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生物化學(xué)知識(shí)點(diǎn)綜述第一章 糖類化學(xué)本章在各類型考試中考察的是一些細(xì)節(jié)性的知識(shí),具體有以下一些知識(shí)點(diǎn):1 糖的定義和分類:糖主要由C、H、O三種元素所組成,是一類多羥基醛或多羥基酮,或者是它們的縮聚物或衍生物。根據(jù)能否水解以及可水解成多少個(gè)單糖而分為單糖、寡糖(含2到10個(gè)單糖分子)和多糖(10個(gè)以上單糖分子)。以葡萄糖為代表的單糖的分子結(jié)構(gòu)(特別是旋光異構(gòu)現(xiàn)象)、分類、物理化學(xué)性質(zhì),還有一些重要的單糖要記。圖示:2 比較三種主要雙糖(蔗糖、糖乳和麥芽糖)的組成、連接鍵的種類及其環(huán)狀結(jié)構(gòu)。圖示:3 淀粉、糖原、纖纖素的組成單位和特有的顏色反應(yīng)及生物學(xué)功能,在考卷中出現(xiàn)相對(duì)頻繁。圖示4 糖胺聚糖、糖蛋白、蛋白聚糖的定義及鍵的連接方式。說明:5 常用的鑒別核糖、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉的方法。最簡(jiǎn)便的方法是顯色法。見下表:核糖葡萄糖果糖蔗糖淀粉碘液發(fā)藍(lán)色鹽酸、間苯二酚試劑綠色淡紅色紅色費(fèi)林或本尼迪特試劑紅黃色紅黃色紅黃色加溴水褪色褪色6 了解糖的生理功能(1) 是構(gòu)成生物體的重要成分之一,約占體重的2%左右。(2) 提供生理活動(dòng)所需能量的70%。(3) 參與組成細(xì)胞結(jié)構(gòu)的成分,如染色質(zhì)、生物膜等(4) 參加抗體,部分酶和激素、血型物質(zhì)的合成以及參與細(xì)胞的識(shí)別等第二章 脂類化學(xué)本章知識(shí)一般嚴(yán)選擇題、填題和判斷題中出,考點(diǎn)主要是以下幾個(gè)方面:1 脂類的概論、分類及功能。按組成分類:三酰甘油脂(三脂酰甘油)、磷脂、類脂及結(jié)合脂。2 脂肪酸的特征:鏈長(zhǎng)、雙鍵的位置、構(gòu)型。3 自然界常見的脂肪酸。必需脂肪酸的定義及種類。4 三脂酰甘油的性質(zhì):皂化、酸敗、氫化、鹵化和乙?;?。5 甘油磷脂和鞘磷脂的組成、種類和性質(zhì)。6 血漿脂蛋白的種類。7 膽固醇的結(jié)構(gòu)及其衍生物。第三章 蛋白質(zhì)本章內(nèi)容應(yīng)屬于考試的重點(diǎn),應(yīng)熟悉概念、原理、機(jī)制、理化性質(zhì)等。在名詞解釋、填空題、判斷題、選擇題、簡(jiǎn)答題、論述題以及計(jì)算題等各種題型中都有出現(xiàn)。主要涉及以下一些知識(shí)點(diǎn):1 蛋白質(zhì)的組成,特別是蛋白質(zhì)中氮的平均含量(16%)經(jīng)常在填空題和計(jì)算題中出現(xiàn)。2 組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸的三字符號(hào)和單字符號(hào),20種氨基酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)(除甘氨酸外,均屬L氨基酸)和分類。(1)根據(jù)側(cè)鏈基團(tuán)(R)的極性分類非極性R基氨基酸:Ala Leu Ile Pro Phe Trp Met 不帶電荷的極性R基氨基酸:Gly Ser Thr Cys Asn GlnTyr 帶正電荷的R基氨基酸:Lys Arg His 帶負(fù)電荷的R基氨基酸:Asp Glu(2)根據(jù)人體能否自身合成分為必需氨基酸:Val Leu Ile Thr Met Lys Phe Trp 非必需氨基酸:其余(3)兩種特殊氨基酸脯氨酸:沒有自由的氨基,它是一種亞氨基胱氨酸:是關(guān)半胱氨酸在蛋白質(zhì)中的主要存在形式3 氨基酸物理化學(xué)性質(zhì):旋光性可作一般性的了解,而酸堿性、氨基、羧基以及氨基和羧基共同參加的反應(yīng),特別是等電點(diǎn)及其計(jì)算和測(cè)定方法、氨基酸在不同pH條件下的泳動(dòng)情況常在試題中出現(xiàn)。4 分離方法:紙層析法和離子交換層析法的原理和實(shí)驗(yàn)方法常在考題中出現(xiàn)原理。氨基酸自動(dòng)分析儀的使用要了解。5 氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)參加的反應(yīng)作為鑒定氨基酸的方法,常用的有:色氨酸的乙醛酸反應(yīng)(Ehrlish);酪氨酸米倫氏(Millon);苯丙氨酸的黃色反應(yīng);組氨酸的波利(Pauly)(也可以檢驗(yàn)酪氨酸)等。常常在選擇題和氨基酸的序列分析中出現(xiàn)。6 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)(蛋白質(zhì)分子中氨基酸的排列順序,以肽鍵為主鍵或有少量的二硫鍵為副鍵構(gòu)成的)及高級(jí)結(jié)構(gòu)包括二級(jí)結(jié)構(gòu)(包括螺旋結(jié)構(gòu),折疊片層以及轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲,以氫鍵維持其穩(wěn)定性)、三級(jí)結(jié)構(gòu)(維系結(jié)構(gòu)的非共價(jià)健有:氫鍵、離子鍵、疏水鍵、二硫鍵,主要靠次級(jí)鍵疏水作用、離子鍵、氫鍵和分子間作用力等)、四級(jí)結(jié)構(gòu)(蛋白質(zhì)亞基之間以非共價(jià)鍵締合,主要靠次級(jí)鍵維系。具有蛋白四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)有血紅蛋白、乳酸脫氫酶等,肌紅蛋白不具有四級(jí)結(jié)構(gòu))的定義及類型和維持力是??碱}。亞基與蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)這兩個(gè)概念的辨析。血紅蛋白和肌紅蛋白氧合曲線的差異在考題中也時(shí)有出現(xiàn)。7 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)(兩性電離、膠體性質(zhì)、沉淀、變性、凝固、呈色反應(yīng)、紫外吸收等):其中蛋白質(zhì)的變性是重點(diǎn),名詞解釋及辨析里經(jīng)???。蛋白質(zhì)的變性是指以物理或化學(xué)方法瓦解蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象,破壞了維持二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)的力量,一般不影響其初級(jí)結(jié)構(gòu)。變性蛋白質(zhì)的性質(zhì)必須掌握:a.生物活性消失;b.維系二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵被破壞;c.易被蛋白質(zhì)酶水解;d.-SH等基團(tuán)之反應(yīng)活性增加等。8 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的測(cè)定:蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定或稱序列分析常用的方法是Edman降解和重組DNA法。前者是經(jīng)典的化學(xué)方法,后者是基于分子克隆的分子生物學(xué)方法。重組DNA測(cè)序法首先需要得到編碼某種蛋白質(zhì)的基因(DNA片段) ,然后測(cè)定DNA分子中核苷酸的排列順序。再根據(jù)三個(gè)核苷酸編碼一個(gè)氨基酸的原則扒演出氨基酸的排列順序。不必首先純化該種蛋白質(zhì)。這一復(fù)雜的過程借助于計(jì)算機(jī)的幫助可變得比較簡(jiǎn)單并高效。而Edman化學(xué)降解法則比較復(fù)雜。這首先需要純化一定量的待測(cè)蛋白質(zhì)裂解成大小不同的肽段;將每一肽段作序列分析,再連接起來。兩種方法各有其特點(diǎn)??梢韵嗷ビ∽C和補(bǔ)充。在Edman化學(xué)降解中,常用肽羰與異硫氰酸苯酯反應(yīng),再用次序稀酸處理,成為異硫氰酸苯酯衍生物,用層析進(jìn)行鑒定??勺鳛镹末羰鑒定的化學(xué)試劑還有FDNB、DNS-CL等,C-末端分析常用羧基肽酶??碱}中多以Edman降解出現(xiàn)。蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)的測(cè)定方法中常用的是X放射線晶體衍射法。9 蛋白質(zhì)的分離與合理化是我們強(qiáng)調(diào)的本章的一個(gè)重點(diǎn)。生化專業(yè)的碩士研究生無非就是做這些工作。這部分內(nèi)容容易出問題,建議大家逐字背下。通常分離、純化蛋白質(zhì)的一般原理和方法:(1) 丙酮沉淀及鹽析:鹽析是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液,破壞蛋白質(zhì)在水溶液中的穩(wěn)定性因素而沉淀。各種蛋白質(zhì)在鹽析時(shí)所需的鹽濃度及pH不同。(2) 電泳:電泳是根據(jù)蛋白質(zhì)在低于或高于等電點(diǎn)(pI)溶液中帶電并在電場(chǎng)中向一極移動(dòng)原理來分離蛋白質(zhì)。帶正電荷向負(fù)極泳動(dòng),而帶負(fù)電荷向正極泳動(dòng),分子小的蛋白質(zhì)泳動(dòng)快,分子量大的泳動(dòng)慢,于是蛋白質(zhì)被分離。(3) 層析:層析是分離純化的重要手段之一。有離子交換層析、親和層析等,其中離子交換層析應(yīng)用最廣。(4) 分子篩(凝膠過濾):是層析一種,在層析柱內(nèi)填滿帶有小孔的顆粒一般是葡聚糖制成。蛋白質(zhì)溶液加之于柱之頂部,往下滲漏,這時(shí)小分子蛋白質(zhì)分子進(jìn)入凝膠微孔,大分子不能進(jìn)入,故大分子蛋白質(zhì)先洗脫下來,小分子后洗脫出來。10. 構(gòu)與功能的關(guān)系也是本章考試的重點(diǎn)??蓮亩鄠€(gè)例子去理解一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系、空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,并結(jié)合隨后章節(jié)的學(xué)習(xí)反復(fù)加深理解。例如,酶原的激活、激素原、前激素原轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘募に氐染捎辛Φ卣f明一級(jí)結(jié)構(gòu)決定空間結(jié)構(gòu),一定的空間結(jié)構(gòu)執(zhí)行一定的功能。變構(gòu)酶、變構(gòu)調(diào)節(jié)等有許多的例子,就是以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能為基礎(chǔ)。同時(shí),變構(gòu)效應(yīng)是生物體內(nèi)普遍存在的功能調(diào)節(jié)方式之一。將學(xué)習(xí)的各章節(jié)內(nèi)容進(jìn)行有機(jī)的聯(lián)系、比較,正確理解專業(yè)名詞的概念,使“概念”變成自己知識(shí)網(wǎng)上的紐節(jié),就會(huì)不斷積累蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的知識(shí),?以不變應(yīng)萬變“,去應(yīng)答研究生入學(xué)考試中各種可能的出題方式。第四章 酶酶這一部分很重要,近幾年來生物化學(xué)的熱點(diǎn)由核酸轉(zhuǎn)向蛋白質(zhì),而人體各功能的實(shí)現(xiàn),最終還需依靠酶來完成,有關(guān)酶的概念和化學(xué)本質(zhì)經(jīng)常在各地的研究生入學(xué)考試題中出現(xiàn),主要有以下一些考點(diǎn):1 酶的分子結(jié)構(gòu):主要是考查一些基本概念:?jiǎn)渭兠?、結(jié)合酶、全酶、輔基和輔酶、必需基團(tuán)、活性中心、結(jié)合基團(tuán)、催化基團(tuán),結(jié)合結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系,論述酶原激活的化學(xué)本質(zhì),以乳酸脫氫酶(LDH)為例,描述同工酶的概念。2 酶促反應(yīng)的特點(diǎn):這一部分內(nèi)容出現(xiàn)的頻率也圈套,希望大家能記住。其特點(diǎn)主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:(1) 高效充,少量的酶在極短的時(shí)間內(nèi)即可催化大量的反應(yīng);(2) 度特異性:酶的專一性主要是由酶特定的結(jié)構(gòu)決定的,一種酶作用于一種化合物,進(jìn)行一種類型的反應(yīng);(3) 酶促反應(yīng)沒有副作用;(4) 酶的催化作用是受調(diào)控的。3 酶的分類也在許多試卷上出現(xiàn)過,特別是在代謝中,有重要功能的一些酶歸屬于哪一類的問題,下表進(jìn)行舉例:酶分類編號(hào)舉例分類編號(hào)舉例氧化還原酶1谷氨酸脫氫酶EC1.4.1.3轉(zhuǎn)移酶2天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶EC2.6.1.1水解酶3精氨酸酶EC3.5.3.1裂解酶4果糖二磷酸醛縮酶EC4.1.2.13異構(gòu)酶5磷酸葡萄糖異構(gòu)酶EC5.3.1.9合成酶5谷氨酰胺合成酶EC6.3.1.24 酶活力(或酶活性表示法)用反應(yīng)初速度表示酶活力。酶活力單位:U;酶的比活力:U/mg蛋白質(zhì)。5 酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)部分建議大家把公式跟四種抑制的圖形記下來。填空中可以考察每種抑制的kmVm的變化情況-圖形記住了,kmVm的變化也就輕松了,不然老混淆。其中也有幾個(gè)概念:最適pH、最適溫度、酶的比活性。(1) 底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響:一般來說,在其因素不變的情況下,底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度影響的作圖呈雙曲線,具體來說:a. 當(dāng)作用物濃度(S)很低時(shí),反應(yīng)速度(V)隨S增高而成直線比例上升。b. 當(dāng) S繼續(xù)增高時(shí),V也增高,但不成比例。c. 當(dāng)S達(dá)到一定高度時(shí),V不再隨S增高而增高,反應(yīng)達(dá)到最大速度(Vmax)。在這一部分,米氏議程及其應(yīng)用,km的意義用及其求法是出現(xiàn)最頻繁的考點(diǎn)。米氏方程為:VmaxSKm+SV = 其中km為米氏常數(shù)。其意義為:a. V=1/2Vmax時(shí),km=S,即km為反應(yīng)速度最大速度一半時(shí)的S。km為酶的特征常數(shù),單位為mmol/L。不同酶有不同的km值,同一酶催化不同底物則有不同的km值 。各同工酶的km值也不同,可借km值 鑒別之。b. Skm時(shí),米氏方程分母中的km可忽略不計(jì),此時(shí)V=Vmax,即反應(yīng)速度達(dá)到最大速度Vmax。c. 當(dāng)Skm時(shí),米氏方程分母中S忽略不計(jì),此時(shí)V與S成正比。d. 當(dāng)k3很小時(shí),kmk-1/k1ES/ES,因此km值大小反映酶與作用物親和力的大小。Km小,反映酶對(duì)作用物親和力大;km大則反映酶與作用物親和力小。雙倒數(shù)作圖法是求km和Vmax最常用的作圖法。它將米氏方程作倒數(shù)處理,得下式: 以1/V對(duì)1/S作圖,可得一直線,從縱軸處的截距1/Vmax及橫軸上的截距-1/km,可準(zhǔn)確求得km值和Vmax。1/V=Km/Vmax(1/S)+1/Vmax (2) 酶濃度的影響:當(dāng)作用物濃度足夠大時(shí),V與E成正比。這一部分只是作為一個(gè)選擇項(xiàng)在選擇題中出現(xiàn)過。(3) pH的影響:需明確最適pH不是酶的特征常數(shù),而且并不是所有的最適pH都近中性,如胃蛋白酶的最適pH值為1.5,精氨酸酶的最適pH為9.8(4) 溫度的影響,其特點(diǎn)在一般的起得早中經(jīng)常出現(xiàn)。溫度對(duì)酶促反應(yīng)的影響有如下幾個(gè)特點(diǎn):a. 從低溫開始,隨溫度增加,反應(yīng)速度加大。b. 達(dá)到一定溫度后,反應(yīng)速度達(dá)到最大,此溫度為酶的最適溫度。溫血?jiǎng)游锩傅淖钸m溫度一般在3740,最適溫度不是酶的特征性常數(shù)。c. 當(dāng)溫度繼續(xù)升高,酶蛋白變性增加,反應(yīng)速度開始下降。d. 酶活性隨溫度而,但低溫一般不使酶破壞。e. 若酶捉反應(yīng)進(jìn)行時(shí)間短暫,其最適溫度可相應(yīng)提高。(5) 抑制劑的影響:分為不可逆抑制作用和可逆抑制作用,其中以可逆作用出現(xiàn)的偏多??赡嫘砸种谱饔茫哼@類抑制劑與酶的結(jié)合是可逆的,清除抑制劑后酶活性可以恢復(fù)的抑制作用。有三類:a. 競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑;b. 非單鍵性抑制劑c. 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑當(dāng)這三類可逆性抑制劑存在時(shí),作用物與酶促反應(yīng)速度的關(guān)系見下圖和下表:競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑無抑制劑非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑各種可逆性抑制作用的比較作用特征無抑制劑競(jìng)爭(zhēng)性抑制非競(jìng)爭(zhēng)性抑制反競(jìng)爭(zhēng)性與I結(jié)合的組分EE、ESES動(dòng)力學(xué)參數(shù)表觀kmKm增大不變減小最大速度Vmax不變降低降低林-貝氏作圖斜率Km/Vmax增大增大不變縱軸截距1/ Vmax不變?cè)龃笤龃髾M軸截距-1/ Vmax增大不變減小(6) 激活劑的影響:常見的增長(zhǎng)點(diǎn)是Cl-對(duì)唾液淀粉酶活性的影響。6 酶作用機(jī)制:有專一性機(jī)理(鎖與鑰匙學(xué)說和誘導(dǎo)契和假說)和高效性的機(jī)理,以后者出現(xiàn)偏多,而且考查的題型上也是多樣化(填寫、選擇、判斷、問答等)(1)機(jī)理的兩種學(xué)說 關(guān)于酶與作用物如何結(jié)合成中間復(fù)合物,又如何完成其催化作用有許多設(shè),為多數(shù)人贊同的是誘導(dǎo)契合學(xué)說。 過去有人認(rèn)為,酶與作用物結(jié)合時(shí)酶的活性中心結(jié)構(gòu)與作用物的結(jié)構(gòu)必須吻合,它們就如同鎖和鑰匙一樣,非常配合地結(jié)合成中間復(fù)合物。當(dāng)這種中間復(fù)合物形成時(shí),會(huì)促進(jìn)作用物的結(jié)構(gòu)發(fā)生某些化學(xué)變化(如作用物分子的鍵因扭曲、變形而斷裂等)而轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物,此即所謂酶作用的“鎖角學(xué)說“。 鎖角學(xué)說的缺點(diǎn)在于認(rèn)為酶的結(jié)構(gòu)是固定不變的,若如此,在一個(gè)酶促可逆反應(yīng)中,酶不能同時(shí)與作用物和產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)都相配合。因此又有人提出,酶分子(包括輔酶在內(nèi))的構(gòu)象與作用物的構(gòu)象原來并非恰巧吻合,只是當(dāng)作用物分子與酶分子相碰時(shí),可誘導(dǎo)酶的構(gòu)象變得能與作用物配合,然后才結(jié)合成中間復(fù)合物,進(jìn)而引起作用物分子發(fā)生相應(yīng)的化學(xué)變化。此即酶的“誘導(dǎo)契合學(xué)說“。(2)酶作用高效性的機(jī)理:體現(xiàn)在以下5個(gè)方面:a. 靠近與定向b. 變形與扭曲c. 共價(jià)催化d. 酸堿催化e. 酶活性部位的低介電區(qū)在這一部分中,還要了解某些酶的作用原理:a. 溶菌酶:活性部位有Glu35和Asp52,典型的酸堿催化b. 胰凝乳蛋白酶:活性部位有Asp102、His57和Ser195組成的電荷拉力網(wǎng)c. 羧肽酶A:含金屬離子Zn2+的酶。7 酶的調(diào)節(jié):酶調(diào)節(jié)的類型(共價(jià)調(diào)節(jié)化學(xué)修飾、酶原激活、酶含量在分子水平的調(diào)節(jié)、別構(gòu)調(diào)節(jié)等)。幾個(gè)概念也很重要:別構(gòu)酶、調(diào)節(jié)酶等。8 多酶體系,常常作用名詞解釋出現(xiàn),有時(shí)與同工酶的特點(diǎn)一起構(gòu)成選擇項(xiàng)出現(xiàn),要引起重視。9 關(guān)于抗體酶與核酶的定義及其與酶的比較近兩年在有些高校的研究生入學(xué)考試中時(shí)有出現(xiàn)。10酶的分離降純化在科研單位的研究生招生考試中出現(xiàn)得較頻繁,方法同蛋白質(zhì)的分離純化,但常常要控制溫度、pH、時(shí)間等,并且每一步驟都需測(cè)定酶的總活力和比活力,了解酶的純化倍數(shù)和回收率。第五章 核 酸本章的基本概念、理化性質(zhì)等經(jīng)常在試題中出現(xiàn),具體來說,有以下一些內(nèi)容:1.核酸分子的組成:這一部分既有核苷(酸)的名稱 ,也有核苷酸的命名規(guī)則,還包括一些稀有堿基等內(nèi)容都曾在考題中出現(xiàn)過。 基本組成單位是核苷酸,有堿基、戊糖與堿基三種成分。組成DNA的核苷酸稱脫氧核糖核苷酸(dNTP),組成RNA的核苷酸稱核糖核苷酸(NTP)。DNA與RNA的組成差異主要表現(xiàn)在戊糖及堿基成分上,如下表:戊糖堿基核苷酸RNA核糖A U C G腺苷酸(AMP) 鳥苷酸(GMP)胞苷酸(AMP) 尿苷酸(UMP)DNA脫氧核糖A T C G脫氧腺苷酸(dAMP) 脫氧鳥苷酸(dGMP)脫氧胞苷酸(dAMP) 胸苷酸(dTMP) 核苷酸的其他形式:核苷二磷酸(NDP),核苷三磷酸(NTP),環(huán)化核苷酸(cAMP、cGMP)2. DNA的分子結(jié)構(gòu)和功能(1)DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu):指DNA分子中核苷酸的排列順序及連接方式。核苷酸的排列順序代表了遺傳信息。四種核苷酸是通過3,5磷酸二酯鍵連接在一起的。(2)DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu):雙螺旋結(jié)構(gòu)中的堿基組成規(guī)則:A=T,G=C,且A+G=T+C;雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的具體內(nèi)容,Z-DNA的概念。(3)DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu):主要形式為超螺旋,生物體中最常見的超螺旋為負(fù)超螺旋。負(fù)超螺旋的存在可以使DNA雙鏈堿基對(duì)打開所需要的能量降低41KJ/mol,因而,有利于DNA的雙鏈分開。許多DNA旋轉(zhuǎn)酶的抑制劑,如萘啶酮酸,香豆霉素和新生霉毒等均可以抑制大腸桿菌的DNA復(fù)制。 (4)功能:其基本功能是作為生物遺傳信息復(fù)制的模板和基因轉(zhuǎn)錄的模板,是生命遺傳繁殖的物質(zhì)基礎(chǔ)和個(gè)體生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。3RNA的結(jié)構(gòu)和功能:RNA的結(jié)構(gòu)一般以單鏈形式存在,在局部可形成雙螺旋結(jié)構(gòu),成莖環(huán)樣或發(fā)夾結(jié)構(gòu)。(1)細(xì)胞內(nèi)RNA的種類和功能:名稱英文縮寫功能 核蛋白體RNArRNA核蛋白體組成成分信使RNAmRNA蛋白質(zhì)合成模板轉(zhuǎn)運(yùn)RNAtRNA轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸不均一核RNAhnRNA成熟mRNA的前體小核RNAsnRNA參與hnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運(yùn)小胞漿RNAScRNA/7S-RNA蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號(hào)識(shí)別體的組成成分小核仁RNASnoRNA參與rRNA的加工和修飾(2) rRNA結(jié)構(gòu)一般了解,但mRNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)、tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)、三級(jí)結(jié)構(gòu)常出現(xiàn)在考試題中。真核生物mRNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)都是單順反子,其結(jié)構(gòu)中的5端帽子和3端Poly(A)尾巴是經(jīng)曲考題tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)為三葉草型,記住“三環(huán),一柄”及其功能。含有“三環(huán)“(二氫尿嘧啶環(huán)、反密碼子環(huán)、TC環(huán)),“一柄”是(氨基酸臂)。其中反密碼子環(huán)中部的三個(gè)堿基可以與mRNA的三聯(lián)體密碼形成堿基互補(bǔ)配對(duì),解讀遺傳密碼,稱為反密碼子,次黃嘌呤(I)常出現(xiàn)于反密碼子中。氨基酸臂3末端的CCA-OH單鏈用于連接該tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)的氨基酸。TRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)呈倒L型,其中反密碼環(huán)和氨基酸臂分別位于倒L的兩端。4核酸的性質(zhì):主要是DNA的變性及復(fù)性。涉及到一些基本的概念,如:變性、復(fù)性、雜交、紫外吸收等,其中Tm值、增色效應(yīng)、減色效應(yīng)是經(jīng)常出現(xiàn)的考點(diǎn);此外,還有變性及復(fù)性DNA理化性質(zhì)的改變。許多試劑或一些物理因素,例如酸、堿、熱、低離子強(qiáng)度的影響,將使氫鍵斷裂,使DNA由起初堅(jiān)固的、螺旋形的、雙股的天然構(gòu)象分開成不規(guī)則的卷曲單鏈,叫DNA變性作用。變性DNA有理化性質(zhì)的改變,表現(xiàn)在:(1)紫外吸收增加:DNA變性作用發(fā)生在一個(gè)很窄的溫度范圍內(nèi),通常把光吸收增值一半時(shí)的溫度稱為該DNA的熔點(diǎn)或熔解溫度,用Tm表示:(2)比旋值下降:天然DNA有強(qiáng)烈的正向旋光,變性后比旋值下降(3)粘度下降:天然DNA溶液具有很高的粘度,這是由于DNA相當(dāng)堅(jiān)固的雙螺旋結(jié)構(gòu)及其長(zhǎng)棒狀的性質(zhì)所決定的。當(dāng)DNA變性雙螺旋解型 粘度急劇下降,浮力密度升高。DNA溶液加熱變性時(shí),雙螺旋的兩條鏈分開。如果將溶液迅速冷卻,兩條單鏈繼續(xù) 保持分開。但若緩慢冷卻,則兩條鏈又可發(fā)生特異的重組合而恢復(fù)成雙螺旋。因此,DNA變性在一定條件下是可逆的。變性DNA恢復(fù)其原有結(jié)構(gòu)和性質(zhì)稱為“復(fù)性”。復(fù)性后DNA的一系列物理化學(xué)性質(zhì)得到恢復(fù),如紫外吸收值 下降,粘度增加,比旋值 增加,生物活性也得到部分恢復(fù)。雜交:在DNA復(fù)性過程中,將不同的DNA單鏈分子放在同一溶液中,或者將DNA和RNA分子放在一起,雙鏈分子的再形成既可以發(fā)生在序列完全互補(bǔ)的核酸分子間,也可發(fā)生在堿基序列部分互補(bǔ)的不同的DNA之間或DNA與RNA之間。 紫外吸收:核酸溶液在260nm波長(zhǎng)處具有最大光吸收。DNA變性后,在260nm處的紫外吸收增高,稱為增色效應(yīng)(高色效應(yīng))。變性DNA,在退炎復(fù)性時(shí),其在260nm處的紫外吸收會(huì)減少的現(xiàn)象稱為減色效應(yīng)。DNA熱變性過程中,紫外吸收達(dá)到最大值的一半時(shí)第七章膜類、生物氧化和生物能學(xué)生物能考點(diǎn)很少,生物氧化考點(diǎn)分布的要略微多一些。所以我們將這三部分合并為一章經(jīng)。二、 膜這一部分的考點(diǎn),主要分布在生物膜的組成成分、影響生物膜流動(dòng)性的因素、生物膜分子結(jié)構(gòu)模型以及生物膜與物質(zhì)運(yùn)輸?shù)葞讉€(gè)方面。1生物膜的組成成分:主要由蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類組成,還有水、金屬離子等。蛋白質(zhì)分為外周蛋白和內(nèi)在蛋白。脂質(zhì)有磷脂、膽固醇、糖脂等,其中以磷脂為主要成分。2生物膜的流動(dòng)性:膜的流動(dòng)性主要決定于磷脂。影響因素很多,如鏈的不飽和程度和鏈長(zhǎng),膽固醇、鞘磷脂的會(huì)計(jì)師,膜蛋白以及溫度、pH、離子強(qiáng)度、金屬離子等,其中最主要的是鏈的不飽和程度和鏈長(zhǎng)。3生物膜分子結(jié)構(gòu)模型:這類模型很多,其中,考題中出現(xiàn)最多的是“流動(dòng)鑲嵌”模型,并且以填空、簡(jiǎn)答、選擇以及論述等多種題型出現(xiàn)。H的協(xié)同運(yùn)輸(填空、判斷、名詞以及選擇題中都有出現(xiàn))和線粒體蛋白的跨膜運(yùn)送(多為簡(jiǎn)答或論述題),此外,分泌蛋白通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的運(yùn)送在試卷呂偶爾也可見到。二、生物氧化這一部分首先要提請(qǐng)大家注意的是一些基本概念,比如:呼吸鏈、氧化磷酸化、P/O比值,底物水平磷酸化等,常作為名詞解釋出現(xiàn),并且希望能夠計(jì)算像話過程中的P/O比值,除此之外,這一部分的考點(diǎn)主要分布在以下幾個(gè)方面:7 標(biāo)準(zhǔn)自由能變化與氧化還原電位勢(shì)的關(guān)系GO,n EO,F(xiàn)(n:電子數(shù);F:法拉第常數(shù),F(xiàn)96485Cmol-1)這一部分內(nèi)容多在選擇題和填空題中出現(xiàn),偶爾也會(huì)出現(xiàn)在計(jì)算題中。FADH2(Fe-S)復(fù)合體II復(fù)合體IATP復(fù)合體IIIATP復(fù)合體IVATP磷酸化偶聯(lián)部位NADHHFMN(Fe-S)CoQCytb Cytc 1 Cytc Cytaa3 1/2O22呼吸鏈及排列順序:主要在選擇題、填空題和判斷題中出現(xiàn)。體內(nèi)有兩條呼吸鏈,分別為NADH氧化呼吸鏈和FADH2 氧化呼吸鏈。它們的P/O比值分別為3和2。組成呼吸鏈的主要成分有尼克酰胺核苷酸、黃素蛋白、鐵硫蛋白、輔酶Q及細(xì)胞色素等五類。前四類酶通過加氫和脫氫反應(yīng),傳遞作用物脫下的氫,故是遞氫體;而細(xì)胞色素可傳遞電子,故是遞電子體。其排列順序如下:8 呼吸鏈抑制劑的作用位點(diǎn):復(fù)合體I:魚藤酮、粉蝶霉素A、異戊巴比妥可與I中的鐵硫蛋白結(jié)合,阻斷電子傳遞。復(fù)合體III:抗霉素A、二巰基丙醇抑制復(fù)合體III。復(fù)合體I V:H2S、CO及CN抑制復(fù)合體IV。這一部分內(nèi)容也主要是以選擇題、填空題和判斷題出現(xiàn),但是,也曾以扒斷野孩子傳遞順序的題型出現(xiàn)過。4氧化磷酸化的作用機(jī)理:主要有化學(xué)偶聯(lián)假立、構(gòu)象偶聯(lián)假說和化學(xué)滲透假說等幾種假說。目前較為普遍公認(rèn)的學(xué)說是“化學(xué)滲透學(xué)說”(chemiosnotic theory)”。也是考試中出現(xiàn)得較多的一個(gè)考點(diǎn)。該學(xué)說認(rèn)為,電子經(jīng)呼吸鏈傳遞釋放的能量,可將質(zhì)子H從線粒體基質(zhì)側(cè)泵到內(nèi)膜外側(cè),產(chǎn)生質(zhì)子電化學(xué)梯度而積蓄能量。當(dāng)質(zhì)子順此梯度經(jīng)ATP合酶FO部分回流時(shí),其F1部分催化ADP和Pi生成ATP。5氧化磷酸化的遇聯(lián)劑和抑制劑:常以選擇題、判斷題和填空題出現(xiàn)。解偶聯(lián)劑:2,4二硝基苯酚和質(zhì)子載體等。抑制劑:寡霉素和各種離子載體。6氧化磷酸化的調(diào)節(jié):(1)ADP和ATP的調(diào)節(jié):ATP/ADPPi比值降低,可調(diào)節(jié)氧化磷酸化加速,反之減慢。(2)甲狀腺素的作用:甲狀腺素可活化許多組織細(xì)胞膜上的Na+K+ATP酶,使ATP加速分解為ADP和Pi,促進(jìn)氧化磷酸化反應(yīng)。7兩種穿梭機(jī)制:可以各種題型出現(xiàn)由于線粒體內(nèi)膜對(duì)物質(zhì)的通透性具有嚴(yán)格的選擇性,在線粒體外生成的NADH不能直接進(jìn)入線粒體經(jīng)呼吸鏈氧化,需要借助穿梭系統(tǒng)才能使2H進(jìn)入線粒體內(nèi)。體內(nèi)有兩種穿梭機(jī)制:磷酸甘油穿梭(NADHFAD2H,形成2ATP);蘋果酸天冬氨酸穿梭(NADHNADH,形成3ATP)。8ATP的利用與貯存ATP是多種生理活動(dòng)能量的直接提供者,體內(nèi)能量的生成、轉(zhuǎn)化貯存和利用,都以ATP為中心。磷酸肌酸是肌肉組織中能量的貯存形式。三、生物能學(xué)1 生物體是一個(gè)開放體系,它與周圍環(huán)境不斷地進(jìn)行物質(zhì)和能量交換,在生物體內(nèi)的生物化學(xué)反應(yīng)都是在接近等溫等壓的條件下進(jìn)行的。2 自由能和標(biāo)準(zhǔn)自由能。3 標(biāo)準(zhǔn)自由能變化與平衡常數(shù)的關(guān)系。4 生物體內(nèi)化學(xué)反應(yīng)的自由能變化。5 能量學(xué)在生物化學(xué)應(yīng)用中的某些規(guī)定6 生物體內(nèi)的高能磷酸化合物。第八章糖類代謝三大物質(zhì)代謝以糖的代謝最為重要。1糖酵解過程:是在胞漿中進(jìn)行的。(1)反應(yīng)過程分為兩個(gè)階段:葡萄糖丙酮酸(酵解途徑)兩次底物水平磷酸化1,3二磷酸甘油酸(磷酸甘油酸激酶)3磷酸甘油酸1ATP磷酸烯醇式丙酮酸(丙酮酸激酶)生成丙酮酸1ATP圖示及參與的酶:丙酮酸(乳酸脫氫酶)乳酸(2)酵解過程中的關(guān)鍵酶:糖原磷酸化酶或已糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶。產(chǎn)物為乳酸。(3)酵解過程中的能量變化:凈得兩分子ATP,兩分子NADH(無氧時(shí)作為H供體,有氧下通過呼吸鏈可生成ATP(4個(gè)或6個(gè))。(4)生理意義:迅速提供能量,給某些器官提供正常代謝所需的能量。2糖的有氧氧化過程:(1)整個(gè)反應(yīng)分為三個(gè)階段葡萄糖丙酮酸(酵解途徑,在胞液中進(jìn)行)丙酮酸(進(jìn)入線粒體,在丙酮酸脫氫酶復(fù)合體)乙酰CoA,NADHH,CO2丙酮酸脫氫酶復(fù)合體:丙酮酸脫氫酶、硫辛酸乙?;D(zhuǎn)移酶、二氫硫辛酸脫氫酶等三種酶和TPP、硫辛酸、CoA、FAD、NAD、Mg26個(gè)輔酶組成。此反應(yīng)不可逆。三羧酸循環(huán)及氧化磷酸化:部位在線粒體。圖示及參與循環(huán)的酶:(2)檸檬酸循環(huán)的關(guān)鍵酶和ATP的生成:關(guān)鍵酶是檸檬酸合成酶;異檸檬酸脫氫酶;酮戊二酸脫氫酶系。一分子乙酰CoA經(jīng)檸檬酸循環(huán)生成15分子ATP,一分子葡萄糖生成38分子的ATP。(3)檸檬酸循環(huán)的關(guān)鍵產(chǎn)物:乙酰CoA乙酰CoA是三個(gè)物質(zhì)代謝進(jìn)入三羧酸循環(huán)的共同途徑。輔酶A是?;傅妮o酶,起著轉(zhuǎn)移乙?;淖饔?,可調(diào)節(jié):控制淀粉或糖原分解為葡萄糖的速度;控制酵解的反應(yīng)速度;控制三羧酸循環(huán)的反應(yīng)速度。(4)三羧酸循環(huán)生理意義:氧化供能;是三大營(yíng)養(yǎng)素分解的最終代謝通路;是三大營(yíng)養(yǎng)素相互轉(zhuǎn)變的聯(lián)系樞紐。糖酵解和有氧氧化的比較糖的分解方式有氧氧化無氧酵解氧氣參與有無最終產(chǎn)物水和二氧化碳丙酮酸能量產(chǎn)生(一摩爾葡萄糖)肝38ATP,肌肉和大腦36 ATP2 ATP進(jìn)行部位第一階段在胞液,第二、三階段在線粒體細(xì)胞液3糖原合成和分解過程及其調(diào)節(jié)機(jī)制(1)糖原合成的過程:糖原合成酶是糖原合成的限速酶。葡萄糖合成糖原過程中共消耗2個(gè)ATP。(2)糖原分解的過程磷酸化酶是糖原分解的限速酶。糖原合成酶和磷酸化酶均具有活性和非活性兩種形式。機(jī)體的調(diào)節(jié)方式是雙重控制,即同一個(gè)信號(hào)可使一個(gè)酶處于活性狀態(tài)而另一個(gè)酶處于無活性狀態(tài)。磷酸化酶有a,b兩種形式,去磷酸化的a型是有活性的,而磷酸化的b型是無活性的。(3)肝糖原的合成和分解的調(diào)節(jié)肝臟糖原代謝主要受胰高血糖素的調(diào)節(jié),而肌肉主要受腎上腺素的調(diào)節(jié)。場(chǎng)所在胞液。糖原分解不是糖原合成的逆過程糖原合成糖原分解GG6P的酶GG6P葡萄糖激酶G6PGG6P酶引物需要不需要能量(指糖原上每生成或降解一個(gè)1,4糖苷鍵所需的能量ATPUTP消耗3個(gè)高能磷酸鍵PPi不消耗能量G1P糖原的酶G1P糖原UDPG焦磷酸化酶糖原合成酶(連接1,4糖苷鍵)分枝酶(連接連接1,6糖苷鍵)糖原G1P磷酸化酶(斷1,4糖苷鍵)糖基轉(zhuǎn)移酶(將1,6鏈連接于分枝點(diǎn)的四個(gè)殘基的葡三糖轉(zhuǎn)移到另一鏈)脫枝酶(斷1,6糖苷鍵)4糖異生是體內(nèi)血糖急需時(shí)來補(bǔ)充血糖的代謝途徑,能進(jìn)行糖異生的器官有肝、腎。糖異生的主要原料是乳酸、氨基酸及甘油。(1)糖異生過程:糖異生途徑、三碳途徑(2)糖異生的生理意義:維持血糖濃度恒定;補(bǔ)充肝糖原;調(diào)節(jié)酸堿平衡,調(diào)節(jié)依賴于酵解和糖異生途徑中的底物循環(huán)進(jìn)行調(diào)節(jié)。(3)關(guān)鍵酶:丙酮酸羧化酶,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶,果糖二磷酸酶,葡萄糖6磷酸酶。5磷酸糖途徑的過程:分為兩個(gè)階段(1)氧化反應(yīng)生成NADPH及CO2,(2)一系列基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng)。意義:提供氫原子來源;維持谷胱甘肽為還原狀態(tài);參與羥化反應(yīng)與生物轉(zhuǎn)化有關(guān)。6乙醛酸循環(huán)僅在植物和微生物中存在。(1)乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶:異檸檬酸裂解酶和蘋果酸合成酶。(2)總反應(yīng):2乙酸CoA NAD 2H2O琥珀酸CoASH NADHH第九章脂類代謝1脂肪的分解代謝脂肪分解代謝首先是脂肪的動(dòng)員,在胞液內(nèi)進(jìn)行。脂肪的動(dòng)員是以甘油三酯脂肪酶起關(guān)鍵性作用,它是脂肪分解的限速酶,也是激素敏感性脂肪酶,受多種激素調(diào)節(jié)。脂肪酸分解代謝過程:主要是脂肪酸的氧化,包括:(1)脂肪酸的活化脂酰輔酶A的生成(在胞液)在胞液中脂酰輔酶A合成酶(存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體外膜上)的作用下,由ATP提供能量,在有CoASH存在下,可將脂肪酸活化生成脂酰CoA。(2)脂酰輔酶A進(jìn)入線粒體在胞液生成的脂酰CoA需借助線粒體膜外側(cè)的肉堿脂?;D(zhuǎn)移酶I和內(nèi)側(cè)的肉堿脂?;D(zhuǎn)移酶II的作用,由肉堿將脂酰CoA攜帶至線粒體內(nèi)。此轉(zhuǎn)運(yùn)過程是脂肪酸氧化的限速步驟,肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I是氧化的限速酶。圖示:(3)脂肪酸氧化的反應(yīng)過程脂肪酸的氧化是在脂酰輔酶A的碳原子上進(jìn)行,它包括脫氫、加水、再脫氫和硫解4步反應(yīng),使脂酰輔酶A生成1分子乙酰CoA和1分子比原來少了2個(gè)碳原子的CoA脂酰。后者可再進(jìn)行脫氫、加水、再脫氫和硫解,如此反復(fù)進(jìn)行,可將偶數(shù)碳脂酰輔酶A分解成若干乙酰CoA、FADH2和NADH H。乙酰CoA經(jīng)三羧酸循環(huán)徹底氧化分解,F(xiàn)ADH2和NADH H通過呼吸鏈經(jīng)氧化磷酸化后產(chǎn)生能量。氧化是體內(nèi)主要的產(chǎn)能方式之一。1分子軟脂酸經(jīng)氧化徹底分解可凈生成129ATP。2酮體代謝:酮體是正常的代謝產(chǎn)物,在血液中含量很少。如不能正常分解,就會(huì)在血液中積累,產(chǎn)生酮血癥。長(zhǎng)期饑餓或糖尿病人會(huì)發(fā)生酮體過多癥。酮體包括乙酰乙酸、丙酮和羥丁酸,在肝臟生成。酮體的生成原料是乙酰CoA,來自脂酸氧化。酮體的生成:先生成乙酰乙酸,然后在羥丁酸脫氫酶作用下生成羥丁酸,或者脫羧生成丙酮。HMGCoA合成酶是酮體生成的限速酶。酮體的利用:肝臟沒有利用酮體的酶,而肝外許多組織有活性很強(qiáng)的利用酮體的酶:琥珀酰CoA轉(zhuǎn)硫酶,乙酰乙酰CoA硫解酶,乙酰乙酸硫解酶。肝內(nèi)生酮肝外用。乙酰乙酸和羥丁酸都先被轉(zhuǎn)化成乙酰CoA,最終通過三羧酸循環(huán)徹底氧化。圖示:CoA3脂肪酸的合成:合成部位在線粒體外的胞液內(nèi)。(1)合成原料:乙酰CoA,ATP,NADPH,HCO3及Mn2+等。乙酰CoA在線粒體內(nèi)產(chǎn)生,不能通過線粒體膜,進(jìn)入胞液需要進(jìn)行檸檬酸丙酮酸循環(huán)。圖示:(2)脂肪酸合成反應(yīng)的步驟圖示:脂肪酸合成由多酶體系催化,其核心是?;d體蛋白(ACP)。在胞液內(nèi)進(jìn)行。ACP?;D(zhuǎn)移酶ACP丙二酸單酰轉(zhuǎn)移酶酮脂酰ACP合成酶酮脂酰ACP還原酶(輔酶NADPH供氫)羥脂酰ACP脫水酶烯脂酰ACP還原酶(輔酶NADPH供氫)脂肪酸碳鏈的延長(zhǎng)酶系在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或者線粒體內(nèi)。4. 不飽和脂肪酸生成:油酸、亞油酸、亞麻酸、花生四烯酸,后三種為人體必需脂肪酸,自身不能合成。但只要食物中有亞油酸的供應(yīng),動(dòng)物亦能利用亞油酸,合成亞麻酸和花生四烯酸。5. 膽固醇的代謝:??迹?)膽固醇合成限速酶: HMGCoA還原酶,用文字要把關(guān)鍵反應(yīng)寫出來(不要求分子結(jié)構(gòu)),比如有甲羥戊酸CoA參加的那步反應(yīng)。(2)合成部位:主要是在肝臟的胞液和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。(3)合成原料:乙酰CoA 、NADPHH,它是葡萄糖、氨基酸及脂肪酸在線粒體內(nèi)的分解代謝的產(chǎn)物,需經(jīng)檸檬酸丙酮酸循環(huán)被運(yùn)至胞液。(4)合成反應(yīng)的步驟:首先需合成甲羥戊酸,最后才合成膽固醇。(5)調(diào)控:饑餓與禁食、皮質(zhì)醇、胰高血糖素抑制肝合成膽固醇,攝取高糖、高飽和脂肪膳食、胰島素及甲狀腺素增加膽固醇合成;膽固醇可反饋抑制肝膽固醇的合成。(6)膽固醇的轉(zhuǎn)化:可轉(zhuǎn)化為膽汁酸、類固醇激素、7脫氫膽固醇、膽固醇酯、維生素D等。6血漿脂蛋白的分類、組成及生理功能等也是常在考題中出現(xiàn),特別是各類型的英文縮寫要能識(shí)別:乳糜微粒CM、極低密度脂蛋白VLDL、低密度脂蛋白LDL、高密度脂蛋白HDL。第十章核酸代謝一、核苷酸代謝核苷酸代謝考查的較少,具體過程不要求掌握,但是嘌呤、嘧啶合成原料和分解產(chǎn)物,每一過程中的關(guān)鍵酶和重要的中間產(chǎn)物等一定得牢記。此外,脫氧核苷酸的生成、嘌呤和核苷酸的抗代謝物的作用及其機(jī)制,也需認(rèn)真理解。嘌呤嘧啶代謝的調(diào)節(jié)要看。一些細(xì)節(jié)留心一下:CTP的合成是在UMP的基礎(chǔ)上合成的,脫氧發(fā)生在NDP水平上。從頭合成補(bǔ)救合成合成代謝分解代謝嘌呤核苷酸代謝(一)嘌呤核苷酸代謝1從頭合成分為兩個(gè)階段:(1)生成次黃嘌呤核苷酸合成原料:天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、C02和一碳單位。重要的中間產(chǎn)物:磷酸核糖焦磷酸(PRPP,作為重要中間產(chǎn)物,可參與哪些反應(yīng)考題中出現(xiàn)過多次)。關(guān)鍵酶:PRPP合成酶和酰胺轉(zhuǎn)移酶,這兩個(gè)酶可受代謝物反饋調(diào)節(jié)。反應(yīng)過程中凡有谷氨酰胺和一碳單位參與的反應(yīng),均可分別被抗代謝物氨基酸類似物氮雜絲氨酸和葉酸類似物甲氨蝶呤所阻斷。嘌呤核苷的從頭合成一開始就在磷酸核糖的分子上逐步合成嘌呤核苷酸。(2)生成腺嘌呤核苷酸和鳥嘌呤核苷酸2脫氧核苷酸的生成(1) 一般是在二磷酸核苷的水平上生成,此特點(diǎn)既適于脫氧嘌呤核苷酸,也適于脫氧嘧啶核苷酸(dUDP和dCDP)。(2) 脫氧胸苷酸的生成例外,它是在一磷酸核苷水平上由dUMP轉(zhuǎn)變生成dTMP的,以后再經(jīng)磷酸化生成dTDP和dTTP。3嘌呤核苷酸抗代謝物(1)6巰基嘌呤(6MP):作用機(jī)理6MP核苷酸6MP反饋抑制酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制IMP和GMP的合成抑制補(bǔ)救合成途徑(2)氮雜絲氨酸:作用機(jī)理是抑制谷氨酰胺參與的反應(yīng)。(3)甲氨蝶砱:作用機(jī)理是抑制二氫葉酸還原酶,因此,抑制了四氫葉酸的生成,干擾了一碳單位的代謝。4嘌呤核苷酸分解代謝終產(chǎn)物是尿酸。尿酸生成異常增多導(dǎo)致痛風(fēng),可用別嘌呤醇治療。(二)嘧啶核苷酸代謝從頭合成補(bǔ)救合成合成代謝分解代謝嘧啶核苷酸代謝1從頭合成(1)合成原料:天冬氨酸,谷氨酰胺和CO2(2)關(guān)鍵酶:氨基甲酰磷酸合成酶II(3)CTP是由UTP轉(zhuǎn)變生成:UMPUDPUTPCTPCDPdCDP(4)嘧啶核苷酸的合成與嘌呤核苷酸的合成不同:先合成嘧啶環(huán),然后再與PRPP反應(yīng)生成嘧啶核苷酸。(5)調(diào)節(jié):嘧啶核苷酸從頭合成過程除受代謝產(chǎn)物的反饋抑制調(diào)節(jié)外,在整體上嘧啶核苷酸與嘌呤核苷酸的合成又互相協(xié)調(diào)平行進(jìn)行。2補(bǔ)救合成途徑嘧啶(除外C)PRPP嘧啶核苷酸尿嘧啶核苷ATP嘧啶核苷酸3. 抗代謝物:嘧啶的抗代謝物主要是5氟尿嘧啶(5FU),在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成一磷酸脫氧核糖氟尿嘧啶(FdUMP)及三磷酸氟尿嘧啶核苷酸(FUMP)后發(fā)揮作用。5FUFdUMPFUMP胸苷酸合成酶參入RNA功能障礙dUMPdTMP() 氨基酸類似物和葉酸類似物對(duì)嘧啶核苷酸代謝的影響類似于對(duì)嘌呤核苷酸代謝的影響。9 分解代謝:嘧啶環(huán)的主要分解產(chǎn)物是氨基異丁酸、丙氨酸、NH3和CO2?;邪奏ず湍蜞奏し纸鉃楸彼?,胸腺嘧啶分解為氨基異丁酸。二、核酸的合成側(cè)重于基本概念,起主要作用的酶等幾方面。(一)DNA的生物合成主要考察基本概念、復(fù)制方式、復(fù)制的基本過程、復(fù)制的酶、DNA的損傷及修復(fù),還有逆轉(zhuǎn)錄酶的生物活性等知識(shí)點(diǎn)。1 基本概念:復(fù)制、半保留復(fù)制、復(fù)制子、DNA聚合酶、前導(dǎo)鏈、滯后鏈、岡崎片段、引物合成酶、不連續(xù)合成、轉(zhuǎn)錄等基本概念。2 DNA半保留復(fù)制:復(fù)制時(shí),母鏈DNA解開成兩股單鏈,各自作為模板指導(dǎo)子代合成新的互補(bǔ)鏈。.子代細(xì)胞的DNA雙鏈,其中一股單鏈從親代完整的接受過來,另一股單鏈則完全重新合成。兩個(gè)子代細(xì)胞的DNA雙鏈,都和親代母鏈DNA堿基序列一致。(1)參與復(fù)制的酶和蛋白質(zhì)因子:DNA聚合酶、解螺旋酶、DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶、引物酶、DNA連接酶。掌握這些酶的特點(diǎn)和作用過程。DNA聚合酶:原核生物:DNA聚合酶I、II、III,其中DNA聚合酶III真正具有合成新鏈的復(fù)制作用。真核生物:DNA聚合酶、,其中DNADNA聚合酶、真正具有新鏈的復(fù)制作用。DNA連接酶:催化雙鏈DNA切口處5磷酸基和3羥基生成磷酸二酯鍵的酶。在原核生物細(xì)胞中以NAD提供能量,在真核細(xì)胞中以ATP提供能量。拓?fù)洚悩?gòu)酶I:(轉(zhuǎn)軸酶)消除DNA的負(fù)超螺旋,改變DNA的超螺旋數(shù)拓?fù)洚悩?gòu)酶II:(旋轉(zhuǎn)酶)引入負(fù)超螺旋,消除復(fù)制叉前進(jìn)帶來的扭曲張力。引物合成酶:催化RNA引物的合成,作用時(shí)該酶與另外6種蛋白結(jié)合形成引發(fā)體。DNA結(jié)合蛋白(SSB):與DNA分開的單鏈結(jié)合防止雙鏈重新結(jié)合。(2)復(fù)制的方向:533DNA復(fù)制的基本過程(1) 起始:過程較復(fù)雜,把DNA解成單鏈和生成引物,包括在拓?fù)涿负徒怄溍傅淖饔孟掳袲NA解成單鏈、在引發(fā)酶的作用下生成引發(fā)體兩個(gè)步驟。圖示(2) 復(fù)制的延長(zhǎng):有三種形式原核生物:催化酶是DNA聚合酶III,是多亞基的不對(duì)稱二聚體,各有核心酶組分,在連續(xù)和不吉分別執(zhí)行功能。真核生物:DNA聚合酶催化不連續(xù)復(fù)制,DNA聚合酶催化連續(xù)復(fù)制。圖示滾環(huán)復(fù)制:一些簡(jiǎn)單低等生物或染色體以外的DNA采取的特殊復(fù)制形式。圖示:(3) 復(fù)制的終止。4DNA的損傷及修復(fù):(1)損傷(突變的意思)意義,突變分子改變的類型:錯(cuò)配;缺失、插入和框移突變;重排。(2)DNA損傷的修復(fù):光修復(fù);切除修復(fù)(最為重要);重組修復(fù);SOS修復(fù)(可能會(huì)帶來高的變異率)。5逆轉(zhuǎn)錄:依賴RNA的DNA合成作用,以RNA為模板,由dNTP聚合成DNA分子。其過程包括三步:以RNA為模板合成DNA,雜化雙鏈上RNA的水解,再以單鏈DNA為模板合成雙鏈DNA。方向也是從53逆轉(zhuǎn)錄酶:依賴RNA的DNA聚合酶。具有三種酶活性:RNA指導(dǎo)的DNA合成反應(yīng)RNA的水解反應(yīng)DNA指導(dǎo)的DNA聚合反應(yīng)。(二)RNA的生物合成1 基本概念:轉(zhuǎn)錄,結(jié)構(gòu)基因,碥碼鏈,不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄,pribnow盒,轉(zhuǎn)錄空泡、順式調(diào)控元件,反式作用因子,轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物,Rho factor,帽子結(jié)構(gòu),斷裂基因,外顯子,內(nèi)含子等。2 RNA的不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄:(1)轉(zhuǎn)錄的模板:DNA雙鏈中按堿基配對(duì)能指引轉(zhuǎn)錄生成RNA的單股鏈即模板鏈;(2)酶:RNA聚合酶。(3)基本過程:起始、延長(zhǎng)、終止。起始過程和終止過程中起作用的因子或序列,原核生物中因子能辨認(rèn)啟動(dòng)子部位,起始轉(zhuǎn)錄因子可識(shí)別轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)。另外,在轉(zhuǎn)錄終止部位有特殊的堿基序列,即一段GC富集區(qū),隨后是一段AT富集區(qū)。在GC富集區(qū)內(nèi)組成一段反向重得序列,轉(zhuǎn)錄至此生成的RNA在相應(yīng)序列中形成了發(fā)卡結(jié)構(gòu),使RNA聚合酶脫離模板而終止轉(zhuǎn)錄。3 轉(zhuǎn)錄后的修飾:首尾修飾,尤其是mRNA的剪接。RNA的加工部位主要在細(xì)胞核內(nèi)少數(shù)在胞漿中進(jìn)行。各種上RNA的加工過程有自己的特點(diǎn),但加工類型主要有以下幾種:剪接和拼接;末端添加核苷酸;化學(xué)修飾;RNA編輯。(1)mRNA前體的加工原核生物:轉(zhuǎn)錄生成的多順反子mRNA不需要復(fù)雜性的加工即可表現(xiàn)功能,僅有的加工是,用RNase裂解多順反子為單順反子。真核生物:轉(zhuǎn)錄出的是單順反子RNA,其前體是非均一RNA(hnRNA)。HnRNA需要經(jīng)垞復(fù)雜的加工過程才能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓膍RNA。其過程包括:剪接:去除內(nèi)含子部分,再將外顯子連接起來,此過程中有多種酶和其他活性物質(zhì)參與(如snRNA、UsnRNA;加帽:5末端加上一個(gè)m7GpppNmp結(jié)構(gòu);加尾:3末端加上多聚A尾巴;化學(xué)修飾:堿基甲基化;RNA編輯:mRNA轉(zhuǎn)錄后還需插入、刪除和取代某些核苷酸殘基,才具有翻譯功能,并改變?cè)蠨NA模板上的遺傳信息。編輯方向:53。第十一章蛋白質(zhì)代謝一、氨基酸代謝主要側(cè)重于分解代謝,氨基酸代謝如果跟糖代謝結(jié)合起來考察,題目就比在了。首選要清楚所給的氨基酸是脫氨還是脫羧。如果是脫氨,還要知道是生糖,還是生酮。所以建議把教材上的例子務(wù)必掌握,有能力還要推一推其他常見氨基酸。如請(qǐng)寫出谷氨酸的代謝經(jīng)過?!绑w內(nèi)氨的代謝

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