新高考2017屆高考生物復(fù)習專題綜練專題14生物技術(shù)實踐.doc

專題十四生物技術(shù)實踐非選擇題(本題共8小題，每小題15分，共120分)1(2016遼寧遼南協(xié)作體二模，39)為了調(diào)查某城市自來水的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了自來水水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。涂布平板所用的培養(yǎng)基是_(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基的制備過程是_。對培養(yǎng)基滅菌的方法是_法。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基培養(yǎng)了一段時間，若空白培養(yǎng)基出現(xiàn)了菌落，請分析說明原因(寫出二個)_； _。(2)培養(yǎng)基滅菌后，將1 mL水樣稀釋1 000倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為51、50和49。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(3)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是_的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于_ ?！敬鸢浮?1)固體計算稱量溶化滅菌倒平板高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基滅菌不合格倒平板過程被污染(或培養(yǎng)皿滅菌不合格等正確答案均給分)(2)5.0108(3)殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留(或殺死接種環(huán)上)上一次劃線末端【解析】(1)涂布平板所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基的制作過程是：計算稱量溶化滅菌倒平板。常采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，若一段時間后出現(xiàn)了菌落，則可能的原因有：培養(yǎng)基滅菌不合格、倒平板過程被污染或培養(yǎng)皿滅菌不合格等。 (2)由題意可知：平板上生長的平均菌落數(shù)(515049)350個，則1mL水樣中的菌落數(shù)(CV)M(500.1)10005.0105個，每升水樣中的活菌數(shù)為5.01051035.0108個。(3)采用平板劃線法分離水樣中的細菌，在操作時，每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)的目的是：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上一次劃線末端。2(2016四川成都七中3月模擬，18)為獲得果膠酶高產(chǎn)菌株，科研人員進行了下列分離、篩選、鑒定工作。(1)為分離果膠酶產(chǎn)生菌，科研人員配制了下表所示成分的培養(yǎng)基，該表空白處的兩種成分是_。制備的培養(yǎng)基常用_法進行滅菌。K2HPO4MgSO4NaNO3FeSO4瓊脂0.1 g0.5 g3 g0.01 g2 g15 g加至1 L(2)科研人員將采集的果園土壤放入無菌水中，振蕩混勻，制成懸液。為獲得較均勻分布的單菌落，還需要將懸液進行_，用_法接種于固體培養(yǎng)基上。接種后的培養(yǎng)基_狀態(tài)放入培養(yǎng)箱。(3)選擇單菌落數(shù)目適宜的培養(yǎng)基，加入一定濃度的剛果紅溶液(果膠與剛果紅結(jié)合后顯紅色)，一段時間后洗去培養(yǎng)基表面的剛果紅溶液，觀察并比較菌落和_直徑的比值，篩選果膠酶高產(chǎn)菌株。(4)將獲得的菌株進行液體培養(yǎng)后，從培養(yǎng)液的_(填“上清液”或“沉淀物”)獲得粗提的果膠酶。將一定量的粗提果膠酶與適量果膠溶液混合，一定時間后測定吸光值來測定酶活性。進行吸光值測定時，需將_與等量果膠溶液混合，作為實驗的對照?！敬鸢浮?1)果膠和蒸餾水高壓蒸汽滅菌(2)梯度稀釋(或系列稀釋)(稀釋)涂布平板倒置(3)水解圈(或透明)(4)上清液等量失活的粗提果膠酶【解析】(1)依題意可知：該實驗的目的是分離果膠酶產(chǎn)生菌，因此培養(yǎng)基中需要加入果膠，在配制過程中需用蒸餾水定容，所以該表空白處的兩種成分是果膠和蒸餾水。制備的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。(2)為獲得較均勻分布的單菌落，還需要將懸液進行梯度稀釋，并用稀釋涂布平板法接種于固體培養(yǎng)基上。接種后的培養(yǎng)基倒置狀態(tài)放入培養(yǎng)箱，以防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。(3)已知果膠與剛果紅結(jié)合后顯紅色。果膠酶產(chǎn)生菌分泌的果膠酶能夠?qū)⑴囵B(yǎng)基中的果膠水解，當單菌落數(shù)目適宜的培養(yǎng)基中加入一定濃度的剛果紅溶液一段時間后，洗去培養(yǎng)基表面的剛果紅溶液，因菌落周圍的果膠被分解，無法形成紅色的復(fù)合物而出現(xiàn)水解透明圈，所以觀察并比較菌落和水解(或透明圈)直徑的比值，可篩選出果膠酶高產(chǎn)菌株。(4)將獲得的菌株進行液體培養(yǎng)后，從培養(yǎng)液的上清液獲得粗提的果膠酶。將一定量的粗提果膠酶與適量果膠溶液混合，一定時間后測定吸光值來測定酶活性。進行吸光值測定時，需將等量失活的粗提果膠酶與等量果膠溶液混合，作為實驗的對照。3(2016貴州高校招生適應(yīng)考試，39)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當土壤中的微生物將尿素分解后才能被植物吸收利用。因此，對土壤中分解尿素的微生物進行分離和鑒定具有重要意義。回答下列問題：(1)對土壤中分解尿素的微生物的分離過程如下：第一步：土壤取樣。取土樣用的工具和盛土樣的信封等在使用前都需要_(填“消毒”或“滅菌”)。第二步：樣品稀釋。通常分離不同種類的微生物要采用不同的稀釋度，原因是_。第三步：微生物的培養(yǎng)與觀察。將一定稀釋度的樣品接種在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上，并在適宜的條件下培養(yǎng)。分解尿素的微生物能在該培養(yǎng)基上生長繁殖，而_則不能生長繁殖。(注：實驗中所用的培養(yǎng)基經(jīng)檢測符合要求，且均在無菌條件下操作)(2)若對土壤懸液進行梯度稀釋時，未經(jīng)振蕩而直接取上層懸液進行梯度稀釋，用稀釋倍數(shù)為104的樣液涂布到平板上進行培養(yǎng)和計數(shù)，統(tǒng)計出的菌落數(shù)往往比正確操作統(tǒng)計出的菌落數(shù)_。(3)對土壤中分解尿素的微生物作進一步的鑒定成分KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O酚紅指示劑尿素蒸餾水培養(yǎng)基(含量)1.4 g2.1 g0.2 g0.01 g1.0 g1000mL若要對上述初步篩選出的分解尿素的微生物作進一步的鑒定，需在上表培養(yǎng)基配方中添加的物質(zhì)是_、_。若分離得到的是尿素分解菌，則培養(yǎng)基中pH升高使酚紅指示劑變?yōu)榧t色，pH升高的原因是_。(4)分解尿素的微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的作用是_?！敬鸢浮?1)滅菌土壤中各種生物的數(shù)量不同不能利用尿素的微生物(2)偏高(3)葡萄糖瓊脂尿素分解菌合成的脲酶將尿素分解成氨(合理敘述即可)(4)將有機物分解為無機物(將尿素分解為氨)【解析】(1)為了防止外來雜菌的污染，應(yīng)對取樣前的工具和信封都進行滅菌。在稀釋樣品時，分離不同種類的微生物要采用不同的稀釋度，原因是土壤中各種生物的數(shù)量不同，所以稀釋倍數(shù)不同，因為是以尿素為唯一氮源，所以在該培養(yǎng)基上不能利用尿素的微生物是不能生長的。(2)如果沒有振蕩取上層的菌液進行計數(shù)，因為下層是土壤，此時的細菌主要在上層菌液中，所以應(yīng)比正常的操作菌落數(shù)偏高。(3)該培養(yǎng)基中還沒有碳源，所以應(yīng)加入葡萄糖，要做鑒別應(yīng)在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，所以還應(yīng)加入瓊脂。因為加入的有酚紅指示劑，尿素分解菌合成的脲酶將尿素分解成氨，pH升高，酚紅指示劑變紅。(4)分解尿素的微生物在生態(tài)系統(tǒng)中是分解者，其作用是將有機物分解為無機物。4(2016山西高三考前質(zhì)檢，39)下圖為蘋果醋的制作流程：(1)過程常用的發(fā)酵菌是_，在蘋果酒的基礎(chǔ)上制作蘋果醋時，需要_(填“升高”或“降低”)溫度，同時還需要適當_。(2)該發(fā)酵菌種可以從食醋中分離獲得。若用平板劃線法分離該發(fā)酵菌，接種結(jié)束后，對接種環(huán)還要進行一次 _滅菌，是為了_。(3)對該發(fā)酵菌進行擴大培養(yǎng)時，將其接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，然后分為甲、乙兩組。甲組進行靜置培養(yǎng)，乙組進行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)_組培養(yǎng)的發(fā)酵菌生長速度快，原因是_、_?！敬鸢浮?1)醋酸(桿)菌升高通入無菌空氣(2)灼燒殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者(3)乙醋酸(桿)菌為需氧型細菌，振蕩可提高培養(yǎng)液的溶解氧含量振蕩可以使菌體與培養(yǎng)液成分充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率【解析】(1)過程要獲得蘋果原醋，則發(fā)酵菌為醋酸菌，在制作蘋果醋時，需要升高溫度，同時還需要適當通入無菌空氣。(2)若用平板劃線法分離該發(fā)酵菌，對接種環(huán)還要進行一次灼燒滅菌，為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者。(3)甲組進行靜置培養(yǎng)，乙組進行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果為乙組培養(yǎng)的發(fā)酵菌生長速度快，原因是醋酸菌為需氧型細菌，振蕩可提高培養(yǎng)液的溶解氧含量和對營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。5(2016寧夏銀川一中一模，39)農(nóng)村中泡菜的制作方法是：新鮮的蔬菜經(jīng)過整理、清潔后，放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中，然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”。密封后置于陰涼處，適宜環(huán)境溫度為2830 。有時制作的泡菜會“咸而不酸”或“酸而不咸”，據(jù)此分析，回答下列問題：(1)用白酒擦拭泡菜壇的目的是_。(2)若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是_。(3)制作過程中，需要加入鹽水，其中清水與鹽的比例應(yīng)為_，加入“陳泡菜水”的作用是_。(4)若要獲得優(yōu)良乳酸菌菌種，應(yīng)選用培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)基中應(yīng)含有_、_、水和無機鹽，同時需要在培養(yǎng)基中添加_。純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有_。培養(yǎng)時還需提供_條件?！敬鸢浮?1)消毒(2)鹽過多抑制了乳酸菌發(fā)酵(3)4：1提供乳酸菌菌種(4)碳源氮源維生素平板劃線法或稀釋涂布平板法無氧【解析】(1)泡菜的制作過程中，用白酒擦拭泡菜壇的目的是消毒。(2)泡菜的制作原理是利用乳酸菌的無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是加入的鹽過多，抑制了乳酸菌發(fā)酵，產(chǎn)生的乳酸過少。(3)制作過程中，需要加入鹽水，其中清水與鹽的比例應(yīng)為4：1，加入“陳泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌種。(4)乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，用選擇培養(yǎng)基獲得優(yōu)良乳酸菌菌種時，培養(yǎng)基中應(yīng)含有碳源、氮源、水和無機鹽，同時需要在培養(yǎng)基中添加維生素。純化菌種時，為了得到單菌落，常采用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種，培養(yǎng)時還需提供無氧條件。6(2016山東棗莊3月模擬，39)我國糧產(chǎn)區(qū)產(chǎn)生大量的作物秸稈，科技工作者研究出利用秸稈生產(chǎn)燃料酒精的技術(shù)，大致流程為(以玉米秸稈為例)：(1)玉米秸稈預(yù)處理后，應(yīng)該選用特定的酶進行水解，使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖。從以下哪些微生物中可以提取到上述的酶？()A釀制果醋的醋酸菌B生長在腐木上的霉菌C制作酸奶的乳酸菌D生產(chǎn)味精的谷氨酸棒狀桿菌(2)若要從土壤中分離生產(chǎn)這種酶的微生物，所需要的培養(yǎng)基為_(按功能分)，培養(yǎng)基中的碳源為_。(3)某同學對這種微生物培養(yǎng)液進行數(shù)量測定，在稀釋倍數(shù)為105對應(yīng)的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的活菌數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL)_。(4)用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)量要比測得的菌落數(shù)量多，原因是_。(5)上述流程圖中，發(fā)酵階段需要的菌種是_，生產(chǎn)酒精要控制的必要條件是_?！敬鸢浮?1)B (2)選擇培養(yǎng)基纖維素 (3)1.17107(4)當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落(5)酵母菌 無氧(密封、密閉)【解析】(1)玉米秸稈含有豐富的纖維素，要將纖維素分解為葡萄糖，需要纖維素酶。生長在腐木上的霉菌，可以分解木頭的纖維素，故可以提取到纖維素酶。(2)用選擇培養(yǎng)基可以分離分解纖維素的微生物。 該種微生物以纖維素為碳源。(3)23.4/0.21051.17107。(4)稀釋涂布平板法測得的數(shù)目比實際少，因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。(5)發(fā)酵產(chǎn)生酒精可以用酵母菌，酵母菌產(chǎn)酒的條件是無氧。7(2016安徽池州二模，39)請回答與微生物分離和培養(yǎng)有關(guān)的問題：(1)稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的正確操作步驟是_(填序號)。為減少誤差，一般要設(shè)置_或以上數(shù)目的平板。土壤取樣稱取10 g土壤加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中制備土壤提取液吸取0.1 mL溶液進行涂布平板依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度(2)無菌技術(shù)主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。其中對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是_；要求實驗操作應(yīng)在_進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。(3)下圖是某同學對萃取的胡蘿卜素樣品所做的鑒定實驗的結(jié)果。圖中實驗組是_，實驗得出的結(jié)論是_。【答案】(1)3個 (2)高壓蒸汽滅菌 酒精燈火焰旁(3)BC萃取樣品中不含胡蘿卜素【解析】(1)稀釋涂布平板法應(yīng)進行一系列的梯度稀釋然后再進行涂布，故正確的操作步驟是。為了減少誤差一般要統(tǒng)計至少3個平板，然后選擇菌落數(shù)在30300之間的平板進行計數(shù)。(2)對培養(yǎng)基進行滅菌最常用的是高壓蒸汽滅菌法，整個實驗操作要在酒精燈火焰旁進行，避免外來微生物的污染。(3)從圖中可以看出，A和D是標準對照，實驗組是B和C，B、C組雖然有色素帶，但沒有出現(xiàn)和標準對照一樣的色素帶，所以得出的結(jié)論是萃取樣品中不含胡蘿卜素。8(2016河北邯鄲一中二模，39)生物組織中存在多種有機物，不同有機物的提取和鑒定方法不盡相同。根據(jù)所學知識，回答下列問題：(1)植物芳香