熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)原理.ppt

TheCentralMelanocortinSystemCanDirectlyRegulateSerumInsulinLevels Reporter ZiqiZhang Author RogerD Coneetal From Endocrinology 2000 2015 6 22 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Background Method process Conclusion 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Obesity Hyperinsulinemia Insulinresistance Type2diabetes Themechanisticrelationshipbetweenobesity hyperinsulinemia insulinresistance anddiabetesisnotentirelyclear 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Mousemodels Hyperinsulinemiaisoneofcommonfeaturesamongalltheanimalmodelsofobesity andalsooneoftheearlistmetabolicalterationsobservedinmodels Thedevelopmentissimilartotheprocessoftype2diabetes 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 TheCentralMelanocortinsystem Energyintake Energyexpenditure Glucosehomeostasis MC4R MC3R Hypothesis thecentralmelanocortinsystemmaybeinvolvedintheregulationofglucosehomeostasis 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Glucosehomeostasis 外周組織對(duì)胰島素的敏感性 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 中央黑皮質(zhì)素信號(hào)傳導(dǎo)缺陷 未知 肥胖組織增生干擾胰島素作用 有報(bào)道 其他未知 瘦素缺陷 有報(bào)道 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 1 Centralmelanocortinreceptorsignalingmayplayaroleinthecontrolofglucosehomeostasis 2 Ahypothesis themelanocortinagonistlowersseruminsulinbystimulatingthesympatheticdrivetothepancreasknowntoinhibitinsulinrelease 3 WhetherthehyperinsulinemiainthemelanocortinobesitysyndromesisprimarytoMC4Rblockade adevelopmentconsequenceofMC4Rblockade orsecondarytotehyperphagiaandobesity 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Surgicalprocedure RIAassayforserumorplasmainsulin Bloodglucoseandglucosetolerancetest Nonesterifiedfattyacidassay Insulintolerancetest 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 MTII是MC4R MC3R的激動(dòng)劑 是 MSH的類似物 ACSF 人工腦脊液 Ob ob老鼠是瘦素缺陷老鼠 具有高胰島素血癥 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Fig1 在ob ob老鼠中 注射黑皮質(zhì)素激動(dòng)劑對(duì)血清胰島素的影響 72 8 30 60min 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 1 A中與兩個(gè)對(duì)照相比 MTII降低血清中的胰島素水平 并具有劑量反應(yīng) 2 B中注射MTII后一小時(shí)檢測(cè)到血糖濃度有明顯增加 a 中央黑皮質(zhì)素受體可能參與在血糖調(diào)節(jié)過(guò)程 b MTII對(duì)胰島素分泌的抑制不是由于降低血糖濃度而間接起作用的 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Ob obmouse IcvinjectionofMT ACSF Leptin RIAassayforseruminsulin totestthehypothesis Ipinjectionwithphentolamineorsaline Phentolamine 芬妥胺 非特異性 腎上腺素受體的反向激動(dòng)劑 對(duì)交感神經(jīng)對(duì)胰島素分泌的抑制有阻斷作用 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Fig2 MTII注射后降低血清胰島素水平是通過(guò)刺激交感神經(jīng)而起作用的 S salineP phentolamineA ACSFM MT L Leptin 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 1 芬妥胺對(duì)胰島素分泌有促進(jìn)作用 與文獻(xiàn)報(bào)道效果相同 芬妥胺能阻斷交感神經(jīng)對(duì)胰島素分泌的抑制作用 2 芬妥胺對(duì)MTII在胰島素分泌上的抑制作用具有完全阻斷效果 3 芬妥胺對(duì)瘦素在胰島素分泌上的抑制作用具有部分阻斷效果 a MTII對(duì)胰島素分泌的抑制效果可能只通過(guò)一種方式起作用 通過(guò)刺激交感神經(jīng)驅(qū)使胰島抑制胰島素的分泌 b 瘦素除了通過(guò)交感神經(jīng)抑制胰島分泌外 可能還有其他方式 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Fig3 在瘦的C57BL 6j小鼠中MTII對(duì)胰島素的分泌和葡萄糖耐性的影響 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 1 MTII對(duì)正常小鼠的基礎(chǔ)胰島素水平也有劑量依賴的抑制作用 2 在注射MTII一小時(shí)后血糖濃度同樣有顯著的升高 3 在PVH注射MTII后進(jìn)行葡萄糖耐受測(cè)試 結(jié)果表明與對(duì)照相比 注射MTII血糖濃度波動(dòng)較大 葡萄糖耐性降低 a 進(jìn)一步表明中央黑皮質(zhì)素受體受激動(dòng)劑刺激后 可能參與血糖平衡調(diào)節(jié) 降低胰島素水平 葡萄糖耐性降低 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Fig4在瘦小的MC4R敲除小鼠中血漿胰島素水平增加 外周胰島素抗性降低 Age 4weeks male Age 6 7weeks male 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Fig4 female male 6 7weeks 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Fig4 8 9weeksmale male 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 在MC4R敲除小鼠生長(zhǎng)過(guò)程中 首先發(fā)現(xiàn)的是胰島素水平上升 而不是體重增加 MC4R缺陷小鼠對(duì)胰島素的耐性下降 出現(xiàn)胰島素抗性 在體重開(kāi)始發(fā)生差異時(shí) 胰島素抗性更強(qiáng) 2 C D組結(jié)果表明 無(wú)論雌雄 皮下注射胰島素后 6 7周大的MC4R缺陷小鼠與野生型相比 血糖降低幅度較小 3 而8 9周大的MC4R敲除小鼠與野生型相比 在注射胰島素后 血糖下降幅度更緩和 而且此時(shí)MC4R敲除小鼠體重開(kāi)始表現(xiàn)出略大于野生型小鼠 1 MC4RKO小鼠四周大時(shí)測(cè)量其血漿胰島素水平 與野生型相比 其胰島素水平顯著增加 而在6 7周測(cè)其體重變化 發(fā)現(xiàn)基本與野生型一樣重 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 Fig5 6 7weeksfemale 9 10weeksmale 6 7weeksfemale 6 7weeksmale 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 1 無(wú)論6 7周大雌性還是8 9周大的雄性MC4R敲除小鼠與野生型在葡萄糖耐性上沒(méi)有明顯區(qū)別 2 無(wú)論雌雄 6 7周大的MC4R敲除小鼠與對(duì)照相比在血清NEFA 游離脂肪酸水平上沒(méi)有明顯區(qū)別 a 此時(shí) MC4RKO小鼠甘油三酯代謝正常 b MC4RKO小鼠的胰島素抗性并非是由于非酯化脂肪酸的增加誘導(dǎo)產(chǎn)生的 c 葡萄糖耐性正?？赡苁且?yàn)橐葝u素補(bǔ)償性增加彌補(bǔ)了胰島素抗性作用 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 點(diǎn)擊添加文本 1 中央黑皮質(zhì)素受體信號(hào)傳導(dǎo)可能對(duì)胰島素的分泌有強(qiáng)的抑制作用 而且該系統(tǒng)可能獨(dú)立參與血糖平衡控制過(guò)程 2 中央黑皮質(zhì)素肽可能作用于黑皮質(zhì)素受體去增加交感神經(jīng)興奮 作用于胰島 以發(fā)揮對(duì)胰島素分泌的抑制作用 3 結(jié)果暗示MC4R敲除小鼠的胰島素抗性不僅僅是因?yàn)榉逝?可能還有其他原因引起的 比如它可能一部分是因?yàn)橐葝u素受體的脫敏 4 在ob ob小鼠中瘦素對(duì)胰島素降低作用可能不依賴黑皮質(zhì)素系統(tǒng) 5 M