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第8課時(shí)菊花的組織培養(yǎng)學(xué)習(xí)導(dǎo)航1.閱讀教材p32“基礎(chǔ)知識(shí)”,掌握植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程及影響因素。2.閱讀教材p3435“實(shí)驗(yàn)操作”,掌握植物組織培養(yǎng)的過(guò)程及注意事項(xiàng)。3.結(jié)合教材p36“課題延伸”及左側(cè)培養(yǎng)基配方,理解植物激素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。重難點(diǎn)擊1.熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程。2.理解細(xì)胞分化的概念及離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化。3.歸納ms培養(yǎng)基的配制方法,并設(shè)計(jì)表格比較微生物培養(yǎng)基與ms培養(yǎng)基的配方的異同。一、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程和影響因素1.原理理論基礎(chǔ):細(xì)胞的全能性。(1)概念:已經(jīng)分化的細(xì)胞,仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。(2)原因:具有該種生物全套遺傳信息。2.植物組織培養(yǎng)的過(guò)程(1)過(guò)程外植體愈傷組織根或芽完整植株。(2)相關(guān)概念外植體:用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。脫分化:又叫去分化,是由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程。再分化:愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng),重新分化成根或芽等器官的過(guò)程。愈傷組織的特點(diǎn):細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則,是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。3.影響植物組織培養(yǎng)的因素(1)內(nèi)因不同的植物組織:培養(yǎng)的難易程度差別很大。同一種植物材料:材料的年齡、保存時(shí)間的長(zhǎng)短等也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花的組織培養(yǎng):一般選擇未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。(2)外因1.植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。(1)為什么高度分化的植物細(xì)胞還具有全能性?答案因?yàn)楦叨确只闹参锛?xì)胞中含有該物種的全套遺傳物質(zhì)。(2)高度分化的植物細(xì)胞發(fā)育成完整的植株需要哪些條件?答案離體條件;充足的營(yíng)養(yǎng)條件;恰當(dāng)?shù)募に胤N類及濃度配比;適宜的環(huán)境條件;無(wú)菌條件。2.植物組織培養(yǎng)的一般過(guò)程分析。(1)你認(rèn)為植物組織培養(yǎng)的核心環(huán)節(jié)是什么?答案植物組織培養(yǎng)的核心環(huán)節(jié)為脫分化和再分化。(2)你認(rèn)為菊花的組織培養(yǎng)的再分化應(yīng)先誘導(dǎo)生芽還是先誘導(dǎo)生根?答案應(yīng)先誘導(dǎo)生芽,再誘導(dǎo)生根。(3)植物組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)操作主要有哪幾個(gè)步驟?答案主要有6個(gè)步驟:制備ms固體培養(yǎng)基;外植體消毒;接種;培養(yǎng);移栽;栽培。(4)在配制培養(yǎng)基的過(guò)程中,ph的調(diào)節(jié)是在分瓶前還是分瓶后?答案在分瓶前調(diào)節(jié)ph。3.外植體的選擇(1)植物組織培養(yǎng)中應(yīng)盡量選擇什么樣的材料作為外植體?為什么?答案應(yīng)盡量選擇幼嫩的植物組織或器官作為外植體。因?yàn)橥庵搀w的年齡越小,分化程度越低,組織培養(yǎng)的成功率就越高。(2)為什么選擇莖尖分生組織可培育出脫毒苗?答案植物莖尖分生組織,細(xì)胞分裂速度快,其病毒極少,甚至無(wú)病毒。歸納總結(jié)植物組織培養(yǎng)的過(guò)程分析過(guò)程主要變化特點(diǎn)脫分化由外植體形成愈傷組織由高度分化的細(xì)胞恢復(fù)為具有分裂能力的細(xì)胞再分化由愈傷組織形成根、芽等器官重新分化出不同的組織、器官生長(zhǎng)發(fā)育成完整植物體包括營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和生殖生長(zhǎng)1.關(guān)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)的敘述正確的是()a.用于培養(yǎng)的材料不一定需要離體b.植物可通過(guò)光合作用合成有機(jī)物,培養(yǎng)基中不需要加入含碳有機(jī)物c.愈傷組織可制造成人工種子d.脫分化和再分化都需要培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素刺激、誘導(dǎo)答案d解析用于培養(yǎng)的材料一定需要離體,否則基因選擇性表達(dá)形成組織和器官,a項(xiàng)錯(cuò)誤;植物組織培養(yǎng)基中需加入含碳有機(jī)物,提供碳源和能源,b項(xiàng)錯(cuò)誤;胚狀體可制成人工種子,c項(xiàng)錯(cuò)誤;不同階段的培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例不同,可誘導(dǎo)培養(yǎng)物進(jìn)行分裂和分化,d項(xiàng)正確。2.如圖是基因型為aabb的菊花莖尖離體培養(yǎng)示意圖,據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)圖中a和b分別表示_和_。菊花莖尖培養(yǎng)成植物體的根本原因是_。(2)菊花的組織培養(yǎng)形成試管苗的過(guò)程中,其中應(yīng)大量供給的元素是_。試管苗形成過(guò)程中要給予一定光照,其原因是_。(3)脫分化是指_。脫分化和再分化這兩個(gè)過(guò)程的進(jìn)行,除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外,還要保證_,否則植物組織培養(yǎng)就不能成功。(4)這樣培養(yǎng)成的試管苗的基因型為_(kāi)。答案(1)脫分化再分化植物細(xì)胞具有全能性(2)n、s、p、k、ca、mg試管苗形成過(guò)程中要進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物(3)高度分化的植物組織或細(xì)胞,通過(guò)離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程無(wú)菌(4)aabb解析(1)離體的植物組織或細(xì)胞,在培養(yǎng)了一段時(shí)間以后,會(huì)通過(guò)細(xì)胞分裂,形成愈傷組織。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個(gè)過(guò)程叫做再分化。菊花莖尖能培養(yǎng)成植物體的根本原因是植物細(xì)胞具有全能性。(2)離體的植物組織和細(xì)胞,常用ms培養(yǎng)基培養(yǎng),其主要成分包括:大量元素,如n、p、k、ca、mg、s;微量元素,如fe、mn、b、zn、cu、mo、co、i;有機(jī)物以及蔗糖等。在試管苗形成過(guò)程中要每日給予日照12 h,其原因是試管苗形成過(guò)程中要進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物。(3)脫分化和再分化這兩個(gè)過(guò)程的進(jìn)行除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外,還要保證無(wú)菌,原因是雜菌產(chǎn)生的毒素等物質(zhì)會(huì)影響或阻礙植物組織脫分化形成愈傷組織或再分化為根和芽,且雜菌的繁殖能力很強(qiáng),會(huì)與植物組織爭(zhēng)奪培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),使植物得不到營(yíng)養(yǎng),同時(shí)雜菌還會(huì)侵染植株,使之受到傷害。(4)由于植物組織培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,所以培養(yǎng)成的試管苗的基因型為aabb。特別提醒植物組織培養(yǎng)的兩點(diǎn)誤區(qū)警示(1)細(xì)胞全能性表達(dá)的理解細(xì)胞全能性的表達(dá)是由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育成完整個(gè)體,發(fā)育的終點(diǎn)是完整個(gè)體,若發(fā)育為某個(gè)器官或組織不屬于細(xì)胞全能性的表達(dá)。細(xì)胞全能性的大小是自然條件下的,在適宜外界條件下,植物的體細(xì)胞培養(yǎng)比生殖細(xì)胞的培養(yǎng)更容易。(2)對(duì)愈傷組織特點(diǎn)的理解:愈傷組織的細(xì)胞是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞,具有旺盛的分裂能力,無(wú)中央大液泡。二、進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)1.制備ms固體培養(yǎng)基(1)配制各種母液。濃縮倍數(shù)(2)配制培養(yǎng)基:向稱好的瓊脂中加入蒸餾水加熱使瓊脂熔化加入蔗糖和配制好的各種母液加蒸餾水定容調(diào)節(jié)ph分裝。(3)滅菌:高壓蒸汽滅菌法。2.外植體消毒(1)方法:用流水沖凈吸干表面水分體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒無(wú)菌水清洗吸干表面水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液消毒無(wú)菌水清洗。(2)原則:既要考慮藥劑的消毒效果,又要考慮植物的耐受能力。3.接種(1)前期準(zhǔn)備:用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精對(duì)工作臺(tái)消毒,點(diǎn)燃酒精燈。(2)接種操作:外植體形態(tài)學(xué)上端朝上插入培養(yǎng)基中,每瓶接種68塊外植體。(3)注意事項(xiàng):接種操作必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行,器械使用后用火焰灼燒滅菌。4.培養(yǎng)培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該放在無(wú)菌箱中進(jìn)行,并定期進(jìn)行消毒,保持適宜的溫度和光照。5.移栽移栽前應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)瓶的封口膜,讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日,然后用流水清洗根部的培養(yǎng)基。最后將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間,等幼苗長(zhǎng)壯后再移栽到土壤中。6.栽培將幼苗移栽后,每天觀察并記錄幼苗生長(zhǎng)情況,適時(shí)澆水、施肥,直到開(kāi)花。1.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)對(duì)組織培養(yǎng)的作用(1)探討ms培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用大量元素和微量元素:提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽。蔗糖:提供碳源,同時(shí)能夠維持細(xì)胞的滲透壓。甘氨酸、維生素等有機(jī)物:主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。(2)植物是自養(yǎng)生物,為什么用于植物組織培養(yǎng)的ms培養(yǎng)基中需要加入有機(jī)物作為碳源?答案通常植物體本身進(jìn)行光合作用產(chǎn)生糖類,不需要外部供給糖,但植物組織培養(yǎng)利用的是離體組織或細(xì)胞,在其脫分化過(guò)程中不能進(jìn)行光合作用合成糖類,因此必須在培養(yǎng)基中添加糖類,作為碳源和能源物質(zhì),同時(shí)維持細(xì)胞的滲透壓。(3)同微生物培養(yǎng)基的配方相比,ms培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?答案微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,ms培養(yǎng)基則含有植物生長(zhǎng)必需的大量元素和微量元素,還需要添加植物激素。2.植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用(1)試說(shuō)出植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用調(diào)節(jié)劑主要作用生長(zhǎng)素促進(jìn)細(xì)胞的伸長(zhǎng),促進(jìn)愈傷組織和根的形成細(xì)胞分裂素促進(jìn)細(xì)胞的分裂,促進(jìn)芽的分化和形成(2)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素使用順序及比例對(duì)植物組織培養(yǎng)的影響按照不同的順序使用這兩類激素,實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高當(dāng)同時(shí)使用這兩類激素時(shí),兩者用量的比值不同,植物細(xì)胞的發(fā)育方向不同生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值與結(jié)果比值高時(shí)促進(jìn)根的分化,抑制芽的形成比值低時(shí)有利于芽的分化,抑制根的形成比值適中有利于愈傷組織的形成3.植物組織培養(yǎng)中的無(wú)菌技術(shù)在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中是如何實(shí)現(xiàn)無(wú)菌操作的?(1)對(duì)于培養(yǎng)基:用高壓蒸汽滅菌法滅菌。(2)對(duì)于外植體:用酒精和氯化汞溶液消毒,放到無(wú)菌箱中培養(yǎng),移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生活一段時(shí)間。3.生物工程的研究成果已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域,目前科學(xué)家利用植物的莖尖和葉片、莖段等,在無(wú)菌條件下,培養(yǎng)在玻璃器皿中人工配制的培養(yǎng)基上,使之發(fā)育成完整的植株。下圖是運(yùn)用該技術(shù)培養(yǎng)蘭花植株的示意圖。下列關(guān)于這種生物工程技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是()a.這種技術(shù)叫做植物組織培養(yǎng),可以克隆生物體b.過(guò)程的單細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)豐富,液泡小而細(xì)胞核大c.用此方法克隆植物要盡量選擇優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)不充分的材料d.這種技術(shù)可與基因工程、航天工程結(jié)合培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的作物品種問(wèn)題導(dǎo)析(1)植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)一般不會(huì)(填“會(huì)”或“不會(huì)”)發(fā)生改變,所以該項(xiàng)技術(shù)屬于一種克隆技術(shù)。(2)通過(guò)基因工程將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞后,必須采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將植物細(xì)胞培養(yǎng)成植株。答案c解析過(guò)程的單細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)豐富,液泡小而細(xì)胞核大,這是胚性細(xì)胞(類似胚胎細(xì)胞)的特征,在適宜的培養(yǎng)基中,這種單細(xì)胞可發(fā)育成胚狀體。要獲得植物克隆的成功,要盡量選擇優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分的材料。隨著科技的發(fā)展,植物組織培養(yǎng)可與基因工程、航天工程結(jié)合培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的作物品種。4.植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中加有植物激素。下表是培養(yǎng)基中兩種植物激素在不同比例時(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(其中6ba是細(xì)胞分裂素,iaa是生長(zhǎng)素)。請(qǐng)分析完成下列問(wèn)題:實(shí)驗(yàn)組別1234激素種類及激素濃度關(guān)系6ba6baiaa6baiaa6baiaa結(jié)果組織塊產(chǎn)生愈傷組織組織塊分化出芽愈傷組織不斷生長(zhǎng)愈傷組織有生根趨勢(shì)(1)促進(jìn)愈傷組織產(chǎn)生的條件是_,愈傷組織生長(zhǎng)的條件是_。(2)芽的分化條件是_,根的分化條件是_。(3)在植物組織培養(yǎng)中,脫分化可用的激素組合是實(shí)驗(yàn)_和實(shí)驗(yàn)_中的激素濃度關(guān)系,再分化時(shí)可用的激素組合是實(shí)驗(yàn)_和實(shí)驗(yàn)_中的激素濃度關(guān)系。整個(gè)實(shí)驗(yàn)表明,植物的生根、發(fā)芽等生命活動(dòng)是_的結(jié)果。(4)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中,除激素外,還必須含有_,它的成分至少應(yīng)該含有_、_等。(5)判斷愈傷組織是否產(chǎn)生的依據(jù)是看是否產(chǎn)生了_的細(xì)胞。答案(1)必須有細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量相等(2)細(xì)胞分裂素的含量大于生長(zhǎng)素的含量生長(zhǎng)素的含量大于細(xì)胞分裂素的含量(3)1324多種激素共同作用(4)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)礦質(zhì)元素有機(jī)物(5)排列疏松而無(wú)規(guī)則、高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)解析(1)由表中實(shí)驗(yàn)1和實(shí)驗(yàn)3的數(shù)據(jù)顯示,促進(jìn)愈傷組織產(chǎn)生的條件是必須有細(xì)胞分裂素,愈傷組織生長(zhǎng)的條件是細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量相等。(2)由實(shí)驗(yàn)2和4可知,細(xì)胞分裂素的含量大于生長(zhǎng)素的含量,促進(jìn)芽的分化,生長(zhǎng)素的含量大于細(xì)胞分裂素的含量促進(jìn)根的分化。(3)表中1、3組激素的使用利于愈傷組織的形成與生長(zhǎng),即為脫分化。2、4組激素的使用利于根或芽的分化,即為再分化。(4)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中,除激素外,還必須含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它的成分至少應(yīng)該含有礦質(zhì)元素、有機(jī)物等。(5)愈傷組織是一種分化程度較低的細(xì)胞,是排列疏松而無(wú)規(guī)則、高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。1.影響植物組織培養(yǎng)的因素包括()培養(yǎng)基的配制外植體的選取激素的使用消毒溫度、ph、光照a. b.c. d.答案a解析植物組織培養(yǎng)過(guò)程受多種外界因素的影響,其中包括溫度、光照、ph等,而培養(yǎng)基的成分、外植體的選取和消毒是否嚴(yán)格等也影響組織培養(yǎng)。2.在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值高時(shí),下列描述正確的是()a.有利于根的分化和芽的形成b.不利于根的分化和芽的形成c.有利于芽的形成,抑制根的分化d.有利于根的分化,抑制芽的形成答案d解析生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值高時(shí),有利于根的分化,抑制芽的形成;比值低時(shí),有利于芽的分化,抑制根的形成;比值適中時(shí),促進(jìn)愈傷組織的形成。3.下列哪組符合菊花組織培養(yǎng)的基本步驟()a.制備ms固體培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培b.制備ms固體培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)栽培移栽c.制備ms固體培養(yǎng)基外植體消毒接種栽培培養(yǎng)移栽d.制備ms固體培養(yǎng)基外植體消毒接種移栽培養(yǎng)栽培答案a解析移栽是指將培養(yǎng)基上培養(yǎng)的幼苗長(zhǎng)壯后移栽到土壤中,栽培是對(duì)移栽后的幼苗進(jìn)行精細(xì)管理培養(yǎng)的過(guò)程,應(yīng)先移栽后栽培。4.1958年,美國(guó)科學(xué)家斯圖爾德應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù),將二倍體胡蘿卜韌皮部的一些細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng),最終發(fā)育成完整的新植株。下列關(guān)于這一科學(xué)事實(shí)的敘述中,錯(cuò)誤的是()該實(shí)驗(yàn)證明了植物細(xì)胞具有全能性此種生殖產(chǎn)生的后代有廣泛的變異韌皮部細(xì)胞通過(guò)減數(shù)分裂增加細(xì)胞數(shù)目此種生殖產(chǎn)生的后代能保持親本的性狀a. b.c. d.答案b解析體細(xì)胞組織培養(yǎng)屬于無(wú)性繁殖,其后代能保持親本的性狀,變異性?。惑w細(xì)胞不能進(jìn)行減數(shù)分裂。5.下圖表示菊花的莖尖細(xì)胞通過(guò)無(wú)菌操作接種到試管培養(yǎng)基上后,在一定的條件下,形成試管苗的培育過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)要促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括_和小分子有機(jī)物,激素包括細(xì)胞分裂素和_兩類植物激素。(2)此過(guò)程依據(jù)的原理是_。a和b階段主要進(jìn)行的分裂方式是_,b階段除了細(xì)胞分裂外,還進(jìn)行細(xì)胞_等。(3)此過(guò)程要無(wú)菌操作,主要是指對(duì)_進(jìn)行滅菌消毒。b階段需要光照,原因是_。(4)試管苗的根細(xì)胞沒(méi)有葉綠素,而葉的葉肉細(xì)胞具有葉綠素,這是基因_的結(jié)果。答案(1)無(wú)機(jī)物生長(zhǎng)素(2)細(xì)胞的全能性有絲分裂分化(3)培養(yǎng)基芽發(fā)育成葉,葉肉細(xì)胞中葉綠素的合成需要光照條件(4)選擇性表達(dá)解析植物組織培養(yǎng)是用離體的植物組織、器官或細(xì)胞接種到經(jīng)消毒滅菌的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基含有供組織細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育所需要的無(wú)機(jī)物和小分子有機(jī)物,還有調(diào)節(jié)細(xì)胞脫分化和再分化的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。由外植體發(fā)育成試管苗,脫分化階段細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,再分化階段愈傷組織細(xì)胞經(jīng)有絲分裂和細(xì)胞分化形成試管苗,此階段需要光照,原因是葉肉細(xì)胞中葉綠素的合成需要光照條件。基礎(chǔ)過(guò)關(guān)1.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的脫分化的敘述,正確的是()a.植物體的分生組織通過(guò)細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞的過(guò)程b.體內(nèi)分化的細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能發(fā)生改變的過(guò)程c.高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程d.愈傷組織分裂產(chǎn)生大量相同細(xì)胞的過(guò)程答案c2.植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理、培養(yǎng)過(guò)程的順序及誘導(dǎo)使用的植物激素分別是()細(xì)胞的全能性離體植物器官、組織或細(xì)胞根、芽生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素和乙烯愈傷組織再分化脫分化植物體a.、 b.、c.、 d.、答案b解析植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理為植物細(xì)胞的全能性;培養(yǎng)過(guò)程的順序是離體植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,再分化形成根、芽等進(jìn)而形成新的植物體;誘導(dǎo)使用的植物激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。3.植物材料的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗,菊花選材一般選擇的是()a.未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝b.開(kāi)花植株的莖上部枝條c.開(kāi)花植株上的花藥d.未開(kāi)花植株的莖下部的枝條答案a解析進(jìn)行組織培養(yǎng)一般選用幼嫩部分。4.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是()a.給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件b.導(dǎo)入其他植物的基因c.脫離母體并給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件d.將成熟的篩管的細(xì)胞移到去核的卵細(xì)胞中答案c5.植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程:外植體脫分化,愈傷組織再分化,形成根和芽。下列相關(guān)敘述中,錯(cuò)誤的是()a.該過(guò)程的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞的全能性b.脫分化依賴有絲分裂完成c.愈傷組織中的細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)相似d.再分化的實(shí)質(zhì)是某些基因缺失,某些基因表達(dá)答案d解析植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞的全能性,a正確;脫分化過(guò)程中進(jìn)行的增殖方式是有絲分裂,該過(guò)程還沒(méi)有進(jìn)行細(xì)胞分化,所以愈傷組織中的細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)相似,b、c正確;細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),該過(guò)程中沒(méi)有基因的缺失,d錯(cuò)誤。6.在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中,需要下列哪些條件()消毒滅菌一定濃度的植物激素適宜的溫度充足的光照充足的養(yǎng)料適宜的pha. b.c. d.答案d解析整個(gè)植物組織培養(yǎng)過(guò)程中需要無(wú)菌環(huán)境、激素的調(diào)節(jié)、適宜溫度和ph。形成愈傷組織的過(guò)程中,細(xì)胞中葉綠體還沒(méi)有形成,不需要光照進(jìn)行光合作用;不能制造有機(jī)物,需要外界給予。能力提升7.在植物組織培養(yǎng)再分化階段中,逐漸改變培養(yǎng)基中植物激素x和植物激素y的濃度比,細(xì)胞群的變化情況如圖所示。若培養(yǎng)基中植物激素x的濃度為a、植物激素y的濃度為a0.2,則細(xì)胞群分化的結(jié)果最可能是試管()答案c解析從圖中可以看出,植物激素比例適中時(shí)有利于愈傷組織的形成,而當(dāng)植物激素x多于植物激素y時(shí)有利于芽的分化,反之則有利于根的分化,所以當(dāng)植物激素x的濃度為a,而植物激素y的濃度為a0.2時(shí)的培養(yǎng)結(jié)果應(yīng)為c。8.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)中植物激素使用的說(shuō)法,不正確的是()a.植物組織培養(yǎng)中的關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素b.先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素,有利于細(xì)胞分裂和分化c.先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素,細(xì)胞既分裂也分化d.同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí),兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向答案b解析在植物組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基中除營(yíng)養(yǎng)成分外還須添加植物激素,一般包括生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素;外植體脫分化、再分化的誘導(dǎo)方向取決于二者的比例。先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素,有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化;先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素,對(duì)細(xì)胞的分裂和分化均有利。9.菊花種植多年后易積累病毒而導(dǎo)致品種退化。目前生產(chǎn)上采用莖尖分生組織離體培養(yǎng)的方法快速繁殖脫毒的種苗,以保證該品種的品質(zhì)。這種通過(guò)分生組織離體培養(yǎng)獲得種苗的過(guò)程不涉及細(xì)胞的()a.有絲分裂b.分化c.減數(shù)分裂d.全能性答案c解析菊花種植多年后由于細(xì)胞中病毒的積累而使品種退化。莖尖細(xì)胞的有絲分裂速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于病毒的增殖速度,因此常選用菊花的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng),以達(dá)到脫毒目的,其原理是細(xì)胞的全能性;在組織培養(yǎng)過(guò)程中,離體組織通過(guò)脫分化才能成為愈傷組織,經(jīng)過(guò)再分化、細(xì)胞有絲分裂,成為具有根、莖、葉的植物體;植物組織培養(yǎng)過(guò)程中不涉及減數(shù)分裂。10.某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線為“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”。下列有關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是()a.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害b.愈傷組織形成過(guò)程中,既有細(xì)胞分裂,也有細(xì)胞分化c.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控d.生根時(shí),培養(yǎng)基通常應(yīng)含萘乙酸等生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑答案b解析組織培養(yǎng)時(shí)應(yīng)確保無(wú)菌操作,消毒劑的使用原則是既能殺死材料表面的微生物,又能防止傷害組織細(xì)胞,a正確;愈傷組織形成過(guò)程中,只有細(xì)胞分裂,b錯(cuò)誤;出芽和生根都是細(xì)胞再分化的結(jié)果,其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),c正確;萘乙酸為生長(zhǎng)素類似物,可誘導(dǎo)愈傷組織生根,d正確。11.如下圖所示為胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通過(guò)無(wú)菌操作接入試管后,在一定的條件下形成試管苗的培育過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)要促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括_、_和小分子有機(jī)物。植物激素中細(xì)胞分裂素和_是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。(2)此過(guò)程要用_和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的_對(duì)_進(jìn)行消毒。(3)a過(guò)程稱為_(kāi),b過(guò)程稱為_(kāi)。答案(1)大量元素微量元素生長(zhǎng)素(2)酒精氯化汞溶液外植體(3)脫分化再分化解析植物組織培養(yǎng)是將外植體接種到經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)基含有組織細(xì)胞所需的大量元素、微量元素和小分子有機(jī)物,還需加入細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素等植物激素。由外植體發(fā)育到試管苗,需經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織,再經(jīng)再分化形成試管苗。12.斯圖爾德將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),最終獲得發(fā)育完整的新個(gè)體,實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下:細(xì)胞團(tuán)胚狀體植株(1)a過(guò)程稱為_(kāi),誘導(dǎo)這一過(guò)程的物質(zhì)是_。這一實(shí)驗(yàn)的原理是_。(2)植物組織培養(yǎng)過(guò)程中多次強(qiáng)調(diào)一系列的消毒、滅菌及無(wú)菌操作,原因是_。(3)愈傷組織的培養(yǎng)是很重要的一步,一般從接種到出現(xiàn)愈傷組織需要14 d,到時(shí)可以看到外植體長(zhǎng)出_色或_色的_狀的愈傷組織。(4)培養(yǎng)時(shí)注意恒溫箱要關(guān)閉光源,因?yàn)樵赺條件下愈傷組織長(zhǎng)得更快,兩周以后,由于培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)幾乎耗盡,必須_進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng)。(5)試管苗的培養(yǎng)可分為_(kāi)培養(yǎng)和_培養(yǎng),必須先進(jìn)行_培養(yǎng),二者的區(qū)別在于_。答案(1)脫分化植物激素(或生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素)植物細(xì)胞具有全能性(2)外植體材料體積小,抗性差,如果不小心引起污染,將可能造成培養(yǎng)工作的前功盡棄(3)乳白黃瘤(4)無(wú)光更換培養(yǎng)基(5)生芽生根生芽培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同解析(1)a過(guò)程表示由離體的細(xì)胞發(fā)育成細(xì)胞團(tuán),所以為脫分化過(guò)程,誘導(dǎo)脫分化過(guò)程需要有植物激素,主要為生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,該過(guò)程的原理是植物細(xì)胞的全能性。(2)同植物體相比較,離體的植物組織抗性差,所以在組織培養(yǎng)整個(gè)過(guò)程中都要執(zhí)行嚴(yán)格的消毒程序。(3)愈傷組織為外植體經(jīng)脫分化形成的乳白色或黃色的瘤狀物。(4)進(jìn)行組織培養(yǎng)過(guò)程脫分化階段不需要光照,但在再分化階段,由于葉片中葉綠素的形成需要光照,當(dāng)營(yíng)養(yǎng)耗盡時(shí),需更換有豐富營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。(5)試管苗的培養(yǎng)分為生根和生芽培養(yǎng),但是先生芽,才有利于生根,生根培養(yǎng)基與生芽培養(yǎng)基的區(qū)別就在于生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同。真題體驗(yàn)13.(2014江蘇,29)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
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