基因治療PPT課件

1、.,1,基因治療,孫金鈺,.,2,基因轉(zhuǎn)移的靶細(xì)胞 疾病的基因治療 基因治療的種類,.,3,理想的受體細(xì)胞應(yīng)具有下列特點,1）易于從體內(nèi)取出和易于在體外培養(yǎng)并大量擴增； 2）容易被轉(zhuǎn)導(dǎo)； 3）經(jīng)體外操作后能存活并能安全回輸體內(nèi)； 4）回輸體內(nèi)后壽命較長并能高效而持久地表達目的基因,基因轉(zhuǎn)移的靶細(xì)胞,體細(xì)胞（主要是骨髓細(xì)胞） 生殖細(xì)胞 目前常被選用的受體細(xì)胞有造血干細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，成纖維細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞，表皮細(xì)胞，肝細(xì)胞，肌細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等。,.,5,疾病的基因治療,體細(xì)胞基因治療的兩種方法： 1、“exvivo”法 先分離靶細(xì)胞，進行體外基因轉(zhuǎn)移，然后將遺傳學(xué)重建細(xì)胞再自體移植入病人。 2、“i

2、nvivo”法 將遺傳物質(zhì)直接導(dǎo)入病人，以糾正遺傳缺陷，該法重要的是遺傳物質(zhì)特異地傳遞入目標(biāo)器官。,.,6,基因治療的對象,首批對象 （由腺苷脫氨酶（ADA）缺陷引起是嚴(yán)重聯(lián)合性免疫疾?。?其他可能對象 （預(yù)期在最近的將來需進行基因治療的疾?。?不可能對象 （近期內(nèi)難以用基因治療的疾?。?.,7,某些遺傳性疾病的基因治療,一些遺傳性免疫缺陷的染色體位置和受影響的基因。P323 表19-2。,.,8,基因治療的種類,細(xì)胞因子基因治療 MHC基因治療 腫瘤抗原基因治療 細(xì)胞自殺基因治療 抑癌基因治療 耐藥基因治療 反義技術(shù),.,9,實例：腫瘤的基因治療：,腫瘤細(xì)胞的特點： 1.不依賴于外源性生長信

3、號 2.對外源性抗生長信號不敏感 3.能夠逃避細(xì)胞凋亡 4.具有無限復(fù)制的能力 5.具有維持血管生成的能力 6.具有侵襲組織和轉(zhuǎn)移的能力,.,10,腫瘤的基因治療方法：,1抑制癌基因的活性 2恢復(fù)抑癌基因活性 3抑制血管生成 4免疫基因治療 5自殺基因療法 6腫瘤多藥耐藥基因治療,.,11,抑制癌基因的活性,采取的策略是抑制原癌基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯及干擾其轉(zhuǎn)運 在轉(zhuǎn)錄方面,利用人工合成的雙鏈或單鏈DNA寡核苷酸特異性結(jié)合于原癌基因的轉(zhuǎn)錄起始區(qū),形成三螺旋DNA從而抑制轉(zhuǎn)錄 在翻譯方面,一是利用質(zhì)粒載體或病毒載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞,在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄出能與目的基因RNA相互補的反義RNA,從而阻斷目的基因

4、蛋白質(zhì)的表達; 二是體外人工合成反義寡核苷酸(ODNs)或利用核酶特異性地封閉和切割癌基因的mRNA,從而達到治療腫瘤的目的,.,12,恢復(fù)抑癌基因活性,向缺失某種抑癌基因的細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入正常的抑癌基因,則可逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的表型、抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,以達到治療目的,.,13,抑制血管生成,由于腫瘤的血管生成受到血管生長因子、血管生長抑制因子以及其它因子的共同調(diào)控,因此通過阻斷促血管生長因子作用或強化血管生長抑制因子的表達均可達到治療的目的。,.,14,免疫基因治療,最常用的腫瘤免疫基因治療的方法是將細(xì)胞因子導(dǎo)入體細(xì)胞,提供一個合適的微環(huán)境,以有利于提高機體的抗腫瘤免疫應(yīng)答。 目前應(yīng)用的細(xì)胞因子主要包括L-1、L-2、L-4、L-6、IL-7、L-12、L-18、NF-、NF-、G-CSF、GM-CSF等。,.,15,自殺基因療法,它是將能編碼某些藥物敏感酶的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入腫瘤細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的這些酶將低毒或無毒的藥物前體轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒性產(chǎn)物,從而殺傷腫瘤細(xì)胞。 這些基因多是由病毒載體轉(zhuǎn)移入靶細(xì)胞 常用自殺基因有單純皰疹病毒胸苷激酶 (HSV-TK)基因（更昔洛韋GCV）、大腸埃希菌胞嘧啶酶和5-氟胞嘧啶(CD-5-FU)系統(tǒng),.,16,腫瘤多藥耐藥基因治療,轉(zhuǎn)入MDR-I基因、DHFR基因、MG-MT基因等,或者聯(lián)合使用兩