水產養(yǎng)殖學畢業(yè)論文.doc

青島農業(yè)大學本科生畢業(yè)論文（設計）題 目： 微生物制劑在水質改良方面的調查研究姓 名： 王建濤 學 院： 動物科技學院 專 業(yè)： 水產養(yǎng)殖學 班 級： 07級5班 學 號： 20075294 指導教師： 程順峰 2011年 6 月 5 日目 錄中文摘要1abstract1引言11 材料與方法21.1 材料與試劑21.1.1 試驗用產品21.1.2優(yōu)藻樂成分簡介及其作用原理21.1.3便攜式水質指標分析儀器及其作用原理21.2 方法31.2.1 實驗設計31.2.2 實驗與結果記錄32 結果32.1 水體氨氮變化 32.2 水體亞硝酸鹽變化 42.3 水色變化43 討論 6 3.1 研究現(xiàn)狀 63.1.1 傳統(tǒng)肥料肥水優(yōu)缺點 63.1.2氨氮、亞硝酸鹽對水產養(yǎng)殖危害 73.1.3 直觀水色變化 732 生物制劑水產中的應用 103.3 數(shù)據(jù)分析11致謝12參考文獻 13微生物制劑在水質改良方面的調查與研究水產養(yǎng)殖學專業(yè) 王建濤指導教師 程順峰摘要：本文通過對南通區(qū)域小白蝦（）池塘用微生物制劑和傳統(tǒng)有機糞肥進行水質改良做對比實驗。實驗原理是：在自然條件下，取南通如東養(yǎng)殖區(qū)的6口相同大小養(yǎng)殖塘（每口30畝）作為研究對象，分別編號1、2、3、4、5、6，進同源等量的海水。測得水質指標相同后，分別加入不同水質改良劑進行肥水效果對比實驗，并且進行生物制劑對氨氮、亞硝酸鹽影響對比實驗。實驗結果表明生物制劑在養(yǎng)殖水質改良中具有有效降低和控制氨氮和亞硝酸鹽的作用，并且對養(yǎng)殖生物無害、無副作用。關鍵詞：池塘養(yǎng)殖；水質改良；對比；氨氮；亞硝酸鹽 microbial agents in water quality improvement aspects of survey and researchstudent majoring in aquaculture wangjiantaotutor chengshunfengabstract：this article through to nantong area small white shrimp ponds with microbial preparations and traditional organic manure on water quality improvement compared to experiment. experiment principle is: in the natural conditions, take six mouth some culture zones of nantong pond (same size breeding every mouth 30 mu) as the research object,respectively numbers 1, 2, 3, 4, 5, 6, releases seawater. intohomologous after the same measured respectively, water quality indexes of water quality improver were joined different water effect comparative experiments, and biological agents for ammonia nitrogen, nitrite influence comparative experiments. experimental results show that the water quality improvement in breeding biological agents has effectively reduce and control of ammonia nitrogen and nitrite, and the role of breeding biological harmless, without any side effects. keywords: ponds and breeding; water quality improvement; contrast; ammonia nitrogen; nitrite 引言：自古就有“養(yǎng)漁先養(yǎng)水”之說，水質的好壞直接關系到養(yǎng)殖的產量和經濟效益1。良好的水質，是養(yǎng)殖成功的一半。水質的好壞基本可以通過水色來判斷，有經驗的養(yǎng)殖戶往往通過觀察池塘水色及其變化, 進而采取相應的有效措施, 確保收成。水色是由池塘中浮游生物、懸浮顆粒的數(shù)量和種類的不同而起的綜合反映, 其中浮游藻類是主要因素, 不同地區(qū)和同一地區(qū)相鄰的池塘, 浮游生物的種類、優(yōu)勢種類往往不同，一般來說水色分為優(yōu)質水色和危險水色。利用微生物制劑不僅能起到改善水質的作用，而且能控制病原微生物生長于繁殖以及提高動物抵抗力【2】。生物制劑比傳統(tǒng)水產藥品有無害、無殘留、無副作用、持續(xù)作用長久、對整個養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境有長期的保護和改良的作用的優(yōu)點。微生物制劑又稱“有益微生物”、“益生素”等，常見主要有枯草芽孢桿菌、硝化細菌和反硝化細菌、納豆菌、乳酸菌、雙歧桿菌、假單孢菌、酵母菌等菌株組成。隨著水產養(yǎng)殖的發(fā)展，工廠化高密度養(yǎng)殖需大量投入飼料，餌料殘余和水產動物的排泄物溶解于水中，對養(yǎng)殖水體造成污染，導致水體中的有機物、nh3、h2s等有害物質增加，同時化學耗氧量（cod）和生物耗氧量（bod）居高不下，通過使用微生物制劑可以有效消除上述負面影響。水產養(yǎng)殖上根據(jù)用途可分為改善水質的水質調節(jié)劑、控制病原的微生物生長以及提高動物抵抗力增進健康的餌料添加劑3等，微生物控制劑拮抗是微生物之間普遍存在的自然現(xiàn)象。在同一生態(tài)位中微生物通過營養(yǎng)競爭、空間競爭或分泌抗生素、細菌素等毒素抑制其他微生物的生長4。生物制劑能起到改善水質的作用，具有有效降低和控制養(yǎng)殖水體氨氮、亞硝酸鹽含量的作用5，能夠促進水產養(yǎng)殖生物良好生長的作用。 我國微生態(tài)制劑在水產養(yǎng)殖業(yè)中的應用研究開始于20世紀80年代初期6，最早應用于養(yǎng)殖業(yè)的微生態(tài)制劑是“光合細菌7”，主要用于調節(jié)養(yǎng)殖水質。在對光合細菌的培養(yǎng)、擴增、保存技術及應用效果方面做了大量研究工作基礎上，又相繼開發(fā)出乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬、弧菌屬、假單孢菌屬、芽孢桿菌屬的眾多種類及硝化細菌等8。然而，迄今為止對水產養(yǎng)殖用微生態(tài)制劑的大多數(shù)研究僅限于產品開發(fā)和使用效果方面，在諸如精確施用技術、測水施用技術、不同種類合理配伍、抑制與清除技術等方面涉及的不多，這也是在不同水域及同一水域的不同時間、不同施用量、不同施用方法所產生的效果差異較大的主要原因。近年來水產養(yǎng)殖用水及環(huán)境受到嚴重污染和破壞，給養(yǎng)殖業(yè)經濟帶來了重大損失，水產用藥也越來越嚴重，導致養(yǎng)殖生物產生耐藥性，是治病菌產生抗藥性，而且導致養(yǎng)殖生物藥殘量超標，不僅給養(yǎng)殖業(yè)帶來重大損失，而且給消費者帶來了一些疾病。而微生物制劑作為一種新型生物藥品在水產養(yǎng)殖中的應用越來越廣泛，它不僅能改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境，而且能控制病原微生物生長于繁殖以及提高動物抵抗力，還能夠降低養(yǎng)殖水體有毒物質的含量等優(yōu)點。就目前微生物制劑在水產中應用越來越廣泛，且相關研究也越來越多，本文就個別微生物制劑具有降低水產有毒物質（氨氮、亞硝酸鹽）含量進行了實驗和研究，并對本研究的目的和意義進行了闡述。1 材料與方法1.1 材料及試劑1.1.1 實驗用產品（由無錫中順生物科技有限公司提供）豐源：小球藻藻種，在水體缺乏藻種時可以使用；優(yōu)藻樂：還有豐富的芽孢桿菌、硝化細菌、酵母菌，用于調節(jié)水質，降低和控制氨氮、亞硝酸鹽在養(yǎng)殖水中的含量。1.1.2 優(yōu)藻樂成分簡介及其作用原理芽抱桿菌： 革蘭氏染色陽性, 是普遍存在的一類好氣性細菌, 多屬芽抱桿菌屬。該類菌無毒性, 能分泌蛋白酶等多種酶類和抗生素。作用機理是可直接利用水體中的硝酸鹽和亞硝酸鹽, 從而起到改善水質的作用, 芽抱桿菌還能利用其分泌的多種酶類及抗生素, 抑制其它細菌的生長, 減少甚至消滅病原體的影響來改善水質。硝化細菌：硝化細菌屬化能自養(yǎng)菌, 專性好氧, 大多是專性無機型。硝化細菌可分為個亞群亞硝化細菌和硝化細菌。亞硝化細菌將水體中的氨氮化為亞硝酸氮,硝化細菌將亞硝酸鹽氧化為對水生動物無害的硝酸氮。硝化細菌主要與其它細菌一起制成復合微生物制劑使用。酵母菌：酵母為真核生物, 是一種單細胞蛋白即, 含有較高的營養(yǎng)成分。酵母中維生素的含量比魚粉多倍以上, 尤其富含族維生素。其他實驗用品： 碳酸氫銨和過磷酸鈣，有機肥（發(fā)酵雞糞），顯微鏡1.1.3 便攜式水質指標分析儀器及其作用原理【9】： 可粗測氨氮、亞硝酸鹽、ph、溶解氧使用方法：先取待測液5ml,然后加入相應試劑進行與標準比色管對比確定其該項水質指標含量。氨氮測定：向待測液中先加氨氮試劑1號4滴搖勻，然后加氨氮試劑2號5滴搖勻。5分鐘后用小試管取上層液體與氨氮標準比色管對比。原理：碘化鉀和碘化汞溶液與氨反應生成淡紅棕色膠態(tài)化合物，氨氮比例不同顯示的顏色有所差異，通過差異與標準比色管對比可得到結果。亞硝酸鹽測定：向待測液中先加亞硝酸鹽試劑1號5滴搖勻，五分鐘后再加入亞硝酸鹽試劑2號4滴搖勻。10分鐘后用小試管取上層液體與亞硝酸鹽標準比色管對比。原理：亞硝酸鹽和對氨基苯磺酰胺反應生成重氮鹽，再與n-（1-萘基）-乙二胺反應偶聯(lián)生成紅色染料，濃度不同顏色有差異，通過顏色對比確定亞硝酸鹽的含量。ph測定：向待測液中加ph試劑6滴，用小試管取上層液體與ph標準比色管對比。原理：不同的ph值對茚三酮與谷氨酸顯色反應的影響不同，從而產生不同的顏色反應，通過對比可知道所處的ph值。1.2 方法1.2.1 實驗設計 在南通養(yǎng)殖區(qū)選取6口同時新開、相同大小養(yǎng)殖塘（每口30畝）分別編號1、2、3、4、5、6，進同源等量海水，放養(yǎng)規(guī)格相同的脊尾白蝦苗。在晴天上午：1號加入豐源（用水浸泡12小時，(0.81）kg/畝），2號加入豐源源和優(yōu)藻樂（每袋用0.150.2kg紅糖浸泡2小時,(0.30.5) kg/畝），3號加入碳酸氫銨和過磷酸鈣（水深7080cm池塘，一般施碳酸氫銨4560kg/hm2，過磷酸鈣1522kg/hm，施用時應先將n、p肥各自加水溶解后，再進行全池均勻潑灑。），4號加入碳酸氫銨和過磷酸鈣和優(yōu)藻樂，5號加入發(fā)酵有機肥，6號加入發(fā)酵有機肥和優(yōu)藻樂。1.2.2 實驗觀察與結果記錄（1）、用便攜式水質指標分析儀器定期在上午89點測量水中氨氮、亞硝酸鹽含量并記錄數(shù)據(jù)。（2）、每天注意觀察水色變化，并且每日取樣用顯微鏡定期觀察水中有益和有害藻類的生長繁殖情況。2 結果2.1 水體氨氮變化（表1）使用生物制劑后試驗塘口水體中氨氮變化情況（mg/l）使用前1天 3天7天11天15天17天10.10.10.10.10.10.120.1220.10.10.10.10.10.10.130.10.250.220.180.180.20.240.10.250.180.130.120.10.150.10.150.150.130.130.130.1460.10.150.120.110.10.10.1由表1數(shù)據(jù)：（1）向養(yǎng)殖塘中加入不同制劑引起水體氨氮含量變化程度不同。尤其是加入碳酸氫銨和過磷酸鈣、有機肥的池塘變化很明顯，加入的當天氨氮含量很高。 （2）加入“優(yōu)藻樂”的池塘明顯比沒有加的塘口氨氮含量有不斷降低的趨勢。（3）沒加“優(yōu)藻樂”的池塘后期氨氮含量有上升趨勢。2.2 水體亞硝酸鹽變化（表2）使用生物制劑后試驗塘口水體中亞硝酸鹽變化情況 使用前1天3天7天11天15天17天10.010.010.010.010.010.010.0120.010.010.010.010.010.010.0130.010.0180.0150.0130.0130.0130.01340.010.0180.0120.0110.010.010.0150.010.0150.0130.0120.0110.0110.01160.010.0150.0120.0110.010.010.01由表2數(shù)據(jù)：（1）向養(yǎng)殖塘中加入不同制劑引起水體亞硝酸鹽含量變化不同。（2）加入生物肥料“豐源”對水體亞硝酸鹽含量影響很小，而碳酸氫銨和過磷酸鈣、有機肥會使水體亞硝酸鹽含量升高很高。（3）加入“優(yōu)藻樂”的池塘樣硝酸鹽含量有明顯下降趨勢。2.3 水色變化實驗現(xiàn)象：開始進的海水都是透明度較高（用黑白盤測得約50cm），加入肥料后都能在三天后看到明顯透明度降低，水色變綠，尤其十天左右的時候此現(xiàn)象更明顯。但加入不同肥料后現(xiàn)象也有一定差別，3、4、5、6號池塘水水體透明度降低很快，并且實驗中期透明度很低（約15cm），整個水體成暗綠色。每天鏡檢發(fā)現(xiàn)，每滴水中的藻類不斷增多，但大多是藍綠藻、裸藻為主。但在實驗后期透明度又會增大，用顯微鏡觀察有死藻現(xiàn)象。尤其是5、6號池塘中不僅含有大量藍綠藻、裸藻，并且實驗后期有大量枝角類、撓足類滋生。1、2號池塘水體透明度降低的幅度比3、4、5、6慢，并且實驗中期水的透明度保持在25cm左右時間長，但整體看起來水質清新，成翠綠色或黃綠色，直觀水色比3、4、5、6要好，并且鏡檢發(fā)現(xiàn)含大量利于小白蝦食用的綠藻、硅藻。水色對比如下：1號池塘 2號池塘 3號池塘 4號池塘 5號池塘 6號池塘 3 討論3.1 研究現(xiàn)狀3.1.1 傳統(tǒng)肥料肥水缺點一、用化肥肥水的缺點1、有毒物質超標：大量施用化肥，尤其是碳酸氫銨，會在瞬間是氨氮等有毒物質含量急劇上升，惡化水質，反而抑制縊蟶生長，嚴重者會導致縊蟶死亡。2、肥料有效成分易流失，肥效短。表現(xiàn)在水色來得快，去的也快。3、容易倒藻：化肥培養(yǎng)出來的藻類是以藍綠藻、裸藻為主，水色大多成深綠色或翠綠色，這些藻類難以被小白蝦消化吸收利用，而且水色維持時間短，藻相變化頻繁；特別到中后期經常出現(xiàn)水瘦、發(fā)紅等情況，甲藻大量繁殖導致蝦、蟹、貝類疾病頻發(fā)。4、容易導致塘地“沙漠化”，容易滋生泥皮、青苔和絲狀藻，繼而導致后續(xù)肥水培藻困難。二、有機肥的缺點1、枝角類、撓足類易過量滋生：有機糞肥，容易大量滋生枝角類、撓足類，從而造成水體混濁，藻類過少，水體溶氧偏低、放苗前半月左右進行施肥，施用發(fā)酵的有機菌藻失衡；嚴重時導致缺氧，引起“蝦游池，貝死亡”2、水體有害物質超標：有機肥在微生物分解作用下易誘發(fā)水體硫化氫、氨氮等有害物質超標。引起水質污染，誘發(fā)水生動物疾病，一旦出現(xiàn)異常情況，處理起來比較困難。3、容易倒藻：有機肥肥水的水色往往為暗黑色、紅色，藻類以不易消化吸收的藍綠藻為主，當大量繁殖是已造成水質老化、倒藻。一旦倒藻，對貝、蝦、蟹會產生致命的危害，引起死亡。4、有害細菌過多：用有機肥施肥，容易滋生有害菌，在養(yǎng)殖過程中，當水生動物因天氣變化、水環(huán)境不穩(wěn)定、體質下降時，往往病害頻繁導致養(yǎng)殖效益下降。由于傳統(tǒng)肥水肥料存在以上不同程度的缺點，致使肥水效果不好，使用過程中既浪費了肥料，又不能帶來良好的經濟效益。而實驗證明，使用生物肥料卻不存在以上問題，不僅肥水效果好，而且具有促進養(yǎng)殖生物生長、對水體無毒害作用、能長期穩(wěn)定改善水體水質作用等優(yōu)點。并且傳統(tǒng)生物肥料培養(yǎng)藻類不具有定向性，在培養(yǎng)有益藻類的同時也培養(yǎng)出大量有害藻類，造成肥料大量流失。并且有害藻類產生大量毒素給養(yǎng)殖水體和養(yǎng)殖生物帶來了危害，造成水體后期肥水難的現(xiàn)狀，抑制甚至導致養(yǎng)殖生物死亡。而微生物制劑利用本身生物特性，不僅能抑制有害藻類生長繁殖，而且還能抑制有害菌繁殖生長，甚至有的有益菌還能直接吞噬有害菌。3.1.2 氨氮、亞硝酸鹽對水產養(yǎng)殖危害氨氮、亞硝酸鹽破壞池塘養(yǎng)殖環(huán)境；在轉化過程中耗氧、酸化池水危害養(yǎng)殖生物?？稍斐绅B(yǎng)殖生物中毒，引起免疫力下降，食欲下降，身體病變死亡。正常情況況下，7.5mg/lph8.6mg/l、氨氮0.2mg/l、亞硝酸鹽0.02mg/l范圍內適宜養(yǎng)殖，超出指標范圍不大時對養(yǎng)殖有一定危害，而超出范圍太大就會影響?zhàn)B殖生物生長，甚至導致養(yǎng)殖生物死亡。而使用微生物制劑（含有大量有益菌如芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌、硝化細菌等）可以有效分解轉化水體氨氮、亞硝酸鹽，并且分解轉化產物可以為誰藻類和養(yǎng)殖生物生長提供營養(yǎng)，gomez2gil b10等報道將vibrio alginolyticus c7b 菌和微藻chaetoceros muelleri 共同培養(yǎng), vibrio alginolyticus c7b菌迅速增長并在9d 的成熟過程中保持穩(wěn)定的高濃度,使整個養(yǎng)殖環(huán)境形成一個良好生態(tài)循環(huán)。3.1.3 直觀水色變化1、淡綠色、翠綠色這種水色看上去比較嫩綠、清爽，透明度在2030公分左右，肥度正好。水中的藻類以綠藻為主，如小球藻、柵藻、衣藻等，是養(yǎng)殖的較好的水色。水色比較穩(wěn)定，不會突然變清或變?yōu)槠渌?、茶褐色、茶色水： 這種水色的水質比較“肥、活、爽”。水中的藻類以硅藻為主，如新月藻、舟形藻、三角褐指藻、中肋骨條藻、盒形藻等，是養(yǎng)殖的最佳水色。唯一缺陷是持久性差，1015天后會逐漸轉變?yōu)槠渌?、黃綠色水 這種水色為硅藻和綠藻共生的水色，兼具硅藻水與綠藻水的優(yōu)勢，水色穩(wěn)定，營養(yǎng)豐富，是養(yǎng)殖難得的水色。主要藻類有盒形藻、中肋骨條藻、小球藻、衣藻等。4、濃綠色水（濃而不濁）這種水色看上去比較濃，透明度一般比較低，在10公分以下。一般在老塘口或者養(yǎng)殖中后期比較多見，藻類以藻類以綠藻為主，水質較肥，保持的時間較長，不會隨天氣的變化而變化。5、藍綠色水水中的藍藻（微囊藻等）大量繁殖，水質濃濁，透明度低，下風處往往有大量的藍綠色懸浮顆粒，底層水較清瘦，6、7、8月的高溫季節(jié)易產生這種水色。這種水色是水產養(yǎng)殖的頭號殺手，發(fā)病往往很嚴重，導致養(yǎng)殖效益低下。6、暗綠色、墨綠色水有害藻類較多，并且開始老化死亡，水面下風處有油膜狀物，增氧機開啟后容易起泡沫，很難消失7、黑褐色、醬油色水（偏黑色）主要含有機物、鞭毛藻、裸藻等，這種水色主要是因為管理失常，如投喂過多，殘餌、糞便在池底大量腐敗，導致懸浮的有機物過多。水體極度富營養(yǎng)化，水質和底質嚴重惡化、老化。由于有些鞭毛藻會分泌毒素，導致水產動物中毒死亡或大量發(fā)病。8、渾濁、黃泥色水 這種水往往沒有透明度，溶氧低，氨氮、亞硝酸鹽容易超標。主要是倒藻（藻類大量死亡）引起；密度過大，水產動物的活動或增氧劑的攪動也會導致底層的泥沙大量懸浮于水體中而呈現(xiàn)出黃泥色。9、澄清色水 主要有2種情況：（1）青苔水：池底長青苔，青苔大量繁殖，使池水變瘦，藻類繁殖不起來。（2）澄清水：浮游動物大量繁殖吃掉藻類，重金屬含量超標導致水沒有肥起來，水體澄清見底3.2數(shù)據(jù)分析通過表1、表2數(shù)據(jù)可看出：（1）向水體中施傳統(tǒng)肥可引起氨氮、亞硝酸鹽的明顯升高，使用微生物制劑“保水利生素”3天后可看到水體氨氮、亞硝酸鹽含量明顯開始降低，由于有益微生物的大量加入并繁殖可有效分解并降低氨氮、亞硝酸鹽含量。（2）通過水色與養(yǎng)殖生物稱重試驗看得出生物制劑肥水效果明顯，具有定向肥水優(yōu)點，對水體無害、作用持續(xù)長久、對整個養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境有長期的改良的作用。（3）通過此實驗可看出利用生物制劑能起到改善水質的作用，具有有效降低和控制養(yǎng)殖水體氨氮、亞硝酸鹽含量的作用，能夠促進水產養(yǎng)殖生物良好生長的作用。 3.3 實驗意義水質因子對養(yǎng)殖產量的影響越來越引人注意。雖然水生生態(tài)系統(tǒng)是一個極為復雜的系統(tǒng)，但主要是水質、病原和水生生物三者之間的平衡關系【11】。水質因子中c、n、p的含量對養(yǎng)殖影響最大。有些研究者從魚病和環(huán)境的關系論證了no2 是草魚出血病和鰱鳙爆發(fā)病的主要誘因12。nh3和h2s會對機體直接造成損害，因此水質管控已成為制約水產養(yǎng)殖的關鍵因素。通過分離、篩選和培育高效能的復合微生物菌種，研制成復合微生物制劑，應用于養(yǎng)殖水體水質的控制。微生物制劑可以有效改善養(yǎng)殖環(huán)境，有效降低水體氨氮、亞硝酸鹽等有毒物質。并且不造成第二次污染，病原菌不易繁殖生長，能保持整個養(yǎng)殖水體良性的生態(tài)平衡，有利于養(yǎng)殖品種的生長發(fā)育，是一種可以長期應用于水產的微生態(tài)制劑。致謝感謝恩師程順峰對我實習實驗的悉心指導，程老師是我一生中最為敬重、佩服的老師之一，其高深的智慧，廣博的學識，對科研的執(zhí)著與孜孜不倦的追求深深的感染并激勵著我，其無私待人與身體力行的風范將會影響我一生。從程老師那里，我看到了科學的浩瀚與奧妙，也看到了成功背后的執(zhí)著與汗水；通過這些，我放下了眼高手低，學會了腳踏實地。程老師，真心的謝謝您！本論文是無錫中順生物科技有限公司和江蘇南通如東孫澤明孫老板的大力支持和親切關懷下完成的，在此表示衷心的感謝。感謝四年當中給予我知識與教導的老師和學校領導。感謝家人和朋友，你們一如既往的支持是我前進的不竭動力，是你們讓我感悟到了生命的價值，感受到了生活的美好！感謝所有關心、支持過我的人們！最后向參加論文評閱、修改和答辯的各位老師和資深專家教授表示忠心的感謝！參考文獻：1吳偉.應用復合微生物制劑控制養(yǎng)殖水體水質因子初探.湛江海洋大學學報，s912-s917.