OD-1000測濃度使用說明書(onedrop).doc

OD1000分光光度計(jì)簡要操作說明1. 雙擊電腦屏幕上的OD-1000圖標(biāo),啟動軟件.2. 選擇所需的測量模式,屏幕上會彈出初始化儀器的提示.往儀器的下樣品臺中間加入2微升的蒸餾水,合上上臂使形成液柱,然后點(diǎn)擊確定以開始初始化,可以聽見電磁閥開合的聲音.3. 幾秒后屏幕上的提示信息消失,表示初始化完成.用吸水紙將蒸餾水擦干凈,加入2微升的Buffer,合上上蓋并點(diǎn)擊Blank.4. Blank完成后,用吸水紙將Buffer擦干凈即可以開始上樣,點(diǎn)擊Measure開始測量. 圖一 圖二 圖三 圖四5. 測量完成后,點(diǎn)擊Show Report查看結(jié)果,選擇Save進(jìn)行保存.6. 保存的數(shù)據(jù)對應(yīng)地保存在C:Onedrop Data文件夾.OD-1000操作注意事以下建議非必須，但按此操作可得到更佳測量效果：1、 測量前將樣品中度混勻（可采用震蕩器或用手指彈震管底）。2、 TIP頭插入液面下吸取樣品，可避免吸入氣泡；TIP頭貼著下光纖表面打出樣品，且只按到移液器第一擋盡頭，第二擋不要按，可以避免吹出氣泡到樣品中。3、 每次測量完畢后，用蒸餾水清潔上下光纖端面，這樣可以更好地保證下一次測量的準(zhǔn)確性（主要針對超高濃度樣品，一般樣品無此要求）。4、 擦拭用紙需采用柔軟、無屑的，比如濾紙、優(yōu)質(zhì)面巾紙或?qū)嶒?yàn)室專用擦拭紙。以防紙纖維絲落入液體中。5、 每次做BLANK前一定要先用水清潔上下光纖表面，可保證BLANK準(zhǔn)確。6、 每次測量的核酸樣品量建議為1.5-2微升,蛋白樣品建議2-2.5ul. 過少可能無法形成水柱，過多可能溢出。7、 加樣后盡快測量，以防蒸發(fā)濃縮以及灰塵落入，已加樣品不能多次MEASURE,如需重測需重新滴加同一樣品。8、 儀器避免陽光直射，避免強(qiáng)風(fēng)吹拂，以避免蒸發(fā)。9、 儀器USB線與電腦連接時間越長熱平衡越好，所以建議USB線與電腦一直連接；并在每天使用前電腦先開機(jī)一段時間后再使用儀器。10、 連續(xù)測量一段時間后擦凈樣品，用水清潔上下光纖表面，然后用水或BUFFER做RE-BLANK后再M(fèi)EASURE10、為保證軟件高速掃描光譜，請勿同時運(yùn)行其他高占用CPU的軟件。11、儀器不用時，將上臂放下，并在兩臂間墊幾層擦拭紙，可以防止灰塵。注：清潔上下光纖表面（pedestal）的方法是：用移液器加2-2.5ul水在下光纖表面，放下上臂，并順便按壓一下上臂，以使下光纖表面的水滴碰到上光纖表面，然后將上下表面的水都用吸水紙擦去即可。清除樣品時同樣是要將上下表面都擦去。軟件的簡要操作：（以測量核酸為例）1 雙擊啟動Nanodrop軟件，進(jìn)入以下界面（不同的軟件版本可能略有不同）2點(diǎn)擊Nuceic Acid Measurement（核酸測量），會跳出以下對話框：往加樣孔里加入2ul蒸餾水，合上上蓋使形成液柱，然后點(diǎn)擊OK確定，儀器開始初始化并發(fā)出噠噠聲。3 在初始化時，屏幕上會出現(xiàn)如下信息：“Initializing Spectrometer- please wait” and “checking detector bias”。當(dāng)這些信息消失后，儀器即可正常使用。軟件轉(zhuǎn)為如下界面：4測量空白對照：用吸水紙將加樣孔和上蓋的液體擦干凈，然后向加樣孔中加入空白對照樣2ul（即Blank），合上上蓋并點(diǎn)擊Blank。5 Blank完成后，即可開始樣品的測量：在Sample Type的下拉列表中選擇樣品類型，如DNA50，ssDNA-37,RNA-40(-之后的數(shù)字表示此樣品的OD為1時所對應(yīng)的濃度，單位為ng/ul)，用吸水紙將加樣孔和上蓋的液體擦干凈，然后向加樣孔中加入2ul樣品，點(diǎn)擊Measure，可以看到如下結(jié)果6用吸水紙將加樣孔和上蓋的液體擦干凈，然后向加樣孔中加入另一個樣品，以同樣的方法進(jìn)行測量。如果要查看所有的測量結(jié)果，點(diǎn)擊Show Report。7如果要退出此測量界面，點(diǎn)擊右上角的EXIT。在退出前請保存測量數(shù)據(jù)。 注：Reblank是指重新做空白對照，其值不僅會應(yīng)用于之后測量的樣品，也會同時作為新的空白對照更改之前測量的樣品值8歷史數(shù)據(jù)查詢在以下目錄：C:onedrop datatemp databackup聲明: 以上操作方法對于其他測量如蛋白的測量具有一定的參考意義，只是在具體的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法上略有不同，如BCA,Bradford等以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立。詳細(xì)內(nèi)容請參閱生物學(xué)資料和說明書名詞介紹:Nuclear Acid Measurement: 核酸測量Protein 280: 用280nm波長測量蛋白,選擇適當(dāng)?shù)牡鞍最愋?如BSA,IgG等),軟件將在測量后給出吸光度值并自動計(jì)算其濃度MicroArray Measurement: 測定熒光染料標(biāo)記核酸的效率UV-vis Measurement: 連續(xù)波譜掃描,可用于尋找最大吸收峰Cell Cultures: 用600nm波長測量菌密度Protein BCA: BCA法測蛋白Protein Bradford: Bradford法測蛋白Protein Lowry: Lowry法測蛋白User Preference: 用戶對于軟件的默認(rèn)設(shè)置做一些修改Utility & Diagnostics: 性能診斷Sample Type: 選擇樣品的類型 l: 使用者自己輸入波長,并查看樣品在此波長的OD值 Abs: 吸光度值 A260 10mm Path : 常規(guī)的分光光度計(jì)使用的比色杯寬度約為10mm,即測量光程為10mm,與常規(guī)分光光度計(jì)不同的是,Nanodrop的測量光程是1mm和0.2mm.但是軟件會自動將所測得的吸光度值轉(zhuǎn)換成10mm光程對應(yīng)的值. A260 10mm Path就是指10mm測量光程時樣品在260nm波長時的OD值 A280 10mm Path: 10mm測量光程時,樣品在280nm波長時的OD值 Dye: 染料 Max Absorbance: 使用