WS-T227-2002臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程編寫(xiě)要求.pdf

C 5 0中 華 人 民 共 和 國(guó) 衛(wèi) 生 行 業(yè) 標(biāo) 準(zhǔn)WS / T 2 2 7 一 2 0 0 20 4 床檢驗(yàn)操作規(guī)程編寫(xiě)要求R e q u i r e m e n t f o r t h e t e c h n i c a l p r o c e d u r e ma n u a l i n c l i n i c a l l a b o r a t o r y2 0 0 2 一 0 4 一 2 0發(fā) 布2 0 0 2 一 0 7 一 0 1實(shí)施中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā) 布wS / T 2 2 7 -2 0 0 2前言 為了使臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程編寫(xiě)規(guī)范化， 確保檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行常規(guī)操作， 保證檢驗(yàn)質(zhì)量， 特制定本標(biāo)準(zhǔn)。 本標(biāo)準(zhǔn)從2 0 0 2 年 7 月 1日起實(shí)施。 本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部醫(yī)政司提出。 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位: 上海市臨床檢驗(yàn)中心。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人: 馮仁豐、 胡曉波。 本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心負(fù)責(zé)解釋中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)ir1h 床檢驗(yàn)操作規(guī)程編寫(xiě)要求Re q u i r e me n t f o r t h e t e c h n ic a l p r o c e d u r e ma n u a l i n c l i n i c a l la b o r a t o r yws / T 2 2 7 一 2 0 0 2范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了設(shè)計(jì)、 制定和使用臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程的基本要求。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于各級(jí)各類(lèi)醫(yī)療衛(wèi)生單位編寫(xiě)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程， 也適用于臨床檢驗(yàn)產(chǎn)品廠商編寫(xiě)產(chǎn)品使用方法說(shuō)明。2總則2 . 1 操作規(guī)程是檢測(cè)系統(tǒng)的組成部分， 是臨床檢驗(yàn)的技術(shù)檔案 是保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必須內(nèi)容。2 - 2 操作規(guī)程應(yīng)是指導(dǎo)檢驗(yàn)人員正確操作的依據(jù)。但操作規(guī)程不能用來(lái)彌補(bǔ)檢驗(yàn)方法設(shè)計(jì)上的缺陷。2 . 3 操作規(guī)程必須含有質(zhì)量管理內(nèi)容， 包括進(jìn)行檢驗(yàn)的說(shuō)明， 明確質(zhì)量控制和糾正作用系統(tǒng)等。 這些書(shū)面文件是臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程的必須組成部分。2 . 4 操作規(guī)程由主任或主管技術(shù)人員負(fù)責(zé)編寫(xiě)， 編寫(xiě)內(nèi)容含義必須明確( 無(wú)疑義) 、 完整。 要確保每個(gè)檢驗(yàn)人 員能理解 ， 并嚴(yán)格按操作規(guī)程 的精確說(shuō) 明進(jìn)行操作 。3操作規(guī)程的 內(nèi)容要求 每個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng) 目都必須具有明確而完整的操作規(guī)程資料以及精確的敘述。應(yīng)具備下列內(nèi)容:3 門(mén)實(shí)驗(yàn)原理和/ 或檢驗(yàn)?zāi)康? 概述) ; 可包括臨床應(yīng)用和/ 或?qū)嵱眯浴? . 2 使用的標(biāo)本種類(lèi)和收集方法、 病人準(zhǔn)備要求、 標(biāo)本容器的要求、 拒收標(biāo)本的規(guī)定、 標(biāo)本處理方法、 標(biāo)本儲(chǔ)存規(guī)定、 標(biāo)本外送規(guī)定等。13 使用的試劑、 校準(zhǔn)品、 控制品、 培養(yǎng)基以及其他所需物品。所有材料都須寫(xiě)明廠商名、 產(chǎn)品號(hào)、 包裝量、 配制要求、 使用和儲(chǔ)存要求等3 . 4 使用的儀器廠商名、 型號(hào)， 本項(xiàng)目?jī)x器使用具體要求和校準(zhǔn)程序I5 每步操作步驟， 直至報(bào)告結(jié)果。3 . 6 控制品使用水平和頻率， 允許限的糾正措施。3 . 7 計(jì)算方法。3 . 8 參考值范圍。I9 操作性能的概要。如: 精密度、 病人結(jié)果可報(bào)告范圍、 方法學(xué)比較等。3 . 1 0 對(duì)超出可報(bào)告范圍的結(jié)果的處理3 門(mén)1 對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果為病危報(bào)警值的處理3 . 1 2 方法局限性( 如干擾物和/ 或注意事項(xiàng)) 。3 門(mén)3 參考文獻(xiàn)3 . 1 4 其他必須內(nèi)容。中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部2 0 0 2 - 0 4 一 2 0 批準(zhǔn)2 0 0 2 - 0 7 - 0 1 實(shí)施 IWS / T 2 2 7 一 2 0 0 24規(guī)程式樣和 內(nèi)容 根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的大小和功能， 操作規(guī)程的格式也應(yīng)有不同。在小型( 單一) 實(shí)驗(yàn)室中， 有一本包括所有內(nèi)容的操作規(guī)程即可。 在大型綜合的、 多部門(mén)的實(shí)驗(yàn)室， 應(yīng)有不同專(zhuān)業(yè)和內(nèi)容的操作規(guī)程， 分放于各個(gè)專(zhuān)業(yè)室組。整套匯集的操作規(guī)程存放于科室負(fù)責(zé)人或相應(yīng)場(chǎng)所。4 - ， 操作規(guī)程手冊(cè)的式樣應(yīng)按實(shí)驗(yàn)室要求和結(jié)構(gòu)來(lái)確定。但都須包括質(zhì)量管理內(nèi)容， 以及匯集有關(guān)檢驗(yàn)項(xiàng) 目操作規(guī)程。 每個(gè)規(guī)程須包括第 3章中敘述的內(nèi)容。 規(guī)程手冊(cè)可設(shè)計(jì)成活頁(yè)本形式， 便于補(bǔ)充和修改。4 . 1 門(mén)每個(gè)項(xiàng) 目規(guī)程均應(yīng)從第I頁(yè)起 ， 自成一冊(cè)， 便于更換。4 . 1 . 2 盡可能使用圖表或表格形式， 便于查閱。4 . 1 . 3 使用編號(hào)系統(tǒng)， 便于查閱。4 - 1 - 4 可做一些查閱卡、 流程圖、 廠商產(chǎn)品索引等為規(guī)程附錄， 反映最新動(dòng)態(tài)4 門(mén). 5 鼓勵(lì)使用電腦編寫(xiě)規(guī)程， 簡(jiǎn)化編輯和修訂程序。4 . 2 規(guī)程的使用對(duì)象4 . 2 . 1 行政和業(yè)務(wù)主管人員依據(jù)規(guī)程具體要求， 進(jìn)行質(zhì)量管理。 規(guī)程也反映實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展檢驗(yàn)技術(shù)水平。4 . 2 _ 2 熟練檢驗(yàn)人員應(yīng)隨時(shí)對(duì)照操作規(guī)程， 檢查實(shí)際操作狀況， 保證檢驗(yàn)質(zhì)量。對(duì)出現(xiàn)的問(wèn)題及時(shí)糾正。在進(jìn)行不熟悉的項(xiàng)目檢驗(yàn)時(shí)， 按規(guī)程進(jìn)行。 實(shí)現(xiàn)無(wú)人指導(dǎo)完成不熟悉的檢驗(yàn)。4 . 2 . 3 新的檢驗(yàn)人員和進(jìn)修人員可從規(guī)程中學(xué)到詳細(xì)內(nèi)容， 并嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行實(shí)際操作。5 以產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)直接作為規(guī)程的要求5 . 1 廠商一般都提供了詳細(xì)的產(chǎn)品使用說(shuō)明。但是實(shí)驗(yàn)室只有確實(shí)完全按照廠商要求， 使用指定牌號(hào)和型號(hào)的儀器、 指定的試劑、 指定校準(zhǔn)品( 包括廠商和品種的一致) 以及指定具體每一步操作步驟， 而且定期對(duì)儀器做保養(yǎng)和校準(zhǔn)， 實(shí)驗(yàn)室才可直接采用廠商產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)作為自己的操作規(guī)程。5 . 2 實(shí)驗(yàn)室對(duì)廠商規(guī)程要求有任何變動(dòng)和修改的， 則產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)不能直接作為實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程。5 . 3 直接引用的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)必須是中文的使用說(shuō)明， 不可用外文說(shuō)明。 必須包括第3 章中敘述的內(nèi)容。6操作規(guī) 程的格 式要求 在實(shí)驗(yàn)室中各種類(lèi)型、 各個(gè)項(xiàng)目、 各個(gè)操作方法的規(guī)程應(yīng)確定統(tǒng)一格式。1 每個(gè)項(xiàng)目、 每個(gè)方法的操作規(guī)程的第 1 頁(yè)頁(yè)首， 要注明:1 . 1 操作規(guī)程項(xiàng)目名稱(chēng)。1 . 2 操作規(guī)程的單位及部門(mén)。1 . 3 文件編號(hào)。1 . 4 版本15 頁(yè)序和總頁(yè)數(shù)1 . 6 批準(zhǔn)實(shí)施 日 期。1了 規(guī)程有效期， 以及復(fù)審計(jì)劃。， . 8 規(guī)程分發(fā)部門(mén)和/ 或個(gè)人。19 規(guī)程編寫(xiě)者、 審批者， 以及保管者1 . 1 0規(guī)程修訂記錄。行U八kU行卜目n卜U幽U尸卜U戶(hù)匕戶(hù)0G在以后各頁(yè)的眉首均有操作規(guī)程字樣及文件編號(hào)， 并印有橫線。在每頁(yè)的右下腳印有頁(yè)序。在定期復(fù)審或發(fā)現(xiàn)問(wèn)題時(shí)， 需要作部分修改的或更新的， 應(yīng)注明新確認(rèn)的年月及版本。 并由主任或，L月，口嘆C曰主管簽名認(rèn)可。 2wS / T 2 2 7 一 2 0 0 27操作規(guī)程的修改7 . 1 在使用和復(fù)審中， 需要對(duì)規(guī)程作修改或更新時(shí)， 應(yīng)有充分的實(shí)驗(yàn)資料證明確有修改的必要， 并明確須修改的具體內(nèi)容。了 . 2 編寫(xiě)者完成修改后， 由實(shí)驗(yàn)室主任審核， 經(jīng)審核同意， 修改稿以新版本形式更換原有規(guī)程， 并通知各有關(guān)部門(mén)。7 . 3 實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)將原版本和新版本規(guī)程， 以及實(shí)驗(yàn)資料， 合并為規(guī)程修改文件， 另行保管備查。WS / T 2 2 7一 2 0 0 2 附錄A ( 標(biāo)準(zhǔn) 的附錄)檢驗(yàn)操作規(guī)程示例A 1 例 1 : 血清總膽固醇( T C) 測(cè)定A 1 . 1 第 1 頁(yè)頁(yè)首內(nèi)容 血清總膽固醇( TC ) 測(cè)定( 酶法， C H O D - P A P法) XX醫(yī)院檢驗(yàn)科 操作規(guī)程文件號(hào): C G XXXX 第 3版 共 XX頁(yè) 1 9 9 9 年 1 月 2 0日 起實(shí)施 本規(guī)程每 2 年復(fù)審一次 復(fù)審日期: XXXX年XX月XX日 復(fù)審人: XXX( 簽名) 規(guī)程編寫(xiě)者: XXX 審批者: XXX 批準(zhǔn)日期: 1 9 9 9 年 1 月1 9日 文件分發(fā)部門(mén)和/ 或個(gè)人: 醫(yī)務(wù)科; 保管者: XXX( 簽名) 院長(zhǎng)辦公室; 保管者: XXX( 簽名) 院檔案室; 保管者: XXX( 簽名) 檢驗(yàn)科; 主任: XXX( 簽名) 臨床化學(xué)檢驗(yàn)室: XXX( 簽名)A1 . 2 原理 血清中的膽固醇醋( C E ) 被膽固醇醋水解酶( C E H) 水解成游離膽固醇( C h o l ) ， 后者被膽固醇氧化酶( C H O D ) 氧化成 一 膽街烯酮， 并產(chǎn)生過(guò)氧化氫， 再經(jīng)過(guò)氧化物酶( P O D) 催化 4 - 氨基安替比林與酚( 三者合稱(chēng)P A P ) ， 生成紅色醒亞胺色素( T r i n d e r 反應(yīng)) 。醒亞胺的最大吸收在 5 0 0 n m左右， 吸光度與標(biāo)本中總膽固醇呈正比。反應(yīng)式如下 : 膽 固 醇 酷 + H 戶(hù)C E H 膽 固 醇 + 游 離 脂 肪 酸 膽 固 醇 斗 。 2 一 H o n 膽 幽 烯 酮 + H 2 0 , 2 H 必+ 4 - 氨 基 安 替 比 林 + 酚 三 里醒 亞 胺 + 4 H 刀A1 . 3 標(biāo)本采集與處理 對(duì)于血脂分析， 特別需要強(qiáng)調(diào)“ 分析前” 各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量管理A1 . 11 受檢者( 體檢對(duì)象或病人) 的準(zhǔn)備: 除總膽固醇不一定用空腹血外 ， 測(cè)定甘油三醋、 脂蛋白與載脂蛋白的病人必須空腹 1 2 h ， 不飲酒 2 4 h后采集血樣。對(duì)于體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有 2 周時(shí)間保持平時(shí)的飲食習(xí)慣， 近期內(nèi)體重穩(wěn)定， 無(wú)急性病、 外傷、 手術(shù)等意外情況。 妊娠后期各項(xiàng)血脂都會(huì)增高， 應(yīng)在產(chǎn)后或終止哺乳后 3 個(gè)月檢驗(yàn)才能反映其基本血脂水平。 注意有無(wú)應(yīng)用影響血脂的藥物， 如降血脂藥、 避孕藥、唆嗦類(lèi)利尿劑. R 受體阻滯劑、 免疫抑制劑、 某些降壓劑、 降糖藥、 胰島素及其他激素制劑等， 檢驗(yàn)以前應(yīng)根據(jù)所用藥物的特性停止用藥數(shù)天或數(shù)周， 否則應(yīng)記錄用藥情況。對(duì)體檢對(duì)象及做前瞻性觀察者， 還應(yīng)ws / T 2 2 7 一2 0 0 2 注意采血的季節(jié)， 因?yàn)檠接屑竟?jié)性變動(dòng)， 為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗(yàn)。應(yīng)囑體檢對(duì)象在 抽血前 2 4 h內(nèi)不作劇烈運(yùn)動(dòng)。 Al . 12 靜脈采血 除非是臥床的病人， 一般在采血時(shí)取坐位體位影響水分在血管內(nèi)外的分布， 因此 影響血脂水平。例如站立 5 min可使血脂濃度提高 5 0 o , 1 5 mi n提高 1 6 0 o ， 故在采血前至少應(yīng)靜坐 5 mi n 。一般從肘靜脈取血， 使用止血帶的時(shí)間不超過(guò) 1 m i n ， 穿刺成功后立即松開(kāi)止血帶。靜脈阻滯 5 mi n 可使甘油三醋增高1 0 0 o -1 5 0 5 A l . 13 抗凝劑: 我國(guó)多用血清作血脂檢驗(yàn) 如用血漿， 多主張 用E D T A N a z ( 1 m g / m 工 ) 抗凝。 抗凝血漿 中的總膽固醇和甘油三醋水平比血清中約低 3 0 o , E D T A用量越多 血漿水平偏低越明顯。但肝素抗凝 不影響血漿中水平 Al . 3 . 4 標(biāo)本處理: 血標(biāo)本應(yīng)盡快送實(shí)驗(yàn)室 室溫下放置3 0 min -4 5 mi n 后離心分離血清或血漿。 置潔 凈試管加蓋保存。在室溫中放置不超過(guò) 3 h , 4 C保存可穩(wěn)定 4天。置一7 0 C可長(zhǎng)期保存， 但不可反復(fù) 凍融 A l . 4 試劑 A l . 4 . 1 酶試劑: 本科使用xx公司/x產(chǎn)品號(hào)試劑盒， 為干粉試劑。臨用前用水復(fù)溶即可使用。每瓶 十粉用水x x ml復(fù)溶。復(fù)溶后試劑內(nèi)各主要成分如下: 磷酸鹽緩沖 液p H 7 . 7 0 . 4 m o l / I 假單胞菌膽固醇醋水解酶X8 0 0 U / 1 - 奴卡氏菌膽固醇氧化酶妻4 0 0 U/ L 辣根過(guò)氧化物酶-l 0 0 0 U/ I 膽酸鈉3 m m o l / 1 , 4 - 氨基安替比林。 . 5 mm o l / L 酚3 . 5 m m o l / L 聚氧乙烯表面活性劑3 g / L A l . 4 . 2 總膽固醇校準(zhǔn)血清: 也由xx公司提供， 產(chǎn)品號(hào)為xxo A l . 4 . 3 試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性: 未開(kāi)瓶的試劑于4 C保存， 可穩(wěn)定至有效期。復(fù)溶的試劑在 2 C 8 C 可穩(wěn)定 7天， 1 5 C-2 5 C 可穩(wěn)定 3 天。如在穩(wěn)定期內(nèi)試劑出現(xiàn)明顯的粉紅色， 棄去不用 A1 . 5 儀器 xx型號(hào)光電比色計(jì) ， 具 5 0 0 n m-5 2 0 n m濾光 片。 Al . 6 操作 標(biāo)本為及時(shí)分離的空腹血清， 以及肝素或E D T A抗凝血漿。 本法為終點(diǎn)法。 測(cè)定時(shí)標(biāo)本管與標(biāo)準(zhǔn)管 分別加人標(biāo)本與校準(zhǔn)血清各 1 0 p L , 酶試劑 1 . 0 0 m 工 J ， 混勻后在 3 7 C 放置 5 m i n ， 或 2 0 C-2 5 C 放置 1 0 m i n 后用比色計(jì)比色， 以試劑空白調(diào)零， 波長(zhǎng)5 0 0 n m或 5 2 0 n m, 顏色至少穩(wěn)定6 0 mi n ,A 1 . 7 計(jì)算x C(A 飛 )式中 C -測(cè)定血清總膽固醇濃度， mm o l / I ; A a r ;t 標(biāo)本管吸光度; A t ,標(biāo)準(zhǔn)管吸光度; C校準(zhǔn)血清中總膽固醇濃度， mm o l / I。A 1 . 8 操作性能A 1 . 8 門(mén)精密度: 批內(nèi) v1 . 5 %， 批間C v1 7 0 p mo l / L時(shí)有明顯負(fù)干擾。 抗壞血酸與甲基多巴血中濃度高于治療水平時(shí)也使結(jié)果偏低。 高甘油三醋血癥( 血清混濁) 在本法中( 血清與試劑量 1 1 0 0時(shí)) 一般無(wú)明顯影響。 注 1 本法為中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)推薦的總膽固醉測(cè)定常規(guī)方法( 見(jiàn)中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志 1 9 9 51 8 : 1 8 5 ) , 2 試劑中兩種酶膽固醇醋水解酶和膽固醇氧化酶的質(zhì)量十分重要。必須能有效地水解各種脂肪酸的膽固醉醋( 有 些微生物來(lái)源的醋酶不易水解花生四烯酸酷) ， 對(duì)膽固醇的氧化必須完全。選擇試劑盒時(shí)應(yīng)側(cè)試對(duì)血清標(biāo)本總 膽固醇的反應(yīng)速度， 好的試劑一般能在5m。內(nèi)( 有的只要 1 m i n -2 min ) 反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)。 反應(yīng)不能在1 0 m i n內(nèi) 完成的試劑不宜采用， 其原因可能是原酶質(zhì)量不好或酶用量太少， 后者可使高膽固醇結(jié)果偏低。本法所用試劑， 要求標(biāo)本與酶試劑用量的比例為 1哥 1 0 0 ， 使可報(bào)告范圍上限達(dá) 1 3 mmo l / L ， 過(guò)多地提高標(biāo)本比例， 會(huì)使側(cè)定上 限降低。如果標(biāo)木中總膽固醇濃度超過(guò)1 3 m mo l / 1 . . 可用生理鹽水稀釋后重新測(cè)定?，F(xiàn)在臨床很少要求做游離 膽固醇測(cè)定， 如需做游離膽固醇測(cè)定， 最簡(jiǎn)便的也是酶法， 即在上述總膽固醉試劑中省去酷水解酶。一般游離膽 固醇約占膽固醇的 3 0 環(huán)左右 3 總膽固醇測(cè)定要求標(biāo)準(zhǔn)化 與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)取得一致， 必須有準(zhǔn)確可靠的標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)( S RM ) 1 )酶法測(cè)定總膽固醇時(shí)， 血清中大部分膽固醇是酷化的， 而且血清基體對(duì)酶反應(yīng)有明顯影響 不可使用純膽固 醇溶液為標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)際上由美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院( N 1 S T ) 提供代號(hào)為S R M 9 0 9的人參考血清， 作為總膽 固醉測(cè)定的一級(jí)標(biāo)準(zhǔn); 我國(guó)也已建立了國(guó)家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)G B W 0 9 1 3 8 人血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)” 。常規(guī)使用的試 劑盒必須具有可追溯于以上參考血清的校準(zhǔn)血清， 方能保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠 2 )不可使用總膽固醇的定值控制品作標(biāo)準(zhǔn). 3 )本法使用的校準(zhǔn)血清為液態(tài)， 用前必須充分混勻。A 1 . 9 參考值 人群血脂水平主要決定于生活因素， 特別是飲食營(yíng)養(yǎng)， 所以各地區(qū)調(diào)查所得參考值高低不一， 應(yīng)根據(jù)冠心病流行病學(xué)研究及臨床經(jīng)驗(yàn)統(tǒng)一制定高膽固醇劃分標(biāo)準(zhǔn)。歐美國(guó)家制定的標(biāo)準(zhǔn)大致相同， 4 0歲以上人群總膽固醇水平高低的劃分大致可定為: 合適水平5 . 1 7 m m o l / L ( 2 0 0 m g / d l ) ; 邊緣水平5 . 1 7 mmo l / I 一6 . 4 6 m mo l / 1 , ( 2 0 1 mg / d l - - 2 1 9 mg / d l ) ; 高膽固醇血癥妻6 . 4 7 m mo l / L( )2 2 0 m g / d i),Al . 1 0 臨床意義 影響總膽固醇水平的因素有:A1 . 1 0 . 1 年齡與性別?？偰懝檀妓酵S年齡上升， 但到7 0 歲或 8 0 歲后有所下降， 中青年期女性低干男性， 5 0 歲以后女性高于男性;Al . 1 0 . 2 長(zhǎng)期高膽固醇、 高飽合脂肪酸和高熱量飲食可使總膽固醇增高;Al . 1 0 . 3 遺傳因素;Al . 1 0 - 4 其他。如缺少運(yùn)動(dòng)、 腦力勞動(dòng)、 精神緊張等可使總膽固醇升高。 高膽固醇血癥是冠心病的主要危險(xiǎn)因素之一。病理狀態(tài)下高膽固醇有原發(fā)與繼發(fā)的兩類(lèi)。原發(fā)的如家屬性高膽固醇血癥( 低密度脂蛋白受體缺陷) 、 家屬性 a p o - B缺陷癥、 多源性( p o l y g e n i c ) 高總膽固醇、 混合性高脂蛋白血癥。繼發(fā)的見(jiàn)于腎病綜合征、 甲狀腺機(jī)能減退、 糖尿病、 妊娠等。 低總膽固醇血癥也有原發(fā)的 與繼發(fā)的， 前者如家屬性的無(wú)R 或低脂蛋白血癥; 后者如甲 亢、 營(yíng)養(yǎng)不良、 慢性消耗性疾病等。低總膽固醇者容易發(fā)生腦出血， 也可能易患癌癥( 未證實(shí)) 。肝臟是膽固醇及卵磷脂膽固醇酞基轉(zhuǎn)移酶( I , C A T) 合成的器官， 嚴(yán)重肝病病人血清總膽固醇不一定很低， 但由于血清卵磷脂膽固醇酞基轉(zhuǎn)移酶活力低下， 血清膽固醇醋占總膽固醇的比例可低達(dá) 5 0 %以下。wS / T 2 2 7 一 2 0 0 21 1參考文獻(xiàn)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司編 . 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程( 第二版) . 南京: 東南大學(xué)出版社， 1 9 9 7 .A1268A 2 例 2 : C反應(yīng)蛋白測(cè)定 A2 . 1 第 1頁(yè)頁(yè)首內(nèi)容 C反應(yīng)蛋白測(cè)定( 散射比濁法) xx 醫(yī)院檢驗(yàn)科 操作規(guī)程文件號(hào): C Gxxxx 第 1版 共 xx頁(yè) 2 0 0 0 年 9 月 1 6日起實(shí)施 本規(guī)程每 2 年復(fù)審一次 復(fù)審日期: XXXX年XX月XX日 復(fù)審人: XXX( 簽名) 規(guī)程編寫(xiě)者: XXX, xxx 審批者: XXX 批準(zhǔn)日期 2 0 0 0年9月 1 0日 文件分發(fā)部門(mén)和/ 或個(gè)人: 醫(yī)務(wù)科: 保管者: XXX( 簽名) 院長(zhǎng)辦公室; 保管者: XXX( 簽名) 院檔案室; 保管者: XXX( 簽名) 檢驗(yàn)科; 主任 XXX( 簽名) 免疫檢驗(yàn)室: XXX( 簽名) A2 . 2原理 用抗人C反應(yīng)蛋白 抗體和 樣品中C 反應(yīng)蛋白 作用， 形成抗原 一 抗體復(fù) 合物使光散射增加。 檢測(cè)散射 光變化速率峰值反映樣品中C反應(yīng)蛋白量。 本檢驗(yàn)科使用xx公司的xx型號(hào)特定蛋白測(cè)定儀及其公 司提供的配套試劑、 校準(zhǔn)品等進(jìn)行C反應(yīng)蛋白測(cè)定。 A 2 . 3 標(biāo)本要求 A 2 . 11 使用新鮮血清， 不使用血漿。 A 2 . 3 . 2 在采集血液后的2h內(nèi)分離血清。并置于具塞試管中。 A 2 . 3 . 3 8h內(nèi)不及時(shí)測(cè)定的血清可存放于 2 C : -S C 冰箱保存。3天后測(cè)定的血清置-1 5 C 一2 0 C，冰凍保存但冰凍血清只能做一次復(fù)融。反復(fù)凍融會(huì)使測(cè)定結(jié)果下降。 A 2 . 3 - 4 嚴(yán)重溶血或脂血的標(biāo)本不能作測(cè)定。 A 2 . 4 試劑 A 2 . 4 . 1 每個(gè)試劑均購(gòu)自XX公司。 1 ) C反應(yīng)蛋白抗體( 公司試劑盒代號(hào)P / N X X) 每個(gè)抗體試劑瓶?jī)?nèi)含已處理過(guò)的山羊抗血清 5 . 0 mL, 疊氮鈉為。 . 1 %( W/ W) 2 ) X X系統(tǒng)專(zhuān)用稀釋液( 公司試劑盒代號(hào)P / N XX) o 3 ) C反應(yīng)蛋白校準(zhǔn)品( 公司試劑盒代號(hào) P / N X X ) , 4 ) 緩沖液( 代號(hào)P / N XXX) e 5 ) 至少用 2 個(gè)水平的控制品。 A2 . 4 . 2 試劑準(zhǔn)備WS / T 2 2 7 一2 0 0 2 從冰箱中取出試劑， 立即可用。在上機(jī)前， 須將緩沖液及稀釋液顛倒徹底混勻。A 2 . 4 . 3 試劑性能可接受性 按測(cè)定項(xiàng)目資料手冊(cè)中質(zhì)量控制章節(jié)所規(guī)定內(nèi)容進(jìn)行質(zhì)量控制。結(jié)果必須在實(shí)驗(yàn)室規(guī)定的可接受范圍內(nèi)。A 2 . 4 . 4 超過(guò)失效期的試劑不可使用。A 2 . 5 儀器和校準(zhǔn)A 2 . 5 . 1 使用xx公司的xx型號(hào)特定蛋白分析儀。A 2 . 5 . 2 將校準(zhǔn)品在室溫中平衡后， 按儀器要求上機(jī)校準(zhǔn)A2 . 6 操作步驟A 2 . 6 . 1 校準(zhǔn)步驟 1 ) 在儀器的主顯示菜單上按 F 5 鍵做系統(tǒng)設(shè)置。按 F l 鍵做項(xiàng)目設(shè)置， 在顯示信息中確定抗體盤(pán)上本項(xiàng)目位置。按仁 F 1 鍵修正盤(pán)設(shè)置， 回到主顯示菜單。 2 ) 按仁 F 2 鍵進(jìn)人校準(zhǔn)狀態(tài)， 選擇相應(yīng)項(xiàng) 目。按 F 1 鍵要儀器閱讀抗體卡資料， 并插人C反應(yīng)蛋白抗體卡。 按 F 2 口 鍵進(jìn)人校準(zhǔn)品盤(pán)設(shè)定， 確認(rèn)校準(zhǔn)品所在位置。按 F 2 鍵要儀器閱讀校準(zhǔn)品卡， 并插人相應(yīng)校準(zhǔn)品卡。閱讀后， 按 F 1 鍵。 3 ) 將 C反應(yīng)蛋白校準(zhǔn)品2 0 0 K L加于樣品盤(pán)的指定位置， 另外將校準(zhǔn)品 5 約 4 0 0 p L也加于相應(yīng)位置， 按開(kāi)始鍵， 啟動(dòng)校準(zhǔn)。完成校準(zhǔn)后， 按 F 4 鍵確認(rèn)A 2 . 6 - 2 樣品操作步驟 1 ) 在主顯示菜單上按匡1 鍵進(jìn)人樣品側(cè)定程序 2 ) 在各種樣品杯確認(rèn)后， 若只做C反應(yīng)蛋白測(cè)定。放置測(cè)定樣品或控制品2 0 0川 置于樣品盤(pán)內(nèi)。若同時(shí)做類(lèi)風(fēng)濕因子， 抗“ O ， 則需樣品4 0 0 IA L 。這些樣品足夠做雙份測(cè)定。 3 ) 若做樣品 預(yù)稀釋?zhuān)?用緩沖液對(duì)樣品做1 ， 6 稀釋后， 將稀釋樣品2 5 0 k L 置于 樣品 盤(pán)內(nèi)。 注: 請(qǐng)參見(jiàn)xx型儀器操作手冊(cè)， 了解使用原始管和微量管)A 2 . 了 質(zhì)量控制 每批測(cè)定都使用xx公司控制品做質(zhì)量控制。 請(qǐng)參見(jiàn)xx型系統(tǒng)項(xiàng)目手冊(cè)附錄本規(guī)程要求， 每月天間C V不超過(guò) 4 %.A 2 . 8 計(jì)算 系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)地計(jì)算出結(jié)果。A2 . 9 參考值 xx公司C R P測(cè)定以I F C C推薦的歐洲共同體參考局的 C R M 4 7 0 特定蛋白