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1、.鈣離子對血液凝固的影響一、實驗?zāi)康模河^察某些因素對血液凝固的影響,尤其是鈣離子對血凝的影響。二、實驗原理:血液凝固指?血液凝固的過程可以分為三個階段,凝血酶原激活物的形成、凝血酶的形成、纖維蛋白的形成。血液凝固的途徑有兩條,即:內(nèi)源性凝血與外源性凝血。內(nèi)源性途徑指參與凝血的因子全部來自血液,因血液與帶負電荷的異物表面接觸而啟動。表面激活所生成的凝血因子在鈣離子的作用下可以激活f, fa在鈣離子的作用下與fa在活化的血小板提供的磷脂膜表面結(jié)合成復(fù)合物可進一步激活f。外源性凝血途徑指來自于血液之外的組織因子暴露與血液而啟動的凝血過程,又稱組織因子途徑。當(dāng)血管損傷后暴露出組織因子,組織因子與fa、
2、鈣離子結(jié)合而形成復(fù)合物。這個復(fù)合物在磷脂和鈣離子存在的情況下迅速激活f生成fa。由內(nèi)源性和外源性途徑生成的fa在鈣離子存在的情況下可與fa在磷脂膜表面生成結(jié)合生成fa-fa-鈣離子-磷脂復(fù)合物,即:凝血酶源酶復(fù)合物,進而激活凝血酶原,誘發(fā)凝血過程。資料顯示1:因子,即纖維蛋白原,由肝實質(zhì)產(chǎn)生,在凝血酶的作用下轉(zhuǎn)變成纖維蛋白聚合體,在鈣離子的作用下變成牢固的、不可溶解的纖維蛋白。因子在凝血酶和鈣離子的作用下才分解出具有活性的凝血酶。因子也會在鈣離子存在的情況下與因子結(jié)合成復(fù)合物從而激活因子。因子在fa、磷脂、鈣離子形成的凝血酶過程中起催化作用,從而加速了凝血酶原轉(zhuǎn)變成了凝血酶。因子,即鈣離子,在
3、凝血過程中許多環(huán)節(jié)都需要鈣離子的參與,有間接證據(jù)證明鈣離子再被吸收以后吸附以維持凝血因子的電荷表面或穩(wěn)定各種凝血蛋白質(zhì)、磷脂等結(jié)構(gòu)。當(dāng)血小板活化后,胞質(zhì)內(nèi)高濃度的鈣離子可以引起血小板的收縮活動,可以促進血塊凝固。當(dāng)血液中缺乏鈣離子的時候,血液不凝固,資料顯示:如果血凝的復(fù)鈣時間增長,則出現(xiàn)一定程度的抗凝血現(xiàn)象。復(fù)鈣時間:是指脫鈣抗凝的血液在加入鈣離子后重新凝固所需要的時間。三、實驗對象: 家兔。四、實驗藥品及器械: 兔手術(shù)臺、哺乳類動物手術(shù)器械一套、水浴箱、動脈夾、動脈插管、試管架、試管、5ml注射器、大燒杯、小燒杯、棉花、冰塊、石蠟;1%戊巴比妥鈉、肝素、腦組織上清液、5%氯化鈣、5%磷酸鈉
4、。五、實驗步驟:1、麻醉:用1%戊巴比妥鈉3ml/kg由兔耳緣靜脈注射麻醉。麻醉的標(biāo)志:呼吸平穩(wěn)、瞳孔散大、角膜反射消失及四肢疼痛反射消失。2、固定:將麻醉好的兔子仰臥位固定于兔臺上。3、備皮:頸部剪毛。4、準(zhǔn)備實驗:準(zhǔn)備對照組、脫鈣組、高鈣組,裝好實驗藥品.a組:按下表裝好藥品a(1-7)b組(即脫鈣組):在a組藥品的等量前提下在試管b(1-7)中加入5%磷酸鈉1ml。c組(即高鈣組):在a組藥品的等量前提下在試管c(1-7)中加入5%氯化鈣1ml。5、手術(shù):頸部正中切口(57cm),分離皮下組織和肌肉,分離一側(cè)頸總動脈,頭端結(jié)扎,外周端夾動脈夾并插管。6、開始操作并記錄數(shù)據(jù)。六、觀查項目:
5、按下表操作并觀察結(jié)果,進行記錄實驗儀器編號實驗條件凝血時間(min)a組b組c組10ml試管中加入鮮血1ml1對照管2棉花3石蠟4加入腦組織上清液0.5ml537度水浴6冰浴7加入肝素4u七、實驗結(jié)果預(yù)測:根據(jù)預(yù)測結(jié)果繪制時間曲線,并進行對比及結(jié)果分析。八、分析討論:運用單一變量和多變量來驗證這些因素對血液凝固的影響。當(dāng)接觸面的粗糙程度不同時,棉花接觸面粗糙,相當(dāng)于血管管壁破裂激活凝血酶加快凝血時間,故較對照管時間短;而石蠟則保持了光滑血管的特性,延緩了凝血時間,也可是說是光滑的管壁激活的您能凝血酶少,較對照管時間長。溫度不同時,當(dāng)對照管在室溫20攝氏度以下時凝血酶不能被完全激活發(fā)揮最大凝血效率,而37攝氏度則提供了凝血酶的最適溫度故血液凝固時間較對照管短,而冰浴條件下則抑制了凝血酶的活性使其凝血時間延長。當(dāng)加入腦組織的九、注意事項:1、記錄凝血時間應(yīng)該力求準(zhǔn)確。2、判斷凝血的標(biāo)準(zhǔn)要求一致。一般以傾斜試管大45度時試管內(nèi)血液不見流動為標(biāo)準(zhǔn)。3、合理分工,對比實驗的采血的時間要緊接著進
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