衣原體檢驗立克次體檢驗支原體檢驗螺旋體及檢驗.ppt

支原體 概念 支原體是一類缺乏細胞壁 形態(tài)上呈高度多形性 可通過濾菌器 并能在無生命培養(yǎng)基中生長繁殖的最小的原核細胞型微生物 形態(tài)染色 無細胞壁 能通過濾菌器高度多形性革蘭陰性 不易著色常用吉姆薩染色 呈淡紫色 培養(yǎng)特性 細胞膜含膽固醇營養(yǎng)要求高二分裂繁殖為主生長緩慢 荷包蛋 樣菌落 生化反應 分解葡萄糖糖 生殖道支原體 肺炎支原體不分解葡萄糖 利用精氨酸 人型支原體 口腔支原體等 肺炎支原體 其頂端結(jié)構(gòu)能黏附宿主上皮細胞從宿主細胞膜獲取營養(yǎng) 并產(chǎn)生有毒代謝產(chǎn)物 或引起超敏反應 使細胞損傷多經(jīng)呼吸道感染引起原發(fā)性非典型性肺炎 泌尿生殖道感染支原體 種類 人型支原體 生殖道支原體 溶脲脲原體傳播途徑 性傳播垂直傳播所致疾病 非淋病性尿道炎早產(chǎn) 流產(chǎn) 微生物學檢查 分離培養(yǎng) 菌落特征 形態(tài)觀察 生化反應冷凝集試驗 檢測冷凝集素PCR技術(shù) 采用基因擴增技術(shù)檢測支原體的DNA 支原體與細菌的區(qū)別 立克次體 立克次體是一類嚴格細胞內(nèi)寄生的原核細胞型微生物 是引起斑疹傷寒 恙蟲病 Q熱的病原體 立克次體共同特點 大小介于細菌和病毒之間 革蘭染色陰性 多呈球桿狀專性細胞內(nèi)寄生以節(jié)肢動物為傳播媒介多引起人畜共患病對抗生素敏感 生物學特性 形態(tài)染色 球桿狀 常用Giemsa染色 在感染的細胞中排列不規(guī)則培養(yǎng)方法 動物接種 雞胚接種 細胞培養(yǎng)抗原構(gòu)造 與變形桿菌OX菌株有共同抗原 用于外斐反應 致病性 致病物質(zhì)內(nèi)毒素 與細菌內(nèi)毒素毒性作用相似磷脂酶A 溶解宿主細胞膜和溶酶體膜致病機制 侵犯小血管內(nèi)皮細胞 節(jié)肢動物叮咬 侵犯小血管內(nèi)皮細胞 第一次菌血癥 侵犯全身小血管內(nèi)皮細胞 第二次菌血癥 高熱頭痛皮疹 所致疾病 普氏立克次體 所致疾病 流行性斑疹傷寒傳染源 病人傳播媒介 人虱傳播方式 人虱 人虱 人 人 流行性斑疹傷寒傳播方式 所致疾病 地方性斑疹傷寒傳染源 鼠等傳播媒介 鼠蚤傳播方式 莫氏立克次體 鼠 鼠 鼠蚤 鼠蚤 人 地方性斑疹傷寒傳播方式 鼠虱 免疫性 以細胞免疫為主病后免疫力牢固 微生物學檢查 標本采集 血液分離培養(yǎng) 接種豚鼠血清學試驗 外斐反應 衣原體 是一類能通過細菌濾器 嚴格的細胞內(nèi)寄生 有獨特發(fā)育周期的原核細胞型微生物 衣原體共同特征 革蘭陰性 圓形或橢圓形有細胞壁有獨特的發(fā)育周期 二分裂繁殖細胞內(nèi)寄生對抗生素敏感種類 沙眼衣原體肺炎衣原體鸚鵡熱衣原體 生物學特性 形態(tài)染色與發(fā)育周期 原體 感染型 始體 繁殖型 培養(yǎng)特性 專性細胞內(nèi)寄生雞胚卵黃囊接種 致病性與免疫性 致病物質(zhì)內(nèi)毒素 外膜蛋白所致疾病沙眼包涵體性結(jié)膜炎非淋病性泌尿生殖道感染性病淋巴肉芽腫呼吸道感染免疫性 病后免疫力不牢固 微生物學檢查 直接鏡檢 結(jié)膜病灶刮片Giemsa染色 查包涵體免疫熒光染色查衣原體碘液分離培養(yǎng)雞胚卵黃囊接種核酸檢測 螺旋體 是一類細長 柔軟 彎曲呈螺旋狀 運動活潑的原核細胞型微生物 種類 鉤端螺旋體疏螺旋體密螺旋體 特征 有細胞壁有DNA和RNA以二分裂方式繁殖對抗生素敏感 鉤端螺旋體 引起鉤端螺旋體病 生物學性狀 形態(tài)染色細長 螺旋細密 兩端彎曲如鉤常用Fontana鍍銀染色 染成棕褐色運動活潑培養(yǎng) 適宜溫度28 30 常用柯氏培養(yǎng)基 生長緩慢抵抗力 一般 對青霉素敏感 在水中存活時間長 致病性 致病物質(zhì) 溶血素 細胞毒因子 內(nèi)毒素樣物質(zhì)所致疾病 鉤端螺旋體病 人畜共患疾病傳染源 鼠類 豬傳播途徑 經(jīng)粘膜或破損皮膚經(jīng)胎盤傳播 臨床特征 鉤體血癥 眼紅腿疼淋巴大 寒熱酸痛一身乏 臨床類型 流感傷寒型黃膽出血型肺出血型腎功衰竭型等 免疫性 病后對同型鉤體有牢固免疫力以體液免疫抗感染為主 尿 血標本 鏡檢 分離培養(yǎng) 血清學鑒定 動物試驗 檢測核酸 微生物學檢查 微生物學檢查 血清學診斷檢測特異性抗體 顯微鏡凝集溶解試驗 酶聯(lián)免疫吸附試驗 防治原則 防鼠 滅鼠 加強對帶菌家畜的管理流行地區(qū)易感人群接種疫苗治療首選青霉素 梅毒螺旋體 是引起梅毒的病原體梅毒屬性傳播疾病 生物學性狀 形態(tài)染色 兩端尖直 螺旋細密規(guī)則 運動活潑培養(yǎng)特性 不易人工培養(yǎng)抗原性 特異性抗原 刺激機體產(chǎn)生特異性凝集抗體復合抗原 刺激機體產(chǎn)生梅毒反應素抵抗力 極弱 對青霉素 四環(huán)素等敏感 致病性 致病物質(zhì) 莢膜樣物質(zhì) 粘多糖酶所致疾病 梅毒后天梅毒 經(jīng)性接觸傳染臨床分期一期梅毒 外生殖器硬性下疳二期梅毒 全身梅毒疹三期梅毒 皮膚粘膜潰瘍 侵犯內(nèi)臟器官或組織先天梅毒 經(jīng)胎盤傳給胎兒胎兒表現(xiàn)為流產(chǎn) 死胎出生后表現(xiàn)為鋸齒形牙 鞍形鼻等 免疫性 以細胞免疫為主抗磷脂抗體 梅毒反應素 對機體無保護作用 僅供血清學試驗 微生物學檢查 硬性下疳 梅毒疹滲出液 鏡檢梅毒螺旋體 血清標本 非特異性試驗 查梅毒反應素 特異性試驗 測定梅毒螺旋體特異性抗體 防治原則 加強性衛(wèi)生教育和嚴格社會管理 梅毒確診后 宜用青霉素等藥物及早予以徹底治療 二期梅毒 二期梅毒 三期梅毒 梅毒螺旋體 鉤端螺旋體 碘液染色 衣原體免疫熒光染色 原體 沙眼 獨特的發(fā)育周期 外斐反應 變形桿菌OX菌株代替立克次體抗原進行交叉凝集反應 以檢測患者血清中有無立克次體抗體 以協(xié)助某些立克次體病的診斷 外斐反應的交叉凝集 支原體與細菌L型的區(qū)別 支原體 荷包蛋 樣菌落 支原體電鏡圖 恙蟲病立克次體 所致疾病 恙蟲病傳染源 鼠等傳播媒介 恙螨傳播方式 恙蟲病傳播方式 鼠類 恙螨幼蟲 卵 成蟲 稚蟲 卵 成蟲 稚蟲 第二代幼蟲 人 病毒 病毒是個體微小 結(jié)構(gòu)簡單 只含一種核酸 在細胞內(nèi)以復制方式進行增殖的非細胞型微生物 病毒特征 體積微小 能通過濾菌器 需用電子顯微鏡觀察非細胞結(jié)構(gòu) 無細胞結(jié)構(gòu) 由蛋白質(zhì)和核酸組成 核酸類型單一 只含一種核酸嚴格的細胞內(nèi)寄生以復制方式增殖抵抗力特殊 耐冷不耐熱 對抗生素不敏感 病毒的基本性狀和分類 病毒的形態(tài) 結(jié)構(gòu)和化學組成 病毒的大小與形態(tài) 病毒體 指完整的 成熟的具有感染性的病毒顆粒 病毒的測量單位 納米 nm 病毒形態(tài) 球形 桿形 絲狀 彈狀 磚形蝌蚪形等研究病毒大小和形態(tài)的方法 電子顯微鏡超濾膜法超速離心法 病毒的結(jié)構(gòu)與化學組成 病毒結(jié)構(gòu) 基本結(jié)構(gòu) 核衣殼 輔助結(jié)構(gòu) 核心 衣殼 殼粒 衣殼 包膜 核心 只含一種核酸 DNA或RNA 分別稱DNA病毒和RNA病毒 控制病毒的增殖 變異 毒力等性狀除去病毒衣殼仍具有感染性的核酸稱感染性核酸 化學成分為蛋白質(zhì)構(gòu)型 螺旋對稱 20面體立體對稱 復合對稱具有保護核酸的作用具有抗原性 能刺激機體產(chǎn)生免疫應答通過與宿主細胞表面受體結(jié)合參與感染 衣殼 包膜 化學成分 類脂 多糖和蛋白質(zhì)類脂 多糖來自宿主細胞蛋白質(zhì)由病毒基因編碼包膜蛋白形成刺突包膜蛋白的作用 具有抗原性參與病毒感染可引起機體發(fā)熱 病毒的增殖 病毒的增殖周期 吸附 穿入 脫殼 生物合成 組裝與釋放 病毒的增殖周期 吸附 特異性吸附穿入 通過胞飲 融合 轉(zhuǎn)位作用方式脫殼 生物合成 病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄復制子代病毒核酸轉(zhuǎn)譯子代病毒蛋白組裝與釋放芽生釋放 破胞釋放 病毒增殖示意圖 吸附 宿主細胞 穿入 脫殼 生物合成 組裝 釋放 病毒的異常增殖和干擾現(xiàn)象 病毒的異常增殖 頓挫感染 缺陷病毒病毒的干擾現(xiàn)象概念 兩種病毒同時或先后感染同一宿主細胞 可發(fā)生一種病毒干擾另一種病毒增殖的現(xiàn)象 干擾機理誘導細胞產(chǎn)生干擾素 競爭干擾干擾類型 同種干擾 異種干擾 自身干擾實際意義 指導疫苗的合理使用 理化因素對病毒的影響 溫度 病毒耐冷不耐熱 應低溫保存病毒輻射 破壞病毒核酸結(jié)構(gòu) 導致病毒滅活脂溶劑 有包膜病毒對脂溶劑敏感消毒劑 可滅活病毒抗生素 病毒對抗生素不敏感 抗生素治療病毒性疾病無效 病毒的變異 變異類型 毒力變異耐藥性變異抗原性變異溫度敏感性變異變異機制基因突變基因重組 病毒的分類 根據(jù)宿主不同分類動物病毒 植物病毒 昆蟲病毒 細菌病毒根據(jù)核酸類型分類 DNA病毒 RNA病毒根據(jù)有無包膜分類 有包膜病毒 無包膜病毒臨床分類呼吸道病毒 消化道病毒 肝炎病毒 蟲媒病毒 出血熱病毒 腫瘤病毒 亞病毒 類病毒 只有單股RNA 無蛋白質(zhì)衣殼主要引起植物疾病朊粒只含具有感染性的蛋白質(zhì) 分子量3 0 104 與老年性癡呆 多發(fā)性硬化癥 腦組織海綿狀淀粉樣變 瘋牛病 等有關(guān) 病毒的感染與免疫 病毒的感染方式 水平傳播 通過黏膜表面 呼吸道 消化道 泌尿生殖道通過皮膚傳播 媒介昆蟲叮咬皮膚醫(yī)源性傳播 經(jīng)輸血 注射 拔牙 手術(shù)等垂直傳播 經(jīng)胎盤傳播經(jīng)產(chǎn)道傳播 病毒感染的類型 隱性感染 成為病毒攜帶者 獲得免疫顯性感染 急性感染持續(xù)性感染慢性感染潛伏感染 慢發(fā)感染 病毒的致病機制 一 病毒對宿主細胞的直接作用影響細胞的生命力殺細胞感染非殺細胞感染細胞融合形成包涵體 有些病毒感染的細胞在普通光學顯微鏡下可觀察到胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)圓形或卵圓形的斑塊狀結(jié)構(gòu)細胞轉(zhuǎn)化細胞凋亡 二 病毒感染的免疫病理損傷體液免疫損傷通過 型超敏反應引起損傷細胞免疫損傷通過Tc細胞和Th1細胞殺傷病毒感染的細胞 同時造成組織細胞損傷病毒直接損傷淋巴細胞或淋巴器官艾滋病毒直接殺傷CD4T細胞 抗病毒免疫 干擾素 干擾素概念 干擾素是個體出生后 由病毒或干擾素誘導劑刺激多種細胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白 種類 型干擾素 干擾素 干擾素 型干擾素 干擾素 免疫干擾素 干擾素的產(chǎn)生及干擾素的作用機制干擾素的生物學活性 抗病毒 免疫調(diào)節(jié) 抗腫瘤 非特異性殺傷不受MHC限制通過依賴抗體的殺傷作用 ADCC 不依賴抗體的殺傷作用 自然殺傷 干擾素可調(diào)節(jié)NK細胞的殺傷作用 NK細胞 特異性免疫 體液免疫的保護作用中和抗體 阻止病毒吸附依賴抗體的細胞毒作用 ADCC 殺傷病毒寄生的細胞細胞免疫的保護作用TH1 釋放細胞因子效應Tc CTL 特異性殺傷病毒寄生的細胞 微生物學檢查 標本采集與送檢 用于培養(yǎng) 注意時間 部位 處理 保存血清學診斷 雙份血清標本檢查方法 顯微鏡觀察 電鏡 光鏡血清學 查病毒標記物 檢測特異性抗體病毒基因檢測 病毒的分離培養(yǎng) 組織細胞培養(yǎng) 將組織或細胞模擬體內(nèi)的生理條件在試管或培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng) 使其生存或生長 稱組織培養(yǎng) 組織培養(yǎng)方法 原代培養(yǎng) 如原代猴腎細胞等次代培養(yǎng) 二倍體細胞株 如人胚肺成纖維細胞傳代株W1 38傳代細胞系 多為腫瘤細胞或突變的二倍體細胞 如Hela細胞 Hep 2細胞等 雞胚接種 雞胚接種的優(yōu)點雞胚接種的缺點雞胚接種部位 卵黃囊接種 尿囊腔接種 絨毛尿囊膜接種 動物接種 病毒的鑒定 初步鑒定 動物感染 根據(jù)病毒感染動物的表現(xiàn)初步判斷雞胚接種 根據(jù)接種部位不同 收獲不同材料 進行觀察細胞培養(yǎng) 細胞病變效應紅細胞吸附干擾作用物理化學實驗 病毒的鑒定 最后鑒定 中和試驗已知抗體 待檢病毒 細胞培養(yǎng) 觀察有無細胞病變交叉保護試驗病毒免疫動物 2周后 用標準動物作攻擊試驗不接種病毒的動物 2周后 用標準動物作攻擊試驗 病毒的血清學診斷 標本采集 早期和恢復期雙份血清急性期單份血清IgM的測定雙份血清的IgG的測定 常用方法中和試驗補體結(jié)合試驗血凝抑制試驗免疫熒光試驗酶免試驗膠乳凝集試驗間接血凝試驗 特異性預防 人工主動免疫滅活疫苗減毒活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗人工被動免疫抗病毒免疫血清丙球 藥物治療 金剛烷胺 抑制病毒脫殼 預防感冒 病毒蛋白酶的抑制物 indinavir 核苷類藥物 皰疹凈 阿昔洛韋 抗病毒藥物 特異性抗體治療性疫苗 免疫制劑 其他 干擾素及干擾素誘生劑 中草藥 抗病毒基因治療 asODN asON 核酶 補體結(jié)合試驗 抗原 抗體 補體 綿羊紅細胞 溶血素 溶血 不溶血 病毒與抗體對應 病毒與抗體不對應 血凝試驗和血凝抑制試驗 血凝試驗 血凝素 雞紅細胞 紅細胞凝集血凝抑制試驗 血凝素 抗體 雞紅細胞 紅細胞不凝集 20面體立體對稱 RNA Capsomere 殼粒 螺旋對稱 病毒的分離培養(yǎng) 三大培養(yǎng)技術(shù)動物接種雞胚接種細胞培養(yǎng) 細胞病變效應 CPE 病毒在細胞內(nèi)增殖引起細胞形態(tài)學改變 干擾素的產(chǎn)生及作用機制 病毒結(jié)構(gòu)示意圖 核心 衣殼 包膜 無包膜