新人教版高中生物選修1DNA的粗提取與鑒定

1、名校名 推薦DNA的粗提取與鑒定教學(xué)目的1初步掌握 DNA粗提取和鑒定的方法。2觀察提取出來的DNA物質(zhì)。實(shí)驗(yàn)原理1 DNA在 NaCl 溶液中的溶解度是隨NaCl 的濃度變化而改變的。 DNA在 014mol/L 的 NaCl溶液中的溶解度最低，據(jù)此可使溶解于NaCl 溶液中的 DNA析出。2 DNA不溶于酒精溶液， 但細(xì)胞中某些物質(zhì)可以溶于酒精溶液，據(jù)此可提取雜質(zhì)較少的 DNA。3 DNA二苯胺沸水浴藍(lán)色（用于 DNA的鑒定）實(shí)驗(yàn)步驟1材料制備0.1G/ml 檸檬酸鈉 100ml500ml 燒杯玻璃棒攪拌 1000r/min離心 2min吸去上清液活雞血 180ml即得雞血細(xì)胞液（也可將上

2、述燒杯置于冰箱中，靜置一天使雞血細(xì)胞自行沉淀）2方法步驟取血細(xì)胞液 5-10ml 20ml 蒸餾水，玻璃棒沿一個(gè)方向快速攪拌（1）提取血細(xì)胞核物質(zhì)紗布過濾，濾液中含 DNA和其他核物質(zhì)，如蛋白質(zhì)原理：血細(xì)胞的細(xì)胞膜、核膜吸水脹破，玻璃棒快速攪拌機(jī)械加速血細(xì)胞破裂（2）溶解核內(nèi) DNA：濾液 2mol/LNaCl 溶液 40ml，玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌（3）析出含 DNA的粘稠物：向上述溶液中緩緩加入蒸餾水，并輕輕地沿一個(gè)方向攪拌，出現(xiàn)絲狀物，當(dāng)絲狀物不再增加時(shí)，停止加水（此時(shí)NaCl 溶液相當(dāng)于稀釋到 014mol/L ）（4）濾取含 DNA的粘稠物：用多層紗布過濾，含DNA的粘稠物留在紗布上（

3、5）DNA粘稠物再溶解：20ml2mol/LNaCl溶液 50ml 燒杯，上述粘稠物緩慢攪拌 3 min（6）過濾含 DNA的 2mol/LNaCl 溶液：用 2 層紗布過濾，濾液中含DNA（7）提取含雜質(zhì)較少的 DNA：上述溶液 95%酒精，緩慢攪拌，出現(xiàn)乳白色絲狀物，用玻璃棒將絲裝物卷起。（8）DNA鑒定：實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵：1名校名 推薦本實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵是獲取較純凈的DNA，因此應(yīng)注意：1充分?jǐn)嚢桦u血細(xì)胞液。DNA存在于雞血細(xì)胞核中。將雞血細(xì)胞與蒸餾水混合以后，應(yīng)用玻璃棒沿一個(gè)方向快速攪拌，使血細(xì)胞加速破裂，并釋放出DNA2沉淀 DNA必須用冷酒精。實(shí)驗(yàn)前必須準(zhǔn)備好大量95%的酒精，并在冰箱中（

4、5以下）至少存放 24 小時(shí)。3正確攪拌含有懸浮物的溶液。在第（ 3）、（ 5）步驟，玻璃棒不要直插燒杯底部，且攪拌要輕緩，以便獲得較完整的 DNA分子。在步驟（ 7），要將玻璃棒插入燒杯溶液中間，用手緩慢轉(zhuǎn)動(dòng) 5-10min 。【同類題庫】在“ DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中分別使用2molL、014mol L、 2mol L、 0015molL 的氯化鈉溶液，其作用分別是（A）A溶解、析出、溶解、溶解C溶解、溶解、析出、溶解B析出、溶解、析出、溶解D溶解、析出、溶解、析出下列圖示中能反映DNA溶解度與 NaCI 溶液濃度之間關(guān)系的是（C）DNA在下列哪種濃度的 NaCl 溶液中溶解度最低（

5、 B）A 2 00mol/LB 0 14 mol/L C0015 mol/L D010 mol/L在 DNA的粗提取過程中，初步析出DNA和提取較純凈的 DNA所用的藥品的濃度和名稱分別是（ B）01 g/ml 的檸檬酸鈉溶液200mol/L 的 NaCl溶液 014 mol/L 的 NaCl溶液體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精溶液 0 015 mol/L的 NaCl 溶液 0 04 mol/L 的 NaCl 溶液ABCD與析出 DNA粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是（C）A操作時(shí)緩緩滴加蒸餾水，降低 DNA的溶解度B在操作 A 時(shí)，用玻璃棒輕緩攪拌，以保證 DNA分子完整C加蒸餾水可同時(shí)降低 DNA和蛋

6、白質(zhì)的溶解度，兩者均可析出D當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí)，此時(shí)NaCl 的濃度約為 0.14mol/L.（多選）下列有關(guān)“ DNA粗提取”的操作中，正確的是（ABCD）A在雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水B在“析出 DNA粘稠物”時(shí)，要緩緩加入蒸餾水，直至溶液中粘稠物不再增多C在用酒精凝集 DNA時(shí)，要使用冷酒精D用玻璃棒攪拌時(shí)要沿一個(gè)方向“ DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”中有三次過濾：（1）過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液。（2）過濾含粘稠物的 0.14mol/L NaCl .（3）過濾溶解有 DNA的 2mol/L NaCl.以上三次過濾分別為了獲得（A）2名校名 推薦A含核物質(zhì)的濾液、紗布上的粘稠物、含 DN

7、A的濾液B含核物質(zhì)的濾液、濾液中 DNA粘稠物、含 DNA的濾液C含核物質(zhì)的濾液、濾液中 DNA粘稠物、紗布中 DNA D含較純的 DNA濾液、紗布上粘稠物、含 DNA的濾液為獲取較純凈的 DNA，采集來的血樣可用蛋白酶處理，然后用有機(jī)溶劑除去蛋白質(zhì)。下列有關(guān)敘述，正確的是（ D）A除去血漿中的蛋白質(zhì)B除去染色體上的蛋白質(zhì)C除去血細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)D除去血細(xì)胞中所有的蛋白質(zhì)在“DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”中，和“使用蛋白酶從染色體中提取DNA”中的蛋白酶具有相似作用的物質(zhì)是（ D）A NaCl 溶液B蒸餾水C檸檬酸鈉D冷卻的酒精DNA不溶于下列何種溶液（ D）A NaCl 溶液BKCl 溶液CMg

8、Cl溶液D酒精溶液下列不同濃度的 NaCl 溶液中，使DNA析出最徹底和溶解度最高的是（A） 0.14mol/L 2mol/L 0.25mol/L 0.015 mol/LA和B和C和D和下列操作中，對(duì) DNA的提取量影響較小的是（ B）A使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂，放出DNA等核物質(zhì)B攪拌時(shí)，要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動(dòng)C在析出 DNA粘稠物時(shí)，要緩緩加入蒸餾水，直至溶液中粘稠物不再增多D在用酒精沉淀 DNA時(shí)，要使用冷酒精，甚至再將混合液放入冰箱中冷卻E在 DNA的溶解和再溶解時(shí)，要充分?jǐn)嚢柙凇?DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”中：（1）實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水，第一次目的是，第二次目的是。（2）說

9、明不同濃度的 NaCl 溶液的作用：2mol/L NaCl 的作用；0.14mol/L NaCl的作用；0.015 mol/L NaCl的作用；（3）提純 DNA的原理是，所用試劑為。攪拌要，目的。（4）能否用哺乳動(dòng)物血液代替？簡述理由。 （1）使血細(xì)胞吸水破裂，溶解細(xì)胞核內(nèi)的 DNA；降低 NaCl 溶液的濃度，降低 DNA分子在 NaCl 溶液中的溶解度析出 DNA分子（ 2）溶解含 DNA的核物質(zhì)；使含 DNA的絲狀粘稠物析出DNA分子；進(jìn)行 DNA鑒定（ 3）DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中某些鹽類蛋白質(zhì)可溶于酒精溶液； 95%的冷卻酒精；輕緩、同方向；保持 DNA分子的完整性（ 4）不

10、能，成熟的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核 此實(shí)驗(yàn)中有幾次用玻璃棒攪拌，每次攪拌的方向是一致的；但每次攪拌的強(qiáng)度不同，請(qǐng)就此予以說明。（1）提取雞血細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)時(shí)，應(yīng)攪拌，目的是。（2）向含核物質(zhì)的2mol/L NaCl溶液滴加蒸餾水析出DNA粘稠物時(shí)，應(yīng)攪拌，目的是。（3）DNA粘稠物再溶解于2mol/L NaCl溶液時(shí)，應(yīng)攪拌，目的是。3名校名 推薦（4）用 95%的冷卻酒精提取含雜質(zhì)較少的DNA時(shí)，應(yīng)攪拌，目的是。 （ 1）快速；加速血細(xì)胞破裂（2）輕緩；盡量保持 DNA分子的完整性（ 3）輕緩；盡量保持DNA分子的完整性（ 4）輕緩；保持 DNA分子的完整性 以下是有關(guān) DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)的閱

11、讀材料：a核酸極不穩(wěn)定，在較為劇烈的化學(xué)、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制備DNA時(shí)要加入 DNA酶（水解 DNA的酶）的抑制劑檸檬酸鈉，以除去Mg，防止 DNA酶的激活。b核酸中的 DNA和 RNA在生物體內(nèi)均以核蛋白（由核酸和蛋白質(zhì)組成）的形式存在，DNA核蛋白在 1 mol/L NaCl 溶液中溶解度很大，但在 0.14mol/L NaCl溶液中溶解度很低；而 RNA核蛋白溶于 0.14mol/L NaCl 溶液。c用苯酚處理，可使蛋白質(zhì)變性，且留在苯酚層內(nèi)；在DNA溶液中加入 25 倍體積，濃度為 95%的酒精，可將 DNA分離出來。此時(shí) DNA十分粘稠，可用玻璃棒攪成團(tuán)取出。d

12、DNA在強(qiáng)酸性環(huán)境下，水解產(chǎn)生脫氧核糖等小分子物質(zhì)，它與二苯胺酸性溶液反應(yīng)，能生成藍(lán)色化合物。e實(shí)驗(yàn)材料與器械：檸檬酸鈉溶液、石英砂、 0.14mol/L NaCl 溶液、 1 mol/L NaCl溶液、苯酚、 95%的酒精、二苯胺試劑、濃硫酸、花椰菜、研缽、燒杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉網(wǎng)、酒精燈、吸管、試管等。以下是 DNA粗提取實(shí)驗(yàn)的步驟，請(qǐng)根據(jù)以上閱讀材料回答有關(guān)問題：（1）研磨：取 10 克花椰菜加適量的、和石英砂，研磨成勻漿。（2）過濾。（3）將濾液稀釋 6 倍，其目的是：。（4）離心處理，產(chǎn)生沉淀。（5）取沉淀物，置于 2 毫升 1 mol/L NaCl溶液中，使 DNA核蛋白再

13、次溶解，再加2 毫升苯酚充分震蕩后靜止，待其分層后棄其上層苯酚。這一步的目的是除去。（6）如何將剩余溶液中的 DNA提取出來？。（7）如何證明提取物質(zhì)確實(shí)是DNA分子？。其實(shí)驗(yàn)過程的要點(diǎn)是向放有 DNA的試管中加入適量該試劑， 混合均勻后，將試管置于中5min，待試管后，觀察試管中的顏色變化。這個(gè)實(shí)驗(yàn)也說明DNA耐溫，前次溫度有利于，后次溫度則有利于 DNA。 （ 1）檸檬酸鈉溶液、 1 mol/L NaCl 溶液（ 3）使 DNA核蛋白溶解度降低而析出（5）（DNA核蛋白中的）蛋白質(zhì)（ 6）向下層溶液中加25 倍體積，濃度為95%的酒精，此時(shí)用玻璃棒攪動(dòng)，玻璃棒上成團(tuán)的物質(zhì)即是DNA（ 7）

14、用適量濃硫酸處理提取物，再滴加二苯胺酸性溶液數(shù)滴，如有藍(lán)色物質(zhì)出現(xiàn)即可證明提取物為DNA。沸水?。焕鋮s；高；加快染色反應(yīng)的速度；析出。 “ DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中， A、 B、 C、 D、 E 五個(gè)小組除下表中所列處理方法不同外，其他操作步驟均相同，而且正確，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻不同。組別實(shí)驗(yàn)材提取核物質(zhì)時(shí)去除雜質(zhì)時(shí)DNA鑒定時(shí)料加入的溶液加入的溶液加入的試劑A雞血蒸餾水95的酒精 (25C)二苯胺B菜花蒸餾水95的酒精 ( 冷卻 )雙縮脲，C人血漿蒸餾水95的酒精 ( 冷卻 )二苯胺D人血細(xì)2mol L 的氯化 014mol L 的氯化雙縮脲胞鈉鈉E雞血蒸餾水95的酒精 ( 冷卻 )二苯胺(1

15、) 實(shí)驗(yàn)材料選擇錯(cuò)誤的組別是。其原因是4名校名 推薦。(2) 實(shí)驗(yàn)步驟 ( 不包括實(shí)驗(yàn)材料 ) 均正確，但得不到 DNA的組別是。(3) 沸水浴中試管顏色變藍(lán)的組別是；藍(lán)色較淡的是，其原因是。(4)B 組實(shí)驗(yàn)不成功的最主要原因是。(1)C 、D 人的血漿中沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核，選用這些材料得不到DNA或得到的 DNA很少 (2)C (3)A 、E A 冷卻的酒精對(duì) DNA的凝集效果較佳，該組使用的是25的酒精 (4) 菜花細(xì)胞在蒸餾水中不能被破壞，得不到 DNA(應(yīng)采用研磨的方法 )在“ DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，有同學(xué)按書本知識(shí)和自己的思路，試做了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)你判斷實(shí)

16、驗(yàn)結(jié)果。(1) 他把與檸檬酸鈉混合的新鮮血液放在幾層紗布上過濾，紗布上最主要的結(jié)構(gòu)是。(2) 他在含有 DNA、 RNA及蛋白質(zhì)等的混合物中加入大量的物質(zhì)的量濃度為20mol/L 的氯化鈉溶液后，通過攪拌后，放在幾層紗布上過濾，他得到的濾液中一定含有實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹行枰崛〉某煞质恰?3) 他在上述濾液中加入冷酒精 ( 體積分?jǐn)?shù)為 95) ，并用玻璃棒向個(gè)方向攪拌，溶液中的絲狀物的主要成分是。(4) 他把含有 DNA、RNA、蛋白質(zhì)與氯化鈉的混合溶液稀釋成物質(zhì)的量濃度為014mol/L 的氯化鈉溶液后，放在幾層紗布上過濾，他得到的濾液中含量最多的成分是。 血細(xì)胞DNA DNA水請(qǐng)利用如下實(shí)驗(yàn)材料做相關(guān)實(shí)驗(yàn)，再選擇其中的一種實(shí)驗(yàn)材料，設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，以展示你的科學(xué)素養(yǎng)和創(chuàng)新才能。(1) 如用上述材料做觀察植物細(xì)胞的有絲分裂、 葉綠體中色素的提取和分離、 觀察植物的向性運(yùn)動(dòng)等實(shí)驗(yàn)。你選擇的最佳材料依次是( 填圖中序號(hào)即可 )。(2) 如用紫色洋蔥表皮做完細(xì)胞的質(zhì)壁分離及復(fù)原實(shí)驗(yàn)后， 又用此裝片觀察細(xì)胞分裂， 結(jié)果未觀察到處于分裂期的細(xì)胞。請(qǐng)解釋原因。(3) 創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案實(shí)驗(yàn)課題：探究鎳為植物生活所必需的礦質(zhì)元素材料用具：完全營養(yǎng)液甲、缺鎳的完全營養(yǎng)液乙、適當(dāng)?shù)娜萜骱凸潭ú牧稀㈤L勢相似的玉米幼苗，含鎳的