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文檔簡介
高中生物實驗,2006年3月,考試大綱中有關(guān)信息,實驗考試能力要求 理解所學實驗、實習的內(nèi)容,包括實驗目的、原理、方法和操作步驟,掌握相關(guān)的操作技能;具備驗證相關(guān)生物學事實的能力,并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析和處理;能對一些生物學問題進行初步的探究性研究。,考試大綱中有關(guān)信息,(1)生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定 (2)高倍顯微鏡的使用和觀察葉綠體 (3)細胞質(zhì)流動的觀察 (4)觀察植物細胞的有絲分裂 (5)比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率,考試大綱中有關(guān)信息,(6)探索淀粉酶對淀粉和蔗糖的作用 (7)溫度對酶活性的影響 (8)葉綠體中色素的提取和分離 (9)觀察植物細胞的質(zhì)壁分離與復原 (10)植物向性運動的實驗設計和觀察 (11)設計實驗,觀察生長素或生長素類似物對植物生長發(fā)育的影響,考試大綱中有關(guān)信息,(12)DNA的粗提取與鑒定 (13)調(diào)查人群中的遺傳病 (14)種群密度的取樣調(diào)查 (15)設計并制作小生態(tài)瓶,觀察生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性 (16)調(diào)查環(huán)境污染對生物的影響 (17)觀察SO2對植物的影響,考點49-1觀察類實驗,用高倍顯微鏡觀察葉綠體 觀察細胞質(zhì)的流動 觀察植物細胞的有絲分裂 觀察植物細胞的質(zhì)壁分離與復原,實驗一 高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動,一、實驗原理: 高等綠色植物的葉綠體存在于細胞質(zhì)基質(zhì)中。葉綠體一般是綠色的、扁平的橢球形或球形,可以用高倍顯微鏡觀察它的形態(tài)和分布。,活細胞中的細胞質(zhì)處于不斷流動狀態(tài),葉綠體在細胞中的運動是細胞質(zhì)流動的重要標志,實驗二 高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動,深入原理 1、葉綠體主要在葉子和幼莖的皮層。 2、光照強度會影響葉綠體在細胞內(nèi)的排列方向和分布位置。(適應性) 在弱光下,葉綠體橢球形的正面面向光照可以接受更多的光;而在強光下,葉綠體的橢球形的側(cè)面朝向光照,以減小強光對葉綠體的傷害;在暗處葉綠體呈無規(guī)律排列。 3、不同種類的植物,葉綠體的形態(tài)、大小及每個細胞中數(shù)量的多少有很大差別 。(多樣性),實驗二 高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動,二、實驗材料選用: 蘚類的葉、 君子蘭葉、 黑藻葉、 菠菜葉、 水綿、 天門冬的葉狀枝,理想材料:黑藻 取材部位:幼嫩的小葉,實驗二 高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動,沉水草本。莖分枝,長達2米。葉48輪生,質(zhì)薄,條形或條狀矩圓形,長820毫米,寬12毫米,具1脈。邊緣有細刺狀鋸齒,稀全緣,無柄 。 生態(tài)習性和地理分布: 常見于水田、池塘或溪流等淡水中,有時甚茂密,成為優(yōu)勢種;匐枝的頂芽肥大,越冬繁道,斷體也能繁殖。在我國廣布各地。,實驗二 高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動,深入原理 1、促進細胞內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)運,促進細胞器之間的聯(lián)系 2、細胞質(zhì)流動是一種消耗能量的生命現(xiàn)象 3、細胞質(zhì)的流動會受到一定的外界條件的影響 4、提高細胞質(zhì)流動性的方法:進行光照;升高水溫;切傷一小部分葉片。,觀察細胞質(zhì)的流動,注意事項 1、黑藻事先應放在光照充足、水溫較高條件下培養(yǎng)34小時。 2、選取幼嫩小葉。 3、選擇靠近葉脈或接近葉片基部部位觀察。 4、臨時裝片內(nèi)的材料應始終保持有水狀態(tài) 。,廻旋式,環(huán)流式,問題討論: 1、葉綠體的形態(tài)、分布和運動與它的功能有何關(guān)系? 2、影響細胞質(zhì)流動的內(nèi)因和外因分別是什么?由此如何處理實驗材料有利于更好地觀察? 3、細胞質(zhì)流動對于活細胞完成生命活動有何重要意義?,實驗2-觀察植物細胞的有絲分裂,、觀察有絲分裂,視野中處于什么時期的細胞最多?為什么? 實驗中主要的幾個步驟是什么? 解離的目的是什么? 為什么先漂洗再染色?順序不能顛倒? 染色所用的試劑是什么? 制片的步驟中應注意什么?,實驗3觀察植物的質(zhì)壁分離與復原,實驗3觀察植物的質(zhì)壁分離與復原,問題討論: 1、植物細胞發(fā)生質(zhì)壁分離的內(nèi)因與外因分別是什么? 2、將紫色洋蔥表皮細胞浸入與細胞液等滲的蔗糖溶液中會出現(xiàn)什么現(xiàn)象? 3、用高濃度的硝酸鉀溶液代替蔗糖溶液進行實驗會出現(xiàn)什么現(xiàn)象? 4、質(zhì)壁分離時間長短的控制對實驗結(jié)果有什么影響?,實驗3觀察植物的質(zhì)壁分離與復原,例題解析:,1、洋蔥是生物學實驗的常用材料之一,右圖 是經(jīng)一段時間培養(yǎng)后的洋蔥示意圖,請回答 下列問題: (1)若利用此洋蔥觀察植物細胞的有絲分裂, 則取材部位應是_,該部位用肉眼 觀察呈_色。實驗中用_和_分別作為解離液和染色液,當你用顯微鏡觀察時,發(fā)現(xiàn)大部分細胞處于細胞分裂的間期,原因是_。 (2)若要驗證植物細胞吸水原理,則最好的取材部位是_,請在右側(cè)空白處畫出你在顯微鏡下觀察到的細胞失水后的狀態(tài)(畫一個細胞)。 (3)若要嘗試利用此洋蔥進行葉綠體色素的提取和分離實驗,你將用到的試劑分別是_。,例題解析: (上海高考試題),B,2、在生物學實驗中,關(guān)于引流法的敘述正確的是 A、 在蓋玻片一側(cè)滴加試劑,然后將裝片傾斜 B、引流目的是讓試劑滲到蓋玻片下 C、 原性糖鑒定實驗中需要用引流法 D、引流法可防止裝片中產(chǎn)生氣泡,顯微鏡觀察實驗 :,取材解離漂洗染色制片,取材、直接制片,取材、直接制片,取材、制片,低倍鏡的使用、低倍鏡到高倍鏡的轉(zhuǎn)換、熟練使用高倍鏡、熟練進行對光、對焦、調(diào)節(jié)視野光線的強弱等一系列操作,正確選擇觀察的參照,明確觀察目標,尋找、識別觀察目標,觀察、對比,實驗4觀察SO2對植物的影響,1 實驗原理 SO2可以破壞葉綠體,使葉片變黃、枯焦,甚至死亡。根據(jù)亞硫酸鈉與稀硫酸反應生成SO2的原理,可以制備SO2 ,然后對相同長勢的植物進行處理,觀察其對植物的影響。,深入原理,測鐘罩的容積注水法 測放入植物后鐘罩的容積溢水法(將鐘罩裝滿水,雙手將花盆向水里放,當花盆平罩口時,在測溢剩的水。) 主要破壞植物的葉綠體,同時使葉肉細胞脫水而干枯,植物葉片變黃褐色或土黃色等。,考點49-2 驗證性實驗,生物組織中還原糖-脂肪-蛋白質(zhì)的鑒定 葉綠體中色素的提取和分離 DNA的粗提取與鑒定 學習微生物培養(yǎng)的基本技術(shù),實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,一、實驗原理: 、可溶性還原糖斐林試劑 磚紅色沉淀 、脂肪蘇丹III 橘黃色 脂肪蘇丹IV 紅色 3、蛋白質(zhì)雙縮脲試劑 紫色反應,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,1.可溶性還原糖的鑒定原理: 生物組織中常見的可溶性還原糖有葡萄糖、果糖、麥芽糖。這三種糖分子中都含有游離的具有還原性的半縮醛羥基,因此叫還原性糖,而蔗糖的分子中沒有,因此叫非還原性糖。 斐林試劑(淡藍色的Cu(OH) 2)與可溶性還原糖在水浴加熱的條件下,生成磚紅色的Cu2O沉淀。,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,2.脂肪的鑒定原理: 當蘇丹染料在脂肪類物質(zhì)中的溶解度大于在其它溶劑(如酒精、丙酮)中的溶解度時,蘇丹染料便大量進入脂肪類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)內(nèi),在脂滴中溶解、積累,并吸附在脂肪顆粒結(jié)構(gòu)上,呈現(xiàn)出橘黃色或紅色。蘇丹與脂肪的親和力大于蘇丹,因此染色時間短。,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,3.蛋白質(zhì)的鑒定原理: 在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NCONHCONH2)能與Cu2作用,可形成紫色或紫紅色的絡合物,這一反應稱雙縮脲反應。凡在本身結(jié)構(gòu)中具有雙縮脲基的化合物,都能進行雙縮脲反應,這是特定的顏色反應。蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵(兩個相鄰的肽鍵與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似),因此又稱為肽鍵反應。,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,二、實驗材料選用: 1、可溶性還原糖 含糖量較高,顏色較淺或近于白色的植物組織,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,二、實驗材料選用: 2、脂肪的鑒定 富含脂肪(植物油)的種子 如花生、核桃、蓖麻等的種子 花生干種子,在實驗前需要浸泡34h。浸泡時間過長,則組織太軟,影響切片效果。,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,二、實驗材料選用: 3、蛋白質(zhì)的鑒定 (1)植物組織樣液:黃豆種子(浸泡12天)或用豆?jié){ (2) 動物組織樣液:雞蛋清 蛋清:水1:10 稀釋,攪拌均勻后, 用67層紗布過濾。,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,三、試劑 : 1、斐林試劑 A液 質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液 B液 質(zhì)量濃度為0.05g/ mL的CuSO4溶液 2、雙縮脲試劑 A液 質(zhì)量濃度0.1g/mL的NaOH溶液 B液 質(zhì)量濃度0.01g/mL的CuSO4溶液 3、蘇丹III 0.1g蘇丹III干粉,溶于100mL體積分數(shù)為95%的酒精中,待全部溶解后再使用。,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,四、 注意事項: 1、合理安排 ,注意安全 2、蘋果組織液必須臨時制備,保存時間不能過長 3、雙縮脲試劑B(CuSO4)不能多加,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,實驗一生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定,四、討論與探究: 1、你有沒有簡便、直觀的方法證明花生種子中含有脂肪組織? 2、在做糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液? 3、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同? 4、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加34滴而不能過量?,例題解析: (上海高考試題),1、鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,不可能需要用到的化學試劑是: A.斐林試劑 B.蘇丹染液 C.雙縮脲試劑 D.二苯胺,(2005廣東生物14)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機物的鑒定實驗中,以下操作錯誤的是 A、可溶性還原糖的鑒定,可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀 B、只有脂肪的鑒定需要使用顯微鏡 C、用雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)不需要加熱 D、使用斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)配現(xiàn)用,實驗二葉綠體中色素的提取和分離實驗,問題討論: 1、色素提取和分離實驗中對材料的處理是怎樣的?分別有什么意義? 2、色素提取原理怎樣?色素分離方法是什么? 3、實驗結(jié)果是怎樣的?,(03江蘇33)分別在A、B、C三個研缽中加2克剪碎的新鮮菠菜綠葉,并按下表所示添加試劑,經(jīng)研磨、過濾得到三種不同顏色的溶液,即:深綠色、黃綠色(或褐色)、幾乎無色。,例題解析:,:“+”表示加;“”表示不加。試回答: (1)A處理得到的溶液顏色是 ,原因 。 (2)B處理得到的溶液顏色是 ,原因是 。 (3)C處理得到的溶液顏色是 ,原因是 。,實驗三DNA的粗提取與鑒定,1 三次過濾,2 兩次沉淀析出,實驗三DNA的粗提取與鑒定,3 兩次加蒸餾水,實驗三DNA的粗提取與鑒定,4 DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線,實驗三DNA的粗提取與鑒定,溶解度,鑒定DNA時,所使用的溶解DNA的NaCl溶液不再是2mol/L而是0.015mol/L ,主要是避免過多的NaCl影響二苯胺與DNA的反應。 鑒定所用的試劑是二苯胺或甲基綠。而且須加熱。,實驗三DNA的粗提取與鑒定,某些物質(zhì)的鑒定 :,斐林試劑,雙縮脲試劑,蘇丹、蘇丹,二苯胺,先混勻再加入、水浴加熱,先加入A液,再加入B液,染色,混勻水浴加熱,磚紅色沉淀,紫色物質(zhì),橘黃色、紅色,藍色,溶解度原理,丙酮、層析液,色素及色素帶,雜質(zhì)較少的DNA,不同濃度的NaCl溶液、冷酒精,考點49-3 探究性實驗,比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率 探索淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用 探索溫度對酶活性的影響 植物向光性的實驗設計和觀察,實驗一 比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率,一、實驗原理 1、新鮮的肝臟中含有過氧化氫酶,F(xiàn)e3+是一種無機催化劑,它們都可以催化過氧化氫分解成水和氧。 2、分別用一定數(shù)量的過氧化氫酶和Fe3+催化過氧化氫分解成水和氧,可以比較兩者的催化效率。 3、酶作為生物催化劑,其催化效率比無機催化劑的效率要高出1071013倍,體現(xiàn)其高效性。 4、經(jīng)計算,用質(zhì)量分數(shù)為3.5的氯化鐵溶液和質(zhì)量分數(shù)為20的肝臟研磨液做實驗,每滴氯化鐵溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。,實驗一 比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率,二、實驗材料選用 制備質(zhì)量分數(shù)為20肝臟研磨液 : 新鮮的豬肝 20g 水100mL,研磨 改進: 將稱量好的新鮮肝臟碎塊和水放入薄厚、大小適宜的塑料袋中,一手捏住封口,另一手的擠壓(手研)被包裹的肝臟碎塊,直至研磨成勻漿后,用大頭針在塑料膜上扎上許多小孔,將勻漿從小孔擠出來,即可用于實驗。(也可以將濾液再過濾一次),實驗一 比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率,三、注意事項 1、豬肝或其它動物肝臟一定要新鮮 2、為增加對照效果,可適當降低氯化鐵溶液濃度 3、最好使用20200mm的大試管 4、可再增加一組對照: 把肝臟研磨液煮沸后進行對照實驗,實驗二 探索淀粉酶對淀粉和蔗糖水解的作用,一、實驗原理 1、淀粉和蔗糖都是非還原糖 葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原糖 2、淀粉酶能催化淀粉水解,不能催化蔗糖水解 3、斐林試劑能鑒定溶液中有無還原糖。,實驗二 探索淀粉酶對淀粉和蔗糖水解的作用,深入原理 在正常條件下,萌發(fā)的種子胚內(nèi)產(chǎn)生赤霉素,它刺激了糊粉層產(chǎn)生淀粉酶,促使淀粉水解,供胚的生長發(fā)育所需。在這種系統(tǒng)里,經(jīng)過赤霉素處理以后,糊粉層細胞的RNA和蛋白質(zhì)合成的速度增加了一倍,而合成的蛋白質(zhì)差不多有一半是淀粉酶。,實驗五 探索淀粉酶對淀粉和蔗糖水解的作用,二、實驗材料選用 淀粉酶: 是一種植物淀粉酶,質(zhì)量分數(shù)為2%的淀粉酶,最適PH為5.57.5,最適溫度為5075 。 唾液淀粉酶: 唾液:蒸餾水1:9稀釋,最適PH為6.8,最適溫度為37 。 不同的人唾液中酶的含量有個體差異,老師應該根據(jù)學生的實驗現(xiàn)象,調(diào)整稀釋比例。,實驗二 探索淀粉酶對淀粉和蔗糖水解的作用,三 、方法步驟 1、 2、振蕩混勻,將試管在60左右熱水中,保溫5min。 3、取出試管,各加入2mL斐林試劑。 4、將兩支試管沸水浴,觀察顏色變化。,實驗二 探索淀粉酶對淀粉和蔗糖水解的作用,四、注意事項 蔗糖溶液一定要純凈 蔗糖溶液要現(xiàn)配現(xiàn)用 在實驗前,教師應先用斐林試劑檢驗蔗糖溶液,如有紅色沉淀,不能再用。,實驗三 探索溫度對酶催化作用的影響,實驗四 植物向性運動的實驗設計和觀察,一、實驗原理 1、向性運動是植物受單向外界刺激而引起的定向運動,它的運動方向隨刺激而定。 2、在單側(cè)光刺激下,植物表現(xiàn)出向光性運動;在重力影響下,植物的根表現(xiàn)出向重力性運動。,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,二、目的要求 1、初步學會設計植物向性運動實驗的方法 2、學會觀察植物的向性運動,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,完整的實驗設計方案及常用實驗原則 1、實驗題目 2、假設 3、預期 4、實驗 5、觀察和收集數(shù)據(jù) 6、分析 7、推論 8、交流,對 照 原則 單一變量原則 條件可控原則 可 重 復 原則,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,三、植物向重力性實驗設計參考 方案一:,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,三、植物向重力性實驗設計參考 方案二: 1、在一扁形玻璃槽內(nèi)緊貼一側(cè)玻璃, 將已萌動的玉米或小麥種子種在潮濕的 沙土中。均勻澆水,培養(yǎng)一段時間,觀 察根、莖的生長。 2、待已明顯看出向地生長的幼根和背地生長的幼莖后,將玻璃槽橫置,仍然均勻澆水,觀察根、莖的生長。幾天后,便可看到橫置的根會彎向地心方向生長,橫置的莖又彎向背向地心方向生長。證明根具有向重力性,莖有負向重力性。,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,三、植物向重力性實驗設計參考 方案三: 1、將干瓊脂溶解于沸水中制成 3濃度的瓊脂溶液,倒入一培養(yǎng)血中,使厚度在23 mm左右,能固定種子即可,不宜過厚,以免影響種子的呼吸。 2、待瓊脂溶液溫度下降,未凝固前,將一粒已萌動的玉米種子固定于培養(yǎng)皿中央,蓋上培養(yǎng)蓋,保持濕度。 3、將培養(yǎng)皿豎著固定在一支架上,放在恒溫箱(25)培養(yǎng)。每隔一日將培養(yǎng)皿的角度轉(zhuǎn)90,觀察根的生長情況。,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,三、植物向重力性實驗設計參考 方案四: 將一新鮮柳樹的枝條正掛; 將一新鮮柳樹的枝條倒掛; 保持潮濕、溫暖的環(huán)境條件,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,四、植物向水性實驗設計參考 方案一:,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,四、植物向水性實驗設計參考 方案二:,實驗八 植物向性運動的實驗設計和觀察,五、植物向光性實驗設計選題 1、 生長素的發(fā)現(xiàn)過程的經(jīng)典實驗 2、向光性與胚芽鞘、胚芽的關(guān)系,
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