臨床檢驗方法的評價CLSIEP文件.ppt

臨床檢驗方法的評價,郭健衛(wèi)生部臨檢中心,方法評價,方法選擇,常規(guī)分析前準備,常規(guī)分析,樣品,統(tǒng)計質(zhì)控,報告結(jié)果,預(yù)防措施,方法發(fā)展,分析方法分級,決定性方法（definitivemethod）：經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準確度或不確定性原因的方法。參考方法（referencemethod）：經(jīng)詳盡研究證實其不準確度與不精密度可以忽略的方法。常規(guī)方法（routingmethod）：可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法。,常規(guī)方法,參考方法,決定性方法,準確度增加,應(yīng)用范圍增加,不同方法的關(guān)系,標準品（referencematerial）：充分均勻并具有一個或多個良好確定的特性值的材料或物質(zhì)，用來校準儀器設(shè)備、評估測定方法或給其它物質(zhì)賦值。一級標準品（原級參考物）：穩(wěn)定、均一，由高度準確的若干方法定值，可用于校準決定性方法及為二級標準品定值。二級標準品：用一級標準品校準，參考方法定值。校準品：用二級標準品校準，擬被用于校準的常規(guī)方法定值。用于對常規(guī)方法和儀器的校準。,標準品分級,參考方法,決定性方法,廠家方法,常規(guī)分析,一級標準品,二級標準品,校準品,準確度的傳遞,溯源,校準,儀器參數(shù)試劑,人血清無機成分分析標準物質(zhì)GBW09135血清膽固醇標準物質(zhì)GBW09138,一級標準物質(zhì),二級標準物質(zhì),紅細胞微粒標準物質(zhì)GBW（E）090001膽紅素標準物質(zhì)GBW（E）090002氰化高鐵血紅蛋白溶液標準物質(zhì)GBW（E）090004純化血紅蛋白標準物質(zhì)GBW（E）090011,評價內(nèi)容：初步評價（NCCLSEP10）精密度（NCCLSEP5）對比及偏差（NCCLSEP9）線性（NCCLSEP6）抗干擾能力（NCCLSEP7）基質(zhì)效應(yīng)（NCCLSEP14）臨床準確度（敏感性和特異性）（NCCLSGP10，ROC曲線）,方法的評價,NCCLS文件EP9-A,用患者樣本進行方法對比及偏差評估,批準指南,2019年12月,評價兩種分析方法（同一分析項目）的偏差。,評價要求：,熟悉儀器操作熟悉評價方案質(zhì)控足夠的數(shù)據(jù)（最少5個工作日，40個樣本）,用途：,目的：引進新方法前或用一種方法替代另一種方法時進行偏差分析。,實驗樣本：來源于健康人或患者，無干擾，盡量避免貯存。,對比方法：廠家要求的實驗室常規(guī)方法或公認的參考方法。具有好的精密度沒有已知的干擾物相同單位相對國家標準或參考方法的偏差是已知的,測定范圍：醫(yī)學決定水平范圍內(nèi)（均勻分布）樣本數(shù)：至少40例，增加可提高可信性。測定方法：兩種方法分別做雙份測定。測定順序：每天：1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2、1,測定次數(shù)：每天分別用兩種方法進行測定，至少測定5天，共40個樣本數(shù)據(jù)監(jiān)督：系統(tǒng)誤差、人為誤差質(zhì)控：常規(guī)質(zhì)控,熟悉儀器及方法收集數(shù)據(jù)檢查方法內(nèi)的離群點界限：（雙份測定）相對差值均值的4倍,實驗步驟,繪圖,均值散點圖（X，Y）所有值散點圖（Yij，Xi）偏差圖散點圖（Yij-Xij），Xi）,均值散點圖（X，Y）,偏差圖：每次測定的Y均值與X均值之差-相應(yīng)X均值圖,線性相關(guān)目測檢查兩種方法間離群值目測檢查界限：4倍兩種方法間絕對偏差的均值絕對差值允許范圍:相對差值允許范圍:,適合范圍計算r，r2=0.95范圍適合r20.95擴大數(shù)據(jù)范圍線性回歸計算均勻離散度的直觀檢查,預(yù)期偏差及可信范圍線性回歸方程計算偏差（高、中、低3組）解釋實驗結(jié)果并與內(nèi)部標準比較,定量分析方法的線性評價,EvaluationofTheLinearityofQuantitativeAnalyticalMethodsEP6-P,目的,為實驗室中采用定量分析方法的用戶提供評價儀器或方法是否滿足廠家線性指標的評價方法。用戶可為分析方法設(shè)定線性范圍。,定義,AssayRange（LinearRange)Therangeofconcentrationoractivityinwhichthefinaloutputvalueofasystemisproportionaltotheanalyteconcentrationoractivitywithinastatedtolerance.,定義,Linearity:Themeasureofthedegreetowhichacurveapproximatesastraightline.Itreferstooverallsystemresponse(i.e.,thefinalanalyticalanswerratherthantheinstrumentoutput),ScopeandLimitations,線性是分析方法的一個特征，不同于準確性和精密度。線性實驗應(yīng)該使用與待分析物基質(zhì)相似的樣本。線性檢驗系統(tǒng)反應(yīng)，包括校準、線性化技術(shù)、系數(shù)和儀器反應(yīng)。,使用者的需求,用簡單的實驗來檢驗廠家標示的線性范圍及定量分析方法的分析范圍。在實驗室中作為方法學的信息（方法線性）。進行線性評價實驗。,儀器的熟悉過程,執(zhí)行分析過程的實驗室人員必須掌握儀器操作和維護程序、樣本準備方法和校準。對較簡單的設(shè)備需要5天或更少時間。對較復(fù)雜的多通道設(shè)備需要5天或更長時間。,實驗周期,在完成儀器熟悉過程后開始實驗并收集數(shù)據(jù)。全部實驗和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi)完成。,線性評價實驗,樣本要求：最少4個濃度水平，推薦5個水平?；|(zhì)效應(yīng)：應(yīng)使用與病人樣本相似的樣本或注明基質(zhì)類型。,可以使用的樣本,病人混合血清理想的樣本基質(zhì)高值樣本：高于上限30%低值樣本：線性低限或更低。,可以使用的樣本,Patient-SamplePoolSpikedwithAnalyte加入品在沒有干擾物存在時不需高純度。PoolDilutedwithTreatedPoolMaterial用于降低分析物濃度，如：透析、熱處理、層析。,可以使用的樣本,PoolDilutedwithSaline。在線性實驗中使用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng)。CommercialControl/CalibratorMaterial此類樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實際的線性結(jié)果。,可以使用的樣本,Underdiluted/OverdilutedCommercialControlMaterialAqueousSolutions（一般無基質(zhì)效應(yīng)）SolutioninOtherSolvents（基質(zhì)效應(yīng)與有機溶劑相似）,推薦的樣本添加材料,ALB：白蛋白干粉、humanfractionV.乙醇：無水乙醇ALP：純酶AMS：腮腺或胰腺提取物BIL：膽紅素純品Ca:CaCO3Cl:NaCl,推薦的樣本添加材料,CHOL：膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品CO2：CaCO3CREA：標準液或高值血清-ALT：純酶GLU：右旋糖AST：純酶ALT：純酶,推薦的樣本添加材料,HBD：純酶LDH：純酶Lipase：胰腺提取物Mg：MgCl2P:K(H)2PO4或Na(H)PO4TP：白蛋白干粉、人或牛的成份VUA：在得不到高值病人樣本時，使用標準儲備液或干燥尿酸。BUN：在得不到高值病人樣本時，使用標準儲備液或干燥尿素。,樣本分析順序,分析序列應(yīng)為隨機排列。有顯著攜帶污染時，應(yīng)用空白隔開樣本。每個實驗組內(nèi)應(yīng)至少分析4個（最好是5個）不同濃度水平的樣本。,樣本濃度范圍,應(yīng)覆蓋待評線性范圍的上、下限。評價結(jié)果不滿意時應(yīng)重新設(shè)定濃度。線性范圍內(nèi)至少應(yīng)保留有4個濃度。,樣本的準備,足量的混合血清。低濃度混合血清（No1）；高濃度混合血清（No5）血清（No2）：3份“No1”+1份“No5”血清（No3）：2份“No1”+2份“No5”血清（No4）：1份“No1”+3份“No5”,樣本濃度計算,C1V1+C5V5濃度=-V1+V5,數(shù)據(jù)收集,x1y1-1y1-2y1-3y1-4x2y2-1y2-2y2-3y2-4x3y3-1y3-2y3-3y3-4x4y4-1y4-2y4-3y4-4x5y5-1y5-2y5-3y5-4,數(shù)據(jù)評價,觀察有無明顯的數(shù)據(jù)錯誤。若有明顯異常時應(yīng)判斷是否為離群點。如離群點超出2點，則保留全部數(shù)據(jù)或重做全部實驗。,離群點檢查,用于特定濃度Y值離群點的檢驗。將4個重復(fù)值從大到小排列（Y1到Y(jié)4）。計算：D=Y1-Y4若Y1可能是離群點，計算：D1=（Y1-Y2）/D若Y4可能是離群點，計算：D4=（Y3-Y4）/D,離群點判斷,判斷值（Criticalvalue)(0.05)0.765(0.01)0.889,繪圖和評價,線性X-Y圖，X軸為分析物濃度。反應(yīng)值或儀器輸出值為Y軸。目測離群值。(Y=aX+b)目測線性判斷是否符合要求。進行統(tǒng)計學判斷和評價。,注意：,統(tǒng)計學標準和臨床可接受限不同。慎用方法學線性范圍從0開始。有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評價中：最小的線性濃度醫(yī)學決定水平最大的線性濃度,參考文獻,DixonW.J.andMasseyF.J.introductiontostatisticalanalysis,3rdedition,McGraw-HillBookCo.,NewYork,1969,pp308-310,500,536-537.WeissbergA.andBeattyG.H.Tablesoftolerance-limitfactorsfornormaldistributions,Technometrics2:4,1960Graybill,FranklinA.Anintroductiontolinearstatisticalmodels,volumeI,McGraw-HillBookCompany,1961,p191.,臨床化學設(shè)備的精密度評價,EvaluationofPr