DB51T1205-2011棉花黃萎病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程.doc

59.060.10B 16DB51四川省地方標(biāo)準(zhǔn)DB 51/T 12052011棉花黃萎病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程2011 - 01 - 25發(fā)布2011 - 03 - 01實(shí)施四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB51/T 12052011目次前言II1范圍12規(guī)范性引用文件13術(shù)語(yǔ)和定義14供試菌種制備15田間抗性鑒定方法26調(diào)查及計(jì)算方法27抗病性評(píng)價(jià)3附錄A（資料性附錄）病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)計(jì)算公式4前言本標(biāo)準(zhǔn)由四川省農(nóng)業(yè)廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：四川省農(nóng)科院經(jīng)作所、四川省農(nóng)業(yè)廳本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：曾華蘭、劉宇、葉鵬盛、何煉、劉朝輝、韋樹(shù)谷4棉花黃萎病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了轉(zhuǎn)基因棉花、雜交棉花和常規(guī)棉花黃萎病抗性鑒定方法和抗病性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于棉花育種、棉花生產(chǎn)和植保單位對(duì)轉(zhuǎn)基因棉花、雜交棉花和常規(guī)棉花黃萎病抗性鑒定和抗病評(píng)價(jià)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于四川省棉區(qū)。2 規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 1103 棉花 細(xì)絨棉GB 4407.1 經(jīng)濟(jì)作物種子 纖維類(lèi)DB51/336-2003 無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品（或原料）產(chǎn)地環(huán)境條件DB51/337-2003 無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥使用準(zhǔn)則DB51/338-2003 無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品肥料使用準(zhǔn)則3 術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1 感病對(duì)照品種 the sensitive standard variety感病對(duì)照品種為生產(chǎn)上常年黃萎病病情指數(shù)達(dá)到50左右的品種。3.2 校正系數(shù)(K) correction factor(K)校正系數(shù)（K）為50除以鑒定試驗(yàn)中感病對(duì)照品種的實(shí)際病情指數(shù)。在實(shí)際中K值在0.751.25時(shí)，鑒定結(jié)果方為有效。3.3 相對(duì)病情指數(shù) relative disease index相對(duì)病情指數(shù)為供試品種的實(shí)際病情指數(shù)與校正系數(shù)（K）的乘積。4 供試菌種制備供試菌種為試驗(yàn)前一年從田間采集的棉花黃萎病病株分離純化培養(yǎng)獲得的黃萎病菌種。用PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)斜面菌種，接種在改良的米飯培養(yǎng)基（取大米3g、蔗糖5g，裝入500ml三角瓶中，加水200ml，于15磅滅菌30min，自然冷卻至室溫即成）中，于2528下進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)7d后，按1:10的比例接種在滅菌的棉籽上，置2528培養(yǎng)15d后，在室內(nèi)自然晾干即成棉籽載菌體。在接菌前，將棉籽載菌體用水洗下棉花黃萎病菌孢子，用消毒的雙層紗布過(guò)濾，在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)，配制成孢子含量達(dá)到2107 spores/g的孢子懸浮液作田間接種用。5 田間抗性鑒定方法5.1 鑒定田塊選擇及田間管理5.1.1 土壤條件選擇土壤耕層深厚，疏松肥沃，有機(jī)質(zhì)含量豐富，中性或酸性的土壤。土壤環(huán)境質(zhì)量應(yīng)符合DB51/336-2003的要求。5.1.2 灌溉條件鑒定田塊有水源保證，排灌設(shè)施健全，灌溉水符合DB51/336-2003的要求。5.1.3 空氣質(zhì)量空氣環(huán)境質(zhì)量應(yīng)符合DB51/336-2003的要求。5.1.4 田間管理田間施肥應(yīng)符合DB51/338-2003 的要求。本條文沒(méi)有說(shuō)明的栽培技術(shù)，仍按常規(guī)技術(shù)措施實(shí)施。5.2 抗性鑒定方法5.2.1 接菌方法采用傷根接菌法。5.2.2 接菌時(shí)間和接菌量棉花黃萎病抗性鑒定在棉苗移栽時(shí)，利用自然傷根接菌。在棉苗移栽時(shí)，按每株10ml的量灌根接種棉黃萎病菌孢子懸浮液。接菌后覆土蓋膜，保持田間濕度。5.2.3 田間設(shè)計(jì)每品種在田間隨機(jī)排列，每重復(fù)種植25株以上，3次重復(fù)。鑒定田塊四周設(shè)保護(hù)行。棉花苗期和成株期不防治病害，可施用殺蟲(chóng)劑、殺螨劑防治棉蚜、棉鈴蟲(chóng)、棉葉螨等害蟲(chóng)，施藥應(yīng)符合DB51/337-2003的要求。6 調(diào)查及計(jì)算方法在棉花蕾期和花鈴期觀察記載發(fā)病情況，當(dāng)感病對(duì)照的病情指數(shù)達(dá)到50左右時(shí)，對(duì)全部棉株進(jìn)行病情調(diào)查，記載各棉株的發(fā)病程度。發(fā)病程度的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)附錄A1。根據(jù)各品種棉株的發(fā)病程度級(jí)別，計(jì)算病情指數(shù)、相對(duì)病情指數(shù)。計(jì)算方法見(jiàn)附錄A2。7 抗病性評(píng)價(jià)根據(jù)各品種的相對(duì)病情指數(shù)，按照表1標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)各品種的抗病性。表1 棉花枯萎病抗性鑒定評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)抗性型病指（X）范圍免疫（I）X =0.00高抗（HR）0.00X10.00抗（R）10.00X20.00中抗（MR）20.00X35.00感（S）35.00X50.00高感（HS）X50.00AA附錄A （資料性附錄）病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)計(jì)算公式A.1 棉株發(fā)病程度的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)棉株的發(fā)病程度，分為0、1、2、3、4級(jí)共5個(gè)級(jí)別，其分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下：0級(jí)：健株，葉片無(wú)病狀；1級(jí)：有25% 及以下的葉片表現(xiàn)癥狀，即葉片出現(xiàn)葉肉變黃或呈現(xiàn)不規(guī)則形的黃色病斑；2級(jí)：26%5O%的葉片表現(xiàn)病狀，病斑顏色大部分變?yōu)辄S色或黃褐色，葉片邊緣略有卷枯現(xiàn)象；3級(jí)：51%75%的葉片表現(xiàn)病狀，少數(shù)病葉凋落；4級(jí)：76%及以上的葉片表現(xiàn)病狀，多為褐色掌狀枯斑，嚴(yán)重時(shí)葉片大量脫落，甚至棉株枯死。A.2 病情指數(shù)、校正系數(shù)、相對(duì)病情指數(shù)