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第一部分 微生物的利用實(shí)驗(yàn)1 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1. 如何操作才能盡量避免唄雜菌污染？規(guī)范操作，符合滅菌原則：培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)用具等嚴(yán)格滅菌 在無(wú)菌室，超凈工作臺(tái)上操作，在酒精燈旁操作，手、實(shí)驗(yàn)服等 減少操作時(shí)間 控制培養(yǎng)條件：PH、溫度等2. 在培養(yǎng)后如何判斷是否有雜菌污染？ 觀察菌落形態(tài)、大小等 鑒別培養(yǎng)基：伊紅美蘭 顯微觀察形態(tài)、結(jié)構(gòu)等 染色觀察等3. 進(jìn)行恒溫培養(yǎng)時(shí)為什么要將培養(yǎng)皿倒置？防止水蒸氣凝結(jié)成水滴，從培養(yǎng)皿蓋上滴落培養(yǎng)基表面并擴(kuò)散，導(dǎo)致菌落間相互影響，不能形成單菌落，達(dá)不到實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?. 實(shí)驗(yàn)完成后，接觸過(guò)細(xì)菌的器皿應(yīng)如何處理？先高壓滅菌后再洗滌，廢棄物經(jīng)高壓滅菌后再拋棄。5. 如果分離的是轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌，如何保證不被普通的大腸桿菌污染？配置選擇培養(yǎng)基，（如含抗氨芐青霉素的培養(yǎng)基），篩選出轉(zhuǎn)基因工程菌。實(shí)驗(yàn)2 分離以尿素為氮源的微生物1. 為什么要用瓊脂糖代替瓊脂配制固體培養(yǎng)基？瓊脂是未被融化的混合物，內(nèi)含一定量的含氮化合物。如果用瓊脂固化培養(yǎng)基，會(huì)為細(xì)菌提供一定量的非尿素類氮源，這樣會(huì)在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)生大量以非尿素為氮源的細(xì)菌，不利于以尿素為氮源的而細(xì)菌的篩選，故而用經(jīng)純化的瓊脂糖而不用瓊脂作固化劑。2. 有脲酶的細(xì)菌在生態(tài)穩(wěn)態(tài)上起什么作用？如果土壤中有許多尿素，在自然界較高溫度下會(huì)被水解，水解后的氨使土壤變成堿性，氨與其他陰離子物質(zhì)如SO2-4、CO2-3、NO -3等形成化合物，則會(huì)使土壤板結(jié)。有脲酶的細(xì)菌使植物廢棄物和動(dòng)物尸體分解，并利用了所形成的氨，有利于自然界中氮的循環(huán)。 3. 有脲酶的細(xì)菌菌落周圍為什么有著色的環(huán)帶出現(xiàn)？細(xì)菌向胞外分泌脲酶，使培養(yǎng)基中中的尿素分解，尿素分解后產(chǎn)生氨，氨為堿性，酚紅在酸性環(huán)境中為黃色，在堿性環(huán)境中變?yōu)榧t色。培養(yǎng)基中的酸堿指示劑產(chǎn)生顏色變化（變紅），標(biāo)志著攢脲酶水解尿素的作用，從而證明這一菌株可以以尿素為氮源。紅色環(huán)狀區(qū)域的大小代表脲酶活性的強(qiáng)弱和含量的多少。紅色區(qū)域越大，表明菌株利用尿素的能力越強(qiáng)。 4. 與全培養(yǎng)基上的菌落數(shù)比較，為什么尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落？表明能利用尿素的細(xì)菌在土壤中只占有極少部分。實(shí)驗(yàn)4 果汁中的果膠和果膠酶1、制作果汁的最佳條件是什么？品質(zhì)最好的果汁應(yīng)該是：（1）盡量保留水果中的營(yíng)養(yǎng)成分；（2）具有水果的原始口味；（3）有更多的固形物；（4）分散程度好，不沉淀，不上?。唬?）有原始的水果色彩；（6）除去所有的機(jī)械組織，更易消化。因此，能使更多的水果成分溶解和分散在果汁中的條件就是最佳條件，達(dá)到這些條件的方法要溫和，且對(duì)人體無(wú)害。2、果膠酶在制作果汁中起什么作用？果膠是細(xì)胞間的黏連成分，也是果汁中的成分，加入果膠酶可將細(xì)胞離析，增加固形物的分散度。此外，還降低了水果勻漿懸液的黏度，有利于過(guò)濾掉不溶物，并使果膠分散成半乳糖醛酸。3、果膠酶還可能有什么作用？果膠酶除用于果汁外，還用于果酒澄清，同時(shí)也作為洗衣粉的添加劑。加果膠酶的洗衣粉可除去衣服上的果汁、果醬等污垢。4、果膠酶水解果膠的最終產(chǎn)物是什么？要使果汁澄清，應(yīng)該使用果膠酶和果膠甲酯酶中的哪一種？還是同時(shí)使用兩種酶？為什么？果膠酶水解果膠的最終產(chǎn)物是半乳糖醛酸。要使果汁澄清，應(yīng)同時(shí)使用果膠酶和果膠甲酯酶。從微生物中獲得的果膠酶都包括這兩種酶。因?yàn)?，如果不使果膠完全降解成半乳糖醛酸，則不可能增加組織的分散性，許多水果中的固形物不能除去，這樣會(huì)降低果汁的營(yíng)養(yǎng)成分，也影響其澄清度。實(shí)驗(yàn) 6 -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)1.如何證明洗滌固定化酶柱的流出液中沒(méi)有淀粉酶?可在試管中加入1ml可溶性淀粉，再加幾滴淀粉酶柱流出液，保溫幾分鐘后用碘液檢驗(yàn)。如仍顯藍(lán)色，則流出液中沒(méi)有淀粉酶了。2.耐高溫的淀粉酶有哪些可能的用途?可以在高溫下使淀粉水解快，而且酶不會(huì)因高溫上而失活，所以可在一些需要高溫加熱同時(shí)又要水解淀粉的反應(yīng)中使用。實(shí)驗(yàn)8 果酒和果醋的制作1. 葡萄或其它果實(shí)上常有天然的野生酵母存在，為什么上述兩個(gè)實(shí)驗(yàn)都要接種酵母？生產(chǎn)葡萄酒時(shí)一般不加蔗糖，都只用野生酵母。本實(shí)驗(yàn)為了加速反應(yīng)，使觀察更直觀，需要有更多底物（蔗糖）參加反應(yīng)，所以加入酵母使酒精發(fā)酵占有優(yōu)勢(shì)是必須的。否則會(huì)有許多霉菌生長(zhǎng)，出現(xiàn)異味，影響質(zhì)量。2. 為什么發(fā)酵瓶中的液體不能裝滿？從以葡萄糖為底物發(fā)生乙醇發(fā)酵的反應(yīng)式看，1個(gè)葡萄糖分子經(jīng)過(guò)乙醇發(fā)酵后 要產(chǎn)生2分子的CO2,因此發(fā)酵過(guò)程中有氣體的產(chǎn)生。如果發(fā)酵液裝滿容器，則液體將外溢，一則發(fā)酵液會(huì)損失，二則瓶口等處會(huì)被許多雜菌污染，特別是被霉菌污染，影響產(chǎn)物品質(zhì)，所以發(fā)酵液不能裝滿。3. 教材圖12裝著水的彎曲玻璃管起什么作用？裝著水的玻璃管可防止氧氣進(jìn)入。由于厭氧發(fā)酵過(guò)程中有CO2產(chǎn)生，使瓶?jī)?nèi)壓力加大，CO2氣體可以從裝有水的玻璃管中出去，減小瓶中壓力。此外，有水封閉也起著防止被空氣中雜菌污染的作用。4. 制酒時(shí)必須保證所有用具都是清潔的，為什么？不論是葡萄糖還是其他水果，對(duì)微生物來(lái)說(shuō)都是良好的培養(yǎng)基，特別是霉菌?？諝庵杏泻芏嗝咕咦?，也有細(xì)菌，如果用具不清潔，就等于向果汁接種了許多雜菌，他們都可以利用糖繁殖菌體。這樣，我們飲用的就不是果酒，而是雜菌的培養(yǎng)液了，輕則會(huì)影響我們的口感，重則會(huì)影響我們的健康。5. 制醋時(shí)為什么要向發(fā)酵瓶中通入空氣？從乙醇進(jìn)行醋酸發(fā)酵的反應(yīng)式看，反應(yīng)是一個(gè)氧化過(guò)程，需要空氣中的氧氣，因此要向發(fā)酵瓶中通入氧氣。6. 為什么空氣要用棉花過(guò)濾？甲瓶中的酒水混合物和乙瓶中的鋸末都含有微生物可利用的養(yǎng)分，進(jìn)入的空氣含有大量微生物，經(jīng)棉花過(guò)濾可防止微生物進(jìn)入。7. 你所得到的丙瓶中的液體就是市售的白醋？為什么？怎樣才能得到白醋？市售白醋中除醋酸外，還含有豐富的不揮發(fā)性酸、糖、酯、醇等物質(zhì)，這些物質(zhì)多為加入的酵母所產(chǎn)生。只有醋酸不能達(dá)到口感好、有香氣的目的。在生產(chǎn)中將一部分丙瓶產(chǎn)物加工成成品，另一部分再與甲瓶溶液一起進(jìn)入乙瓶，這樣可增加口感。最后的成品需要調(diào)兌、過(guò)濾、化驗(yàn)，再包裝成成品，如光華白醋的流出液含酸可達(dá)9.0%9.5%，而成品中只有5%，要經(jīng)過(guò)上述過(guò)程才能得到市售類型的白醋。實(shí)驗(yàn)10 泡菜的腌制和亞硝酸的測(cè)定1. 加入白酒起什么作用？白酒可抑制泡菜表面雜菌的生長(zhǎng)，它也是一種調(diào)味劑，可增加醇香感。2. 用水封閉壇口起什么作用？不封閉有什么結(jié)果？水封閉壇口起著使壇內(nèi)與壇外空氣隔絕的作用，空氣中21%是氧氣，這是最簡(jiǎn)易的造成無(wú)氧環(huán)境的方法。這樣，壇內(nèi)可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌進(jìn)行乳酸發(fā)酵。如不封閉，則會(huì)有許多需氧細(xì)菌生長(zhǎng)，蔬菜會(huì)腐爛。3. 厭氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵的產(chǎn)物有什么不同？乳酸菌產(chǎn)生乳酸屬厭氧發(fā)酵；酵母產(chǎn)生乙醇屬于厭氧發(fā)酵；醋酸菌產(chǎn)生乙酸屬有氧發(fā)酵，如繼續(xù)進(jìn)行有氧發(fā)酵，則產(chǎn)物被氧化產(chǎn)生乙酸。此外，需氧微生物的作用也可使蔬菜腐爛。實(shí)驗(yàn)11 植物的組織培養(yǎng)1、不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實(shí)驗(yàn)相同的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度？任何植物種或品種都不可貿(mào)然使用與本實(shí)驗(yàn)相同的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度，都要探索使用何種合成激素和何種激素濃度才行。2、本實(shí)驗(yàn)用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，為什么？植物中存在的天然激素都有相應(yīng)的使之分解的酶，這樣，天然激素在植物體內(nèi)和存在的時(shí)間就較短，而人工合成激素在植物中沒(méi)有相應(yīng)于它的酶，所以作用和存在的時(shí)間長(zhǎng)，作用效果明顯。3、