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此文檔收集于網(wǎng)絡(luò),如有侵權(quán),請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除 緒論第三節(jié) 微生物的概述微生物是肉眼看不見(jiàn)的,可以在電子顯微鏡或光學(xué)顯微鏡下看到的所有微小生物的統(tǒng)稱。按細(xì)胞結(jié)構(gòu)的有無(wú)可分為非細(xì)胞結(jié)構(gòu)微生物(如病毒,類病毒)和具細(xì)胞結(jié)構(gòu)微生物。按細(xì)胞核膜、細(xì)胞器和有絲分裂有無(wú)等,可分為原核微生物和真核微生物。一、 微生物的分類和命名(一)微生物的分類各種微生物按其客觀存在的生物屬性和親緣關(guān)系,有次序地分門別類排列成一個(gè)系統(tǒng),從大到小,可以按域、界、門、綱、目、科、屬、種等分類。把主要的、基本屬性類似的微生物分列為域,在域內(nèi)從類似的微生物中找出它們的差別,再列為界。以此類推,一直分到種。“種”是分類的最小單位,但“株”不是分類單位。(三)微生物的命名采用生物學(xué)中的二名法,即命名原則:學(xué)名=屬名+種名+(首次定名人)規(guī)定與常識(shí):屬名的首字母要大寫,種名的首字母小寫,都要用斜體字表達(dá)。如大腸埃希氏桿菌的名稱是 Escherichia coli 。二、病毒和類病毒病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu),是明顯區(qū)別于原核微生物和真核微生物的一類特殊的超微生物。類病毒是比病毒小的超微小生物。三、原核微生物與真核微生物(一)原核微生物特點(diǎn):沒(méi)有核膜,也沒(méi)有細(xì)胞器,只有細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)陷形成的不規(guī)則的泡沫結(jié)構(gòu)體系,不進(jìn)行有絲分裂。原核微生物包括古菌(即古細(xì)菌)、細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌、放線菌、立克次氏體、支原體、衣原體和螺旋體。(二)真核微生物特點(diǎn):有發(fā)育完好的細(xì)胞核,核內(nèi)有核仁和染色質(zhì),有核膜和高度分化的細(xì)胞器,能進(jìn)行有絲分裂。真核微生物包括除藍(lán)細(xì)菌以外的藻類、真菌(酵母菌、霉菌、傘菌)、原生生物、微型后生生物等。四、微生物的特點(diǎn):個(gè)體極小、分布廣,種類繁多、繁殖快、易變異。第一篇 微生物學(xué)基礎(chǔ)第一章 非細(xì)胞結(jié)構(gòu)的超微生物病毒重點(diǎn)掌握:病毒的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)、病毒的繁殖過(guò)程及溶原性了解:病毒的培養(yǎng)方法第一節(jié) 病毒的一般特征及其分類一、 病毒的特點(diǎn):1、 是沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)2、大多數(shù)病毒的大小在0.2以下,在光學(xué)顯微鏡下看不見(jiàn),必須在電子顯微鏡下方可看見(jiàn)(病毒大小一納米計(jì))3、專性寄生在活的敏感宿主體內(nèi)的超微小微生物4、只具簡(jiǎn)單的獨(dú)特結(jié)構(gòu),可通過(guò)細(xì)菌過(guò)濾器5、沒(méi)有核糖體,也沒(méi)有合成細(xì)胞物質(zhì)和繁殖所必備的酶系統(tǒng),不具獨(dú)立的代謝能力6、 在宿主體外呈現(xiàn)不具生命特征的大分子物質(zhì),但仍保留感染宿主的潛在能力。第二節(jié) 病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)二、病毒的化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)(一)病毒的化學(xué)組成蛋白質(zhì)和核酸,個(gè)體大的病毒除含蛋白質(zhì)和核酸外,還含類脂質(zhì)和多糖。(二)病毒的結(jié)構(gòu)病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)整個(gè)病毒體分兩部分:蛋白質(zhì)衣殼和核酸內(nèi)芯,兩者構(gòu)成核衣殼。完整的具有感染力的病毒體叫病毒粒子。病毒粒子有兩種:一種是不具有被膜的裸露病毒粒子,另一種是在核衣殼外面由被膜包圍所構(gòu)成的病毒粒子。寄生在植物體內(nèi)的類病毒和擬病毒結(jié)構(gòu)更簡(jiǎn)單,只具RNA,不具蛋白質(zhì)。1、蛋白質(zhì)衣殼是由一定數(shù)量的衣殼粒按一定的排列組合構(gòu)成的病毒外殼。由于衣殼粒的排列組合不同,使病毒有三種對(duì)稱性構(gòu)型:立體對(duì)稱型;螺旋對(duì)稱型;復(fù)合對(duì)稱型。蛋白質(zhì)的功能:是保護(hù)病毒使其免受環(huán)境因素的影響,決定病毒感染的特異性,使病毒與敏感細(xì)胞表面特定部位有特異親和力,病毒可牢固地附著在敏感細(xì)胞上。還有致病性、毒力和抗原性。2、核酸內(nèi)芯有兩種:核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)病毒核酸的功能是:決定病毒遺傳、變異和對(duì)敏感宿主細(xì)胞的感染力。動(dòng)物病毒、植物病毒和噬菌體在吸附、入侵方式上有所不同,復(fù)制基本相似。第三節(jié) 病毒的繁殖 一、病毒的繁殖過(guò)程 吸附、侵入、復(fù)制與聚集、釋放。P18大腸桿菌T系偶數(shù)噬菌體二、噬菌體的溶原性包括:毒(烈)性噬菌體和溫和性噬菌體毒性噬菌體:侵入宿主細(xì)胞后,隨即引起宿主細(xì)胞裂解的噬菌體。毒性噬菌體被看成正常表現(xiàn)的噬菌體。溫和噬菌體:侵入宿主細(xì)胞后,核酸附著并整合在宿主染色體上,和宿主的核酸同步復(fù)制,宿主細(xì)胞不裂解而繼續(xù)生長(zhǎng),這種不引起宿主細(xì)胞裂解的噬菌體。溶原細(xì)胞:含有溫和噬菌體核酸的宿主細(xì)胞。(原噬菌體隨宿主細(xì)胞分裂傳給子代細(xì)胞,子代細(xì)胞也稱為溶原細(xì)胞。)原噬菌體(或前噬菌體):在溶原細(xì)胞內(nèi)的溫和噬菌體核酸。溶原性是遺傳特性,溶原性細(xì)菌的子代也是溶原性。溶原性細(xì)菌內(nèi)的原噬菌體沒(méi)有感染力,它一旦脫離溶原性細(xì)菌的染色體后即可恢復(fù)復(fù)制能力,并引起宿主細(xì)菌裂解而釋放出成熟的毒性噬菌體,這是溶原性發(fā)生變異所致。溶原性噬菌體的命名是在敏感菌株的名稱后面加一個(gè)括號(hào),在括號(hào)內(nèi)寫上溶原性噬菌體。第四節(jié) 病毒的測(cè)定與培養(yǎng)一、病毒的測(cè)定樣品中的病毒數(shù)量可用顆粒計(jì)數(shù)法、間接計(jì)數(shù)法或感染效價(jià)法進(jìn)行測(cè)定。二、病毒的培養(yǎng)特征(一)病毒在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征:將噬菌體的敏感細(xì)胞接種在液體培養(yǎng)基中,經(jīng)培養(yǎng)后敏感細(xì)菌均勻分布在培養(yǎng)基中而使培養(yǎng)基渾濁。然后接種噬菌體,敏感細(xì)菌被噬菌體感染后發(fā)生菌體裂解,原來(lái)渾濁的細(xì)菌懸液變成透明的裂解溶液。(二)病毒在固體培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征:將噬菌體的敏感細(xì)菌接種在瓊脂固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成許多個(gè)菌落,當(dāng)接種稀釋適度的噬菌體懸液后引起點(diǎn)性感染,在感染點(diǎn)上進(jìn)行反復(fù)的感染過(guò)程,宿主細(xì)菌菌落就一個(gè)個(gè)地被裂解成一個(gè)個(gè)空斑,這些空斑就叫噬菌斑。三、病毒的培養(yǎng)基要求苛刻,專一性強(qiáng)。其敏感細(xì)胞要具備如下條件:1、 必須是活的敏感動(dòng)物或是活的敏感動(dòng)物組織細(xì)胞;2、 能提供病毒附著的受體;3、 敏感細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有破壞特異性病毒的限制性核酸內(nèi)切酶,病毒進(jìn)入細(xì)胞可生長(zhǎng)繁殖。空斑是指原代或傳代單層細(xì)胞被病毒感染后,一個(gè)個(gè)細(xì)胞被病毒蝕空成空斑。(PFU病毒空斑單位)一個(gè)空斑表示一個(gè)病毒。第五節(jié) 對(duì)病毒影響最大的物理因素是溫度、光和干燥度。四(二)污水處理過(guò)程中對(duì)病毒的去除效果污水處理分一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)處理。一級(jí)處理是物理過(guò)程,以過(guò)篩、除渣、初級(jí)沉淀除去沙礫、碎紙、塑料袋等固體廢物為目的,去除病毒的效果很差,約去除30%。二級(jí)處理是生物處理方法,是生物吸附、生物降解和絮凝沉降作用過(guò)程,以去除有機(jī)物、脫氮和除磷為目的,同時(shí)對(duì)污水中病毒的去除率較高,去除病毒率在90%99%。三級(jí)處理是繼生物處理后的深度處理,有生物、化學(xué)及物理的處理過(guò)程。它包括絮凝、沉淀、過(guò)濾和消毒過(guò)程,進(jìn)一步去除有機(jī)物、脫氮和除磷。三級(jí)處理可使病毒的滴度常用對(duì)數(shù)值下降46。第二章 原核微生物重點(diǎn)掌握:細(xì)菌的形態(tài)、細(xì)胞結(jié)構(gòu)及各部分結(jié)構(gòu)的功能;細(xì)菌的培養(yǎng)特征;細(xì)菌的物理化學(xué)性質(zhì)(細(xì)菌的帶電性及等電點(diǎn)、革蘭氏染色的原理與步驟);放線菌的菌絲體及菌落形態(tài)。了解藍(lán)細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)特點(diǎn)以及與水體富營(yíng)養(yǎng)化有關(guān)的藍(lán)細(xì)菌種屬根據(jù)rRNA序列的不同,可將所有生物劃分為三大域,即古菌域、細(xì)菌域和真核生物域。古菌和細(xì)菌同屬于原核微生物。第一節(jié) 古菌域一、古菌的特點(diǎn)大多數(shù)古菌的細(xì)胞壁不含二氨基庚二酸和胞壁酸,不受溶菌酶和內(nèi)酰胺抗生素如青霉素的作用。代謝:有異養(yǎng)型、自養(yǎng)型和不完全光合作用3種類型。呼吸類型:古菌多數(shù)為嚴(yán)格厭氧、兼性厭氧,還有專性好氧。繁殖方式與繁殖速度:古菌的繁殖方式有二分裂、芽殖。其繁殖速度較慢,進(jìn)化速度也比細(xì)菌慢。生活習(xí)性:大多數(shù)古菌生活在極端環(huán)境(極熱、極酸、絕對(duì)厭氧等)二、古菌的分類根據(jù)古菌的生活習(xí)性和生理特性,古菌可分為三大類型:產(chǎn)甲烷菌:產(chǎn)甲烷菌是專性厭氧菌。(在自然界或糞便或污水處理廠剩余污泥的厭氧消化、有機(jī)固體廢物厭氧堆肥或填埋中,產(chǎn)甲烷菌可與水解菌和產(chǎn)酸菌等協(xié)同作用,將有機(jī)物降解成的、乙醇甲烷化,產(chǎn)生有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的清潔燃料和生物能源甲烷。)嗜熱嗜酸菌:古生硫酸鹽還原菌和極端嗜熱古菌極端嗜鹽菌:端嗜鹽對(duì)有特殊的適應(yīng)性和需要性,它們通常棲息在高鹽環(huán)境如曬鹽場(chǎng)、天然鹽湖或高鹽腌漬食物如魚和肉類中。第二節(jié) 細(xì)菌域一、 細(xì)菌的個(gè)體形態(tài)和大小細(xì)菌有4種形態(tài):球狀、桿狀、螺旋狀和絲狀,分別稱為球菌、桿菌、螺旋菌和絲狀菌。(一) 細(xì)菌的形態(tài)1、球菌(有單球菌,雙球菌,排列不規(guī)則,4個(gè)球菌壘疊在一起的,8個(gè)球菌壘疊成立方體的,鏈狀的) 2、桿菌(有單桿菌,雙桿菌,鏈桿菌)3、螺旋菌(螺旋卷曲狀厭氧污泥中有紫硫螺旋菌、紅螺菌屬和綠菌屬,弧菌,呈逗號(hào)型)4、絲狀菌 分布在水生境、潮濕土壤和活性污泥中。絲狀體是絲狀菌分類的特征。(二)細(xì)菌的大小細(xì)菌的大小以微米計(jì)。多數(shù)球菌的大?。ㄖ睆剑?.52.0。桿菌的大小用其長(zhǎng)與寬度乘積表示。螺旋菌的大小用其寬度與彎曲長(zhǎng)度乘積表示。細(xì)菌大小的影響因素有:菌齡、環(huán)境滲透壓、代謝產(chǎn)物的積累、pH等。二、 細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu) 細(xì)菌為單細(xì)胞結(jié)構(gòu)。所有細(xì)菌共有的結(jié)構(gòu)有:細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞質(zhì)及其內(nèi)含物、擬核。部分細(xì)菌特有結(jié)構(gòu):芽孢、鞭毛、莢膜、黏液層、衣鞘及光合作用層片等。(一) 細(xì)胞壁細(xì)胞壁是包圍在細(xì)菌體表最外層的、堅(jiān)韌而有彈性的薄膜。約占菌體質(zhì)量的10%25%。1、細(xì)胞壁的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)細(xì)菌分為革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌,兩者的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)不同。革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁厚,結(jié)構(gòu)較簡(jiǎn)單,含肽聚糖、磷壁酸、少量蛋白質(zhì)和脂肪。革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁較薄,結(jié)構(gòu)較復(fù)雜,分外壁層和內(nèi)壁層。外壁層又分3層:最外層是脂多糖,中間是磷脂層,內(nèi)層為脂蛋白。內(nèi)壁層含肽聚糖,不含磷壁酸。革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁化學(xué)組成的區(qū)別:革蘭氏陽(yáng)性菌含大量的肽聚糖,獨(dú)含磷壁酸,不含脂多糖。革蘭氏陰性菌含極少肽聚糖,獨(dú)含脂多糖,不含磷壁酸。兩者的不同還表現(xiàn)在各種成分的含量不同。尤其脂肪的含量非常明顯,革蘭氏陽(yáng)性菌脂肪含量為1%4%,革蘭氏陰性菌脂肪含量為11%22%。2、細(xì)菌細(xì)胞壁的生理功能保護(hù)原生質(zhì)體免受滲透壓引起的破裂;維持細(xì)菌的細(xì)胞形態(tài);阻擋某些分子進(jìn)入和保留蛋白質(zhì)在間質(zhì);為鞭毛提供支點(diǎn),使鞭毛運(yùn)動(dòng)。(二)原生質(zhì)體包括細(xì)胞質(zhì)膜(原生質(zhì)膜)、細(xì)胞質(zhì)及內(nèi)含物、擬核。1、 細(xì)胞質(zhì)膜細(xì)胞質(zhì)膜是緊貼在細(xì)胞壁的內(nèi)側(cè)而包圍細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟而富有彈性的薄膜。是半滲透膜,具有選擇性的滲透作用,能阻止大分子通過(guò),并選擇性地逆濃度梯度吸收某些小分子進(jìn)入細(xì)胞。細(xì)胞質(zhì)膜的結(jié)構(gòu):磷脂雙分子層構(gòu)成膜的基本骨架;磷脂分子以多種形式不斷運(yùn)動(dòng)使膜結(jié)構(gòu)具有流動(dòng)性;膜蛋白質(zhì)無(wú)規(guī)則的以不同深度分布在膜的磷脂層中;膜上的蛋白質(zhì)和磷脂的數(shù)量與種類可隨細(xì)菌生理狀態(tài)而變化。細(xì)胞質(zhì)膜的生理功能:維持滲透壓的梯度和溶質(zhì)的轉(zhuǎn)移;細(xì)胞質(zhì)膜上有合成細(xì)胞壁和形成橫隔膜組分的酶,可在膜的外表面合成細(xì)胞壁;膜內(nèi)陷形成的中間體含有細(xì)胞色素,參與呼吸作用,還為DNA提供附著點(diǎn);還有多種酶,可進(jìn)行物質(zhì)代謝和能量代謝;為鞭毛提供附著點(diǎn)。2、 細(xì)胞質(zhì)(原生質(zhì))細(xì)胞質(zhì)(原生質(zhì))是在細(xì)胞質(zhì)膜以內(nèi),除核物質(zhì)以外的無(wú)色透明、粘稠的復(fù)雜膠體。細(xì)胞質(zhì)由蛋白質(zhì)、核酸、多糖、脂質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽和水組成。細(xì)胞質(zhì)的內(nèi)含物有:核糖體、內(nèi)含顆粒。核糖體:合成蛋白質(zhì)的部位、由核糖核酸(rRNA)和蛋白質(zhì)組成。內(nèi)含顆粒:(貯藏能量)細(xì)菌生長(zhǎng)到成熟階段,因營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩(通常缺氮,碳源和能源過(guò)剩)形成一些貯藏顆粒。3、擬核細(xì)菌的核因?yàn)闆](méi)有核膜和核仁,所以稱為原始核或擬核,也稱為細(xì)菌染色體。由脫氧核糖核酸(DNA)纖維組成。擬核攜帶著細(xì)菌全部遺傳信息,它的功能是決定遺傳性狀和傳遞遺傳性狀,是重要的遺傳物質(zhì)。(三)莢膜、粘液層、菌膠團(tuán)和衣鞘1、莢膜莢膜是一些細(xì)菌在其細(xì)胞表面分泌的一種黏性物質(zhì),把細(xì)胞壁完全包圍封住的物質(zhì)。莢膜能相對(duì)穩(wěn)定地附著在細(xì)胞壁表面,使細(xì)菌與外界環(huán)境有明顯的邊緣。高碳氮比和強(qiáng)通氣條件的培養(yǎng)有利于好氧細(xì)菌的莢膜形成。細(xì)菌莢膜一般很厚;有的細(xì)菌莢膜很薄,在200 以下,稱為微莢膜。莢膜是細(xì)菌的分類特征之一。莢膜的含水率在90%98%,有些細(xì)菌的莢膜含多糖。莢膜的功能:具有莢膜的S型肺炎鏈球菌毒力強(qiáng),有助于肺炎鏈球菌侵染人體;莢膜保護(hù)致病菌免受宿主吞噬細(xì)胞的吞噬,保護(hù)細(xì)菌免受干燥的影響;當(dāng)缺乏營(yíng)養(yǎng)時(shí),莢膜可被用作碳源和能源,有的莢膜還可作氮源;廢水生物處理中的細(xì)菌莢膜有生物吸附作用,將廢水中的有機(jī)物、無(wú)機(jī)物及膠體吸附在細(xì)菌體表面上。2、粘液層有些細(xì)菌不產(chǎn)莢膜,其細(xì)胞表面仍可分泌黏性的多糖,疏松地附著在細(xì)菌細(xì)胞壁表面上,與外界沒(méi)有明顯邊緣,這叫黏液層。黏液層在廢水生物處理過(guò)程中有生物吸附作用,在曝氣池中因曝氣攪動(dòng)和水的沖擊力容易把細(xì)菌黏液沖刷入水中,以致增加水中有機(jī)物,它可被其他微生物利用。3、菌膠團(tuán)有些細(xì)菌由于其遺傳特性決定,細(xì)菌之間按一定的排列方式互相黏集在一起,被一個(gè)公共莢膜包圍形成一定形狀的細(xì)菌集團(tuán),叫做菌膠團(tuán)。4、衣鞘(對(duì)細(xì)菌起保護(hù)作用)水生境中的絲狀菌的絲狀體表面的黏液層或莢膜硬質(zhì)化,形成一個(gè)透明堅(jiān)韌的空殼,即為衣鞘。莢膜、黏液層和衣鞘對(duì)染料的親和力極低,很難著色,都用負(fù)染色法染色。(四)芽孢(抵抗外界不良環(huán)境)某些細(xì)菌在它的生活史中的某個(gè)階段或某些細(xì)菌在它遇到外界不良環(huán)境時(shí),在其細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)內(nèi)生孢子叫芽孢。所有的芽孢都可抵抗外界不良環(huán)境。是細(xì)菌的分類鑒定依據(jù)之一。芽孢的特點(diǎn):芽孢的含水率低,38%40%;芽孢壁厚而致密;芽孢中的2,6吡啶二羧酸(DPA)含量高,DPA以鈣鹽形式存在,所以鈣含量也高;芽孢含有耐熱性酶,具有耐熱性。芽孢是抵抗外界不良環(huán)境的休眠體。芽孢不易著色,但可用孔雀綠染色。(五)鞭毛(使細(xì)菌運(yùn)動(dòng),增加吸附力)由細(xì)胞質(zhì)膜上的鞭毛基粒長(zhǎng)出穿過(guò)細(xì)胞壁伸向體外的一條纖細(xì)的波浪狀的絲狀物叫鞭毛。具有鞭毛的細(xì)菌都能運(yùn)動(dòng),不具鞭毛的細(xì)菌一般不能運(yùn)動(dòng)。(如貝日阿托氏菌沒(méi)有鞭毛但仍可運(yùn)動(dòng),這種運(yùn)動(dòng)叫滑動(dòng))鞭毛著生部位、數(shù)目、排列是細(xì)菌分類的依據(jù)之一。三、細(xì)菌的培養(yǎng)特征有:細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征;細(xì)菌在明膠培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征;細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征;細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征。以上培養(yǎng)特征均可用以鑒定細(xì)菌,或判斷細(xì)菌的呼吸類型。(一)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征(瓊脂20g/L)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征就是菌落特征。菌落是由一個(gè)細(xì)菌繁殖起來(lái)的,由無(wú)數(shù)細(xì)菌組成具有一定形態(tài)特征的細(xì)菌集團(tuán)。用稀釋平板法和平板劃線法將呈單個(gè)細(xì)胞的細(xì)菌接種在固體培養(yǎng)基上,在一定的溫度條件下培養(yǎng),細(xì)菌就可在固體培養(yǎng)基上迅速生長(zhǎng)繁殖形成一個(gè)由無(wú)數(shù)細(xì)菌組成的群體(即菌落)。菌落的特征是分類鑒定的依據(jù)之一。應(yīng)用:固體培養(yǎng)基常用于微生物分離、鑒定、計(jì)數(shù)和菌種保存等方面??蓮?方面看菌落的特征:表面特征;邊緣特征;縱剖面特征。(濕潤(rùn)、較光滑、較透明、較粘稠、易挑取、質(zhì)地均勻、菌落正反面或邊緣與中央部位的顏色一致)菌苔是細(xì)菌在斜面培養(yǎng)基接種線上長(zhǎng)成的一片密集的細(xì)菌群落。(二)細(xì)菌在明膠培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征用穿刺接種法將某種細(xì)菌接種在明膠培養(yǎng)基中培養(yǎng),能產(chǎn)生明膠水解酶水解明膠,不同的細(xì)菌將明膠水解成不同形態(tài)的溶菌區(qū),依據(jù)這些不同形態(tài)的溶菌區(qū)或溶菌與否可將細(xì)菌進(jìn)行分類。應(yīng)用:明膠培養(yǎng)基可用于觀察微生物產(chǎn)酶情況。(三)細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征用穿刺接種技術(shù)將細(xì)菌接種在含質(zhì)量濃度35g/L瓊脂的半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng),細(xì)菌可呈現(xiàn)出各種生長(zhǎng)形態(tài)。依據(jù)細(xì)菌的生長(zhǎng)形態(tài)可判斷細(xì)菌的呼吸類型和鞭毛有無(wú),能否運(yùn)動(dòng)??梢罁?jù)如下生長(zhǎng)狀況判斷細(xì)菌的呼吸類型:如果細(xì)菌在培養(yǎng)基的表面及穿刺線的上部生長(zhǎng)者為好氧菌。沿著穿刺線自上而下生長(zhǎng)者為兼性厭氧菌或兼性好氧菌。如果只在穿刺線的下部生長(zhǎng)者為厭氧菌。根據(jù)如下生長(zhǎng)狀況判斷細(xì)菌是否運(yùn)動(dòng):如果只沿著穿刺線生長(zhǎng)者為沒(méi)有鞭毛、不能運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌;如果不但沿著穿刺線生長(zhǎng)而且穿透培養(yǎng)基擴(kuò)散生長(zhǎng)者為有鞭毛、能運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌。應(yīng)用:半固體培養(yǎng)基可用于觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種(鞭毛、呼吸類型)和測(cè)定噬菌體的效價(jià)等方面。(四)細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征在液體培養(yǎng)基中 ,細(xì)菌整個(gè)個(gè)體與培養(yǎng)基接觸,可以自由擴(kuò)散生長(zhǎng)。有的細(xì)菌使培養(yǎng)基渾濁,菌體均勻分布于培養(yǎng)基中。有的細(xì)菌互相凝聚成大顆粒沉在管底部,培養(yǎng)基很清。細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征是分類依據(jù)之一。應(yīng)用:液體培養(yǎng)基適于作生理等研究,由于發(fā)酵率高,操作方便,也常用于發(fā)酵工業(yè),獲取大量菌體或代謝產(chǎn)物。 四、細(xì)菌的物理化學(xué)特性(一)細(xì)菌表面電荷和等電點(diǎn)蛋白質(zhì)由20種氨基酸按一定的排列順序由肽鍵連接組成。氨基酸是兩性電解質(zhì),在堿性溶液中表現(xiàn)出帶負(fù)電荷,在酸性溶液中表現(xiàn)出帶正電荷。在某一特定pH溶液中,氨基酸所帶的正電荷和負(fù)電荷相等時(shí)的pH,稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。 由氨基酸構(gòu)成的蛋白質(zhì)也是兩性電解質(zhì),細(xì)菌細(xì)胞壁表面含表面蛋白,所以,細(xì)菌也具有兩性電解質(zhì)的性質(zhì),有各自的等電點(diǎn)。細(xì)菌的等電點(diǎn)為pH25.革蘭氏陽(yáng)性菌的等電點(diǎn)為pH23,革蘭氏陰性菌的等電點(diǎn)為pH45,在pH34之間的為革蘭氏染色不穩(wěn)定性菌。(細(xì)菌培養(yǎng)液的pH若比細(xì)菌的等電點(diǎn)高,細(xì)菌的游離氨基電離受抑制,游離羧基電離,細(xì)菌則帶負(fù)電。如果培養(yǎng)液的pH比細(xì)菌的等電點(diǎn)低,細(xì)菌的游離羧基電離受抑制,游離氨基電離,細(xì)菌則帶正電。)在一般的培養(yǎng)、染色、血清實(shí)驗(yàn)等過(guò)程中,細(xì)菌多處于偏堿性(pH為77.5)、中性和偏酸性(6pH異化作用時(shí),生命個(gè)體的重量和體積不斷增大的過(guò)程。繁殖生命個(gè)體生長(zhǎng)到一定階段,通過(guò)特定方式產(chǎn)生新的生命個(gè)體,即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的生物學(xué)過(guò)程。發(fā)育從生長(zhǎng)到繁殖,是生物的構(gòu)造和機(jī)能從簡(jiǎn)單到復(fù)雜、從量變到質(zhì)變的發(fā)展變化過(guò)程,這一過(guò)程稱為發(fā)育。代時(shí)(世代時(shí)間)細(xì)菌兩次細(xì)胞分裂之間的時(shí)間個(gè)體生長(zhǎng)微生物細(xì)胞個(gè)體吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),進(jìn)行新陳代謝,原生質(zhì)與細(xì)胞組分的增加為個(gè)體生長(zhǎng)。群體生長(zhǎng)群體中個(gè)體數(shù)目的增加。可以用重量、體積、密度或濃度來(lái)衡量。二、 研究微生物生長(zhǎng)的方法(一) 分批培養(yǎng)分批培養(yǎng)是將一定量的微生物接種在一個(gè)封閉的、盛有一定量液體培養(yǎng)基的容器內(nèi),保持一定的溫度、pH和DO,微生物在其中生長(zhǎng)繁殖。培養(yǎng)基一次性加入,不更換。細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線:一定量的微生物,接種在封閉的適合的新鮮液體培養(yǎng)基中,在適宜的溫度下培養(yǎng),以細(xì)菌個(gè)數(shù)或細(xì)菌數(shù)的對(duì)數(shù)或細(xì)菌的干重為縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),連接坐標(biāo)系上個(gè)點(diǎn)成的一條曲線。細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖可細(xì)分為6個(gè)時(shí)期:停滯期、加速期、對(duì)數(shù)期、減速期、靜止期和衰亡期。細(xì)菌的代時(shí)G=0.301(tx -t 0)/(lgNx-lgN0)(二)連續(xù)培養(yǎng)概念:在細(xì)菌進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí),以一定的速率不斷地補(bǔ)充新鮮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),同時(shí)以同樣的速率排除培養(yǎng)物(含菌體及代謝產(chǎn)物),讓培養(yǎng)的微生物長(zhǎng)時(shí)間地處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,以利于微生物的增殖速率和代謝活性處于某種穩(wěn)定狀態(tài)。 培養(yǎng)方式:恒濁連續(xù)培養(yǎng)和恒化連續(xù)培養(yǎng)。細(xì)菌生長(zhǎng)曲線在廢水生物處理中的應(yīng)用:在廢水的水質(zhì)情況(主要是有機(jī)物濃度)可利用不同生長(zhǎng)階段的微生物處理廢水。如,常規(guī)活性污泥法利用生長(zhǎng)速率下降階段的微生物,包括減速期、靜止期的微生物;生物吸附法利用生長(zhǎng)速率下降階段(靜止期)的微生物;高負(fù)荷活性污泥法利用生長(zhǎng)速率上升階段(對(duì)數(shù)期)和生長(zhǎng)速率下降階段(減速期)的微生物;而有機(jī)物含量低,其BOD5與CODCr的比值小于0.3,可生化性差的污(廢)水,則用延時(shí)曝氣法處理,即利用內(nèi)源呼吸階段(衰亡期)的微生物處理。P171常規(guī)活性污泥不利用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的微生物而利用靜止期的微生物的原因:處于對(duì)數(shù)期的微生物代謝活力強(qiáng),能去除大量有機(jī)物,但對(duì)進(jìn)水有機(jī)物濃度需求高,使出水不易達(dá)到排放標(biāo)準(zhǔn); 處于對(duì)數(shù)期的微生物生長(zhǎng)繁殖旺盛,沉淀性能差,致使出水水質(zhì)差; 處于靜止期的微生物活力相對(duì)較差,但仍有相當(dāng)?shù)幕盍?,去除有機(jī)物的效果仍較好; 處于靜止期的微生物體內(nèi)積累了大量貯存物,強(qiáng)化了微生物的生物吸附能力,自我絮凝、凝合能力強(qiáng),在二沉池中泥水分離效果好,出水水質(zhì)好。四、微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定方式(一) 測(cè)定微生物的總數(shù)(直接計(jì)數(shù)法) 1、 計(jì)數(shù)器直接計(jì)數(shù) 2、 染色涂片計(jì)數(shù) 3、 比例計(jì)數(shù)法 4、 比濁法(二)測(cè)定活菌數(shù)(間接計(jì)數(shù)法)(三)計(jì)算生長(zhǎng)量第二節(jié) 微生物的生存因子微生物的生長(zhǎng)因子:溫度PH 氧化還原電位 溶解氧 太陽(yáng)輻射 活度與滲透壓 表面張力第三節(jié) 其他不利環(huán)境因子對(duì)微生物的影響紫外輻射和電離輻射超聲波重金屬極端溫度極端PH干燥一些有機(jī)物抗生素第四節(jié) 微生物與微生物之間的關(guān)系1 競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系 指不同的微生物種群在同一環(huán)境中,對(duì)食物等營(yíng)養(yǎng)、DO、空間和其它共同要求的物質(zhì)互相競(jìng)爭(zhēng),互相受到不利影響。如菌膠團(tuán)細(xì)菌與絲狀細(xì)菌。 2 原始合作關(guān)系 指兩種微生物共存于同一環(huán)境中,相互提供營(yíng)養(yǎng)及其它生活條件,雙方互為有利,相互受益,當(dāng)兩者分開時(shí)各自可單獨(dú)生存。如固氮菌與纖維素分解菌。3 共生關(guān)系 指兩種微生物共同生活于同一環(huán)境中,各自執(zhí)行優(yōu)勢(shì)的生理功能,在營(yíng)養(yǎng)上互為有利,組成共生體,但兩者分開后不能單獨(dú)生活。如真菌和藻類。 4. 偏害關(guān)系 指同存于同一環(huán)境中的同種微生物,一種微生物在其生命活動(dòng)過(guò)程中,產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物或改變其它條件,從而抑制其它微生物的生長(zhǎng)繁殖,甚至殺死其它微生物的現(xiàn)象。5. 捕食關(guān)系 指有的微生物不是通過(guò)代謝產(chǎn)物來(lái)對(duì)抗對(duì)方,而是吞食對(duì)方。6. 寄生關(guān)系 指一種生物(寄生菌)需要在另一種生物體(寄主或宿主)內(nèi)生活,從而攝取營(yíng)養(yǎng)才能得以生長(zhǎng)繁殖。第五節(jié) 軍中的退化、復(fù)壯與保藏二、菌種的保藏目的:對(duì)于選育出來(lái)的優(yōu)良性狀的菌株進(jìn)行妥善保藏,使其不受污染、不退化和死亡。保藏原理:根據(jù)微生物的生理、生化特性,創(chuàng)造人工條件,如低溫、干燥、缺氧、貧乏培養(yǎng)基和添加保護(hù)劑等,使微生物處于代謝微弱、緩慢,生長(zhǎng)繁殖受抑制的休眠狀態(tài)。保藏方法:定期移植法 將菌種接種于斜面或液體培養(yǎng)基中,待生長(zhǎng)成健壯的菌體后,將其置于4冰箱中保藏,每隔一定時(shí)間重新移植培養(yǎng)一次。干燥法 將菌種接種到適當(dāng)?shù)妮d體上,如河沙等,以保藏菌種。隔絕空氣法 是定期移植的輔助方法,將待保護(hù)的斜面菌種用橡皮塞代替原有的棉塞塞緊,可避免水分散發(fā)且隔氧,能適當(dāng)延長(zhǎng)包藏期。蒸餾水懸浮法 只需將菌種懸浮在無(wú)菌蒸餾水中,將容器封好即可。綜合法 是利用低溫、干燥和隔絕空氣等幾個(gè)保藏菌種的重要方法的綜合。目前最好的菌種保藏。第二篇 微生物生態(tài)
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