細(xì)菌一般染色方法ppt課件

常用的細(xì)菌染色方法 革蘭染色抗酸染色細(xì)菌基本形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察 細(xì)菌染色意義 由于細(xì)菌個體微小 基本上無色透明 故將其用適當(dāng)染料染色觀察 方能顯示它的形態(tài) 大小 構(gòu)造及染色特性等 在細(xì)菌鑒別上有重要意義 革蘭染色是細(xì)菌學(xué)中使用最廣泛的一種染色方法 籍此染色法 可將所有細(xì)菌區(qū)分為兩大類 細(xì)菌染色方法及原理 常采用美藍(lán) 結(jié)晶紫等堿性染料進(jìn)行染色 多數(shù)染料都是中性有機(jī)鹽 據(jù)著色基的不同可分為以下類型 堿性染料 basicdye 帶正電染料 其陽離子部分為發(fā)色基團(tuán) 可與細(xì)胞中帶負(fù)電的組分結(jié)合 酸性染料 Aciddye 帶負(fù)電染料 其陰離子部分為發(fā)色基團(tuán) 可與細(xì)胞中帶正電的組分結(jié)合 革蘭染色原理 細(xì)菌的等電點(diǎn)較低 約在pH2 5之間 故在中性 堿性或弱堿性溶液中 菌體蛋白質(zhì)電離后帶負(fù)電荷 易與帶正電荷的堿性染料如龍膽紫及堿性復(fù)紅等結(jié)合 使細(xì)菌被染成紫色或紅色 一 細(xì)菌染色標(biāo)本片的制備 細(xì)菌染色檢查 首先要進(jìn)行細(xì)菌標(biāo)本制備 制備細(xì)菌標(biāo)本一般包括涂片 干燥 固定三步 固定的目的和方法 使細(xì)菌的細(xì)胞凝固 使菌體與玻片粘得更牢固可改變菌體對染料的通透性加熱固定可殺死細(xì)菌 比較安全固定的方法將制成的標(biāo)本勻速通過火焰三次 革蘭染色 染色 初染 結(jié)晶紫 媒染 碘液 脫色 酒精 復(fù)染 復(fù)紅 濾紙吸干油鏡鏡檢 safranin Crystalviolet 染色步驟 結(jié)晶紫初染盧戈碘液媒染 乙醇脫色復(fù)紅復(fù)染 分鐘水洗 分鐘水洗 秒水洗 秒水洗吸干 Germisstainedvioletorred 結(jié)晶紫初染 分鐘水洗 碘液媒染 分鐘 水洗 酒精脫色 秒 水洗 復(fù)紅復(fù)染 秒 水洗 濾紙吸干油鏡鏡檢 抗酸染色法 acid faststain 分枝桿菌屬的細(xì)菌 包括結(jié)核分枝桿菌 麻風(fēng)分枝桿菌等 為抗酸性細(xì)菌 一般染色法不易著色 須用抗酸染色法 注意事項涂片要略厚加溫染色或延長染色時間 加溫時隨時補(bǔ)加染色液分枝桿菌呈紅色 其他細(xì)菌和背景為藍(lán)色 操作過程 取痰液 涂片 略厚 干燥 固定 石炭酸復(fù)紅加溫染色8 10分鐘后 用3 的鹽酸酒精脫色約1 2分鐘 脫色時輕搖玻片 直到涂片顏色脫去為止水洗后 用堿性美藍(lán)復(fù)染1分鐘 水洗 印干 鏡檢 形態(tài) 細(xì)長 略彎曲的桿菌 多聚集成團(tuán) 無鞭毛 芽胞 染色性 不易著色 抗酸染色陽性 菌體呈紅色 背景中其他物質(zhì)藍(lán)色 結(jié)核分枝桿菌 M tuberculosis 細(xì)菌基本形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察 基本形態(tài)球菌桿菌弧菌特殊結(jié)構(gòu)芽孢枯草桿菌 破傷風(fēng)梭菌莢膜肺炎球菌鞭毛變形桿菌 葡萄球菌鏈球菌肺炎球菌腦膜炎球菌 革蘭陽性 革