制劑中幾種特殊輔料的含量測定方法

關(guān)于制劑中幾種特殊輔料含量測定方法的幾點(diǎn)建議現(xiàn)推薦幾種特殊輔料的含量測定方法，可供參考，具體如下： 甘露醇甘露醇是制劑中常用輔料，公司內(nèi)大量品種使用甘露醇作為輔料。甘露醇分子含有多個(gè)羥基，同藥物分子之間存在氫鍵作用，可能會影響藥物的溶出，因此準(zhǔn)確測定制劑中甘露醇含量對仿制藥研發(fā)是十分必要的。經(jīng)過文獻(xiàn)調(diào)研及本公司孟魯司特鈉咀嚼片和曲美片中甘露醇含量測定結(jié)果，表明如下方法可供參考。1、色譜條件【1】：色譜柱：HP-5色譜柱（50m0.32mm0.52m）進(jìn)樣方式：直接進(jìn)樣進(jìn)樣量：1l樣品濃度：5mg/ml進(jìn)樣口溫度：300載氣種類：高純氮?dú)廨d氣流速：1.0ml/ml柱溫：260分流比1:20檢測器：FID檢測器檢測器溫度：3002、 溶液配制：供試品溶液：將待測樣品研細(xì)，取細(xì)粉10mg，精密稱定，置10ml頂空瓶中。直接加入1ml醋酐，再加入1ml吡啶，加蓋密閉，振搖均勻，100下保溫40min。保溫完畢后，開蓋取適量溶液作為供試品溶液。對照品溶液：取甘露醇10mg，精密稱定，置10ml頂空瓶中。直接加入1ml醋酐，再加入1ml吡啶，加蓋密閉，振搖均勻，100下保溫40min。保溫完畢后，開蓋取適量溶液作為對照品溶液。3、 測定法取上述供試品和對照品溶液各1l分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算供試品中甘露醇的含量。在此條件下甘露醇保留時(shí)間約為8.4min。計(jì)算公式：含量%=AsWrSsArSrP100%式中：Wr：對照品重量，mg Ar：對照品峰面積 As：供試品峰面積 Ss：供試品稀釋倍數(shù) Sr：對照品稀釋倍數(shù)P：對照品的含量4、檢驗(yàn)儀器：名稱型號廠家編號氣相色譜儀7890A安捷倫科技公司電子天平MS105DU梅特勒托利多儀器有限公司氣相色譜柱HP-5安捷倫科技公司USE745521H5、試藥與試劑：名稱級別來源醋酐分析純北京化工廠吡啶分析純北京化工廠對照品：名稱批號含量（%）來源甘露醇-分析純北京化工廠4、 結(jié)果與結(jié)論4.1結(jié)果：孟魯司特鈉咀嚼片中甘露醇含量測定結(jié)果樣品批號樣品來源甘露醇含量（%）理論含量（%）Z20160702北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司63.5467.0M011397默沙東公司64.9967.0曲美片中甘露醇含量測定結(jié)果樣品批號樣品來源甘露醇含量（%）理論含量（%）9F3595施維雅（天津）制藥有限公司33.77-950050施維雅制藥有限公司34.66-2160601-1北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司42.4440.020160524北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司20.6520.020160531北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司32.1030.04.2結(jié)論：理論含量為文獻(xiàn)中給出的投料量或者實(shí)際投料量。從測定結(jié)果可以看出，實(shí)際測定值和理論值十分接近。該方法可以用作制劑中甘露醇含量測定方法。5、討論前期方法開發(fā)過程中嘗試了頂空色譜法，由于乙酰甘露醇揮發(fā)溫度較高，無明顯色譜峰，所以最終采用了直接進(jìn)樣法。由于采用了直接進(jìn)樣法，色譜柱應(yīng)盡量選擇較粗內(nèi)徑的色譜柱，可以避免異物對色譜柱的堵塞；試驗(yàn)過程中還應(yīng)注意對進(jìn)樣口和檢測器的清潔，防止堵塞和鬼峰出現(xiàn)。 滑石粉以本公司曲美片中滑石粉的含量測定方法為例，如下：1、 方法依據(jù)曲美片中含有多種成分，其中曲美他嗪、甘露醇、交聯(lián)聚維酮K30均溶于水，淀粉可以水解后溶解于稀酸中；而硬脂酸鎂、滑石粉不溶于稀酸。因此取適量曲美混粉或者片劑在稀酸中充分水解溶解后，不溶物為硬脂酸鎂和滑石粉，通過殘?jiān)亓靠梢缘玫接仓徭V和滑石粉的總重量。2、溶液配制：供試品溶液：備用。取250ml錐形瓶，加100ml純化水，再加入20ml濃硫酸，搖勻，作為稀硫酸溶液。取本品粉末或者片劑共計(jì)2g，精密稱定，置于該錐形瓶中。75下保溫并攪拌24h使淀粉完全水解。24h后將溶液用0.45m濾膜抽濾（使用水膜即可，濾膜使用前稱重），并用40ml純化水洗滌濾餅，每次20ml，共2次。將濾膜和濾餅置于烘箱中，70下鼓風(fēng)干燥15min后取出，冷卻至室溫稱重。利用下式計(jì)算出滑石粉和硬脂酸鎂總含量。計(jì)算公式：含量%=WA-WMWS100%式中：WA：濾餅和濾膜干燥后總重，mg WM：濾膜重量，mg Ws：供試品重量，mg 3、檢驗(yàn)儀器：名稱型號廠家編號電子天平MS105DU梅特勒托利多儀器有限公司EB-1-001恒溫加熱磁力攪拌器DF-101S鄭州恒巖儀器有限公司YYG104、結(jié)果：曲美片中滑石粉含量測定結(jié)果樣品批號樣品來源滑石粉和硬脂酸鎂總含量（%）理論總含量（%）9F3595施維雅（天津）制藥有限公司6.19-8F3529施維雅（天津）制藥有限公司6.02-自制樣品1北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司2.692.0自制樣品2北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司4.224.0自制樣品3北京萬生藥業(yè)有限責(zé)任公司5.726.0理論含量為文獻(xiàn)中給出的投料量或者實(shí)際投料量。測定結(jié)果為滑石粉和硬脂酸鎂的總含量，由于硬脂酸鎂為常用輔料且常用量為1%，所以直接扣去1%即可得到滑石粉含量。從測定結(jié)果可以看出，實(shí)際測定值和理論值十分接近。該方法可以用作曲美片中滑石粉含量測定方法。5、討論：樣品中滑石粉含量較低，且重量法誤差較大，因此樣品需求量較大，實(shí)際應(yīng)用時(shí)應(yīng)注意備足供試品量。微孔濾膜較薄，且材質(zhì)不耐高溫，因此干燥時(shí)應(yīng)在低溫下干燥。 十二烷基硫酸鈉1、液質(zhì)連用測定參數(shù)1.1、色譜條件：流動相：水相（量取1000ml水，加入0.1ml甲酸、0.1ml氨水，混勻）-乙腈50:50。色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（Agilent公司的Poroshell 120 EC-C18，50mm4.6mm 2.7m）流速：1.0ml/min；柱溫：40C；進(jìn)樣量：5l檢測器：質(zhì)譜檢測器1.2、質(zhì)譜條件：離子源：ESI-API；電壓：3000V霧化器壓力：35 psig；干燥氣體溫度：350C干燥氣體流速：12L/min質(zhì)量選擇器：MSD1（-）: 掃描離子：265（C12）、293（C14）、121（內(nèi)標(biāo)）；誘導(dǎo)解離能：35；增益：1 ；掃描模式：SIM。MSD2（-）：掃描離子：237、321；誘導(dǎo)解離能：35；增益：1 ；掃描模式：SIM。備注：掃描離子取決于實(shí)驗(yàn)?zāi)康模捎赟DS的組成復(fù)雜，根據(jù)需要可以增加掃描的離子，如C10或C16.2、溶液配制：內(nèi)標(biāo)溶液配制：取苯甲酸約400mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用乙腈-水（50:50）溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。對照品溶液：取對照品SDS約20mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。供試品溶液：視情況而定。精密量取對照品溶液和供試品溶液各5l，注入液質(zhì)色譜儀，記錄色譜圖，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量。 泊洛沙姆1、液質(zhì)連用測定參數(shù)1.1、色譜條件：色譜柱：TSKgel 2000swxl流速：0.5ml/min；柱溫：30C；進(jìn)樣量：50l流動相：水相（量取1000ml水，加入0.77g乙酸銨，混勻）-乙腈95:5。檢測器：質(zhì)譜檢測器1.2、質(zhì)譜條件：離子源：ESI-API；電壓：3000V霧化器壓力：35 psig；干燥氣體溫度：350C干燥氣體流速：12L/min質(zhì)量選擇器：MSD1（+）: 掃描離子：133；誘導(dǎo)解離能：250；增益：5 ；掃描模式：SIM。常量測定也可以在上述液相條件下使用HPLC-ELSD方法，檢出能力約40ug/ml。2、溶液配制：標(biāo)準(zhǔn)曲線儲備液：稱取約20mg泊洛沙姆置100ml量瓶中，用水溶解，并定容至刻度，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液：分別吸取0.5ml，1.0ml，2.0ml標(biāo)準(zhǔn)曲線儲備液置10ml量瓶中，用水稀釋定容，搖勻。也可以使用單點(diǎn)外標(biāo)。供試品溶液：視情況而定。精密量取對照品溶液和供試品溶液各5l，注入液質(zhì)色譜儀，記錄色譜圖，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法按峰面積計(jì)算含量。 葡甲胺1、液質(zhì)連用測定參數(shù)1.1、色譜條件：色譜柱：HILIC 5um 250*4.6mm流速：0.6ml/min；柱溫：40C；進(jìn)樣量：5l流動相：水相（量取1000ml水，加入0.1ml甲酸、0.1ml氨水，混勻）-乙腈35:65。檢測器：質(zhì)譜檢測器1.2、質(zhì)譜條件：離子源：ESI-API；電壓：3000V霧化器壓力：35 psig；干燥氣體溫度：350C干燥氣體流速：12L/min質(zhì)量選擇器：MSD1（+）: 掃描離子：196；誘導(dǎo)解離能：70；增益：1 ；掃描模式：SIM。MSD2（-）：掃描離子：121；誘導(dǎo)解離能：70；增益：1 ；掃描模式：SIM。2、溶液配制：稀釋劑：乙腈-水（98:2）內(nèi)標(biāo)溶液配制：取苯甲酸約100mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用乙腈-水（50:50）溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。對照品儲備液：取對照品約25mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻。對照品溶液：精密量取儲備液1ml，置25ml量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。供試品溶液：視情況而定。精密量取對照品溶液和供試品溶液各5l，注入液質(zhì)色譜儀，記錄色譜圖，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量。 鈣1、ICP測定法:儀器參數(shù)：待測元素鈣分析物波長317.993內(nèi)標(biāo)物鈀內(nèi)標(biāo)物波長340.458nm冷卻氣體流速（升/分）15輔助氣體流速（升/分）0.2霧化器氣體流速（升/分）0.55功率（瓦）1300觀測距離15.0觀測方向軸向蠕動泵流速1.5ml/min氣體高純氬氣重復(fù)測定次數(shù)3定量方法按峰面積計(jì)算，內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法；工作站內(nèi)置計(jì)算方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線扣除標(biāo)樣空白;供試品溶液扣除實(shí)際空白2、對照品：名稱含量/純度廠家鈣單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)1000g/ml國家有色金屬及電子材料分析測試中心鈀單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)1000g/ml國家有色金屬及電子材料分析測試中心3、溶液配制：校準(zhǔn)空白：2%硝酸。稀釋劑：2%硝酸。標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液（線性溶液）配制方法：分別精密量取鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000g/ml）20l、50l、100l、150l、200l，置10ml量瓶中，分別加入400l鈀標(biāo)準(zhǔn)溶液作為內(nèi)標(biāo)物，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液1、2、3、4、5。供試品溶液：稱取細(xì)粉約25mg置25ml容量瓶中，用稀釋