2019-2020高中生物 專(zhuān)題1 基因工程 1 DNA重組技術(shù)的基本工具檢測(cè)（含解析）新人教版選修3.doc

1.1DNA重組技術(shù)的基本工具 一、選擇題題型一對(duì)基因工程的誕生及概念的理解1科學(xué)家將發(fā)光基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi)，培育出了發(fā)光的煙草，以下有關(guān)該過(guò)程中應(yīng)用的技術(shù)，敘述正確的是()A該技術(shù)是在細(xì)胞水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的B該技術(shù)的操作環(huán)境是在生物體內(nèi)C該技術(shù)的原理是基因突變D該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是定向產(chǎn)生人類(lèi)需要的生物類(lèi)型答案D解析基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品，D正確；該技術(shù)是基因工程技術(shù)，是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，A錯(cuò)誤；該技術(shù)的操作環(huán)境是在生物體外，B錯(cuò)誤；基因工程的生物學(xué)原理是基因重組，C錯(cuò)誤。2下列敘述符合基因工程概念的是()A在細(xì)胞內(nèi)直接將目的基因與宿主細(xì)胞的遺傳物質(zhì)進(jìn)行重組，賦予生物新的遺傳特性B將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人的干擾素的菌株C用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上答案B解析基因工程不能在生物細(xì)胞內(nèi)直接將目的基因與宿主細(xì)胞的遺傳物質(zhì)進(jìn)行重組，不符合基因工程的概念，A錯(cuò)誤；將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人的干擾素的菌株，符合基因工程的概念，B正確；用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株，屬于誘變育種，不符合基因工程的概念，C錯(cuò)誤；基因工程是通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，噬菌體自行感染細(xì)菌并將自身DNA導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞不符合基因工程的概念，D錯(cuò)誤。題型二限制酶來(lái)源及作用3下列有關(guān)基因工程中限制酶的描述，正確的是()A限制酶只能識(shí)別6個(gè)或8個(gè)脫氧核苷酸組成的序列B限制酶的活性受溫度的影響C限制酶能識(shí)別和切割RNA和DNAD限制酶只能從原核生物中提取答案B解析限制酶能夠識(shí)別并切割雙鏈DNA分子上特定的核苷酸序列，大多數(shù)限制酶能夠識(shí)別由6個(gè)核苷酸組成的序列，少數(shù)可以識(shí)別由4、5或者8個(gè)核苷酸組成的序列，A、C錯(cuò)誤；限制酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，活性受溫度影響，B正確；限制酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的，在真核生物細(xì)胞內(nèi)也可能存在，例如酵母菌，D錯(cuò)誤。4下列關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A限制性核酸內(nèi)切酶主要是從微生物細(xì)胞中分離純化的B限制性核酸內(nèi)切酶不能將目的基因連接到不同的載體上C一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸D限制性核酸內(nèi)切酶既可切割鏈狀DNA也可切割環(huán)狀DNA答案C解析限制性核酸內(nèi)切酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的，A正確；把目的基因連接到載體上使用的酶是DNA連接酶，B正確；通常一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，而非核苷酸，C錯(cuò)誤。5限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。如圖所示為四種限制酶BamH、EcoR、Hind以及Bgl的識(shí)別序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來(lái)的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合并且正確的末端互補(bǔ)序列是()ABamH和EcoR；末端互補(bǔ)序列AATTBBamH和Hind；末端互補(bǔ)序列GATCCEcoR和Hind；末端互補(bǔ)序列AATTDBamH和Bgl；末端互補(bǔ)序列GATC答案D解析限制酶BamH與Bgl雖然識(shí)別的核苷酸序列不同，但切割后露出的黏性末端相同，故兩種末端序列可以互補(bǔ)黏合。題型三DNA連接酶分類(lèi)及作用6“分子縫合針”DNA連接酶“縫合”的部位是()A堿基對(duì)之間的氫鍵B堿基與脫氧核糖C雙鏈DNA片段間的磷酸二酯鍵D脫氧核糖與脫氧核糖答案C解析相鄰的兩個(gè)脫氧核苷酸之間由磷酸和脫氧核糖形成的磷酸二酯鍵連接，DNA連接酶連接的是此化學(xué)鍵。7下列有關(guān)DNA連接酶的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是()ADNA連接酶可以將限制酶切開(kāi)的雙鏈DNA片段“縫合”起來(lái)BDNA連接酶根據(jù)功能可以分為Ecoli DNA連接酶和T4 DNA連接酶CDNA連接酶能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來(lái)，而不能在雙鏈DNA片段平末端進(jìn)行連接DDNA連接酶最初是從原核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的答案C解析DNA連接酶分為Ecoli DNA連接酶和T4 DNA連接酶，這兩種酶都能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端連接起來(lái)，其中T4 DNA連接酶還可以連接平末端，C錯(cuò)誤。8在基因工程操作過(guò)程中，Ecoli DNA連接酶的作用是()A將任意兩個(gè)DNA分子連接起來(lái)B連接具有相同黏性末端的DNA分子，包括DNA分子的基本骨架和堿基對(duì)之間的氫鍵C只連接具有相同黏性末端的DNA分子的基本骨架，即磷酸二酯鍵D只連接具有相同黏性末端的DNA分子堿基對(duì)之間的氫鍵答案C解析Ecoli DNA連接酶能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端連接起來(lái)，恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，故A、B、D錯(cuò)誤，C正確。題型四載體的功能和特點(diǎn)9基因工程載體必須具備的條件中，錯(cuò)誤的是()A能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存B具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接C能進(jìn)入受體細(xì)胞中并控制其新陳代謝過(guò)程D在限制酶切點(diǎn)外必須含有標(biāo)記基因，便于篩選答案C解析作為基因工程的載體必須能夠在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存，有一個(gè)至多個(gè)限制酶的切點(diǎn)，具有某些標(biāo)記基因，A、B、D正確；載體進(jìn)入受體細(xì)胞后不能影響受體細(xì)胞正常的代謝活動(dòng)，C錯(cuò)誤。10下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述，正確的是()A質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器B質(zhì)粒是細(xì)胞質(zhì)中能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子C質(zhì)粒上有細(xì)菌生活所必需的全部基因D質(zhì)粒的復(fù)制過(guò)程一定是在宿主細(xì)胞外獨(dú)立進(jìn)行的答案B解析質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子，細(xì)菌為原核生物，沒(méi)有細(xì)胞器，A錯(cuò)誤，B正確；細(xì)菌生活所必需的基因分布在擬核DNA上，質(zhì)粒上也有基因，如標(biāo)記基因，但不是必需基因，C錯(cuò)誤；質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞后，在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，或整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，隨染色體DNA進(jìn)行同步復(fù)制，D錯(cuò)誤。11質(zhì)粒之所以能作為基因工程的載體，是由于它()A含蛋白質(zhì)，從而能完成生命活動(dòng)B能夠自我復(fù)制C是RNA，能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成D具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)，能夠攜帶目的基因答案B解析質(zhì)粒是一種小型環(huán)狀DNA分子，不含蛋白質(zhì)，A、C錯(cuò)誤；質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能夠自我復(fù)制，從而保持連續(xù)性，B正確；質(zhì)粒具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)，但不是作為基因工程載體的必備條件，D錯(cuò)誤。12限制酶Mun和限制酶EcoR的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是CAATTG和GAATTC。如圖表示四種質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，其中，箭頭所指部位為限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，質(zhì)粒的陰影部分表示標(biāo)記基因。適于作為圖示目的基因載體的質(zhì)粒是()答案A解析用限制酶EcoR切割含目的基因的DNA片段，可以獲得目的基因，產(chǎn)生的黏性末端為AATT。用限制酶Mun切割A(yù)項(xiàng)中質(zhì)粒后，不會(huì)破壞標(biāo)記基因，而且還能產(chǎn)生與目的基因兩側(cè)黏性末端相同的末端，適于作為目的基因的載體，A正確；B項(xiàng)中的質(zhì)粒沒(méi)有標(biāo)記基因，不適于作為目的基因的載體，B錯(cuò)誤；C項(xiàng)、D項(xiàng)中的質(zhì)粒含有標(biāo)記基因，但用限制酶切割后會(huì)被破壞，因此不適于作為目的基因的載體，C、D錯(cuò)誤。二、非選擇題13下列是基因工程的有關(guān)問(wèn)題，請(qǐng)回答：(1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列，并可以使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的_(填化學(xué)鍵名稱(chēng))斷裂，形成的末端總體可分為兩種類(lèi)型，分別是_。(2)目的基因和載體重組時(shí)需要的工具酶是_，與限制性核酸內(nèi)切酶相比，它對(duì)所重組的DNA兩端堿基序列_(填“有”或“無(wú)”)專(zhuān)一性要求。(3)如圖表示的是構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)的某種質(zhì)粒與目的基因。已知限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GGATCC，限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GATC。分析可知，最好選擇限制酶_切割質(zhì)粒，限制酶_切割目的基因所在的DNA片段，這樣做的好處分別是_ _、_。答案(1)磷酸二酯鍵黏性末端和平末端(2)DNA連接酶無(wú)(3)限制酶切割質(zhì)粒不會(huì)把兩個(gè)標(biāo)記基因都破壞目的基因兩端均有限制酶的識(shí)別序列解析(1)限制性核酸內(nèi)切酶作用的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵。限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子后形成平末端或黏性末端。(2)DNA連接酶能將雙鏈DNA片段“縫合”起來(lái)，恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，對(duì)所重組的DNA兩端的堿基序列無(wú)專(zhuān)一性。(3)限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GGATCC，限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GATC，目的基因的兩端皆有限制酶的識(shí)別序列，用限制酶切割質(zhì)粒只會(huì)破壞一個(gè)標(biāo)記基因，用限制酶切割質(zhì)粒則會(huì)將兩個(gè)標(biāo)記基因全部破壞。14啤酒酵母菌是啤酒生產(chǎn)上常用的典型的發(fā)酵酵母菌，除用于釀造啤酒及其他的飲料酒外，還可發(fā)酵面包，菌體維生素、蛋白質(zhì)含量高，可作食用、藥用和飼料。科學(xué)家將大麥細(xì)胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，獲得的啤酒酵母菌種可產(chǎn)生LTP1蛋白，并釀出泡沫豐富的啤酒?；镜牟僮鬟^(guò)程如下：(1)該技術(shù)定向改變了啤酒酵母菌的性狀，這在可遺傳變異的來(lái)源中屬于_。(2)為了將LTP1基因?qū)虢湍妇?xì)胞內(nèi)，所用的載體是_。(3)要使載體與LTP1基因連接，首先應(yīng)使用_進(jìn)行切割。假如載體被切割后，得到的分子末端序列為，則能與該載體連接的目的基因分子末端有(多選)_，其中與是同一種限制酶切割的是_。A. B.C. D.(4)將LTP1基因片段與載體“縫合”起來(lái)，需要_酶，常用的有_、_，它們連接的化學(xué)鍵是_，其中能“縫合”兩個(gè)雙鏈DNA片段的平末端的酶是_。答案(1)基因重組(2)(大腸桿菌的)質(zhì)粒(3)限制酶ABCA(4)DNA連接Ecoli DNA連接酶T4DNA連接酶磷酸二酯鍵T4DNA連接酶解析(1)由圖可知該技術(shù)屬于基因工程，該變異屬于基因重組。(2)據(jù)圖可以看出，載體為大腸桿菌的質(zhì)粒。(3)與具有相同黏性末端的是A、B、C，它們能相互連接，其中A與是由同一種限制酶切割的。(4)將LTP1基因片段與載體“縫合”起來(lái)需要的酶是DNA連接酶，常用的有Ecoli DNA連接酶、T4DNA連接酶，它們連接的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵，而起到“縫合”平末端作用的連接酶是T4DNA連接酶。一、選擇題1下列有關(guān)基因工程誕生的說(shuō)法，不正確的是()A基因工程是在生物化學(xué)、分子生物學(xué)和微生物學(xué)等學(xué)科的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的B工具酶和載體的發(fā)現(xiàn)使基因工程的實(shí)施成為可能C遺傳密碼的破譯為基因的分離和合成等提供了理論依據(jù)D基因工程必須在同物種間進(jìn)行答案D解析基因工程可在不同物種間進(jìn)行，它可打破生殖隔離的界限，定向改造生物的遺傳性狀，D錯(cuò)誤。2下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述中正確的是()A用限制酶切割一個(gè)DNA分子中部，獲得一個(gè)目的基因時(shí)，被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)B限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大CCATG和GGATCC序列被限制性核酸內(nèi)切酶切出的黏性末端游離堿基數(shù)不同D只有用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒答案B解析用限制性核酸內(nèi)切酶切割一個(gè)DNA分子中部，獲得一個(gè)目的基因時(shí)，需要切割目的基因的兩側(cè)，因此要斷裂4個(gè)磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大，B正確；CATG和GGATCC序列被限制酶切出的黏性末端游離堿基數(shù)均為四個(gè)，C錯(cuò)誤；不同的限制性核酸內(nèi)切酶切割也可能形成相同的末端序列，因此不同限制酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，也能形成重組質(zhì)粒，D錯(cuò)誤。3下列說(shuō)法中，正確的是()ADNA連接酶最初是從人體細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的B限制酶的識(shí)別序列一定是GAATTCC利用載體在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制的過(guò)程可稱(chēng)為“克隆”D限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并使鏈間的氫鍵斷裂答案C解析DNA連接酶最初是從原核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，A錯(cuò)誤；限制酶有多種，每種限制酶都能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，因此不是所有限制酶的識(shí)別序列都是GAATTC，B、D錯(cuò)誤；利用載體在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制的過(guò)程可稱(chēng)為分子水平上的“克隆”，C正確。4下列關(guān)于DNA連接酶作用的敘述，正確的是()A不能將單個(gè)核苷酸加到某DNA片段末端B一種DNA連接酶只能連接某一特定序列的DNA片段C連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來(lái)，而不能將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接答案A解析DNA連接酶的作用是連接兩個(gè)DNA片段，形成磷酸二酯鍵，A正確，C錯(cuò)誤；DNA連接酶對(duì)所重組的DNA兩端堿基序列無(wú)專(zhuān)一性要求，B錯(cuò)誤；T4DNA連接酶既可以連接DNA片段互補(bǔ)的黏性末端，也可以連接平末端，但連接平末端的效率比較低，D錯(cuò)誤。5如圖所示DNA分子的某一片段，其中分別表示某種酶的作用部位，則相應(yīng)的酶依次是()ADNA連接酶、限制性核酸內(nèi)切酶、解旋酶B限制性核酸內(nèi)切酶、解旋酶、DNA連接酶C解旋酶、限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶D限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、解旋酶答案C解析使氫鍵斷裂的酶是解旋酶，限制性核酸內(nèi)切酶使相鄰兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵的酶是DNA連接酶。6下列有關(guān)酶的敘述，正確的是()A同種限制酶既可以切割目的基因所在片段又可以切割質(zhì)粒，因此不具備專(zhuān)一性BRNA聚合酶和DNA聚合酶都可以催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄C限制酶不能切割煙草花葉病毒的核酸DDNA連接酶可催化脫氧核苷酸鏈間形成氫鍵答案C解析一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子，因此具有專(zhuān)一性，A錯(cuò)誤；DNA聚合酶不能催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄，B錯(cuò)誤；煙草花葉病毒的核酸為RNA，不能用限制酶切割，C正確；DNA連接酶可催化DNA片段間的磷酸二酯鍵的形成，D錯(cuò)誤。7下列有關(guān)基因工程的敘述正確的是()ADNA連接酶的作用是使互補(bǔ)的黏性末端之間發(fā)生堿基A與T，C與G之間的連接B基因工程中使用的載體最常見(jiàn)的是大腸桿菌C載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞并可促進(jìn)目的基因的表達(dá)D基因工程造成的變異，實(shí)質(zhì)上相當(dāng)于人為的基因重組，但卻產(chǎn)生了定向變異答案D解析DNA連接酶連接的是磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；基因工程中使用的載體最常見(jiàn)的是質(zhì)粒，B錯(cuò)誤；載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，但不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)，C錯(cuò)誤；基因工程能按照人們的意愿定向改造生物的性狀，其原理是基因重組，D正確。8對(duì)如圖所示黏性末端的說(shuō)法正確的是()A甲、乙、丙黏性末端是由兩種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的B圖乙中的酶切位點(diǎn)在A與G之間C如果甲中的G突變?yōu)锳，則該限制性核酸內(nèi)切酶不能識(shí)別該切割位點(diǎn)D構(gòu)建基因表達(dá)載體所用限制酶和DNA連接酶分別作用于a處和b處答案C解析根據(jù)圖示結(jié)果可知，切割甲的限制酶的識(shí)別序列是GAATTC，切割乙的限制酶的識(shí)別序列是CAATTG，切割丙的限制酶的識(shí)別序列是CTTAAG，故甲、乙、丙三個(gè)黏性末端是由三種限制酶切割產(chǎn)生的，A錯(cuò)誤；圖乙中的酶切位點(diǎn)在A與C之間，而不是A與G之間，B錯(cuò)誤；限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，如果甲中的G發(fā)生突變，則限制酶不能識(shí)別該切割位點(diǎn)，C正確；構(gòu)建基因表達(dá)載體所用的限制酶和DNA連接酶的作用位點(diǎn)均是磷酸二酯鍵，b處為氫鍵，D錯(cuò)誤。二、非選擇題9下圖表示兩種限制酶識(shí)別DNA分子的特定序列，并在特定位點(diǎn)對(duì)DNA分子進(jìn)行切割的示意圖，請(qǐng)回答以下問(wèn)題：(1)圖中甲和乙代表_ _。(2)EcoR、Hpa代表_ _。(3)圖中甲和乙經(jīng)過(guò)相應(yīng)操作均形成兩個(gè)片段，切口的類(lèi)型分別為_(kāi)、_。甲中限制酶的切點(diǎn)是_之間，乙中限制酶的切點(diǎn)是_之間。(4)由圖解可以看出，限制酶的作用特點(diǎn)是_。(5)如果甲中G堿基發(fā)生基因突變，可能發(fā)生的情況是_。答案(1)有特定脫氧核苷酸序列的DNA片段(2)兩種不同的限制酶(或限制性核酸內(nèi)切酶)(3)黏性末端平末端G、AT、A(4)能識(shí)別雙鏈DNA分子的特定脫氧核苷酸序列，并從特定的位點(diǎn)將DNA分子切開(kāi)(5)限制酶不能識(shí)別切割位點(diǎn)10下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma切割前后，分別含有_、_個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Sma酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越_。(3)要用圖1中的質(zhì)粒和圖2中外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma切割，原因是_ _。(4)圖1中的質(zhì)粒本質(zhì)為_(kāi)，具有_能力，是基因工程中_的載體。除質(zhì)粒外，基因工程中還可以用_、_等作為載體。(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入_酶。答案(1)02(2)高(3)Sma會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因(4)環(huán)狀DNA分子自我復(fù)制最常用噬菌體衍生物動(dòng)植物病毒(5)DNA連接解析(1)質(zhì)粒被切割前為環(huán)狀DNA分子，所有磷酸基團(tuán)均參與