蔬菜、水果和食用菌農(nóng)藥殘留檢測(cè)細(xì)則(劉肅)

2010年蔬菜、水果和食用菌農(nóng)藥殘留檢測(cè)細(xì)則按NY/T 761-2008方法，稱(chēng)取35 g勻漿試樣，加入70 mL乙腈，高速勻漿2 min后用濾紙過(guò)濾或抽濾，氯化鈉鹽析后，分取4份：第一份：取10 mL提取液，按照NY/T 761有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥測(cè)定步驟進(jìn)行前處理，用氣相色譜（FPD）進(jìn)行測(cè)定。第二份：取10 mL提取液，按照NY/T 761有機(jī)氯和菊酯類(lèi)農(nóng)藥測(cè)定步驟進(jìn)行前處理，用氣相色譜（ECD）進(jìn)行測(cè)定。第三份：取10 mL提取液：按照NY/T 761氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的前處理測(cè)定氨基甲酸酯（柱后衍生），同一溶液用高效液相色譜（紫外檢測(cè)器）同時(shí)測(cè)定吡蟲(chóng)啉、多菌靈、辛硫磷、除蟲(chóng)脲、滅幼脲、啶蟲(chóng)脒、氟蟲(chóng)腈和阿維菌素。注：定容時(shí)現(xiàn)加3 mL甲醇，充分溶解殘?jiān)?，再用水定容? mL。充分混勻后過(guò)0.45 m的膜，上機(jī)測(cè)定。HPLC色譜參考條件： C18柱，3 mm5m25cm；柱溫：40；流量：0.5mL/min；進(jìn)樣量：10L。吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、多菌靈、除蟲(chóng)脲、氟蟲(chóng)腈、滅幼脲、辛硫磷和阿維菌素溶劑梯度及波長(zhǎng)見(jiàn)表1和表2。表1 溶劑梯度時(shí)間min水%甲醇/乙腈（7+3）%0.006535 6.30653516.00653517.70653520.00010021.50010023.00010023.01010028.006535表2 波長(zhǎng)變化表時(shí)間，min06.316.0017.721.5波長(zhǎng)/nm2752452252802450.2mg/L吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、多菌靈、除蟲(chóng)脲、氟蟲(chóng)腈、滅幼脲、辛硫磷和阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見(jiàn)圖1。圖1 0.2mg/L吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、多菌靈、除蟲(chóng)脲、氟蟲(chóng)腈、滅幼脲、辛硫磷和阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖快速液相色譜參考條件： BEHC18柱，10 cm；柱溫：40；流量：0.45mL/min；進(jìn)樣量：5L。多菌靈、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、除蟲(chóng)脲、滅幼脲、氟蟲(chóng)腈、辛硫磷和阿維菌素溶劑梯度及波長(zhǎng)見(jiàn)表3和表4。表3 溶劑梯度時(shí)間min乙腈%0.05%氫氧化銨溶液(pH=1011)%02575490104.390104.3125755.52575表4 波長(zhǎng)變化表時(shí)間，min03.23.54.2波長(zhǎng)/nm2552252852450.2mg/L多菌靈、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、除蟲(chóng)脲、滅幼脲、氟蟲(chóng)腈、辛硫磷和阿維菌素溶標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見(jiàn)圖2。圖2 0.2mg/L多菌靈、吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、除蟲(chóng)脲、滅幼脲、氟蟲(chóng)腈、辛硫磷和阿維菌素溶標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖注：如果氟蟲(chóng)腈在液相色譜上有無(wú)法克服的干擾，也可用GC-ECD進(jìn)行檢測(cè)，參考色譜條件見(jiàn)表5。表5儀器條件：色譜柱：RTX-1 30 m0.25 mm0.50m進(jìn)樣體積 L：1.00載氣流量 mL/min：0.8進(jìn)樣口溫度 ：250.0檢測(cè)器溫度 ：320.0初始溫度 ：150.0初始時(shí)間min：1.00程序升溫：升溫速率 /min最終溫度 保留時(shí)間 min130.00220.00.00色譜圖見(jiàn)圖3。溴氰菊酯氟氰戊菊酯氰戊菊酯氟氯氰菊酯聯(lián)苯菊酯氟蟲(chóng)腈百菌清乙烯菌核利圖3 0.1 mg/L百菌清、乙烯菌核利、氟蟲(chóng)腈、聯(lián)苯菊酯、氟氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖第四份：取10 mL提取液，過(guò)石墨炭黑氨基串聯(lián)柱（在樣品色素不嚴(yán)重的情況下，也可用氨基柱代替石墨炭黑氨基串聯(lián)柱）預(yù)淋液5 mL：乙腈+甲苯=3+1；淋洗液：25 mL乙腈+甲苯=3+1，定容后用于質(zhì)譜項(xiàng)目。50農(nóng)藥的凈化方式和所用檢測(cè)器見(jiàn)表6。表6 50種農(nóng)藥凈化方式和所用檢測(cè)器分組組分名稱(chēng)凈化方式檢測(cè)儀器1甲胺磷、氧樂(lè)果、磷胺、久效磷、甲拌磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、甲基異柳磷、水胺硫磷、樂(lè)果、敵敵畏、毒死蜱、乙酰甲胺磷、三唑磷、丙溴磷、殺螟硫磷、二嗪磷、馬拉硫磷、亞胺硫磷、伏殺硫磷不凈化GC-FPD2氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、聯(lián)苯菊酯、三唑酮、百菌清、滴滴涕、六六六、氟胺氰菊酯、氟氰戊菊酯、三氯殺螨醇、腐霉利、五氯硝基苯、異菌脲、乙烯菌核利弗羅里矽柱凈化GC-ECD3氟蟲(chóng)腈、啶蟲(chóng)脒、噠螨靈、苯醚甲環(huán)唑、嘧霉胺石墨炭黑氨基串聯(lián)柱凈化GC-MS4涕滅威（包括涕滅威砜涕滅威亞砜）滅多威、克百威（包括3-羥基克百威）、甲萘威氨基柱凈化LC-氨基甲酸酯分析系統(tǒng)吡蟲(chóng)啉、多菌靈、辛硫磷、除蟲(chóng)脲、滅幼脲、啶蟲(chóng)脒、氟蟲(chóng)腈和阿維菌素氨基柱凈化LC-紫外檢測(cè)器可用氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行確認(rèn)農(nóng)藥的參考色譜條件見(jiàn)表7和見(jiàn)表8。表7色譜條件色譜柱Restek-5ms 30 m0.25 mm0.25 m載氣類(lèi)型He柱頭壓120 KPa線(xiàn)速度48.8 cm/sec總流速30.0 mL/min柱流速1.75 mL/min尾吹流速5.0 mL/min分流模式不分流分流比-1.0進(jìn)樣時(shí)間7.0min進(jìn)樣口升溫程序升溫速率 /min最終溫度 保留時(shí)間 min1-120.06.50280.00250.030.00色譜柱升溫程序升溫速率 /min最終溫度 保留時(shí)間 min1-82.06.0028.00300.05.00表8選擇離子保留時(shí)間農(nóng)藥名稱(chēng)特征離子1特征離子2特征離子310.848甲胺磷949514111.084敵敵畏10918518713.565乙酰甲胺磷949513613.872敵百蟲(chóng)10913914515.747氧樂(lè)果10911015617.09久效磷12716419217.227甲拌磷12123126017.337六六六（1）21721922118.071六六六（2）21721922118.223六六六（3）21721922118.742磷胺（1）12713826418.876六六六（4）21721922118.99百菌清26426626819.39抗蚜威16616723819.712磷胺（2）12713826419.937甲基對(duì)硫磷10912526320.28甲霜靈16020624920.475五氯硝基苯29329529720.651殺螟硫磷10912527720.907嘧霉胺19819920020.939馬拉硫磷12512717321.143倍硫磷10912527821.2毒死蜱19931431621.219對(duì)硫磷10913729121.29三唑酮12820821021.384水胺硫435二嗪47腐霉利9628328522.776滴滴涕（1）31631832023.441丙溴磷33733937423.539滴滴涕（2）31631832023.752滴滴涕（3）16523523724.403三氯殺螨558滴滴涕（4）16523523724.625滴滴涕（5）16523523724.667甲基異柳磷19923124124.972三唑磷16116231324.968氟蟲(chóng)腈36736937125.452滴滴涕（6）16523523725.878克螨405異菌脲31431626.595亞胺硫磷16016131726.7聯(lián)苯菊酯16516618126.858甲氰菊517伏殺硫971氯氟氰菊653氟氯氰菊酯（1）16316522629.767氟氯氰菊酯（2）16316522629.876氟氯氰菊酯（3）16316522629.921氟氯氰菊酯（4）16316522630.057氯氰菊酯（1）16316518130.175氯氰菊酯（2）16316518130.283氯氰菊酯（3）16316518130.325氯氰菊酯（4）16316518130.332氟氰戊菊酯（1575氟氰戊菊酯（2242反式氰戊菊酯（1）16722541931.248苯醚甲環(huán)唑（1）32332432531.349苯醚甲環(huán)唑（2）32332432531.483氟胺氰菊534噠螨靈11714732332431.553氟胺氰菊943溴氰菊酯（1242溴氰菊酯（2）181251255可用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行確認(rèn)農(nóng)藥的參考色譜條件如下： a）色譜柱: ACQUITY UPLCTM BEH C18 1.7um 2.150mm Column 。b) 柱溫：35 。c) 進(jìn)樣量：10 L。d) 流動(dòng)相及流速見(jiàn)表9。g) 毛細(xì)管電壓：3 KV。h) 離子源溫度：110 。i) 去溶劑氣溫度：350 。j) 去溶劑氣流量：500 L/hr。k) 錐孔反吹氣流量：50 L/hr。l) 碰撞氣流速：0.18 mL/min。m）MRM 監(jiān)測(cè)離子見(jiàn)表10。表9 梯度洗脫程序時(shí)間min流速mL/minA（甲醇）%B（1.0 mmol 醋酸胺溶液）%曲線(xiàn)Initial0.2510903.50.25901066.00.25901067.00.2510901表10 MRM 監(jiān)測(cè)離子序號(hào)農(nóng)藥名稱(chēng)保留時(shí)間min電離方式母離子錐孔電壓V子離子 1碰撞能量 eV子離子2碰撞能量eV1涕滅威亞砜1.45ES+22925109.016165.9102涕滅威砜1.58ES+2232586.112147.883滅多威1.76ES+162.71587.98105.984吡蟲(chóng)啉2.13ES+256.134175.120209.11553-羥基克百威2.3ES+238.125162.914180.986多菌靈2.52ES+19233132.128160.1187涕滅威2.71ES+212.925891498108甲基硫菌靈2.95ES+343.225151.122311109克百威3.01ES+22225122.918164.91010甲萘威3.13ES+201.920126.928144.9511除蟲(chóng)脲3.98ES-309.119155.925288.91012滅幼脲4.06ES-307.425126.325154.11013辛硫磷4.14ES+299.41777.425129.31214定蟲(chóng)脒2.30ES+223279034125.92015氟蟲(chóng)腈3.98ES-434.935249.628329.71516阿維菌素4.98ES+895.690449.247751.341質(zhì)量控制。檢測(cè)過(guò)程要做試劑空白和加標(biāo)回收率，每10個(gè)樣品加一個(gè)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。將同類(lèi)樣品分成一組（如抽了15個(gè)番茄，不按順序號(hào)，在檢測(cè)時(shí)將其分為一組），用該類(lèi)樣品空白配置標(biāo)準(zhǔn)溶液。每一類(lèi)樣品組做一個(gè)本底加標(biāo)回收率，添加