(論文)菊花嫩莖快繁技術(shù)的研究 論文(2013年優(yōu)秀畢業(yè)設(shè)計(jì)論文)_第1頁(yè)
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畢 業(yè) 設(shè) 計(jì)(論 文) 菊花嫩莖快繁技術(shù)的研究專 業(yè) 生物技術(shù)及應(yīng)用 學(xué)生姓名 班 級(jí) 生物技術(shù)及應(yīng)用(2)班 學(xué) 號(hào) 指導(dǎo)教師 完成日期 5 第5頁(yè),共13頁(yè)附1:成績(jī)?cè)u(píng)議學(xué)號(hào)姓名 題目 指導(dǎo)教師建議成績(jī): 評(píng)閱教師建議成績(jī): 答辯小組建議成績(jī): 院答辯委員會(huì)評(píng)閱意見(jiàn)及評(píng)定成績(jī):答辯委員會(huì)主任簽字(蓋章): 年 月 日附2:畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)任務(wù)書(shū)姓名學(xué)號(hào)班級(jí)題目菊花嫩莖快繁技術(shù)的研究設(shè)計(jì)(論文)主要內(nèi)容配制培養(yǎng)基(包括:誘導(dǎo)培養(yǎng)基,繼代培養(yǎng)基,生根培養(yǎng)基。)先配制誘導(dǎo)培養(yǎng)基組培室消毒(超凈工作臺(tái)紫外消毒20min)菊花嫩莖消毒處理實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)操作(初代培養(yǎng),繼代培養(yǎng),生根培養(yǎng)) 觀察并記錄數(shù)據(jù)和現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)中可能出現(xiàn)問(wèn)題的處理實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的苗移栽到適用田。重點(diǎn)研究問(wèn)題怎樣避免或減少褐變的機(jī)率,怎么樣降低污染率。激素在不同時(shí)期對(duì)其起到什么作用。光照,溫度對(duì)其有什么影響。不同品種的菊花其生長(zhǎng)環(huán)境有什么不同。培養(yǎng)因素對(duì)菊花組織的影響。6BA和NAA對(duì)菊花葉片分離再生的影響等.主要技術(shù)指標(biāo)配置標(biāo)準(zhǔn)的母液,配置培養(yǎng)基,PH及培養(yǎng)基的濃度,滅菌鍋的正確操作,超凈工作臺(tái)的操作及無(wú)菌操作。誘導(dǎo)培養(yǎng)的成活率,繼代培養(yǎng)的成活率及最終長(zhǎng)成小苗的比例。對(duì)其生長(zhǎng)環(huán)境的掌握程度。其它要說(shuō)明的問(wèn)題莖老發(fā)生褐變,真菌污染,操作不當(dāng)、講話導(dǎo)致細(xì)菌污染。滅菌出錯(cuò),培養(yǎng)基出現(xiàn)問(wèn)題(包括滅菌時(shí)中途打開(kāi)滅菌鍋在里面加?xùn)|西,操作失誤等)。不同的菊花的生長(zhǎng)條件不同等。指導(dǎo)老師意見(jiàn) 指導(dǎo)教師簽字: 年 月 日附3:指導(dǎo)教師意見(jiàn) 對(duì)論文的簡(jiǎn)短評(píng)價(jià):1.指出論文存在的問(wèn)題及錯(cuò)誤2.對(duì)創(chuàng)造性工作評(píng)價(jià)3.建議成績(jī) 優(yōu) 良 中 及格 不及格 指導(dǎo)教師簽字 年 月 日評(píng)閱教師意見(jiàn) 對(duì)論文的簡(jiǎn)短評(píng)價(jià):1.指出論文存在的問(wèn)題及錯(cuò)誤2.對(duì)創(chuàng)造性工作評(píng)價(jià)3.建議成績(jī) 優(yōu) 良 中 及格 不及格 評(píng)閱教師簽字 年 月 日吳黎平 : 菊花愈傷組織快繁技術(shù)的研究答辯小組評(píng)議意見(jiàn)學(xué)號(hào)姓名 題目 答辯小組意見(jiàn): 1、對(duì)論文的評(píng)價(jià)2.建議成績(jī)等級(jí) 優(yōu) 良 中 及格 不及格3.需要說(shuō)明的問(wèn)題 答辯小組長(zhǎng)簽字 年 月 日菊花嫩莖快繁技術(shù)的研究06生物技術(shù)及應(yīng)用(2)班 吳黎平 指導(dǎo)老師:黃小忠摘要:先實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作,然后選取菊花,以帶頂芽的嫩莖為外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,放在培養(yǎng)室里培養(yǎng)并觀察,一周后長(zhǎng)出叢生芽,再?zèng)]有污染的叢生芽在無(wú)菌超凈工作臺(tái)上用手術(shù)刀切成多塊,再將叢生芽接到繼代培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng),當(dāng)發(fā)現(xiàn)初步長(zhǎng)出嫩根時(shí),將無(wú)污染的帶根的叢生芽接到生根培養(yǎng)基中,當(dāng)生長(zhǎng)成幼苗時(shí)將生根試管苗開(kāi)蓋練苗,移栽。及在培養(yǎng)過(guò)程中遇到的問(wèn)題。關(guān)鍵詞:菊花;組織培養(yǎng);褐變;脫毒;外植體Rapid Propagation of Chrysanthemum tender stem ResearchAbstract: Tests before first the preparatory work, then the selection chrysanthemum, plants the body take the belt terminal bud tender stem as outside to vaccinate in the induction culture medium, places in the raise room to raise and to observe, after a week is long grows thickly the bud, then does not have the pollution to grow thickly the bud to sliver the multi-blocks on the asepsis ultra only work table with the scalpel, then will grow thickly the bud grafting to continue in a generation of culture medium to carry on continues a generation of raise, when discovered when at the beginning of the length of stride will leave the tender root, will not have the pollution the belt root to grow thickly the bud grafting to take root in the culture medium, when will grow the seedling will take root the test tube seedling to uncap practices the seedling, will transplant. And question which meets in the raise process.Keyword:Chrysanthemum; Tissue culture; Turning brown; Escapes the poison; Outside plants the body目 錄1材料和方法811材料與用具812培養(yǎng)條件 913實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作 9131培養(yǎng)基配制 9132接種室的滅菌 9133超凈工作臺(tái)及器械消毒 9134材料選取 9135材料滅菌 914接種 1015誘導(dǎo)側(cè)芽生長(zhǎng)1016 繼代培養(yǎng) 1017誘導(dǎo)生根1018移栽培養(yǎng)102結(jié)果與分析102.1初代培養(yǎng) 102.2繼代培養(yǎng) 1123生根誘導(dǎo)及移栽112 4細(xì)菌、真菌污染及防治123.討論 12參考文獻(xiàn) 13致謝14菊花又稱“菊”、“秋菊”、“黃花”, 為菊科菊屬的多年生宿根草本植物或半灌木, 是原產(chǎn)于我國(guó)的十大傳統(tǒng)名花和世界最主要的切花之一, 主產(chǎn)于浙江、江蘇, 在四川、安徽、河南、山東等省也有栽培。杭菊、亳菊、貢菊、滁菊、祁菊、懷菊、濟(jì)菊、黃菊為我國(guó)藥用菊花的八大主流商品。菊花株高80120cm 左右, 莖直立, 基部木質(zhì)化, 上部多分枝, 枝略具棱, 是典型的溫帶短日照植物。在短日照下能提早開(kāi)花, 喜陽(yáng)光忌蔭蔽, 較耐旱、忌澇; 喜溫暖濕潤(rùn)氣候, 但也能耐寒, 嚴(yán)冬季節(jié)根莖能在地下越冬, 花能經(jīng)受微霜, 但幼苗生長(zhǎng)和分枝孕蕾期需較高的氣溫, 最適生長(zhǎng)溫度為20左右。菊花的再生能力強(qiáng), 采用扦插法繁殖操作簡(jiǎn)便, 易于成活, 且沒(méi)有季節(jié)限制, 全年均可進(jìn)行。菊花味甘、性寒,在明代李時(shí)珍的本草綱目中載有“利五脈,調(diào)四肢,治頭目風(fēng)熱,腦骨疼痛,養(yǎng)目血,去翳膜,主肝氣不足”的功效1 , 且具有很強(qiáng)的抗菌作用, 對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等有很強(qiáng)的抑殺作用,常用于治療心胸?zé)?、疔瘡、偏頭痛、冠心病、乳腺炎、扁桃炎等疾病, 可降低血液中的血脂和膽固醇, 預(yù)防心臟病的發(fā)生, 并能增強(qiáng)身體的免疫能力。其花中主要含有揮發(fā)油、龍腦、乙酸龍酯、矢車菊甙、綠原酸、維生素、黃酮類物質(zhì)、微量元素硒等, 具有清除人體中超氧離子自由基及抗衰老、增加機(jī)體免疫力的生理活性作用。現(xiàn)代研究表明, 菊花花瓣中不僅含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì), 它還有食用、藥用等多種價(jià)值, 有抗病毒、抗炎、抗氧化、抗HIV 和癌細(xì)胞的成分、舒血管、降血壓、降血脂、抗腫瘤等多種藥理作用。菊花的主要繁殖方法有扦插繁殖、分株繁殖、壓條繁殖、嫁接繁殖等,這些方法均存在一定程度的缺點(diǎn)與不足,主要表現(xiàn)為繁殖速度不快、病蟲(chóng)害發(fā)生頻率高、易受季節(jié)變化 影響等等, 尤其在北方地區(qū)冬季嚴(yán)寒,夏秋季為主要綠化季節(jié),冬春季節(jié)為育苗季節(jié),相對(duì)來(lái)說(shuō)任務(wù)重,成本高。隨著組培技術(shù)的發(fā)展,其快速、 高效、 保優(yōu)等都將改變這種不足,因此推動(dòng)菊花走向組培育苗的道路在北方地區(qū)有著廣闊的前景。利用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行菊花的快速繁殖,則可有效解決上述問(wèn)題與矛盾,已越來(lái)越成為菊花繁殖的重要方法與手段,在菊花種苗生產(chǎn)上加以推廣應(yīng)用?,F(xiàn)在生產(chǎn)上多用扦插和嫁接繁殖,但該方法大面積綠化使用時(shí)成苗慢,根據(jù)植物細(xì)胞全能性 ,利用組織培養(yǎng)方法,在短時(shí)間內(nèi)將體細(xì)胞培養(yǎng)出大量植株 ,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中有著非常大的推廣潛力與意義。栽培技術(shù)在菊花科研中占據(jù)著重要的地位, 已成為人們研究的重點(diǎn);其中人們更側(cè)重于成分提取與分析研究, 人們已經(jīng)意識(shí)到菊花的化學(xué)成分、色素研究對(duì)開(kāi)發(fā)其有效成分有重大意義2。1.材料和方法 1.1材料與用具 植物材料:菊花嫩莖。器材與用具:超凈工作臺(tái)、 解剖刀、 長(zhǎng)柄鑷子、 架臺(tái)、無(wú)菌濾紙、 酒精燈、火柴、 標(biāo)簽、棉球、廢液缸、垃圾袋、皮筋、精密pH試紙(5.47.0)、玻璃三角瓶(150ml)、封口膜、培養(yǎng)皿。藥品與試劑:MS培養(yǎng)基母液、激素(生長(zhǎng)素 、細(xì)胞分裂素等)母液、有機(jī)物(瓊脂、蔗糖)、無(wú)菌水、0.1 %升汞、 70 %、75%酒精、0.1MNaOH。1.2培養(yǎng)條件 適宜的溫度范圍為24 26,28培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)快但增殖倍數(shù)低, 26時(shí)增殖倍數(shù)最高,但溫度在27 29時(shí), 玻璃化現(xiàn)象較為嚴(yán)重。3 為了減輕試管苗玻璃化現(xiàn)象我們?cè)谂囵B(yǎng)基中添加活性碳,而添加水解酪蛋白則使玻璃苗百分率增加。培養(yǎng)基pH值對(duì)玻璃苗發(fā)生也有影響,在 pH 5.87.0范圍內(nèi),玻璃苗百分率以pH 6.2時(shí)最高,pH 7.0時(shí)最低;培養(yǎng)過(guò)程中注意通氣以盡可能降低培養(yǎng)容器內(nèi)的空氣相對(duì)濕度和改善氧氣供應(yīng)狀況,有助于克服玻璃化光周期:以12 16h/ d 為宜。 在愈傷誘導(dǎo)期進(jìn)行適量的暗培養(yǎng), 有促進(jìn)愈傷形成的作用。光照強(qiáng)度。范圍為1000 4000lx, 較多選擇1500 2000lx。 4000 5000lx 的光照使試管苗的分化增殖倍數(shù)提高, 但對(duì)生根則相反。白色光一般能滿足生長(zhǎng)需要。1.3實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作1.3.1培養(yǎng)基配制 表-1 培養(yǎng)基制作配比培養(yǎng)基配比蔗糖瓊脂pH叢生芽誘導(dǎo)MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L3%0.7%5.8繼代培養(yǎng)MS+6-BA3.5mg/L+NAA0.5mg/L3%0.7%5.8生根培養(yǎng)1/2MS+NAA0.2mg/L3%0.7%5.8滅菌條件為0.11MPA,120min。在煮瓊脂時(shí)要把握好時(shí)間,不宜過(guò)長(zhǎng)以免糖分受熱分解,導(dǎo)致滅菌好的培養(yǎng)基發(fā)黃。滅菌前要檢查滅菌鍋是否缺水,滅菌時(shí)要正確操作,滅菌一定要徹底,中途期間不要打開(kāi)滅菌鍋。1.3.2接種室的滅菌在實(shí)驗(yàn)的前一天,將接種室用高錳酸鉀和甲醛熏蒸進(jìn)行滅菌消毒。1.3.3超凈工作臺(tái)及器械消毒啟動(dòng)超凈工作臺(tái),操作之前用 70 %的酒精擦臺(tái)面。將操作用刀、 鑷子、 剪子等用具在酒精燈下用火灼燒到變紅,冷卻待用。 1.3.4材料選取 選取在脫毒實(shí)驗(yàn)中成功移栽上盆而且長(zhǎng)勢(shì)健壯的植株作為實(shí)驗(yàn)材料,選取莖作為實(shí)驗(yàn)材料8。1.3.5材料滅菌 選取生長(zhǎng)健壯的嫩莖洗去表面泥土 ,在超凈工作臺(tái) ,用 75 %酒精處理 2030 秒 ,再用無(wú)菌水沖洗 35 次 ,轉(zhuǎn)入 0.1 %升汞溶液浸泡 810 分鐘 ,再用無(wú)菌水沖洗 46 次 ,用濾紙吸干水分。1.4.接種在無(wú)菌條件下將其切成2厘米左右?guī)в幸秆康男《?,用鑷子夾取切好的外殖體材料,然后按極性方向直立迅速接種到錐形瓶的培養(yǎng)基中,深約 23 mm,注意培養(yǎng)瓶口始終在火焰下方,盡量使切口接觸培養(yǎng)基,每個(gè)錐形瓶可接種 34 塊外殖體。接種時(shí)錐形瓶應(yīng)保持傾斜,接種后要迅速將瓶口在酒精燈上轉(zhuǎn)動(dòng)灼燒一遍進(jìn)行消毒,然后迅速蓋上專用透性膜封好。最后在瓶壁上貼上標(biāo)簽,注明接種材料的名稱、 編號(hào)和接種日期。接種完成后即轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室進(jìn)行初代培養(yǎng) ,培養(yǎng)溫度2228 ,光強(qiáng)10004000 Lx。1.5誘導(dǎo)側(cè)芽生長(zhǎng)接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。置于光照培養(yǎng)箱中,每天連續(xù)光照1216h ,光照強(qiáng)度為2 0003 000Lx ,培養(yǎng)溫度(25 1) 。經(jīng)過(guò)10d 菊花莖尖顏色逐漸變綠,基部逐漸增大,莖尖也逐漸伸長(zhǎng),一般25d 后,長(zhǎng)出叢生芽。1.6 繼代培養(yǎng)將叢生芽切割下,分開(kāi)接種于繼代培養(yǎng)基之上,一般15d 后可長(zhǎng)出叢生芽,取叢生芽轉(zhuǎn)接于新的培養(yǎng)基繼代上,則可在更短的時(shí)間內(nèi)(約10d) 長(zhǎng)出叢生芽,繼代培養(yǎng)的次數(shù)越多,從接種到長(zhǎng)出叢生芽所需的時(shí)間越短,但不短于7d ,若不及時(shí)轉(zhuǎn)接,芽苗會(huì)迅速長(zhǎng)高。1.7誘導(dǎo)生根待繼代獲得較多叢生芽后,將叢生芽切成單株,取長(zhǎng)約23 cm的芽苗分開(kāi)接種于生根培養(yǎng)基上,進(jìn)行誘導(dǎo)生根培養(yǎng),10d 左右就可出現(xiàn)大量小根,最后有16 條根可長(zhǎng)得較長(zhǎng),芽苗也迅速長(zhǎng)高。待生根后,將生根試管苗開(kāi)蓋練苗,移栽。1.8移栽培養(yǎng)待根長(zhǎng)至12cm時(shí)開(kāi)瓶進(jìn)行練苗,先將瓶塞打開(kāi),讓其由無(wú)菌環(huán)境轉(zhuǎn)至有菌且濕度較低的環(huán)境之中約3d ,將苗取出,小心用流水洗去根表面的培養(yǎng)基殘留物,移栽到素沙中,適當(dāng)遮蔭,一星期后即可成活,成活率達(dá)95 %以上,一個(gè)月后即可上盆。2結(jié)果與分析21初代培養(yǎng)不同外植體對(duì)芽誘導(dǎo)的影響9,外植體誘導(dǎo)成芽時(shí)間有差異4。在拿菊花莖尖和菊花葉片接種到初代培養(yǎng)基上在相同的條件下培養(yǎng)時(shí),發(fā)現(xiàn)莖尖及莖段最為合適,其他外殖體在此培養(yǎng)基效果不明顯。在培養(yǎng)過(guò)程中我們發(fā)現(xiàn)有很多都褐變死亡。為了防止褐變我們加入了VC溶液。為了證明VC能抑制褐變我們做了組對(duì)比實(shí)驗(yàn),在1,2組中我們沒(méi)加入VC,在3,4組中我們加入了VC,其他條件不變(如表2)。表2 初代培養(yǎng)記錄表:次數(shù)接種量真菌污染細(xì)菌污染褐變玻璃化正常成活率160107523660%260128823050%360910203965%460116313965%統(tǒng)計(jì):240423118514460%從表2上我們看到第3,4組的褐變的數(shù)量比第1,2組的褐變數(shù)量少??梢?jiàn)在接種前先用100 mg/ L Vc 浸泡外植體1 h ,在其以后的繼代過(guò)程中加入 200 mg/ L 聚乙烯吡咯吡烷酮(PVP) ,可有效地控制褐變現(xiàn)象5。當(dāng)褐變現(xiàn)象不再發(fā)生時(shí),要及時(shí)停止添加PVP ,以防長(zhǎng)期使用 PVP 對(duì)外植體產(chǎn)生毒副作用。22繼代培養(yǎng)表-3 繼代培養(yǎng)記錄表:次數(shù)接種量真菌污染細(xì)菌污染褐變玻璃化正常成活率1992130304545%2841527004250%31171833036354%41082433304844%統(tǒng)計(jì):408781236319849%23生根誘導(dǎo)及移栽對(duì)大多數(shù)菊花而言加入適量的生長(zhǎng)素效果會(huì)更好, 從生根的天數(shù)和生根的質(zhì)量看IBA 較NAA 好 6。表-4 菊花組培中生長(zhǎng)素的濃度范圍(單位:mg/L )生長(zhǎng)素NAAIBAIAA愈傷誘導(dǎo)和分化0. 01 2-0. 3 3生根0. 1 0. 3 (1/2M S)0. 1 0. 31. 06-BA濃度00. 5 mg/L范圍內(nèi),菊花分枝數(shù)隨6-BA濃度增高而增多,但超過(guò)這一濃度,菊花分枝數(shù)隨濃度增高而降低,說(shuō)明菊花分枝數(shù)在一定范圍內(nèi)與6-BA 濃度呈正相關(guān)。當(dāng) 6-BA 濃度為0. 5mg/L,與其他濃度相比差異極顯著(P 0. 01) 7 。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn),6-BA/ NAA 比值越大有利于芽分化。結(jié)果顯示,試驗(yàn)所采用的誘導(dǎo)培養(yǎng)基芽分化雖然較少,但分化的芽都屬有效芽。最終篩選出此培養(yǎng)基較佳配方,繼代周期為2530d ,增殖倍數(shù)47 倍。因時(shí)間和材料問(wèn)題本次試驗(yàn)為能完成生根培養(yǎng)和移栽,但通過(guò)查閱資料得知:當(dāng)繼代培養(yǎng)的叢生芽長(zhǎng)至2. 53. 5cm,具23 片葉時(shí),可將其切成單株,轉(zhuǎn)接到各種生根培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),一般1 周后有根出現(xiàn)10。在組織培養(yǎng)的過(guò)程中,試管苗移栽的成功與否也是一個(gè)關(guān)鍵的環(huán)節(jié),因?yàn)樵嚬苊缭谠嚬苤胁徽撋L(zhǎng)多好,移栽若不成功則導(dǎo)致前功盡棄。在試驗(yàn)中,當(dāng)試管苗具有45 片葉,56 條根時(shí)即可移栽。24細(xì)菌、真菌污染及防治表-5 初代、繼代培養(yǎng)中的污染統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)類型污染分類總計(jì)概率染菌表現(xiàn)初代真菌污染17.5%外植體周圍有白色絨毛狀菌絲,培養(yǎng)基出現(xiàn)綠、白菌斑細(xì)菌污染13%培養(yǎng)基表層呈水漬狀污染,外植體周圍滴形云霧狀污染繼代真菌污染19%培養(yǎng)基表層出現(xiàn)黃、白色油滴狀菌斑細(xì)菌污染30%培養(yǎng)基表層有粉紅色如水漬狀分布的菌斑在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們會(huì)發(fā)現(xiàn)每次實(shí)驗(yàn)下來(lái)總有幾瓶污染的,大多都是真菌和細(xì)菌污染。細(xì)菌污染主要是我們的操作部規(guī)范,接種時(shí)沒(méi)有嚴(yán)格按照操作制,在接種時(shí)說(shuō)話,或者隨處走動(dòng),自身消毒不徹底導(dǎo)致。為了防止當(dāng)代培養(yǎng)基染菌,我們?cè)谂囵B(yǎng)基中附加50150mg/l氨芐青霉素;為了防止生根培養(yǎng)基的試管苗染菌我們加入50mg/l 硫酸丁胺卡那霉素。3.討論通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)我們了解到不同的激素組合對(duì)不定芽的增殖也有影響。激素水平對(duì)愈傷組織再分化關(guān)系密切, 隨激素水平的提高外植體的分化率增加,芽的分化系數(shù)也提高 , 但激素濃度過(guò)高和生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素配比失調(diào), 易導(dǎo)致玻璃化苗的產(chǎn)生。在相同激素水平、相同條件下, 不同菊花品種的生長(zhǎng)有很大的差異。由此可見(jiàn), 對(duì)某一品種的菊花進(jìn)行組培時(shí), 選用什么樣的激素種類和配比, 較難有一個(gè)固定的模式, 除了參照前人的經(jīng)驗(yàn)外, 最好的辦法還是先進(jìn)行小規(guī)模的試驗(yàn), 選出適宜的激素組合再擴(kuò)大生產(chǎn)。我們?cè)诶^代增殖試驗(yàn)過(guò)程中注意到,采用0. 7 %的瓊脂比采用0. 1 %的植物膠效果要好。0.7%瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿中濕度稍低。而且在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)基不凝固現(xiàn)象,那么我

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