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血液生化檢驗(yàn)及其意義,1,目 錄,一、生化儀的介紹(以IDEXX 為例) 二、樣本采集與制備 三、檢測(cè)指標(biāo)及臨床選擇 四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義,2,一、生化儀的介紹(以IDEXX 為例),生化儀 干式 時(shí)間:8分鐘 項(xiàng)目任意(單次最多12項(xiàng)) 多種動(dòng)物不同年齡模式 試劑片,將綠色盒子存放在冰箱冷藏室, 紫色盒子存放在冰箱冷凍室里。,3,二、樣本采集與制備,全血、血清、血漿的區(qū)別? 如何根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)流程收集和制備全血、血清、血漿樣本? 樣品如何保存? 采多少樣本? 血漿樣本的檢查?,血漿=血清+纖維蛋白原 血漿=全血- 血細(xì)胞,4,二、樣本采集與制備,如何根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)流程收集和制備全血、血清、血漿樣本? 全血樣本收集 血清樣本收集 血漿樣本收集,建議頭皮針:靜脈采血,小動(dòng)物多用紫色,采血管:紅帽、綠帽、紫帽分別指示無(wú)抗凝劑、肝素鋰、EDTA,根據(jù)需求自行選擇,采集的血液需立即放入其內(nèi)。,無(wú)菌采血管:一般用2mL注射器,針頭過(guò)細(xì)易造成溶血,計(jì)數(shù)嫻熟的專業(yè)人員進(jìn)行操作,禁食、安靜的動(dòng)物:應(yīng)激可導(dǎo)致血糖顯著升高,鎂離子(Mg)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酐酸激酶(CK)磷酸酶(PHOS)可能升高。,采血視頻 點(diǎn)擊播放,5,如何根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)流程收集和制備全血、血清、血漿樣本? 血清樣本收集 全血樣本加入無(wú)抗凝劑或促凝管中,凝固取上清液 血漿樣本收集 全血樣本加入肝素鋰抗凝管中離心,取上清液,二、樣本采集與制備,為何建議使用血漿樣本進(jìn)行檢測(cè)? 比血清來(lái)的更快,血清凝固期間會(huì)造成乳酸、氨等指標(biāo)的升高,葡糖糖和總蛋白指標(biāo)的降低。血漿可實(shí)現(xiàn)快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的效果。,抗凝管為何選擇肝素鋰而非其他? EDTA、枸櫞酸鈉會(huì)影響Ca、K等指標(biāo)的偏差,6,二、樣本采集與制備,樣品如何保存?,全血保存 含肝素鋰的全血樣本必須馬上檢驗(yàn)。無(wú)法在1小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn)時(shí),樣本必須離心后,并將血漿轉(zhuǎn)移出保存。,建議您于采血后立即處理及分析樣本,可得到最佳結(jié)果。,血清、血漿保存 血清或血漿必須先與血細(xì)胞分離后才能保存。移液管小心的移至新的采血管,關(guān)緊管蓋避免污染及蒸發(fā)。不要有任何氣泡存在,會(huì)影響血清蛋白。若您無(wú)法在4小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn),冷藏保存。若您無(wú)法在48小時(shí)內(nèi)完成檢驗(yàn),冷凍保存。,7,二、樣本采集與制備,采多少樣本? 依據(jù):做多少項(xiàng)目 公式:試劑片 8,樣本總量(uL)=50uL基本量+10uLx試劑片數(shù) 試劑片 8,樣本總量(uL)=100uL基本量+10u1x試劑片數(shù),0.5 CC的全血可以得到225u1血漿,足矣!,8,血漿樣本的檢查? 為何檢查? 指示什么?,二、樣本采集與制備,不同情況下可能會(huì)影響結(jié)果,如:溶血。您可藉由這些肉眼觀察離心后的樣本,以修正您的檢測(cè)組合。,黃疽 視覺(jué):樣本呈透明淡黃色到不透明的棕色。 象征:阻塞或肝臟疾病,血管內(nèi)的溶血。 額外測(cè)試項(xiàng)目:肝臟相關(guān)酶,總膽紅素,PCV(紅細(xì)胞壓積)。,溶血 視覺(jué):樣本呈透明的淡到深紅色。 象征:紅細(xì)胞在采血中損壞或是血管內(nèi)的溶血。 額外測(cè)試項(xiàng)目:總膽紅素,PCV(紅細(xì)胞壓積),9,厚的白血細(xì)胞層 視覺(jué):白細(xì)胞層(介于血漿或血清和濃縮紅細(xì)胞之間)特別寬。 象征:白細(xì)胞和/或血小板過(guò)多。 額外測(cè)試項(xiàng)目:總白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類,血小板計(jì)數(shù)。,二、樣本采集與制備,血漿樣本的檢查? 指示什么?,血脂 視覺(jué):樣本呈蒼白色,牛奶狀,甚至有浮游的脂肪球狀顆粒。 象征:最近食用脂類食物或脂肪代謝功能不足。 額外測(cè)試項(xiàng)目:血脂和肝臟相關(guān)酶。,10,三、檢測(cè)指標(biāo)及臨床選擇,內(nèi)分泌: 堿性磷酸酶(AKP) 肌酸激酶(CK-NAC) 葡萄糖(GLU-0X) 膽固醇(CHOL) 鈣(Ca) 磷(P) 鈉(Na) 鉀(K) 鎂(Mg),白蛋白(ALB) 總蛋白(TP) 總膽紅素(TB) 總膽汁酸(TBA) 直接膽紅素(DBB) 谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT) r-谷氨酰轉(zhuǎn)移(r-GT) 膽堿酯酶(CHE) 堿性磷酸酶(AKP),尿素氮(BUN) 肌酐(Cr) 尿酸(UA),乳酸脫氫酶(LDH) 血鉀(K) 血鈣(Ca) 肌酸激酶(CK-NAC),血糖血脂: 葡萄糖(GLU-0X) 甘油三脂(TG) 酮體 膽固醇(CHOL) 果酸胺(FMN) 高密度脂 蛋白膽固醇(HDC-C) 低密度脂蛋白膽固醇(LDC-C),電解質(zhì): 鈉(Na) 氯(Cl) 碳酸氫鹽 鎂(Mg) 無(wú)機(jī)磷(P) 鈣(Ca),淀粉酶(AMY) 脂肪酶(LIPA),11,三、檢測(cè)指標(biāo)及臨床選擇,12,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義,同時(shí),在有些病例中,不要忘記正常的體液平衡機(jī)制干擾的影響。,如何分析測(cè)定指標(biāo)?,參考值 (點(diǎn)擊查閱),13,增高臨床意義: 脫水-嘔吐、腹瀉、休克-相對(duì)增多 慢性和免疫介導(dǎo)的疾病-細(xì)菌性傳染病和自體免疫疾病,特別是貓傳染性腹膜炎-球蛋白,特別是-球蛋白的升高。 多發(fā)性骨髓瘤、淋巴肉瘤、漿細(xì)胞瘤,總蛋白(TP),四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義-蛋白,檢測(cè)目的:總蛋白與其他檢查肝腎功能、脫水程度、有無(wú)蛋白質(zhì)流失性腸道疾病或免疫球蛋白疾病一起檢測(cè)時(shí),可提供有用的訊息。此項(xiàng)目單獨(dú)檢測(cè)時(shí)無(wú)法提出具體診斷意義,因?yàn)樗狈μ禺愋浴?降低臨床意義: 水相對(duì)增多(少見(jiàn))多為醫(yī)源性 過(guò)多的蛋白丟失-低白蛋白血癥最常見(jiàn)(最小,易丟失) 腎蛋白丟失 見(jiàn)于腎病綜合征、腎小球性腎炎、淀粉性樣變等。這可通 過(guò)檢查尿中是否存在蛋白來(lái)證實(shí)。 腸蛋白丟失(蛋白丟失性腸病) 在小動(dòng)物中,要考慮的疾病有淋巴癌、絨毛萎縮、大腸炎和嗜酸性腸炎。 出血 當(dāng)全血丟失時(shí),血漿蛋白的丟失會(huì)引起低蛋白血癥,同時(shí)存在貧血。這是評(píng)估再生性貧血,出血性貧血,還是溶血性貧血最容易的方法(如果是后者,血漿蛋白不會(huì)下降)。 燒傷 大面積皮膚燒傷滲出血清,可引起低蛋白血癥。 蛋白合成的下降-營(yíng)養(yǎng)不良、吸收障礙、肝衰,14,白蛋白(ALB),。 。,球蛋白(GLOB),球蛋白(GLOB)=總蛋白(TP)-白蛋白(ALB) 隱藏項(xiàng)目,當(dāng)同時(shí)檢查TP與ALB時(shí),結(jié)果會(huì)自動(dòng)生成,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義-蛋白,15,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義-酶,谷丙轉(zhuǎn)氨酶/丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT),來(lái)源:主要存在于肝臟(犬貓)、心臟和骨骼肌中(大動(dòng)物)。,在犬貓方面,此酶對(duì)肝臟具有特異性。A LT存在于細(xì)胞質(zhì)中,當(dāng)細(xì)胞膜通透性改變或細(xì)胞壞死時(shí)它會(huì)被釋放到血液中。,檢驗(yàn)?zāi)康模喝埖母闻K有無(wú)受損。,作用:催化丙氨酸和酮戊二酸轉(zhuǎn)氨生成丙酮酸和谷氨酸。,檢查適應(yīng)癥:腹瀉、黃疸、腹水、精神不振和厭食,以及難以診斷的疼痛時(shí)。,ALT值升高: 肝病:見(jiàn)于肝壞死、肝腫瘤、脂肪肝及肝炎、肝硬化、肝膿腫和肝膽炎時(shí)。肝臟損傷(自然、手術(shù)、外傷) 藥物:氯丙嗪 、利福平 、紅霉素、氯霉素、四環(huán)素、慶大霉素、皮質(zhì)類固醇抗驚厥藥(撲癲酮、苯巴比妥)等藥物。 中毒:四氯化碳,鉛、汞等重金屬,砒霜等中毒 傳染病:犬傳染性肝炎、貓傳染性腹膜炎、鉤端螺旋體病。 ALT值降低:沒(méi)有意義。,16,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義-酶,谷草轉(zhuǎn)氨酶/天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST),作用:AST催化天門冬氨基酸和酮戊酸轉(zhuǎn)氨生成草酰乙酸和谷氨酸。 來(lái)源:廣泛地分布于機(jī)體中,特別是骨骼肌、心肌、肝臟和紅細(xì)胞。,檢驗(yàn)?zāi)康模簷z查肝臟,心肌或骨骼肌有無(wú)受損。此酶對(duì)任何器官或組織受損都不是一項(xiàng)專一或敏感的指標(biāo)。,AST升高:心肌疾病、骨骼肌疾病、肝細(xì)胞受損、人為誤差(溶血) AST降低:沒(méi)什么意義,17,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義-酶,ALP(ALKP):堿性磷酸酶,ALP是體內(nèi)分布最廣泛的酶之一,主要存在于肝臟和骨骼中;血漿ALP正常值的范圍非常廣;成骨細(xì)胞活性較高的幼年動(dòng)物,其ALP水平較高。,骨源性ALP的升高,通過(guò)肝實(shí)質(zhì)性酶的不升高和黃疸缺乏,很容易與肝膽疾病區(qū)別。 膽道疾病,特別是阻塞,會(huì)引起血漿ALP的大量升高,可通過(guò)ALP的顯著升高而肝實(shí)質(zhì)性酶不發(fā)生任何變化來(lái)鑒別。,18,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義-酶,(CK)CPK:肌酸激酶,存在于骨骼肌、心肌和腦等組織的細(xì)胞漿和線粒體中。檢驗(yàn)?zāi)康氖菣z查骨骼肌或心肌有無(wú)受損。最常見(jiàn)的異常原因是外傷或過(guò)度運(yùn)動(dòng)造成骨骼肌的病變。 增高:心肌炎、心肌梗塞;腦血管意外、腦膜炎、腦梗死、腦缺血;皮肌炎、肌營(yíng)養(yǎng)不良、肌肉損傷、甲狀腺機(jī)能減弱、肺水腫、肺梗死、肌肉物理性損傷。 降低:血樣放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(2小時(shí)),AMYL:淀粉酶,主要存在于胰腺中,通常通過(guò)腎臟排泄。臨床上主要用于診斷急性壞死性胰腺炎。在該疾病中,淀粉酶從細(xì)胞中漏出,并開(kāi)始消化自己的組織。有急性腹痛和嘔吐的癥狀,可能會(huì)被誤認(rèn)為是小腸內(nèi)有異物,如果不能確定的話,就應(yīng)該檢查淀粉酶(和脂肪酶)。,輕度到中度的非特異性的升高,可見(jiàn)于其它急性的腹部疾病(包括腸梗阻)和腎衰。,19,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義,檢驗(yàn)此項(xiàng)目的主要目的:檢測(cè)碳水化合物的代謝情形。,葡萄糖(GLU),增高: 生理性高血糖:餐后 緊張 興奮 疼痛 注射可的松 病理性高血糖:糖尿病、胰腺炎、酸中毒、癲癇、抽搐、顱外傷、顱內(nèi)出血、腦膜炎、腎上腺皮質(zhì)機(jī)能亢進(jìn)、甲狀腺和腦垂體前葉功能亢進(jìn)以及頻死期 降低: 生理性低血糖:饑餓 病理性低血糖:胰島B細(xì)胞增生或瘤,垂體前葉功能減退、腎上腺功能減退、肝病后期、甲狀腺和腦垂體前葉功能減退、壞死性腸炎、消化吸收不良、慢性貧血。,膽固醇(CHOL),檢驗(yàn)?zāi)康模菏羌谞钕俟δ艿拖碌闹羔槨W畛R?jiàn)的異常原因:甲狀腺功能低下。,20,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義,肌酐(CREA),肌酐是肌肉代謝過(guò)程中肌胺酸降解的產(chǎn)物。每天產(chǎn)生的量是相當(dāng)穩(wěn)定的,不會(huì)隨年齡、飲食、運(yùn)動(dòng)或損傷作用而改變。經(jīng)腎臟過(guò)濾及腎小管分泌排出體外。血漿肌酐濃度的變化只與肌酐的排泄有關(guān),也就是說(shuō),它更準(zhǔn)確反映了腎的功能。,既然肌酐比尿素對(duì)腎衰更特異更敏感,為什么還要同時(shí)測(cè)定尿素呢? 1、肌酐在血漿樣品中易變質(zhì)。 2、有些物質(zhì)容易干擾肌酐的檢測(cè),膽紅素降低肌酐濃度,頭孢增加肌酐的濃度。 3、由于尿素受許多因素影響,故尿素的測(cè)定也可以為病畜提供比肌酐更多的信息。,降低沒(méi)有臨床意義;增加到250mol/L左右時(shí),可能是腎前性的原因引起的(脫水或心衰);超過(guò)該值時(shí),腎是有問(wèn)題的(除非存在膀胱破裂或尿道阻塞);當(dāng)血漿肌酐的濃度超過(guò)500mol/L時(shí),情況就十分嚴(yán)重了;濃度超過(guò)1000mol/L的情況,見(jiàn)于腎衰后期、膀胱破裂和尿道阻塞。,21,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義,尿素氮(BUN),蛋白質(zhì)分解后產(chǎn)生的氨具有相當(dāng)?shù)亩拘裕鼤?huì)在肝臟中轉(zhuǎn)變成尿素并由腎小管濾過(guò)后排出體外。,檢驗(yàn)主要目的是腎臟疾病的指標(biāo)。腎衰實(shí)際上只是可以影響血漿尿素濃度的疾病之一,當(dāng)心基于尿素濃度升高把心臟疾病誤診為腎衰的情況。 還是監(jiān)測(cè)慢性心衰治療效果的一種有效方法。 當(dāng)血漿尿素水平高于60mmol/L時(shí),治愈希望很小(除非進(jìn)行腎移植技術(shù)),建議安樂(lè)死。治療腎衰方法主要是喂低蛋白、低鉀、低鎂、低磷的食物,從而降低腎臟的排泄壓力;多飲水,防止脫水的發(fā)生。,22,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義,膽紅素(TBIL),檢驗(yàn)主要目的:檢測(cè)阻塞型肝病。 注意:健康的犬貓總膽紅素的濃度相當(dāng)?shù)?。通常先用肉眼觀察樣本后可決定是否需要檢驗(yàn)?zāi)懠t素。,23,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義,鈣(Ca),24,四、主要檢測(cè)指標(biāo)臨床意義,磷(PHOS),與Ca一樣,血漿濃度也是被甲狀旁腺激素和維生素D調(diào)控的。檢驗(yàn)主要目為判讀腎臟疾病嚴(yán)重程度的指標(biāo)。最常見(jiàn)的異常原因?yàn)槟I衰竭及胃腸炎。,血清磷受食物、體內(nèi)激

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