尿液干化學(xué)分析儀.doc

實(shí)驗(yàn)七 尿液干化學(xué)分析儀Urinary Chemical Analyzer實(shí)驗(yàn)原理1儀器工作原理 多聯(lián)試帶模塊與尿樣中相應(yīng)成分發(fā)生特異性呈色反應(yīng)，顏色深淺與相應(yīng)物質(zhì)濃度成正比。光源掃描各模塊產(chǎn)生的反射光，經(jīng)球面積分儀的濾光片得到單色光，照射光電二極管轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。微處理系統(tǒng)結(jié)合參考系統(tǒng)將電信號(hào)校正為測(cè)定值，以定性或半定量方式打印出結(jié)果。2試帶基本結(jié)構(gòu) 如圖5-3，碘酸鹽層可破壞尿中維生素C等還原性物質(zhì)，消除干擾；無(wú)此層的試帶含一個(gè)檢測(cè)維生素C的模塊，以便進(jìn)行有關(guān)項(xiàng)目的校正。塑料底層吸水層試劑層碘酸鹽層尼龍膜圖5-3 尿液干化學(xué)分析儀試劑塊組成示意圖3試帶模塊反應(yīng)原理 各模塊反應(yīng)的原理、參考范圍、常見(jiàn)干擾項(xiàng)目等見(jiàn)表5-10。表5-10 尿液干化學(xué)分析儀檢查項(xiàng)目、原理、參考范圍及主要干擾因素檢測(cè)項(xiàng)目反應(yīng)原理靈敏度參考范圍干擾因素假陽(yáng)性假陰性酸堿度 (pH)酸堿指示劑法4.59.057標(biāo)本久置后，細(xì)菌繁殖或CO2丟失，pH 試帶浸尿時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，pH 蛋白(PRO)pH指示劑蛋白質(zhì)誤差法對(duì)白蛋白敏感(70100mg/L)，對(duì)球蛋白、粘蛋白、本周蛋白敏感性差陰性pH8，奎寧、磺胺嘧啶、聚乙烯吡咯酮等藥物，季銨類(lèi)消毒劑pH3，高濃度青霉素，高鹽，球蛋白、本周蛋白等非電解質(zhì)蛋白葡萄糖 (GLU)葡萄糖氧化酶法250mg/L陰性過(guò)氧化物、強(qiáng)氧化劑污染高VitC、乙酰乙酸，L-多巴代謝物，高比密低pH尿酮體(KET)亞硝基鐵氰化鈉法乙酰乙酸: 50 100mg/L；丙酮: 400700mg/L；與-羥丁酸不反應(yīng)陰性苯丙酮、L-多巴代謝物、酮體以-羥丁酸為主，陳舊尿隱血(BLD)過(guò)氧化物酶法Hb0.30.5mg/L；RBC10/l陰性肌紅蛋白、易熱性觸酶、氧化劑和菌尿 VitC、蛋白尿、糖尿膽紅素 (BIL)偶氮法5mg/L陰性吩噻嗪類(lèi)藥物VitC、亞硝酸鹽、光照尿膽原(UBG)偶氮法或Ehrich反應(yīng)10mg/L陰性或弱陽(yáng)性吩噻嗪類(lèi)藥物、膽色素原、膽紅素、吲哚亞硝酸鹽、光照、重氮藥物亞硝酸鹽 (NIT)偶氮法0.50.6mg/L陰性陳舊尿、亞硝酸鹽或偶氮試劑污染、食物硝酸鹽含量豐富pH5、尿量過(guò)多、食物硝酸鹽含量過(guò)低、尿在膀胱內(nèi)停留4h、非含硝酸鹽還原酶細(xì)菌感染、VitC、亞硝酸鹽白細(xì)胞(LEU/WBC)中性粒細(xì)胞酯酶法25/l陰性甲醛、氧化劑、膽紅素、呋喃類(lèi)藥以淋巴或單核細(xì)胞為主、蛋白、慶大霉素比密(SG)多聚電解質(zhì)中H+解離量與離子濃度相關(guān)1.0101.0301.0151.025電解質(zhì)性尿蛋白致SG堿性尿致SG維生素C(VitC)酸性環(huán)境中還原染料50 mg/L陰性巰基化合物、胱氨酸、內(nèi)源性酚堿性尿儀器組成1機(jī)械系統(tǒng) 將試帶傳送至預(yù)定檢測(cè)區(qū)，檢測(cè)完成后送到廢物盒。2光學(xué)系統(tǒng) 光線(xiàn)照射到試帶表面產(chǎn)生反射光，反射光強(qiáng)度與反應(yīng)顏色成正比。不同強(qiáng)度的反射光經(jīng)光電轉(zhuǎn)換為電信號(hào)進(jìn)行處理。（1）光源：提供特定波長(zhǎng)的光源如發(fā)光二極管(1ight emitting diode，LED)。（2）單色裝置：球面積分儀使模塊表面的反射光轉(zhuǎn)變成單色光。（3）光電檢測(cè)器：將反射光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，如電荷耦合器件（charge coupled device, CCD）。3電路系統(tǒng) 將電信號(hào)放大，經(jīng)模/數(shù)轉(zhuǎn)換后送微處理器（computer unit, CPU）處理，計(jì)算最終檢測(cè)結(jié)果。然后將結(jié)果輸出到屏幕顯示并打印。4微處理器 除了與參照系統(tǒng)比較，處理和校正檢測(cè)信號(hào)外，還控制整個(gè)儀器運(yùn)作。尿干化學(xué)分析儀結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖5-4。光源檢測(cè)器光電轉(zhuǎn)換器微處理器打印輸出模塊掃描結(jié)構(gòu)（可移動(dòng)）試帶進(jìn)樣結(jié)構(gòu)尿多聯(lián)試帶（位置固定）圖5-4 尿干化學(xué)分析儀結(jié)構(gòu)示意圖試劑器材1試劑 人工尿質(zhì)控液低濃度和高濃度各l份。2器材 尿液干化學(xué)分析儀、尿干化學(xué)試帶。操作步驟1開(kāi)機(jī) 打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，等待儀器自檢完成后，進(jìn)入主菜單。2檢測(cè)質(zhì)控試帶 將質(zhì)控試帶置于檢測(cè)槽內(nèi)，啟動(dòng)儀器運(yùn)行鍵，自動(dòng)檢測(cè)。待儀器打印出質(zhì)控結(jié)果，顯示“正?！焙?，取回質(zhì)控帶保存。3浸漬試帶 將試帶完全浸入尿樣中12s，取出，吸干試帶多余的尿樣。4標(biāo)本檢測(cè) 同步驟2，直到儀器自行打印報(bào)告或?qū)?shù)據(jù)輸出。性能評(píng)價(jià)目前各醫(yī)院使用的尿液分析儀的廠(chǎng)家、種類(lèi)不一，型號(hào)各異，但其性能評(píng)價(jià)及儀器的校正均應(yīng)包括以下5個(gè)方面。1校正儀器（1）按儀器制造商規(guī)定的要求，調(diào)正儀器使其處于最佳工作狀態(tài)，包括儀器安裝的位置、工作室溫度和濕度、檢測(cè)速度、打印顯示功能是否在規(guī)定范圍之內(nèi)。避免陽(yáng)光等其他光源的直接照射、外源性振動(dòng)、外源性電源干擾等。（2）檢查儀器檢測(cè)系統(tǒng)：用標(biāo)準(zhǔn)試帶校正條對(duì)儀器進(jìn)行檢測(cè)，觀(guān)察其是否在規(guī)定的范圍內(nèi)。2檢查儀器和多聯(lián)試帶的準(zhǔn)確性 按儀器規(guī)定的測(cè)定范圍配制一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)物，在嚴(yán)格操作的前提下，每份標(biāo)準(zhǔn)物重復(fù)檢測(cè)3次，觀(guān)察其符合程度。3檢查儀器和多聯(lián)試帶的精確性 取人工尿質(zhì)控液（低濃度和高濃度各1份）和自然尿標(biāo)本（正常尿和異常尿各1份），連續(xù)檢測(cè)20次，觀(guān)察每份標(biāo)本每次檢測(cè)是否在靶值允許的范圍內(nèi)（一般每次檢測(cè)最多相差一個(gè)定性等級(jí)）。4評(píng)價(jià)敏感性（S）和特異性（Sp） 將尿液干化學(xué)分析儀和傳統(tǒng)顯微鏡及尿液理化檢查結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，以傳統(tǒng)法為基準(zhǔn)，計(jì)算儀器檢測(cè)的S和Sp。5建立儀器檢測(cè)參數(shù)的參考范圍 以傳統(tǒng)法為基準(zhǔn)，結(jié)合多聯(lián)試帶檢測(cè)范圍，建立符合本實(shí)驗(yàn)室尿分析儀的參考范圍。質(zhì)量控制尿液干化學(xué)分析存在的局限性和影響因素較多，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性。因此，必須十分重視尿干化學(xué)分析儀和多聯(lián)試帶質(zhì)量控制。使用尿干化學(xué)分析儀應(yīng)以傳統(tǒng)法為基準(zhǔn)，結(jié)合多聯(lián)試帶檢測(cè)范圍，建立符合本實(shí)驗(yàn)室尿液分析儀的參考范圍。其質(zhì)量控制的主要環(huán)節(jié)如下：1分析前的質(zhì)量控制（1）尿樣收集：告知病人正確留取尿樣的方法。根據(jù)檢測(cè)內(nèi)容留取適當(dāng)?shù)臉?biāo)本，防止非尿液成分（如陰道分泌物等）混入。要使用1次性尿杯，有明顯的標(biāo)簽，含患者姓名、病歷號(hào)、收集時(shí)間和檢驗(yàn)項(xiàng)目等。（2）了解患者可能影響尿化學(xué)檢測(cè)的進(jìn)食及使用藥物的情況。（3）尿樣保存：尿樣收集后應(yīng)在2h之內(nèi)完成檢測(cè)，否則選用適當(dāng)?shù)姆栏瘎┎⒗洳乇４?。注意?zhǔn)確有效地標(biāo)記尿標(biāo)本。2分析中的質(zhì)量控制 包括儀器和試帶的準(zhǔn)確性、試帶的有效期、儀器操作正確程度和儀器的校正等方面。（1）嚴(yán)格按操作步驟進(jìn)行檢測(cè)。（2）使用質(zhì)控尿液，根據(jù)尿化學(xué)質(zhì)控液的期望值判斷尿液分析儀的工作狀態(tài)是否正常。自制人工尿質(zhì)控液對(duì)尿葡萄糖、蛋白質(zhì)、血紅蛋白基本能滿(mǎn)足要求，但尿膽紅素、尿膽原結(jié)果不能令人滿(mǎn)意，尿酮體也有問(wèn)題。國(guó)外公司的商品質(zhì)控液效果較好，如Bio-Rad公司的Routine Urine Chemistry Control。（3）質(zhì)控步驟：在對(duì)分析儀全面鑒定和定期校正的基礎(chǔ)上，每日對(duì)儀器和試帶按圖5-3程序進(jìn)行檢查。每次使用“正?！焙汀爱惓！眱煞N濃度的質(zhì)控物進(jìn)行檢查：同1天內(nèi)最好使用同l份質(zhì)控物標(biāo)本；質(zhì)控物任一膜塊的測(cè)定結(jié)果與“靶值”允許有1個(gè)定性等級(jí)的差異（靶值的），超過(guò)此范圍或結(jié)果由“正?！弊兂?“異?！被蛴伞爱惓！弊兂伞罢！本鶓?yīng)視為失控。尿液分析中質(zhì)量控制程序見(jiàn)圖5-5。圖5-5 尿液分析中質(zhì)量控制程序用質(zhì)控物進(jìn)行質(zhì)控質(zhì)控允許范圍內(nèi)超出質(zhì)控允許范圍標(biāo)本測(cè)定檢查質(zhì)控物是否失效 No Yes 重復(fù)試驗(yàn) 重新試驗(yàn)使用新質(zhì)控物質(zhì)控允許范圍內(nèi) 質(zhì)控允許范圍外 繼續(xù)標(biāo)本測(cè)定 配制新質(zhì)控物質(zhì)控允許范圍內(nèi)質(zhì)控允許范圍外標(biāo)本測(cè)定重新試驗(yàn)另一批號(hào)新試帶新試帶廢棄失效試帶質(zhì)控允許范圍內(nèi) 質(zhì)控允許范圍外標(biāo)本測(cè)定檢修或校正儀器新批號(hào)試帶廢棄全部失效試帶質(zhì)控允許范圍外質(zhì)控允許范圍內(nèi)啟用同一批號(hào)試帶 繼續(xù)標(biāo)本測(cè)定使用新質(zhì)控物廢棄舊質(zhì)控物3分析后的質(zhì)量控制 包括試驗(yàn)結(jié)果與顯微鏡檢結(jié)果的相關(guān)性、是否受藥物或病理物質(zhì)的干擾、參考范圍的認(rèn)可、報(bào)告單書(shū)寫(xiě)是否規(guī)范和報(bào)告單回報(bào)時(shí)間是否及時(shí)等方面。（1）化學(xué)分析結(jié)果與顯微鏡檢結(jié)果之間的關(guān)聯(lián)性：如出現(xiàn)表5-11情況表示尿化學(xué)檢測(cè)結(jié)果可疑，應(yīng)進(jìn)一步查明原因。表5-11 尿干化學(xué)結(jié)果可疑情況化學(xué)分析顯微鏡檢查隱血（）大量紅細(xì)胞亞硝酸鹽（）白細(xì)胞（）蛋白質(zhì)（）紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型增多（2）綜合考慮患者的病史：特別是腎臟疾病患者，尿蛋白定性應(yīng)當(dāng)用磺基水楊酸法。如尿化學(xué)分析結(jié)果與鏡檢不一致，應(yīng)進(jìn)一步查明原因。（3）參考范圍的認(rèn)可：尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)白細(xì)胞、紅細(xì)胞出現(xiàn)“假陰性”時(shí)，應(yīng)以鏡檢為準(zhǔn)；但當(dāng)“假陽(yáng)性”時(shí)，儀器的結(jié)果可能正確。這種情況見(jiàn)于白細(xì)胞：當(dāng)尿在膀胱貯存時(shí)間長(zhǎng)，白細(xì)胞破壞，中性粒細(xì)胞酯酶釋放到尿中，導(dǎo)致儀器分析（），鏡檢反而（）；紅細(xì)胞：腎病患者尿中紅細(xì)胞常破壞而釋出血紅蛋白或某些病人尿中有高活性不耐熱的觸酶時(shí)均可導(dǎo)致儀器分析（），鏡檢卻為（）。尿液煮沸冷卻后再測(cè)試可排除不耐熱的觸酶造成的假陽(yáng)性。其他情況要結(jié)合臨床實(shí)踐，不能一概否定或肯定儀器檢測(cè)結(jié)果，更不能隨意調(diào)節(jié)改