動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之小鼠篇

1、小鼠,mendel 1900,william castle bussey,harvard 1900-1928,clarence little,jackson laboratory bar harbor, maine 1929-now,abbie lathrop granby,massachusetts 1900-1918,49 l.c. dunn, clarence little, sewall wright, george snell,一、小鼠成為最常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原因,1、體積小、繁殖快、飼養(yǎng)容易 2、遺傳學(xué)研究最詳細(xì)。 3、與人的遺傳學(xué)組織相似 4、與人的發(fā)育模式相似 5、有眾多遺傳背景清

2、楚的近交系和人類疾病的動(dòng)物模型,二、小鼠的生物學(xué)特點(diǎn),1、外觀：嘴尖，頭呈錐體形，嘴臉前部?jī)蓚?cè)有19根觸須，耳聳立呈半圓形，眼睛大而鮮紅。尾長(zhǎng)約與體長(zhǎng)相等。尾部被有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片。健康小鼠應(yīng)無(wú)外傷、皮毛光滑緊貼皮膚，四肢勻稱、眼睛亮而有神。,上下頜各有兩個(gè)門齒和六個(gè)臼齒，門齒終生不斷生長(zhǎng)。 下頜骨喙?fàn)钔惠^小，髁狀突發(fā)達(dá)，其形態(tài)具有品系特征。,2、解剖學(xué),3、發(fā)育和生長(zhǎng),卵在輸卵管壺腹部受精后開(kāi)始分裂，至桑椹胚（約3天）進(jìn)入子宮，至擴(kuò)張囊胚孵化（約5天后）開(kāi)始著床，妊娠期為19-21天。胎兒產(chǎn)出后母鼠撕破羊膜，咬斷臍帶，吃掉胎盤。新生小鼠赤裸無(wú)毛，皮膚肉紅色，不開(kāi)眼，雙耳與皮膚粘連。初生小鼠

3、即可發(fā)聲，嗅覺(jué)和味覺(jué)敏感。3日齡臍帶脫落，皮膚出現(xiàn)色素，開(kāi)始長(zhǎng)毛并出現(xiàn)胡須。4-6日齡雙耳張開(kāi)聳立，7-8日齡四肢發(fā)育開(kāi)始爬行游走，被毛逐漸濃密，下門齒長(zhǎng)出，9-11日齡有聽(tīng)覺(jué)，被毛長(zhǎng)齊，12-14日齡睜眼，長(zhǎng)出上門齒，開(kāi)始采食及飲水；3周齡可斷奶獨(dú)立生活；4周齡雌鼠陰腔張開(kāi)；5周齡雄鼠睪丸落至陰囊，開(kāi)始生成精子。,4、體重和周齡,小鼠體重增長(zhǎng)的快慢與品系、營(yíng)養(yǎng)狀況、健康狀況、環(huán)境條件以及母鼠哺乳帶子的多少等密切相關(guān)。動(dòng)物體重與日齡或周齡的相關(guān)關(guān)系畫出的曲線，稱為生長(zhǎng)曲線。生長(zhǎng)曲線是動(dòng)物飼養(yǎng)管理和健康狀況多種因素綜合性評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。,5、生殖生理 雄鼠性成熟后，開(kāi)始產(chǎn)生精子并分泌雄性激素，副

4、性腺（精囊、凝固腺、前列腺等）分泌精液，以便精子運(yùn)動(dòng)。雌鼠交配后10-12小時(shí)，在陰道口形成一個(gè)白色的陰道栓，防止精子倒流，可提高受孕率。陰道栓常被視為交配成功的標(biāo)志，和被認(rèn)為是受精卵發(fā)育的起始天（0天）。 雌鼠性成熟后，卵巢產(chǎn)生卵細(xì)胞并分泌雌性激素，出現(xiàn)規(guī)律性的動(dòng)情周期稱為性周期。小鼠正常性周期為4-5天。性周期分為動(dòng)情前期、動(dòng)情期、動(dòng)情后期、動(dòng)情間期（休情期），每個(gè)階段的陰道粘膜均發(fā)生典型變化，可以根據(jù)陰道涂片觀察陰道上皮細(xì)胞的變化確定。受精卵在特殊的情況下可延遲著床，孕期長(zhǎng)達(dá)31-35天；雌鼠在有些情況下會(huì)發(fā)生假孕的現(xiàn)象，一般可維持10-12天，有時(shí)長(zhǎng)達(dá)21天。,6、體溫調(diào)節(jié)和水的代謝

5、小鼠體表面積相對(duì)較大，因此環(huán)境溫度的波動(dòng)常可引起小鼠發(fā)生明顯的生理學(xué)反應(yīng)。對(duì)寒冷的應(yīng)答反應(yīng)為不發(fā)抖的產(chǎn)熱作用，寒冷靜態(tài)下小鼠產(chǎn)生的熱量相當(dāng)于基礎(chǔ)代謝率的3倍，比其他任何動(dòng)物的變化都大。小鼠沒(méi)有汗腺，不能加大喘氣，唾液分泌能力有限，因此在實(shí)驗(yàn)室或運(yùn)輸途中如果環(huán)境溫度升高，只能以體溫升高、代謝率下降以及耳血管擴(kuò)張來(lái)加快散熱。持續(xù)高溫常引起動(dòng)物死亡或產(chǎn)生后效應(yīng)，出現(xiàn)某些生理功能的不可逆損害。 7、遺傳學(xué)特性 小鼠共有20對(duì)染色體（2n=40）和 相同數(shù)量的連鎖群。據(jù)小鼠基因組計(jì)劃 推測(cè)小鼠共有3萬(wàn)多個(gè)結(jié)構(gòu)基因，已查明 定位的有超過(guò)7千個(gè)基因,8、行為學(xué)特性 1）小鼠喜居光線暗淡的環(huán)境，固定一處睡眠營(yíng)

6、巢；膽小怕驚，對(duì)外界環(huán)境的改變反應(yīng)敏感。實(shí)驗(yàn)室馴養(yǎng)條件下，性情溫順易于捕捉，一旦逃出籠外可恢復(fù)野性，行動(dòng)敏捷難以捕捉。 2）小鼠習(xí)慣于晝伏夜動(dòng)，其進(jìn)食、交配、分娩多發(fā)生在夜間?；顒?dòng)高峰有兩次，一次在傍晚后1-2小時(shí)，另一次在黎明前。 3）小鼠為群居動(dòng)物，其信息素是傳遞信息的主要機(jī)制。 4）小鼠群體中的雄性間好斗，頭、背、肩、會(huì)陰和尾部常被咬傷，最常見(jiàn)的咬傷部位是睪丸。群居優(yōu)勢(shì)在雄性很明顯，表現(xiàn)為處于優(yōu)勢(shì)者保留胡須，被稱為“理發(fā)師”。而處于劣勢(shì)者則掉毛，胡須被拔光，這一現(xiàn)象應(yīng)與寄生蟲性和真菌性皮炎所至的掉毛相區(qū)別。,三、在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用,1、藥物學(xué)研究 1）藥物的急性毒性試驗(yàn)：測(cè)定藥物或化

7、學(xué)制劑的半數(shù)致死量（ld50）和藥物的致癌性試驗(yàn)。 2）生物制品的鑒定：廣泛用于血清、疫苗如百日咳菌苗、乙肝疫苗等的鑒定；激素效價(jià)測(cè)定，如hcg的生物效價(jià)測(cè)定。 3）藥物對(duì)疾病綜合治療效果的篩選試驗(yàn)：如抗腫瘤藥物的篩選。 4）藥物藥效和副作用的評(píng)價(jià)：如利用小鼠瞳孔放大作用測(cè)試藥物對(duì)副交感神經(jīng)和神經(jīng)連接的影響；利用聲源性驚厥的小鼠評(píng)價(jià)抗痙攣藥物；用小鼠熱板技術(shù)引起的后爪運(yùn)動(dòng)或機(jī)械壓尾評(píng)價(jià)止痛藥；用termorine的羥基衍生物可誘發(fā)小鼠發(fā)抖來(lái)評(píng)價(jià)抗發(fā)抖（如帕金森氏病不自覺(jué)的發(fā)抖）藥物的藥效；用小鼠角膜和耳廓反射評(píng)價(jià)鎮(zhèn)靜藥藥效；用于全身麻醉藥的測(cè)試和評(píng)價(jià)。,2、腫瘤學(xué)研究 1）近交系小鼠中有幾百個(gè)

8、品系或亞系都有特定的自發(fā)腫瘤或帶有與腫瘤有關(guān)的基因或基因敲出。從腫瘤發(fā)生學(xué)看，與人體腫瘤相近，為研究各類腫瘤的發(fā)生和生物學(xué)特征以及防治提供了良好的動(dòng)物模型。 2）免疫缺陷的裸小鼠可接受人類各種腫瘤細(xì)胞的植入，成為活的癌細(xì)胞“試管”，是研究人類腫瘤生長(zhǎng)發(fā)育、轉(zhuǎn)移和治療的絕佳動(dòng)物。 3）近年來(lái)腫瘤遺傳學(xué)的研究進(jìn)展很快，與癌基因有關(guān)的研究和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和基因敲出動(dòng)物技術(shù)的發(fā)展，為在基因水平研究和治療腫瘤提供了手段。,3、傳染病的研究 1）沙門氏菌病、淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎、脊髓灰質(zhì)炎和鉤端螺旋體病是人和小鼠共患疾病，常用來(lái)研究這些疾病的病理過(guò)程、機(jī)理和藥物治療。 2）小鼠還對(duì)多種人類病原體敏感，易感染誘

9、發(fā)出人類傳染病的模型，可對(duì)病原體的致病力，宿主抵抗的機(jī)理、病理學(xué)和治療進(jìn)行研究。 4、遺傳學(xué)和遺傳性疾病的研究 1)重組近交系小鼠將雙親品系的基因自由組合和重組，產(chǎn)生一系列的子系，這些子系是小鼠遺傳學(xué)分析的重要工具，主要用于研究基因定位及其連鎖關(guān)系。 2）同源近交系小鼠常用來(lái)研究多態(tài)性基因位點(diǎn)的多效性，基因的效應(yīng)和功能以及發(fā)現(xiàn)新的等位基因。,3）轉(zhuǎn)基因小鼠可用于研究基因的功能、表達(dá)和調(diào)節(jié)，探索疾病的分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)和基因治療的可能性和方法。 4）由于突變基因的固定，已產(chǎn)生了許多突變系小鼠，特別是具有遺傳性疾病的突變系為研究人類遺傳性疾病的病因、發(fā)病機(jī)理和治療，提供了自然的模型動(dòng)物。如，纖維化囊腫

10、、家族性肥胖、遺傳性貧血、肌無(wú)力、侏儒癥等，甚至還有染色體異常的性別異常和不育，以及down氏綜合癥。 5、內(nèi)分泌疾病的研究 小鼠內(nèi)分泌腺結(jié)構(gòu)的缺陷常引起類似人類的內(nèi)分泌疾病，是研究的可用材料對(duì)象。如腎上腺皮質(zhì)肥大造成腎上腺皮質(zhì)技能亢進(jìn)，發(fā)生類似人類的柯興氏綜合癥；腎上腺淀粉樣變性造成腎上腺激素分泌不足可引起addison綜合癥；甲狀旁腺激素失活引起鈣磷代謝紊亂和次生骨吸收障礙。,6、免疫學(xué)的研究 1）單克隆抗體 2）利用免疫缺陷小鼠進(jìn)行免疫系統(tǒng)各種組分的分化、功能和機(jī)制。 3）自身免疫疾病研究，如nzb用于研究自發(fā)性的自身免疫貧血癥的發(fā)病機(jī)理。 4）用于研究病原體和宿主免疫系統(tǒng)相互作用方面的

11、研究。7、老年學(xué)的研究 8、行為遺傳學(xué)的研究,國(guó)際行為遺傳學(xué)學(xué)會(huì)成立于1997年 學(xué)術(shù)刊物于2001年1月發(fā)行第一期月刊名稱為gene，brain and behaviors 網(wǎng)址：g2b.org,四、常見(jiàn)疾病及防治 1、沙門氏菌?。菏且环N經(jīng)消化道感染的人畜共患病。流行迅速，死亡率高50-70%。 暴發(fā)型：動(dòng)物突然死亡無(wú)明顯癥狀，大體解剖可見(jiàn)內(nèi)臟充血，肝臟壞死及卡他性腸炎。 急性型和亞急性型：厭食、體重下降、嗜睡、被毛粗亂、弓背、結(jié)膜炎、腹瀉或粘液便，偶有便血，肝和脾腫大、腹部膨脹。多在7-10天死亡。 慢性型：厭食、體重下降，偶見(jiàn)腹瀉，成為帶菌動(dòng)物，長(zhǎng)期排菌。 控制手段以預(yù)防為主，加強(qiáng)衛(wèi)生管

12、理，防止野鼠和其他動(dòng)物昆蟲糞便污染飼料和飲水?；疾∈笕喝刻蕴?duì)所用籠具、食具和房舍徹底消毒。,2）脫腳?。菏怯墒蠖徊《疽鸬囊环N感染性極強(qiáng)的毀滅性疾病。 急性發(fā)病時(shí)常表現(xiàn)出被毛松亂及全身衰竭，多于幾個(gè)小時(shí)內(nèi)死亡，死亡率極高。 慢性感染時(shí)表現(xiàn)為頭面部腫脹、結(jié)膜發(fā)炎、皮膚出現(xiàn)丘疹、四肢腫脹，進(jìn)而潰瘍，嚴(yán)重時(shí)腳尾壞死脫落。尸檢可見(jiàn)廣泛肝脾壞死或有白色壞死灶，感染細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性包涵體。帶毒小鼠可成為引起再次爆發(fā)流行的傳染源。 控制辦法：對(duì)發(fā)生疫情的小鼠群全部淘汰，徹底消毒，疫情小鼠用過(guò)的物品嚴(yán)格消毒；封閉房舍用福爾馬林熏蒸消毒。消毒后的房舍在使用前應(yīng)用警戒鼠監(jiān)測(cè)，以保證發(fā)生疫情的房舍無(wú)害化

13、。,3）淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎：是由lcm病毒引起的人畜共患病。 大腦型：自然感染不多見(jiàn)。腦內(nèi)接種病毒后，表現(xiàn)為活動(dòng)減少、弓背、頭部震顫、肢體極度性痙攣驚厥、后肢強(qiáng)直，發(fā)病后1-3天內(nèi)死亡或5-6天后康復(fù)。 內(nèi)臟型：于感染后6-7天開(kāi)始出現(xiàn)癥狀，被毛松亂、結(jié)膜發(fā)炎、弓背、腹水、嗜睡，以至死亡或小鼠耐過(guò)幾周后可逐漸恢復(fù)。 遲發(fā)型：感染此病毒的新生小鼠呈慢性帶毒者，或由于腎臟損傷引起死亡，乳鼠感染第二周出現(xiàn)死亡，表現(xiàn)為毛發(fā)稀少、衰弱，存活者康復(fù)緩慢、發(fā)育不良、個(gè)體矮小。 防治的辦法是嚴(yán)格控制野鼠、感染鼠或被污染材料物品進(jìn)入飼養(yǎng)區(qū)，外來(lái)鼠應(yīng)經(jīng)檢測(cè)為抗體陰性方能進(jìn)入，對(duì)已感染的小鼠應(yīng)處死淘汰。,4）螨

14、病：小鼠螨病是由寄生于皮毛中的肉螨引起，部位一般在小鼠的軀體背側(cè)前部，尤其是頭頂、頸部那些最少毛的部位，嚴(yán)重時(shí)全身部位受侵。皮膚損害包括瘙癢、脫屑及出現(xiàn)斑狀脫毛，嚴(yán)重癥狀可形成潰瘍和膿皮病，或伴有自體所致的創(chuàng)傷。 螨等體外寄生蟲應(yīng)重在預(yù)防，主要是嚴(yán)格消毒墊料和籠具強(qiáng)化清潔衛(wèi)生，防止螨的傳入。根治的有效方法是采取生物凈化的手段重新建群，目前藥物治療也廣泛應(yīng)用，即用0。4%克螨特或0。3%敵敵畏藥浴兩次（兩次間隔14天）。要徹底根除必須持之以恒，否則極易重新感染。,五、飼養(yǎng)管理要點(diǎn) 1、動(dòng)物健康的外觀檢查：食欲旺盛、眼睛有神，反應(yīng)敏捷、體毛光滑，肌肉豐滿，活動(dòng)有力、身無(wú)傷痕，尾不彎曲、天然孔腔無(wú)分

15、泌物，無(wú)畸形、糞便黑色呈麥粒狀。 2、飼料和飲水 3、動(dòng)物運(yùn)輸 4、完整的記錄 5、動(dòng)物的處死和尸體處理,六、裸小鼠和免疫缺陷動(dòng)物 1、裸小鼠的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展 1962年英國(guó)格拉斯哥醫(yī)院grist在非近交系的小鼠中偶然發(fā)現(xiàn)有個(gè)別無(wú)毛小鼠。四年后，愛(ài)丁堡動(dòng)物研究所沸拉那根（flanagan）又證實(shí)這種無(wú)毛小鼠是由于染色體上等位基因突變引起的，發(fā)現(xiàn)該種鼠皮膚組織學(xué)和以往無(wú) 毛小鼠不同，檢查發(fā)現(xiàn)常因染色體退化，屬于一種新的 無(wú)毛基因，因此認(rèn)為是一種新的自發(fā)突變種，并命名為“裸體”（nude）小鼠，用“nu”表示為基因符號(hào)，但當(dāng)時(shí) 未被人們注意。1968年佩蒂路易斯（pantelouris）發(fā)現(xiàn)裸體小鼠沒(méi)

16、有胸腺，這才引起世界各國(guó)醫(yī)學(xué)生物學(xué)工作者的極大興趣。在這以前，為開(kāi)展細(xì)胞免疫學(xué)的研究，通常采用藥物抑制小鼠t細(xì)胞的產(chǎn)生及其作用，或使用外科手術(shù)摘除胸腺，這些方法往往由于抑制作用不完全或手術(shù)不理想，常導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗。而自發(fā)突變無(wú)胸腺裸鼠的培育成功，則提供了研究胸腺功能、免疫學(xué)機(jī)理的理想動(dòng)物模型。,2、 裸鼠的主要形態(tài)和生理特征 裸鼠的主要特征表現(xiàn)為無(wú)毛（hairless）、裸體（naked）和無(wú)胸腺（athymus）。 原種新生裸體小鼠以無(wú)鼻毛為特征，足尖經(jīng)常收縮，呈螺旋樣畸形。成年雌鼠動(dòng)情周期不規(guī)律，卵巢小，用絨毛膜促性腺激素不能誘發(fā)排卵，雄鼠精子尾部呈盤卷狀，無(wú)活動(dòng)力，因此受孕力極低。新生小

17、鼠3周后生長(zhǎng)明顯遲緩，普遍有肝臟疾病，死亡率高，壽命在1526周。 純系裸體小鼠外形和原種相同，全身幾乎無(wú)毛，偶而背部可見(jiàn)稀疏的帶狀毛、皮薄、光滑或有皺折。皮膚色素balb/c裸體小鼠為淺紅色，白眼；c3h裸鼠為灰白色，黑眼；c57bl/6j裸鼠為黑灰色至黑色，運(yùn)動(dòng)功能正常。,裸鼠由于無(wú)胸腺導(dǎo)致t細(xì)胞發(fā)生發(fā)育障礙。雖然t細(xì)胞和b細(xì)胞的前身正常，但因缺乏胸腺，故不能生成正常成熟t細(xì)胞，缺乏免疫反應(yīng)，因此裸鼠是一種免疫缺陷動(dòng)物。正常小鼠胸腺位于胸骨柄后方，緊貼氣管，心臟腹面，呈乳白色脂肪狀，分左右兩葉。胸腺與機(jī)體免疫機(jī)有關(guān)系密切，現(xiàn)已知胸腺可分泌好幾種具有生物活性的多肽類物質(zhì)，總稱為胸腺素，它可刺

18、激淋巴組織產(chǎn)生淋巴細(xì)胞；使來(lái)自骨髓、脾臟和其它組織和淋巴原始細(xì)胞成熟為具有細(xì)胞免疫活性的t淋巴細(xì)胞，從而發(fā)揮免疫作用。,3、裸鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用 近年來(lái)，無(wú)胸腺裸鼠作為一種新的動(dòng)物模型，活躍于免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、毒理學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域的研究工作中，尤其在免疫生物學(xué)、免疫病理學(xué)、移植免疫、腫瘤免疫、病毒和細(xì)菌免疫將等領(lǐng)域，在短短的幾年中，就展開(kāi)了一系列富有成效的新的研究，推動(dòng)了各方面的工作，為實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)、實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤學(xué)多供了新的有效的工具。,（1）組織移植（人類腫瘤移植）研究 由于裸鼠的免疫缺陷，在一定情況下，不排斥來(lái)自異種動(dòng)物的組織移植。因此可作移植人類惡性腫瘤的接受體。根據(jù)t. fogh等19791

19、980年的報(bào)導(dǎo)，已有150株人的瘤細(xì)胞和人體原發(fā)癌移植于裸鼠獲得成功，目前已成功地結(jié)腸癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病、腎癌、宮頸癌、軟組織肉瘤和骨肉瘤等移植于裸鼠、獲得了一定百分比（35.7%）的良好生長(zhǎng)，并可傳代（見(jiàn)表7-1）。若用已建株的人體腫瘤組織培養(yǎng)細(xì)胞作移植材料，接種后的成活率更高（41%）。我國(guó)北京醫(yī)科大學(xué)等5所醫(yī)院，使用北京藥品檢定所繁殖的裸鼠對(duì)人體結(jié)腸癌、直腸癌、食道癌、乳腺癌、宮頸癌、咽癌、骨巨噬細(xì)胞癌的移植均獲得了成功。,（2）腫瘤藥物治療和腫瘤免疫研究 裸鼠接種成活的腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性與臨床所見(jiàn)十分相近。黑色素瘤以dtic和ccnu的抑瘤作用較強(qiáng)，

20、而5-fu則無(wú)效，與其臨床客觀療效（三藥分別為20%、12%及2.5%）結(jié)果相似。人的burkitt淋巴瘤的裸鼠移植后對(duì)環(huán)磷酰胺有較高的敏感性，也與臨床結(jié)果相符。其它腫瘤如乳腺癌和結(jié)腸癌裸鼠移植，對(duì)前者阿霉素（5mg/kg）、5-fu(5080mg/kg)和苯丙氨酸氮芥（7mg/kg）均有一定的抑瘤效能，對(duì)后者甲基-ccno和絲裂毒素也明顯療效。有趣的是對(duì)p333無(wú)效的六甲密胺，卻對(duì)人體肺癌異種移植有效，應(yīng)用其耐受劑量6090mg/kg都有消瘤作用，對(duì)人體乳瘤mx-1和結(jié)腸瘤cx-1也有效。此藥重新臨床試用，證明對(duì)人支氣管肺癌和淋巴瘤都有治療作用。最近，對(duì)過(guò)去因毒性較大而中斷研究的偶氮氧代正亮

21、氨酸，重新用人腫瘤裸鼠模型評(píng)價(jià)，證明對(duì)mx-1和肺癌lx-1有明顯療效，又重新進(jìn)入臨床研究。近有人用胸腺嘧啶核苷等444888mg/kg給腫瘤裸鼠連續(xù)灌注96140小時(shí)，發(fā)現(xiàn)它能明顯抑制人體黑色素瘤及畸胎瘤的生長(zhǎng)，并導(dǎo)致腫瘤消退而對(duì)宿主無(wú)明顯毒性，這些新結(jié)果已引起了臨床重視。,（3）免疫和遺傳研究 由于近代遺傳學(xué)的迅速發(fā)展，已發(fā)現(xiàn)40余種免疫缺陷病與遺傳因素有關(guān)。許多報(bào)導(dǎo)只介紹了這些疾病的臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，有關(guān)發(fā)病機(jī)理則停留在假說(shuō)階段，這主要是由于沒(méi)有與人類所患的免疫缺陷性疾病相對(duì)應(yīng)的自發(fā)性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，無(wú)法通過(guò)患病動(dòng)物來(lái)觀察疾病發(fā)生與發(fā)展的全過(guò)程，從而無(wú)法闡明其遺傳規(guī)律。 先天性無(wú)胸

22、腺裸鼠的遺傳因素，免疫動(dòng)物原缺陷指標(biāo)以及剖檢所見(jiàn)和組織學(xué)觀察等特征，均與人類免疫缺陷性疾病中的原發(fā)性細(xì)胞免疫病相似。各品系裸鼠因遺傳背景的不同，所表現(xiàn)的細(xì)胞免疫反應(yīng)和實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)亦各不相同，這些裸鼠種群是研究人類各種免疫缺陷性疾病的發(fā)病機(jī)理和遺傳規(guī)律的動(dòng)物模型。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳學(xué)家已育成具有不同免疫缺陷特性的近交系小鼠達(dá)50余種。我國(guó)所應(yīng)用的自發(fā)性免疫缺陷小鼠，主要應(yīng)用的是balb/c為遺傳背景的裸鼠，個(gè)別實(shí)驗(yàn)室也應(yīng)用了nih、icr等非近交系裸鼠,（4）病毒、細(xì)菌、寄生蟲感染機(jī)制的研究 無(wú)胸腺裸鼠的t淋巴細(xì)胞缺損，免疫機(jī)能低下，是研究病毒、細(xì)菌及寄生蟲感染機(jī)制的極好模型動(dòng)物。如可用于研究乙型腦

23、炎sa1414zhk7減毒株為乙腦活毒疫苗的選育株，在正常小鼠體內(nèi)可產(chǎn)生符合規(guī)定的免疫原性（ld50），而在胸腺缺少或胸腺發(fā)育不良的生物個(gè)體免疫原性如何，對(duì)于今后現(xiàn)使用具有參考價(jià)值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)表7-3，以balb/c（+/+）小鼠為對(duì)照。以上結(jié)果說(shuō)明，乙腦病毒感染后所產(chǎn)生的免疫力，主要屬于細(xì)胞免疫，如使t細(xì)胞缺陷的裸鼠體內(nèi)產(chǎn)生與免疫功能正常小鼠同等水平的免疫力，必須加大40倍的免疫劑量，才能達(dá)到。也說(shuō)明裸鼠體內(nèi)還存在著殘余的t淋巴細(xì)胞。由此推論，在現(xiàn)場(chǎng)人群中產(chǎn)生抗體水平較低者，其t細(xì)胞功能是否缺陷，應(yīng)作為因素之一加以探討。,表7-3 乙腦弱毒株免疫實(shí)驗(yàn)結(jié)果,（5）生物制品和藥品的檢定 生物制

24、品（疫苗、菌苗）的安全性的免疫原性是制品必不可少的內(nèi)容之一。它涉及制品是否有潛在致癌性、感染因子以及它的毒力是否有返祖的可能性。特別是在應(yīng)用動(dòng)物組織培養(yǎng)疫苗或人類二倍體細(xì)胞株時(shí)，對(duì)檢出這些細(xì)胞潛在的致癌性，某些制品引起的異常發(fā)應(yīng)及其發(fā)生機(jī)理，對(duì)藥物致癌性或抗癌藥物的研究等諸方面，先天性胸腺機(jī)能缺陷的裸鼠是很好的動(dòng)物模型和實(shí)驗(yàn)手段。,（6） 微生物學(xué)上的研究 以往人類麻風(fēng)桿菌只有在背上有九條紋的犰狳（armadillo）身上才能生長(zhǎng)，而這種產(chǎn)于南美等地的動(dòng)物難于尋找，也不易飼養(yǎng)和操作。1975年colston等將麻風(fēng)桿菌接種于裸鼠足掌，發(fā)現(xiàn)麻風(fēng)桿菌可大量繁殖，全身擴(kuò)散，引起瘤型麻風(fēng)。這為研究麻風(fēng)

25、桿菌的生物特性、免疫原性和麻風(fēng)病發(fā)病機(jī)理提供了極為有用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。又如淋巴?xì)胞性脈絡(luò)膜腦膜炎（lcm）病毒經(jīng)腦內(nèi)接種于無(wú)本病毒隱性感染的正常小鼠，可引起腦膜炎，感染細(xì)胞被當(dāng)作靶細(xì)胞而受到破壞，在腦、脊髓內(nèi)發(fā)生了明顯的細(xì)胞免疫反應(yīng)，但在t細(xì)胞缺損的裸鼠所見(jiàn)卻完全相反，未導(dǎo)致動(dòng)物的死亡，僅出現(xiàn)持續(xù)病毒血癥，體內(nèi)不出現(xiàn)lcm抗體，也無(wú)任何免疫反應(yīng)。,（7）內(nèi)分泌和老年醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用 在人工摘除胸腺動(dòng)物，大多數(shù)研究可見(jiàn)腦下垂體、甲狀腺、腎上腺、性腺等出現(xiàn)異常。有人用無(wú)特定病原體環(huán)境中飼養(yǎng)的裸鼠和正常小鼠進(jìn)行研究，分析3、9、11周齡的雌雄動(dòng)物的腦下垂體生長(zhǎng)激素及甲狀腺、腎上腺皮質(zhì)和性腺的功能，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩

26、者間未見(jiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差別。 在老年醫(yī)學(xué)的研究上，有人認(rèn)為裸鼠沒(méi)有t細(xì)胞，容易引起自身免疫現(xiàn)象，皮膚的可溶性膠原（collagen）也減少，因此認(rèn)為胸腺、自身免疫、老化三者之間是有關(guān)系的。但這方面也有不同論點(diǎn)。,4、免疫缺陷小鼠（裸鼠）在腫瘤學(xué)研究中應(yīng)用的有關(guān)問(wèn)題,1、裸鼠移植瘤的組織學(xué)特征和性狀的穩(wěn)定性 2、裸鼠對(duì)移植瘤的反應(yīng) 3、人體腫瘤裸鼠移植成功的比率,1）移植腫瘤的常規(guī)處理和移植方法 （1）組織塊移植法 （2）懸液移植法 （3）培養(yǎng)細(xì)胞移植法 2）不同移植途徑及其方法 （1）皮下移植 （2）腹腔注射 （3）腎包膜下移植 （4）原位移植,大鼠(rat),一、生物學(xué)特點(diǎn) 1、解剖學(xué) 大鼠成

27、年體長(zhǎng)不小于18-20cm。尾上覆蓋有短毛和環(huán)狀角質(zhì)鱗片，數(shù)量多于200片。 大鼠無(wú)扁桃體，味覺(jué)不發(fā)達(dá)；胃分為兩部分，即前胃（非腺胃）和胃體（腺胃），兩部分有1個(gè)界限脊隔開(kāi)。食管通過(guò)界限脊的一個(gè)褶進(jìn)入胃小彎。此褶是大鼠不會(huì)嘔吐的原因。肝有4葉，再生能力強(qiáng)，經(jīng)部分肝切除術(shù)后仍可再生。,2、生理學(xué) 生長(zhǎng)發(fā)育快，新生鼠體重約5-10g，出生時(shí)無(wú)毛、兩耳關(guān)閉、四肢短小、尾短。2-3天半兩耳張開(kāi)，8-10天切齒萌出，7-10天全身長(zhǎng)滿被毛，12-16天睜眼，20-21天可斷奶獨(dú)立生活。雌鼠發(fā)情周期4-5天，對(duì)光照周期敏感；妊娠期19-23天，平均窩產(chǎn)子6-12只。壽命3年。,3、營(yíng)養(yǎng)學(xué) 大鼠能有效地貯存

28、脂溶性維生素b12，制造vc以及通過(guò)食糞滿足其對(duì)維生素b的大部分需要。大鼠對(duì)營(yíng)養(yǎng)缺乏非常敏感，易產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)缺乏癥，表現(xiàn)為被毛松亂、體重下降或發(fā)育生長(zhǎng)不良、繁殖力和抗病力低下；維生素a、e、k、核黃素和硫胺的缺乏可引起不育、皮膚病和出血。,4、行為學(xué) 大鼠對(duì)新環(huán)境的適應(yīng)能力強(qiáng)，容易接受通過(guò)正負(fù)強(qiáng)化刺激進(jìn)行的多種感覺(jué)指令的訓(xùn)練；晝間睡眠，夜間和清晨比較活躍；性情溫順，易于捉取，當(dāng)粗暴操作、營(yíng)養(yǎng)缺乏或聽(tīng)到其它大鼠尖叫時(shí)，變得緊張不安難于捕捉，甚至攻擊人，孕鼠和哺乳鼠更易產(chǎn)生攻擊人的傾向；比起小鼠較少斗毆傾向，可將雄鼠關(guān)養(yǎng)在一起，不如小鼠合群，可耐單籠飼養(yǎng)。,二、在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用 1、藥物學(xué)研究：大鼠繁殖力強(qiáng)，易飼養(yǎng)形體大小合適，給藥容易，采樣量合適方便；畸胎發(fā)生率低，行為多樣化；常用于藥物毒力、