)

34、并交流病毒分離實(shí)驗(yàn)室建設(shè)經(jīng)驗(yàn),爭取盡快開展病毒分離工作。,網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室流感病毒核酸檢測能力考核,2010年9-10月,國家流感中心對全國流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行流感病毒核酸檢測能力考核,我省19個(gè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室10個(gè)報(bào)告結(jié)果有誤; 2011年1月省CDC轉(zhuǎn)發(fā)中國疾控中心考核結(jié)果通報(bào),并提出具體整改要求; 2011年4月到5月,由省中心流感實(shí)驗(yàn)室制備考核標(biāo)本,對全省18家流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行盲樣考核,16家網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果完全正確,平頂山和周口結(jié)果有誤; 2011年6月通報(bào)省內(nèi)考核結(jié)果,督促各地市做好經(jīng)驗(yàn)總結(jié); 2011年8-9月國家流感中心對全國流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行流感病毒核酸檢測能力考核,目前該項(xiàng)工作正在進(jìn)

35、行中。,存在問題,網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室流感核酸檢測陽性標(biāo)本,送省CDC實(shí)驗(yàn)室的送檢率低。 陽性標(biāo)本向省CDC送檢不及時(shí)。 咽拭標(biāo)本保存不當(dāng),影響病毒分離陽性率。 不能鑒別流感病毒亞型,只做A、B型的區(qū)分,樣本采集、運(yùn)送及保存要求1,流感病毒核酸檢測陽性標(biāo)本保存及送檢要求2,各地市流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室收檢的咽拭標(biāo)本在核酸檢測實(shí)驗(yàn)完畢后,放-70保存。 核酸檢測陽性標(biāo)本送省中心流感實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離,要求從采樣日期到送檢日期不得大于14天。 省中心流感實(shí)驗(yàn)室分離到的陽性標(biāo)本需及時(shí)送檢國家流感中心進(jìn)行復(fù)核,從采集日期到送檢日期不得超過一個(gè)月。,流腦實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測,病原學(xué)監(jiān)測; 耐藥監(jiān)測 免疫水平監(jiān)測; 健康人群帶菌監(jiān)測

36、;,一、病原學(xué)監(jiān)測-醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)標(biāo)本采集,醫(yī)療機(jī)構(gòu)發(fā)現(xiàn)疑似流腦病例時(shí),無論是否使用抗生素治療,都要盡快采集病人腦脊液、血液、瘀點(diǎn)(斑)組織液標(biāo)本,標(biāo)本要盡可能在使用抗生素治療前采集。 腦脊液:采集1毫升腦脊液,進(jìn)行涂片檢測、培養(yǎng)分離、抗原檢測和核酸檢測。 血液:抽取病人全血4毫升,其中一部分用于分離血清,-20保存準(zhǔn)備檢測抗體,其余全血進(jìn)行病原培養(yǎng)分離、核酸檢測。 瘀點(diǎn)(斑)組織液標(biāo)本:選病人皮膚上的新鮮瘀點(diǎn)(斑),消毒后用針頭挑破,擠出組織液,涂片鏡檢。,病原學(xué)監(jiān)測疾控部門檢測1,縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)接到醫(yī)療機(jī)構(gòu)報(bào)告后,當(dāng)天應(yīng)到醫(yī)療機(jī)構(gòu)收集標(biāo)本,并盡快將標(biāo)本送市級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測,對于

37、病原和抗原檢測陰性的病例要采集恢復(fù)期血清以進(jìn)行血清抗體測定,檢測抗體的血清標(biāo)本應(yīng)冷藏運(yùn)送。 部分具備檢測能力的縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu),可從事相應(yīng)的病原學(xué)和血清學(xué)檢測工作。已經(jīng)檢測過的標(biāo)本,報(bào)告市級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)后,直接送省級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)。 腦膜炎雙球菌比較脆弱,采集標(biāo)本后,在運(yùn)送樣品或培養(yǎng)物時(shí),應(yīng)保持樣品處于2036之間。,病原學(xué)監(jiān)測疾控部門檢測2,市級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)收到病例標(biāo)本后,進(jìn)行流腦病原檢測;收集到急性期和恢復(fù)期血清后,進(jìn)行血清抗體測定。收到標(biāo)本7天內(nèi)完成標(biāo)本檢測,并將檢測結(jié)果、分離的菌株于48小時(shí)內(nèi)送省級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu);培養(yǎng)陰性的標(biāo)本每月匯總送省級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)。,病原學(xué)監(jiān)

38、測疾控部門檢測3,省級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)收到標(biāo)本后,應(yīng)于7天內(nèi)完成菌株復(fù)核鑒定、菌株的耐藥性檢測,還應(yīng)對培養(yǎng)陰性標(biāo)本進(jìn)行特異性核酸PCR檢測。檢測完成后,及時(shí)將結(jié)果反饋市級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu),并填寫菌株登記表,于28天內(nèi)將菌株送至中國疾病預(yù)防控制中心。,病原學(xué)監(jiān)測結(jié)果反饋,各級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)要及時(shí)將檢測結(jié)果填入個(gè)案調(diào)查表,并錄入數(shù)據(jù)庫,通過網(wǎng)絡(luò)直報(bào)。同時(shí)及時(shí)逐級反饋檢測結(jié)果,縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)收到上級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)檢測結(jié)果后,應(yīng)及時(shí)將結(jié)果反饋送檢的醫(yī)療機(jī)構(gòu)。,二、耐藥性監(jiān)測,省級疾病預(yù)防控制中心收到病例菌株或密切接觸者菌株后7天內(nèi)應(yīng)完成耐藥性檢測,同時(shí)將病例菌株提供給省級衛(wèi)生行政部門指定的三

39、級醫(yī)院用于耐藥性檢測,醫(yī)院收到菌株后7天內(nèi)應(yīng)完成耐藥性檢測。,三、人群流腦抗體水平和帶菌率監(jiān)測1,各省衛(wèi)生行政部門應(yīng)根據(jù)過去3年流腦平均發(fā)病水平、人口、地理分布特點(diǎn),以及當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制機(jī)構(gòu)工作能力等綜合因素,每年在流腦高發(fā)縣設(shè)立至少2個(gè)監(jiān)測點(diǎn),低發(fā)縣設(shè)至少1個(gè)監(jiān)測點(diǎn),動(dòng)態(tài)收集相關(guān)資料。各省確定監(jiān)測點(diǎn)后,于6月底前上報(bào)中國疾病預(yù)防控制中心備案。,人群流腦抗體水平和帶菌率監(jiān)測2,每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)分7個(gè)年齡組(1歲、12歲、34歲、56歲、714歲、1519歲、20歲),每個(gè)年齡組采集至少30人的血清檢測抗體水平。 每年9月采血1次,每次采血2毫升,編號登記,進(jìn)行流腦抗體水平的檢測,同時(shí)注明采樣對象接種

40、流腦疫苗時(shí)間。,人群流腦抗體水平和帶菌率監(jiān)測3,在開展人群抗體水平調(diào)查采集血液時(shí),同時(shí)采集咽拭子標(biāo)本,進(jìn)行流腦菌株分離培養(yǎng),了解健康人群Nm的帶菌率、帶菌群型。培養(yǎng)所獲得的Nm菌株分純鑒定合格后,將其純培養(yǎng)物的菌苔刮到35支滅菌的脫脂牛奶菌種管中,置-20冰箱保存。,人群流腦抗體水平和帶菌率監(jiān)測4,抗體水平與帶菌率檢測完成后,盡快(最遲于10月底前)將結(jié)果電子版上報(bào)中國疾病預(yù)防控制中心(詳見附表2),分離的菌株于檢測完成后28天內(nèi)送中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所進(jìn)一步鑒定分析。,表1 河南省2010 年健康人群流腦A 群、C 群抗體陽性率,表2 河南省2010 年健康人群流腦抗體年齡組分

41、布,肝炎實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測,HBsAb和HBsAg,2010年病毒性肝炎實(shí)驗(yàn)室分別在安陽、漯河、周口、南陽、濮陽、鄭州、新鄉(xiāng)等6個(gè)地區(qū)采集了血清標(biāo)本,采集4個(gè)年齡組,分別為2-3歲,5-6歲,13-15歲和18歲以上年齡組,乙肝免疫成功率,Anti-HAV lgG,甲肝的綜合監(jiān)測表明,2-3歲和5-6歲的抗體水平較高,分別為90.22%和90.53%,這與近年甲肝疫苗的接種有直接的關(guān)系,13-15歲的抗體水平為69.79%,18歲以上的為94.01%,直接反應(yīng)了甲肝抗體水平隨年齡的增長而增加的趨勢。,甲肝免疫成功率,共三個(gè)地區(qū):分別為原陽、臥龍和太康,每個(gè)地區(qū)30份樣本。,標(biāo)本采集及運(yùn)送的生物安全要求

42、,法律法規(guī),2004年11月12日 國務(wù)院總理溫家寶簽署第424號國務(wù)院令,公布病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例 可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定 人間傳染的病原微生物名錄,采集病原微生物樣本應(yīng)具備的條件,第一,應(yīng)具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護(hù)水平相適應(yīng)的設(shè)備; 第二,具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員; 第三,具有有效的防止病原微生物擴(kuò)散和感染的措施; 第四,具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。,一、安全性,執(zhí)行標(biāo)本采集的所有步驟都必須戴手套、穿實(shí)驗(yàn)服,需要的話,戴防護(hù)口罩和防護(hù)眼鏡; 不能將帶針頭的注射器直接送檢,其內(nèi)容物應(yīng)移至無菌管內(nèi)

43、; 所有的原始標(biāo)本容器應(yīng)該是防漏的,在運(yùn)輸中應(yīng)置于防漏的、可封口的塑料袋中,塑料袋應(yīng)該有一個(gè)獨(dú)立的、可進(jìn)行文字書寫的部分;,二、標(biāo)本的采集與送檢應(yīng)注意的原則,無菌操作 避免污染; 容器和培養(yǎng)基應(yīng)預(yù)先進(jìn)行無菌處理并貼好標(biāo)簽 應(yīng)選擇感染部位或病變明顯的部位采集標(biāo)本 避免周圍組織、器官或分泌物中的雜菌污染,在最佳時(shí)間采集適宜標(biāo)本 懷疑流行性腦膜炎的病人,應(yīng)選取腦脊液、血液或皮膚上的出血淤斑進(jìn)行檢測;如果進(jìn)行病毒培養(yǎng)或其抗原檢測,應(yīng)取急性期標(biāo)本,采集越早,病毒的陽性檢出率越高。 盡量在抗生素使用前采集 對于懷疑細(xì)菌感染的標(biāo)本,特別是對抗生素敏感的病原體,如腦膜炎奈瑟菌。病毒分離培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)加入抗生素,以避免在病毒培養(yǎng)過程中的細(xì)菌污染。,鼻咽拭子保存管:10 ml或15ml螺口塑料管(外螺旋、帶密封墊圈),可耐

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