動物實驗之小鼠篇

1、小鼠,mendel 1900,william castle bussey,harvard 1900-1928,clarence little,jackson laboratory bar harbor, maine 1929-now,abbie lathrop granby,massachusetts 1900-1918,49 l.c. dunn, clarence little, sewall wright, george snell,一、小鼠成為最常用實驗動物的原因,1、體積小、繁殖快、飼養(yǎng)容易 2、遺傳學研究最詳細。 3、與人的遺傳學組織相似 4、與人的發(fā)育模式相似 5、有眾多遺傳背景清

2、楚的近交系和人類疾病的動物模型,二、小鼠的生物學特點,1、外觀：嘴尖，頭呈錐體形，嘴臉前部兩側(cè)有19根觸須，耳聳立呈半圓形，眼睛大而鮮紅。尾長約與體長相等。尾部被有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片。健康小鼠應無外傷、皮毛光滑緊貼皮膚，四肢勻稱、眼睛亮而有神。,上下頜各有兩個門齒和六個臼齒，門齒終生不斷生長。 下頜骨喙狀突較小，髁狀突發(fā)達，其形態(tài)具有品系特征。,2、解剖學,3、發(fā)育和生長,卵在輸卵管壺腹部受精后開始分裂，至桑椹胚（約3天）進入子宮，至擴張囊胚孵化（約5天后）開始著床，妊娠期為19-21天。胎兒產(chǎn)出后母鼠撕破羊膜，咬斷臍帶，吃掉胎盤。新生小鼠赤裸無毛，皮膚肉紅色，不開眼，雙耳與皮膚粘連。初生小鼠

3、即可發(fā)聲，嗅覺和味覺敏感。3日齡臍帶脫落，皮膚出現(xiàn)色素，開始長毛并出現(xiàn)胡須。4-6日齡雙耳張開聳立，7-8日齡四肢發(fā)育開始爬行游走，被毛逐漸濃密，下門齒長出，9-11日齡有聽覺，被毛長齊，12-14日齡睜眼，長出上門齒，開始采食及飲水；3周齡可斷奶獨立生活；4周齡雌鼠陰腔張開；5周齡雄鼠睪丸落至陰囊，開始生成精子。,4、體重和周齡,小鼠體重增長的快慢與品系、營養(yǎng)狀況、健康狀況、環(huán)境條件以及母鼠哺乳帶子的多少等密切相關。動物體重與日齡或周齡的相關關系畫出的曲線，稱為生長曲線。生長曲線是動物飼養(yǎng)管理和健康狀況多種因素綜合性評價的重要指標。,5、生殖生理 雄鼠性成熟后，開始產(chǎn)生精子并分泌雄性激素，副

4、性腺（精囊、凝固腺、前列腺等）分泌精液，以便精子運動。雌鼠交配后10-12小時，在陰道口形成一個白色的陰道栓，防止精子倒流，可提高受孕率。陰道栓常被視為交配成功的標志，和被認為是受精卵發(fā)育的起始天（0天）。 雌鼠性成熟后，卵巢產(chǎn)生卵細胞并分泌雌性激素，出現(xiàn)規(guī)律性的動情周期稱為性周期。小鼠正常性周期為4-5天。性周期分為動情前期、動情期、動情后期、動情間期（休情期），每個階段的陰道粘膜均發(fā)生典型變化，可以根據(jù)陰道涂片觀察陰道上皮細胞的變化確定。受精卵在特殊的情況下可延遲著床，孕期長達31-35天；雌鼠在有些情況下會發(fā)生假孕的現(xiàn)象，一般可維持10-12天，有時長達21天。,6、體溫調(diào)節(jié)和水的代謝

5、小鼠體表面積相對較大，因此環(huán)境溫度的波動常可引起小鼠發(fā)生明顯的生理學反應。對寒冷的應答反應為不發(fā)抖的產(chǎn)熱作用，寒冷靜態(tài)下小鼠產(chǎn)生的熱量相當于基礎代謝率的3倍，比其他任何動物的變化都大。小鼠沒有汗腺，不能加大喘氣，唾液分泌能力有限，因此在實驗室或運輸途中如果環(huán)境溫度升高，只能以體溫升高、代謝率下降以及耳血管擴張來加快散熱。持續(xù)高溫常引起動物死亡或產(chǎn)生后效應，出現(xiàn)某些生理功能的不可逆損害。 7、遺傳學特性 小鼠共有20對染色體（2n=40）和 相同數(shù)量的連鎖群。據(jù)小鼠基因組計劃 推測小鼠共有3萬多個結(jié)構(gòu)基因，已查明 定位的有超過7千個基因,8、行為學特性 1）小鼠喜居光線暗淡的環(huán)境，固定一處睡眠營

6、巢；膽小怕驚，對外界環(huán)境的改變反應敏感。實驗室馴養(yǎng)條件下，性情溫順易于捕捉，一旦逃出籠外可恢復野性，行動敏捷難以捕捉。 2）小鼠習慣于晝伏夜動，其進食、交配、分娩多發(fā)生在夜間?；顒痈叻逵袃纱?，一次在傍晚后1-2小時，另一次在黎明前。 3）小鼠為群居動物，其信息素是傳遞信息的主要機制。 4）小鼠群體中的雄性間好斗，頭、背、肩、會陰和尾部常被咬傷，最常見的咬傷部位是睪丸。群居優(yōu)勢在雄性很明顯，表現(xiàn)為處于優(yōu)勢者保留胡須，被稱為“理發(fā)師”。而處于劣勢者則掉毛，胡須被拔光，這一現(xiàn)象應與寄生蟲性和真菌性皮炎所至的掉毛相區(qū)別。,三、在生物醫(yī)學研究中的應用,1、藥物學研究 1）藥物的急性毒性試驗：測定藥物或化

7、學制劑的半數(shù)致死量（ld50）和藥物的致癌性試驗。 2）生物制品的鑒定：廣泛用于血清、疫苗如百日咳菌苗、乙肝疫苗等的鑒定；激素效價測定，如hcg的生物效價測定。 3）藥物對疾病綜合治療效果的篩選試驗：如抗腫瘤藥物的篩選。 4）藥物藥效和副作用的評價：如利用小鼠瞳孔放大作用測試藥物對副交感神經(jīng)和神經(jīng)連接的影響；利用聲源性驚厥的小鼠評價抗痙攣藥物；用小鼠熱板技術引起的后爪運動或機械壓尾評價止痛藥；用termorine的羥基衍生物可誘發(fā)小鼠發(fā)抖來評價抗發(fā)抖（如帕金森氏病不自覺的發(fā)抖）藥物的藥效；用小鼠角膜和耳廓反射評價鎮(zhèn)靜藥藥效；用于全身麻醉藥的測試和評價。,2、腫瘤學研究 1）近交系小鼠中有幾百個

8、品系或亞系都有特定的自發(fā)腫瘤或帶有與腫瘤有關的基因或基因敲出。從腫瘤發(fā)生學看，與人體腫瘤相近，為研究各類腫瘤的發(fā)生和生物學特征以及防治提供了良好的動物模型。 2）免疫缺陷的裸小鼠可接受人類各種腫瘤細胞的植入，成為活的癌細胞“試管”，是研究人類腫瘤生長發(fā)育、轉(zhuǎn)移和治療的絕佳動物。 3）近年來腫瘤遺傳學的研究進展很快，與癌基因有關的研究和轉(zhuǎn)基因動物和基因敲出動物技術的發(fā)展，為在基因水平研究和治療腫瘤提供了手段。,3、傳染病的研究 1）沙門氏菌病、淋巴細胞脈絡叢腦膜炎、脊髓灰質(zhì)炎和鉤端螺旋體病是人和小鼠共患疾病，常用來研究這些疾病的病理過程、機理和藥物治療。 2）小鼠還對多種人類病原體敏感，易感染誘

9、發(fā)出人類傳染病的模型，可對病原體的致病力，宿主抵抗的機理、病理學和治療進行研究。 4、遺傳學和遺傳性疾病的研究 1)重組近交系小鼠將雙親品系的基因自由組合和重組，產(chǎn)生一系列的子系，這些子系是小鼠遺傳學分析的重要工具，主要用于研究基因定位及其連鎖關系。 2）同源近交系小鼠常用來研究多態(tài)性基因位點的多效性，基因的效應和功能以及發(fā)現(xiàn)新的等位基因。,3）轉(zhuǎn)基因小鼠可用于研究基因的功能、表達和調(diào)節(jié)，探索疾病的分子遺傳學基礎和基因治療的可能性和方法。 4）由于突變基因的固定，已產(chǎn)生了許多突變系小鼠，特別是具有遺傳性疾病的突變系為研究人類遺傳性疾病的病因、發(fā)病機理和治療，提供了自然的模型動物。如，纖維化囊腫

10、、家族性肥胖、遺傳性貧血、肌無力、侏儒癥等，甚至還有染色體異常的性別異常和不育，以及down氏綜合癥。 5、內(nèi)分泌疾病的研究 小鼠內(nèi)分泌腺結(jié)構(gòu)的缺陷常引起類似人類的內(nèi)分泌疾病，是研究的可用材料對象。如腎上腺皮質(zhì)肥大造成腎上腺皮質(zhì)技能亢進，發(fā)生類似人類的柯興氏綜合癥；腎上腺淀粉樣變性造成腎上腺激素分泌不足可引起addison綜合癥；甲狀旁腺激素失活引起鈣磷代謝紊亂和次生骨吸收障礙。,6、免疫學的研究 1）單克隆抗體 2）利用免疫缺陷小鼠進行免疫系統(tǒng)各種組分的分化、功能和機制。 3）自身免疫疾病研究，如nzb用于研究自發(fā)性的自身免疫貧血癥的發(fā)病機理。 4）用于研究病原體和宿主免疫系統(tǒng)相互作用方面的

11、研究。7、老年學的研究 8、行為遺傳學的研究,國際行為遺傳學學會成立于1997年 學術刊物于2001年1月發(fā)行第一期月刊名稱為gene，brain and behaviors 網(wǎng)址：g2b.org,四、常見疾病及防治 1、沙門氏菌?。菏且环N經(jīng)消化道感染的人畜共患病。流行迅速，死亡率高50-70%。 暴發(fā)型：動物突然死亡無明顯癥狀，大體解剖可見內(nèi)臟充血，肝臟壞死及卡他性腸炎。 急性型和亞急性型：厭食、體重下降、嗜睡、被毛粗亂、弓背、結(jié)膜炎、腹瀉或粘液便，偶有便血，肝和脾腫大、腹部膨脹。多在7-10天死亡。 慢性型：厭食、體重下降，偶見腹瀉，成為帶菌動物，長期排菌。 控制手段以預防為主，加強衛(wèi)生管

12、理，防止野鼠和其他動物昆蟲糞便污染飼料和飲水。患病鼠群全部淘汰，并對所用籠具、食具和房舍徹底消毒。,2）脫腳?。菏怯墒蠖徊《疽鸬囊环N感染性極強的毀滅性疾病。 急性發(fā)病時常表現(xiàn)出被毛松亂及全身衰竭，多于幾個小時內(nèi)死亡，死亡率極高。 慢性感染時表現(xiàn)為頭面部腫脹、結(jié)膜發(fā)炎、皮膚出現(xiàn)丘疹、四肢腫脹，進而潰瘍，嚴重時腳尾壞死脫落。尸檢可見廣泛肝脾壞死或有白色壞死灶，感染細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性包涵體。帶毒小鼠可成為引起再次爆發(fā)流行的傳染源。 控制辦法：對發(fā)生疫情的小鼠群全部淘汰，徹底消毒，疫情小鼠用過的物品嚴格消毒；封閉房舍用福爾馬林熏蒸消毒。消毒后的房舍在使用前應用警戒鼠監(jiān)測，以保證發(fā)生疫情的房舍無害化

13、。,3）淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎：是由lcm病毒引起的人畜共患病。 大腦型：自然感染不多見。腦內(nèi)接種病毒后，表現(xiàn)為活動減少、弓背、頭部震顫、肢體極度性痙攣驚厥、后肢強直，發(fā)病后1-3天內(nèi)死亡或5-6天后康復。 內(nèi)臟型：于感染后6-7天開始出現(xiàn)癥狀，被毛松亂、結(jié)膜發(fā)炎、弓背、腹水、嗜睡，以至死亡或小鼠耐過幾周后可逐漸恢復。 遲發(fā)型：感染此病毒的新生小鼠呈慢性帶毒者，或由于腎臟損傷引起死亡，乳鼠感染第二周出現(xiàn)死亡，表現(xiàn)為毛發(fā)稀少、衰弱，存活者康復緩慢、發(fā)育不良、個體矮小。 防治的辦法是嚴格控制野鼠、感染鼠或被污染材料物品進入飼養(yǎng)區(qū)，外來鼠應經(jīng)檢測為抗體陰性方能進入，對已感染的小鼠應處死淘汰。,4）螨

14、病：小鼠螨病是由寄生于皮毛中的肉螨引起，部位一般在小鼠的軀體背側(cè)前部，尤其是頭頂、頸部那些最少毛的部位，嚴重時全身部位受侵。皮膚損害包括瘙癢、脫屑及出現(xiàn)斑狀脫毛，嚴重癥狀可形成潰瘍和膿皮病，或伴有自體所致的創(chuàng)傷。 螨等體外寄生蟲應重在預防，主要是嚴格消毒墊料和籠具強化清潔衛(wèi)生，防止螨的傳入。根治的有效方法是采取生物凈化的手段重新建群，目前藥物治療也廣泛應用，即用0。4%克螨特或0。3%敵敵畏藥浴兩次（兩次間隔14天）。要徹底根除必須持之以恒，否則極易重新感染。,五、飼養(yǎng)管理要點 1、動物健康的外觀檢查：食欲旺盛、眼睛有神，反應敏捷、體毛光滑，肌肉豐滿，活動有力、身無傷痕，尾不彎曲、天然孔腔無分

15、泌物，無畸形、糞便黑色呈麥粒狀。 2、飼料和飲水 3、動物運輸 4、完整的記錄 5、動物的處死和尸體處理,六、裸小鼠和免疫缺陷動物 1、裸小鼠的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展 1962年英國格拉斯哥醫(yī)院grist在非近交系的小鼠中偶然發(fā)現(xiàn)有個別無毛小鼠。四年后，愛丁堡動物研究所沸拉那根（flanagan）又證實這種無毛小鼠是由于染色體上等位基因突變引起的，發(fā)現(xiàn)該種鼠皮膚組織學和以往無 毛小鼠不同，檢查發(fā)現(xiàn)常因染色體退化，屬于一種新的 無毛基因，因此認為是一種新的自發(fā)突變種，并命名為“裸體”（nude）小鼠，用“nu”表示為基因符號，但當時 未被人們注意。1968年佩蒂路易斯（pantelouris）發(fā)現(xiàn)裸體小鼠沒

16、有胸腺，這才引起世界各國醫(yī)學生物學工作者的極大興趣。在這以前，為開展細胞免疫學的研究，通常采用藥物抑制小鼠t細胞的產(chǎn)生及其作用，或使用外科手術摘除胸腺，這些方法往往由于抑制作用不完全或手術不理想，常導致實驗的失敗。而自發(fā)突變無胸腺裸鼠的培育成功，則提供了研究胸腺功能、免疫學機理的理想動物模型。,2、 裸鼠的主要形態(tài)和生理特征 裸鼠的主要特征表現(xiàn)為無毛（hairless）、裸體（naked）和無胸腺（athymus）。 原種新生裸體小鼠以無鼻毛為特征，足尖經(jīng)常收縮，呈螺旋樣畸形。成年雌鼠動情周期不規(guī)律，卵巢小，用絨毛膜促性腺激素不能誘發(fā)排卵，雄鼠精子尾部呈盤卷狀，無活動力，因此受孕力極低。新生小

17、鼠3周后生長明顯遲緩，普遍有肝臟疾病，死亡率高，壽命在1526周。 純系裸體小鼠外形和原種相同，全身幾乎無毛，偶而背部可見稀疏的帶狀毛、皮薄、光滑或有皺折。皮膚色素balb/c裸體小鼠為淺紅色，白眼；c3h裸鼠為灰白色，黑眼；c57bl/6j裸鼠為黑灰色至黑色，運動功能正常。,裸鼠由于無胸腺導致t細胞發(fā)生發(fā)育障礙。雖然t細胞和b細胞的前身正常，但因缺乏胸腺，故不能生成正常成熟t細胞，缺乏免疫反應，因此裸鼠是一種免疫缺陷動物。正常小鼠胸腺位于胸骨柄后方，緊貼氣管，心臟腹面，呈乳白色脂肪狀，分左右兩葉。胸腺與機體免疫機有關系密切，現(xiàn)已知胸腺可分泌好幾種具有生物活性的多肽類物質(zhì)，總稱為胸腺素，它可刺

18、激淋巴組織產(chǎn)生淋巴細胞；使來自骨髓、脾臟和其它組織和淋巴原始細胞成熟為具有細胞免疫活性的t淋巴細胞，從而發(fā)揮免疫作用。,3、裸鼠在生物醫(yī)學研究中的應用 近年來，無胸腺裸鼠作為一種新的動物模型，活躍于免疫學、腫瘤學、毒理學等各個領域的研究工作中，尤其在免疫生物學、免疫病理學、移植免疫、腫瘤免疫、病毒和細菌免疫將等領域，在短短的幾年中，就展開了一系列富有成效的新的研究，推動了各方面的工作，為實驗免疫學、實驗腫瘤學多供了新的有效的工具。,（1）組織移植（人類腫瘤移植）研究 由于裸鼠的免疫缺陷，在一定情況下，不排斥來自異種動物的組織移植。因此可作移植人類惡性腫瘤的接受體。根據(jù)t. fogh等19791

19、980年的報導，已有150株人的瘤細胞和人體原發(fā)癌移植于裸鼠獲得成功，目前已成功地結(jié)腸癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病、腎癌、宮頸癌、軟組織肉瘤和骨肉瘤等移植于裸鼠、獲得了一定百分比（35.7%）的良好生長，并可傳代（見表7-1）。若用已建株的人體腫瘤組織培養(yǎng)細胞作移植材料，接種后的成活率更高（41%）。我國北京醫(yī)科大學等5所醫(yī)院，使用北京藥品檢定所繁殖的裸鼠對人體結(jié)腸癌、直腸癌、食道癌、乳腺癌、宮頸癌、咽癌、骨巨噬細胞癌的移植均獲得了成功。,（2）腫瘤藥物治療和腫瘤免疫研究 裸鼠接種成活的腫瘤對化療藥物的敏感性與臨床所見十分相近。黑色素瘤以dtic和ccnu的抑瘤作用較強，

20、而5-fu則無效，與其臨床客觀療效（三藥分別為20%、12%及2.5%）結(jié)果相似。人的burkitt淋巴瘤的裸鼠移植后對環(huán)磷酰胺有較高的敏感性，也與臨床結(jié)果相符。其它腫瘤如乳腺癌和結(jié)腸癌裸鼠移植，對前者阿霉素（5mg/kg）、5-fu(5080mg/kg)和苯丙氨酸氮芥（7mg/kg）均有一定的抑瘤效能，對后者甲基-ccno和絲裂毒素也明顯療效。有趣的是對p333無效的六甲密胺，卻對人體肺癌異種移植有效，應用其耐受劑量6090mg/kg都有消瘤作用，對人體乳瘤mx-1和結(jié)腸瘤cx-1也有效。此藥重新臨床試用，證明對人支氣管肺癌和淋巴瘤都有治療作用。最近，對過去因毒性較大而中斷研究的偶氮氧代正亮

21、氨酸，重新用人腫瘤裸鼠模型評價，證明對mx-1和肺癌lx-1有明顯療效，又重新進入臨床研究。近有人用胸腺嘧啶核苷等444888mg/kg給腫瘤裸鼠連續(xù)灌注96140小時，發(fā)現(xiàn)它能明顯抑制人體黑色素瘤及畸胎瘤的生長，并導致腫瘤消退而對宿主無明顯毒性，這些新結(jié)果已引起了臨床重視。,（3）免疫和遺傳研究 由于近代遺傳學的迅速發(fā)展，已發(fā)現(xiàn)40余種免疫缺陷病與遺傳因素有關。許多報導只介紹了這些疾病的臨床表現(xiàn)和實驗室檢查結(jié)果，有關發(fā)病機理則停留在假說階段，這主要是由于沒有與人類所患的免疫缺陷性疾病相對應的自發(fā)性實驗動物模型，無法通過患病動物來觀察疾病發(fā)生與發(fā)展的全過程，從而無法闡明其遺傳規(guī)律。 先天性無胸

22、腺裸鼠的遺傳因素，免疫動物原缺陷指標以及剖檢所見和組織學觀察等特征，均與人類免疫缺陷性疾病中的原發(fā)性細胞免疫病相似。各品系裸鼠因遺傳背景的不同，所表現(xiàn)的細胞免疫反應和實驗室檢查指標亦各不相同，這些裸鼠種群是研究人類各種免疫缺陷性疾病的發(fā)病機理和遺傳規(guī)律的動物模型。實驗動物遺傳學家已育成具有不同免疫缺陷特性的近交系小鼠達50余種。我國所應用的自發(fā)性免疫缺陷小鼠，主要應用的是balb/c為遺傳背景的裸鼠，個別實驗室也應用了nih、icr等非近交系裸鼠,（4）病毒、細菌、寄生蟲感染機制的研究 無胸腺裸鼠的t淋巴細胞缺損，免疫機能低下，是研究病毒、細菌及寄生蟲感染機制的極好模型動物。如可用于研究乙型腦

23、炎sa1414zhk7減毒株為乙腦活毒疫苗的選育株，在正常小鼠體內(nèi)可產(chǎn)生符合規(guī)定的免疫原性（ld50），而在胸腺缺少或胸腺發(fā)育不良的生物個體免疫原性如何，對于今后現(xiàn)使用具有參考價值。實驗結(jié)果可見表7-3，以balb/c（+/+）小鼠為對照。以上結(jié)果說明，乙腦病毒感染后所產(chǎn)生的免疫力，主要屬于細胞免疫，如使t細胞缺陷的裸鼠體內(nèi)產(chǎn)生與免疫功能正常小鼠同等水平的免疫力，必須加大40倍的免疫劑量，才能達到。也說明裸鼠體內(nèi)還存在著殘余的t淋巴細胞。由此推論，在現(xiàn)場人群中產(chǎn)生抗體水平較低者，其t細胞功能是否缺陷，應作為因素之一加以探討。,表7-3 乙腦弱毒株免疫實驗結(jié)果,（5）生物制品和藥品的檢定 生物制

24、品（疫苗、菌苗）的安全性的免疫原性是制品必不可少的內(nèi)容之一。它涉及制品是否有潛在致癌性、感染因子以及它的毒力是否有返祖的可能性。特別是在應用動物組織培養(yǎng)疫苗或人類二倍體細胞株時，對檢出這些細胞潛在的致癌性，某些制品引起的異常發(fā)應及其發(fā)生機理，對藥物致癌性或抗癌藥物的研究等諸方面，先天性胸腺機能缺陷的裸鼠是很好的動物模型和實驗手段。,（6） 微生物學上的研究 以往人類麻風桿菌只有在背上有九條紋的犰狳（armadillo）身上才能生長，而這種產(chǎn)于南美等地的動物難于尋找，也不易飼養(yǎng)和操作。1975年colston等將麻風桿菌接種于裸鼠足掌，發(fā)現(xiàn)麻風桿菌可大量繁殖，全身擴散，引起瘤型麻風。這為研究麻風

25、桿菌的生物特性、免疫原性和麻風病發(fā)病機理提供了極為有用的實驗模型。又如淋巴細胞性脈絡膜腦膜炎（lcm）病毒經(jīng)腦內(nèi)接種于無本病毒隱性感染的正常小鼠，可引起腦膜炎，感染細胞被當作靶細胞而受到破壞，在腦、脊髓內(nèi)發(fā)生了明顯的細胞免疫反應，但在t細胞缺損的裸鼠所見卻完全相反，未導致動物的死亡，僅出現(xiàn)持續(xù)病毒血癥，體內(nèi)不出現(xiàn)lcm抗體，也無任何免疫反應。,（7）內(nèi)分泌和老年醫(yī)學上的應用 在人工摘除胸腺動物，大多數(shù)研究可見腦下垂體、甲狀腺、腎上腺、性腺等出現(xiàn)異常。有人用無特定病原體環(huán)境中飼養(yǎng)的裸鼠和正常小鼠進行研究，分析3、9、11周齡的雌雄動物的腦下垂體生長激素及甲狀腺、腎上腺皮質(zhì)和性腺的功能，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩

26、者間未見有統(tǒng)計學上的差別。 在老年醫(yī)學的研究上，有人認為裸鼠沒有t細胞，容易引起自身免疫現(xiàn)象，皮膚的可溶性膠原（collagen）也減少，因此認為胸腺、自身免疫、老化三者之間是有關系的。但這方面也有不同論點。,4、免疫缺陷小鼠（裸鼠）在腫瘤學研究中應用的有關問題,1、裸鼠移植瘤的組織學特征和性狀的穩(wěn)定性 2、裸鼠對移植瘤的反應 3、人體腫瘤裸鼠移植成功的比率,1）移植腫瘤的常規(guī)處理和移植方法 （1）組織塊移植法 （2）懸液移植法 （3）培養(yǎng)細胞移植法 2）不同移植途徑及其方法 （1）皮下移植 （2）腹腔注射 （3）腎包膜下移植 （4）原位移植,大鼠(rat),一、生物學特點 1、解剖學 大鼠成

27、年體長不小于18-20cm。尾上覆蓋有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片，數(shù)量多于200片。 大鼠無扁桃體，味覺不發(fā)達；胃分為兩部分，即前胃（非腺胃）和胃體（腺胃），兩部分有1個界限脊隔開。食管通過界限脊的一個褶進入胃小彎。此褶是大鼠不會嘔吐的原因。肝有4葉，再生能力強，經(jīng)部分肝切除術后仍可再生。,2、生理學 生長發(fā)育快，新生鼠體重約5-10g，出生時無毛、兩耳關閉、四肢短小、尾短。2-3天半兩耳張開，8-10天切齒萌出，7-10天全身長滿被毛，12-16天睜眼，20-21天可斷奶獨立生活。雌鼠發(fā)情周期4-5天，對光照周期敏感；妊娠期19-23天，平均窩產(chǎn)子6-12只。壽命3年。,3、營養(yǎng)學 大鼠能有效地貯存

28、脂溶性維生素b12，制造vc以及通過食糞滿足其對維生素b的大部分需要。大鼠對營養(yǎng)缺乏非常敏感，易產(chǎn)生營養(yǎng)缺乏癥，表現(xiàn)為被毛松亂、體重下降或發(fā)育生長不良、繁殖力和抗病力低下；維生素a、e、k、核黃素和硫胺的缺乏可引起不育、皮膚病和出血。,4、行為學 大鼠對新環(huán)境的適應能力強，容易接受通過正負強化刺激進行的多種感覺指令的訓練；晝間睡眠，夜間和清晨比較活躍；性情溫順，易于捉取，當粗暴操作、營養(yǎng)缺乏或聽到其它大鼠尖叫時，變得緊張不安難于捕捉，甚至攻擊人，孕鼠和哺乳鼠更易產(chǎn)生攻擊人的傾向；比起小鼠較少斗毆傾向，可將雄鼠關養(yǎng)在一起，不如小鼠合群，可耐單籠飼養(yǎng)。,二、在生物醫(yī)學研究中的應用 1、藥物學研究：大鼠繁殖力強，易飼養(yǎng)形體大小合適，給藥容易，采樣量合適方便；畸胎發(fā)生率低，行為多樣化；常用于藥物毒力、