丹皮酚含量測定綜述.doc

丹皮酚含量測定綜述摘要：就各種丹皮酚測定方法研究進展進行了綜述。牡丹皮中含有的丹皮酚具有鎮(zhèn)痛、消炎、抗菌等作用，對現(xiàn)代醫(yī)藥研究與應用有著重大意義。隨著中藥現(xiàn)代化的進展,對中藥有效成分的分離提取、含量測定已成為新的熱點課題。關鍵詞：牡丹 丹皮酚 含量測定 牡丹皮為毛茛科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr1)的干燥根皮, 有清熱涼血、活血化瘀的作用。用于濕熱發(fā)斑、吐血衄血、夜熱早涼,經(jīng)閉痛經(jīng)、癰腫瘡毒、跌打傷痛等。,其主要有效成分為丹皮酚。丹皮酚(Paeonal)又名牡丹酚、芍藥酚,化學名為“22羥基42甲氧基苯乙酮”1，為白色或微黃色有光澤的針狀結(jié)晶，無色針狀結(jié)晶（乙醇），熔點49-51，氣味特殊，味微辣，易溶于乙醇和甲醇中，溶于乙醚、丙酮、苯、氯仿及二硫化碳中，稍溶于水，在熱水中溶解，不溶于冷水，能隨水蒸汽揮發(fā)。丹皮酚可隨水蒸氣蒸餾，且在紫外光區(qū)有強烈吸收，在274nm波長處E（1% 1cm）為862，利用此性質(zhì)可用紫外分光光度計進行測定。現(xiàn)代藥理研究證明丹皮酚具有抗炎、鎮(zhèn)靜、降壓、抗氧化、保護心肌細胞及抑制血小板凝集等作用。丹皮酚的含量高低是作為衡量牡丹皮品質(zhì)優(yōu)劣的一種重要指標，其含量的高低直接影響藥品的療效。目前，丹皮酚的含量測定有高效液相色譜法（HPLC）、分光光度法、氣相色譜法（GC）、薄層掃描法、膠束毛細管電泳法、化學發(fā)光法等。以下是對上述方法的簡要介紹。1. 高效液相色譜法（HPLC） 高效液相色譜法具有分離能力高、靈敏度高、應用廣泛的特點。楊潔等2采用HPLC法,結(jié)果顯示丹皮酚在0. 010. 55g/ml范圍內(nèi)線性關系良好( r = 0. 999 6) ,平均回收率99. 87% , RSD 為1. 46%。該法簡便、快速,重現(xiàn)性好,精度高,適用于牡丹皮中丹皮酚的定量分析。實驗中試用不同體系和比例的流動相,如甲醇- 磷酸,甲醇2醋酸2水,結(jié)果以甲醇2醋酸2水溶液為流動相時丹皮酚的分離效果最好。而反相高效液相色譜（RP-HPLC）法對于含有多組分混合物的中藥及其制劑的分析測定更具特色。梁貴鍵3等采用反相高效液相色潽法，測 51050g/ ml 范圍內(nèi),峰面積(A) 與濃度(C) 呈良好的線性關系,相關系數(shù)r = 019997 ,平均回收率為97.86%，RSD為0.64%。2.分光光度法2.1紫外分光光度法（GV）應用分光光度法測定丹皮酚含量的技術(shù)較為成熟，按具體不同原理又可分為紫外分光光度法、雙波長示差光譜法、一階導數(shù)分光光度法、正交函數(shù)分光光度法等。其中紫外分光光度法具有操作簡單、費用較低等優(yōu)點。但由于該法基本上沒有分離能力，樣品處理要求嚴格，故常被用于要求不很嚴格的一般測定、中藥材炮制方法與處理條件比較、制劑工藝選擇等方面4。2.2雙波長示差光譜法該法可消除干擾組分的影響，方法便捷，結(jié)果準確，但丹皮酚在堿性溶液中穩(wěn)定性較差，應在加堿后30min內(nèi)完成測定，以免造成誤差。2.3一階導數(shù)分光光度法此法可不經(jīng)分離對丹皮酚進行含量測定，且結(jié)果準確。董善士5等以此法分析肺露,由于其他藥材蒸提液在紫外區(qū)對丹皮酚有干擾,在一階導數(shù)光譜圖上,堿性介質(zhì)中選擇測定波長為328 、368 、372 ,可完全消除干擾。2.4正交函數(shù)分光光度法王煥云等6用水蒸氣蒸餾法提取麥味地黃丸得供試品溶液，以水為空白，在220350nm 波長范圍內(nèi)分別對丹皮酚對照品、供試品和陰性對照品溶液進行掃描，得吸收光譜。根據(jù)光譜信息，選用二次正交多項式系數(shù)(P2)作為定量參數(shù)，以消除陰性對照的干擾，在263.8283.8nm 波長之間每間隔 測定各個波長的吸收度值，計算結(jié)果P2與質(zhì)量濃度C呈良好的線性關系，平均回收率為99.0%。3. 氣相色譜法（GC） GC 自動化操作,靈敏度高,重現(xiàn)性好,但對前處理要求高,且設備昂貴,受經(jīng)濟水平制約,廣泛應用受到一定限制。其中閃蒸-GC 不需前處理,分析速度快,避免成分破壞,受試樣品用量少,對含易揮發(fā)成分的貴重藥材分析可降低成本,有獨特優(yōu)勢7。4. 薄層掃描法 薄層掃描法測定丹皮中丹皮酚的含量，方法簡便易行，測定結(jié)果穩(wěn)定，重復性好，是一種準確可靠的含量鍘定方法。尤其是在中藥復方制劑中此方法對丹皮酚的測定可較好地排除其他成分的干擾8。5. 膠束毛細管電泳法 毛細管電泳電化學檢測的裝置簡便、價廉、靈敏度高,其中非接觸式檢測（電極不與溶液直接接觸)避免了分離電場對檢測的干擾和電極中毒,可廣泛用于荷電成分的檢測9。6. 化學發(fā)光法選用魯米諾一過氧化氫(H2O2)一鉆離子（Co2+）為空白發(fā)光體系, 利用H2O2對丹皮酚結(jié)構(gòu)中酚輕基的氧化, 而消耗發(fā)光體系中的H2O2, 致使原空白發(fā)光體系發(fā)光強度降低, 謂之淬滅, 這種淬滅程度的強弱在一定范圍內(nèi)與丹皮酚的濃度成線性關系, 進而實現(xiàn)對丹皮酚的高靈敏測定10。結(jié)語 綜合以上幾種方法來看，毛細管電泳法具有分析速度快,分離效率高,流動相和進樣量少,成本低、適用范圍廣的優(yōu)勢。從HPLC發(fā)展來看,國內(nèi)今后將發(fā)展適用面廣的高效毛細管電泳,尤其膠束電泳色譜方法的引入進一步拓展了HPLC應用范圍。HPLC和全自動的TLC將是今后中藥領域分析手段的主流。參考文獻【1】龔明貴,張巧明,秦翠麗,原小秋.牡丹中丹皮酚含量及其提取檢測方法研究.時珍國醫(yī)國藥.2007,18(3):709-711【2】楊潔,賈國強,劉萍,等. HPLC法測定不同產(chǎn)地牡丹皮中丹皮酚的含量 J .科學技術(shù)與工程, 2006, 6 (3) : 299.【3】梁貴鍵,朱莉,張華,張蔚君,等.RP-HPLC法測定牡丹皮和杞菊地黃丸中丹皮酚的含量.空軍總醫(yī)院學報.2005,21(4):206【4】周宏兵.中藥及其制劑中丹皮酚的含量測定.廣東藥學院學報，2000,16（2）;218-221【5】董善士,李菁,王旌,等.一階導數(shù)光譜測肺露中丹皮酚含量J.中成藥,1991 ,13 (3) :101【6】王煥云，溫愛萍，喬俊纏，等.正交函數(shù)分光光度法測定麥味地黃丸中丹皮酚的含量J.中國藥業(yè)，1999,8(12):31-32【7】吳美強.丹皮酚測定方法研究概述.海峽藥學.2010.2(22):59-60【8】方巖雄，黃劍明，張昆.用超臨界CO2從丹皮中提取丹皮酚J 精細化工，2001,