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實(shí)驗(yàn)23 24 胰島素和腎上腺素對(duì)家兔血糖濃度的影響 1 掌握血糖 bloodsugar 的測(cè)定方法及激素 hormone 對(duì)血糖濃度的影響 了解血糖測(cè)定的臨床意義 實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求 2 機(jī)體的血糖水平受多種激素的調(diào)節(jié)而維持穩(wěn)定影響血糖的激素分為兩類 降低血糖的激素 胰島素 insulin 升高血糖的激素 腎上腺素 adrenaline 胰升糖素 糖皮質(zhì)激素和生長(zhǎng)激素 血漿 plasma 全血經(jīng)抗凝處理后得到的液體成分 含有凝血因子 纖維蛋白原等血清 serum 全血凝固后析出的液體 不含纖維蛋白原 血樣 實(shí)驗(yàn)原理 3 620nm測(cè)定待測(cè)血樣的吸光度 A 與同樣處理的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液比較 標(biāo)準(zhǔn)管法 即可求得血樣中葡萄糖的含量 酸性 加熱 3H2O 羥甲基糠醛 鄰甲苯胺 醛亞胺 藍(lán)色 葡萄糖 glucose 鄰甲苯胺法測(cè)定血糖濃度 4 2 血樣的采集1 心臟內(nèi)取血5ml 加入抗凝劑 草酸鈉 胰 1 腎 1 2 皮下注射胰島素0 5ml kg 2U kg 1小時(shí)后1 腎上腺素0 4ml kg 半小時(shí)后3 心臟內(nèi)取血5ml 加入抗凝劑 胰 2 腎 2 1 動(dòng)物的準(zhǔn)備家兔兩只 禁食一晚 標(biāo)記后 測(cè)量體重并記錄 實(shí)驗(yàn)步驟 5 4 鄰甲苯胺法測(cè)定血糖濃度1 取大試管 按Page78表格添加試劑2 混勻各管 沸水浴中加熱10min后取出 流水冷卻 3 用空白管校正吸光度零點(diǎn) 讀取各管620nm的吸光度 3 血漿的制備血樣采集后 2000rpm離心5min 取上清 6 數(shù)據(jù) 7 G胰 1 G胰 2G腎 1 G腎 2 A測(cè)定 m胰 1 m胰 2 m腎 1 m腎 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 A測(cè)定 m標(biāo)準(zhǔn)A標(biāo)準(zhǔn)血糖濃度 1000V測(cè)定 180g mol 8 1 鄰甲苯胺試劑中含冰乙酸 謹(jǐn)防腐蝕分光光度計(jì)2 分光光度計(jì)的使用方法3 微量移液器的使用4 離心機(jī)使用前必須配平 質(zhì)量配平 位置配平5 電磁爐使用前10min打開(kāi) 絕對(duì)不可干煮 加熱完成后 用夾子取出試管 絕對(duì)不可用手拿6 兔子的抓取 固定 心臟采血 皮下注射方法 注意事項(xiàng) 9 1 打開(kāi)電源 調(diào)節(jié)旋鈕至需要的波長(zhǎng) 預(yù)熱20 30min2 1檔 空白管 T模式下調(diào)100 顯示 Blank 100 3 拉桿拉至1 5檔 T模式下調(diào)0 顯示 0 00 4 換到A模式 拉至2 3 4檔 讀取各個(gè)樣品的吸光度 拉桿 0 4檔 樣品池 讀數(shù) 波長(zhǎng) 毛面 光面 1 分清光面 毛面 手應(yīng)接觸毛面 光線從光面通過(guò)2 用溶液潤(rùn)洗2 3次 裝至2 3至4 5體積3 粗紙吸水 柔紙擦亮光面 比色杯 分光光度計(jì)的使用 10 血糖升高1 糖尿病2 內(nèi)分泌疾病 甲亢 腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn) 嗜鉻細(xì)胞瘤 胰高血糖素瘤3 妊娠高血糖4 胰腺疾病 壞死性胰腺炎 胰腺手術(shù) 原發(fā)胰腺癌5 應(yīng)激性高血糖血糖降低1 胰島 細(xì)胞瘤或增生2 內(nèi)分泌疾病 垂體前葉功能減退癥 腎上腺皮質(zhì)功能減低3 肝源性低血糖 各種肝病致肝功能衰竭 血糖測(cè)定的臨床意義 11 快速血糖測(cè)定儀 測(cè)試時(shí)間 5 15秒測(cè)試范圍 1 1 33 3mmol L試紙條自動(dòng)吸血 1 10 l 自動(dòng)顯示血

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