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提高手工復(fù)核血片質(zhì)量的體會【摘要】 用血液分析儀進(jìn)行血細(xì)胞計數(shù)后進(jìn)行手工復(fù)核血片是血細(xì)胞分析中的一個重要部分, 通過在工作中對大量血球計數(shù)后的血液標(biāo)本進(jìn)行復(fù)核血片,總結(jié)并探討如何提高復(fù)核血片的質(zhì)量,減少漏診和誤診。 【關(guān)鍵詞】 血球計數(shù);復(fù)核;血片;質(zhì)量 血液分析儀的普及大大提高了工作效率,使臨床醫(yī)生能夠及時得到多參數(shù)的血液分析報告,了解病人的病情及其變化情況。但是越來越多的檢驗工作者也意識到儀器并不能完全代替顯微鏡檢查,認(rèn)識到進(jìn)行手工復(fù)核血片的重要性1。什么情況下要進(jìn)行手工復(fù)核血片?如何提高復(fù)核血片的質(zhì)量?根據(jù)從事血液工作的一些經(jīng)驗談?wù)勛约旱囊恍w會。 1 首先應(yīng)該了解不同血球計數(shù)儀的性能及各種血球計數(shù)儀的報警信息內(nèi)容以及它們的直方圖和散點圖的變化 三分類血球儀大都采用的是阻抗法,利用溶血劑破壞紅細(xì)胞并使白細(xì)胞膜皺縮,然后通過識別細(xì)胞體積的大小來進(jìn)行白細(xì)胞分類,分為中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和中間細(xì)胞三大類。但是它不能識別細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu),這樣許多體積較大的幼稚細(xì)胞就有可能在白細(xì)胞分類中分為中間細(xì)胞,使中間細(xì)胞比例明顯增高,這時需要手工復(fù)核血片。根據(jù)經(jīng)驗在中間細(xì)胞10時需進(jìn)行手工復(fù)核血片。而對于一些嚴(yán)重的小細(xì)胞低色素的缺鐵性貧血病人由于紅細(xì)胞的平均體積明顯小于正常值,有一些小紅細(xì)胞容易計數(shù)為血小板,使血小板計數(shù)值大大高于正常范圍,在血小板直方圖上表現(xiàn)為尾部抬高,這時也需要我們進(jìn)行顯微鏡復(fù)核。對于SYSNEX的五分類血球儀,由于它采用半導(dǎo)體激光光束照射細(xì)胞,不但可以反映細(xì)胞體積的大小還可以反映細(xì)胞的內(nèi)容物如核和顆粒以及反映細(xì)胞的DNA和RNA的含量。對血小板計數(shù)還采用了流式計數(shù)的功能,這對于一些血小板異常的病人在準(zhǔn)確性上優(yōu)于三分類血球儀。同時它具有FIAG報警信息以及IG的百分比數(shù)值,但是對于中性粒細(xì)胞桿狀核和分葉核并不能完全區(qū)分,對幼稚細(xì)胞和一些異常淋巴細(xì)胞不能準(zhǔn)確識別,尤其是一些血液病病人的標(biāo)本有時甚至不能分類,使結(jié)果存在假陽性和假陰性。我們可以根據(jù)報警信息的內(nèi)容同時觀察散點圖上變化有針對性復(fù)核,這樣既可以減少不必要的勞動力,又可以減少漏診和誤診。 2 要不斷加強血液形態(tài)學(xué)方面的基本知識學(xué)習(xí) 血液形態(tài)學(xué)涉及到紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板以及其他異常細(xì)胞的形態(tài)學(xué)方面的知識。紅細(xì)胞方面涉及到幼紅細(xì)胞的識別,成熟紅細(xì)胞的形態(tài)以及大小是否一致,是否存在紅細(xì)胞碎片等;白細(xì)胞方面需要辨別不同類型的各種細(xì)胞以及各種細(xì)胞的不同階段和比例,成熟中性粒細(xì)胞是否存在中毒顆粒、空泡變性以及其他異常改變;血小板看是否有血小板聚集和有沒有大血小板的存在。隨著血球計數(shù)儀的普及,我們在血液形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)知識方面越來越薄弱,這就需要我們重視這門基礎(chǔ)學(xué)科,加強這方面的學(xué)習(xí),多向有經(jīng)驗的細(xì)胞形態(tài)學(xué)方面的同事學(xué)習(xí)。 3 要根據(jù)自己實驗室的情況確定顯微鏡復(fù)核的標(biāo)準(zhǔn) 這樣既減少了不必要的勞動力又做到不漏診和誤診。在確定復(fù)核的標(biāo)準(zhǔn)上,許多專家學(xué)者做了大量工作,制訂一些公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)但是由于每個實驗室的儀器和實驗室條件不一樣,可以根據(jù)工作經(jīng)驗確定符合自己實驗室的標(biāo)準(zhǔn),我科為SYSMEX-2100五分類血球儀,在無任何報警信息和圖形正常的情況下,符合率較高,如不屬于血液病病人基本可不做手工復(fù)核,如果有報警信息,則根據(jù)提供的報警信息如“異常淋巴細(xì)胞”、“幼稚粒細(xì)胞”、“有核紅細(xì)胞”、“核左移”、血小板聚集等IP信息有針對性地進(jìn)行復(fù)核,或者當(dāng)白細(xì)胞計數(shù)值20.0109或3.0109、血小板計數(shù)值500109或<70109,同時觀察直方圖和散點圖有無異常來綜合考慮。而對于SYSMEX-KX21三分類血球儀,如果中間細(xì)胞>10,白細(xì)胞計數(shù)值>20.0109或<3.0109,中性粒細(xì)胞>90,淋巴細(xì)胞>50,血小板計數(shù)值>500109或<70109或直方圖存在異常均要進(jìn)行復(fù)核。 4 制備良好的血膜也是保證復(fù)核血片質(zhì)量的重要環(huán)節(jié) 一張良好的血膜要做到頭體尾分布均勻,厚薄適宜,對貧血嚴(yán)重的標(biāo)本推片時角度大一點,速度快一點,反之則相反。染色時室溫低,適當(dāng)延長染色時間,當(dāng)血球計數(shù)結(jié)果顯示白細(xì)胞計數(shù)值高時盡量把血片推薄一些。 5 手工復(fù)核血片的程序 對于一張血片,在進(jìn)行良好的瑞氏染色后,首先我們應(yīng)先用低倍鏡觀察整張血片,看白細(xì)胞和血小板的數(shù)量是否與儀器計數(shù)大致相符,然后看白細(xì)胞的分類情況,是否有原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞,有沒有核左移,成熟粒細(xì)胞的形態(tài)有無分葉過多,中毒顆粒,空泡變性,有無異常淋巴細(xì)胞等異常改變,再看成熟紅細(xì)胞大小是否一致,中央淡染區(qū)有無擴大,有無聚集或緡錢狀凝集。有無淚滴狀紅細(xì)胞、口形紅細(xì)胞、靶形紅細(xì)胞等異常紅細(xì)胞存在。紅細(xì)胞中有無異常結(jié)構(gòu)如卡伯氏環(huán)、嗜堿性點彩紅細(xì)胞等。最后看血小板有無聚集和大血小板的存在。 6 與臨床醫(yī)生多溝通 有異常及時與臨床聯(lián)系,同時自己多了解一些臨床方面的知識,如高齡孕婦血片中有可能出現(xiàn)有核紅細(xì)胞,冷球蛋白血癥,重癥肝炎病人可能使白細(xì)胞計數(shù)或分類出現(xiàn)異常,HE患者經(jīng)常有血小板減少情況,缺鐵性貧血病人治療前后紅細(xì)胞圖形有可能發(fā)生變化2,這些都需要我們多了解,以便在復(fù)核血片時做到心中有數(shù)。發(fā)現(xiàn)有異常及時告知臨床醫(yī)生,有些血片上的異常改變對疾病的支持診斷有很大幫助,例如在外周血涂片上發(fā)現(xiàn)較多紅細(xì)胞碎片同時血球計數(shù)結(jié)果顯示嚴(yán)重貧血并且血小板計數(shù)嚴(yán)重減低,這時紅細(xì)胞碎片的出現(xiàn)對于診斷血栓性血小

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