實驗動物標準化的ppt課件

1、1,實 實驗動物標準化（質量控制） 驗 遺傳控制 環(huán)境控制 實 動 微生物控制 營養(yǎng)控制 驗 物 各種實驗動物特性和應用 動 實驗動物的選擇 物 動 動物實驗基本技術和方法 學 物 人類疾病動物模型 實 免疫缺陷動物 動物胚胎工程 驗 轉基因動物及其它基因工程動物,2,第二章 實驗動物標準化,3,第一節(jié) 實驗動物標準化的意義,生物學實驗研究的四個基本條件 Animal，Equipment，Information，Reagent ，簡稱AEIR四要素 這4個要素在整個實驗研究中具有同等重要的地位，不能忽略或偏廢。事實上，實驗動物質量往往成為制約性要素，影響整個實驗的質量和水平 使用標準的實驗動物

2、并在標準的環(huán)境條件下進行實驗是保證醫(yī)學生物學研究質量的重要條件,4,實驗、工作人員的健康和生命的保證,常見的人畜共患?。毫餍行猿鲅獰帷⒖袢?、猴B病毒、淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒、利什曼原蟲等,5,動物生產和繁殖的保證,動物一旦染上傳染病，則種群難以凈化，一些烈性傳染病如鼠痘、兔病毒性出血癥等可導致動物全軍覆沒，造成巨大的經濟損失。,6,實驗結果準確性、規(guī)律性、重復性的保證,7,按工作程序實驗動物標準化劃分為： 實驗動物生產條件標準化 實驗動物質量標準化 動物實驗條件標準化 對應三種合格證,8,一、實驗動物質量標準化,微生物質量標準化 遺傳學質量標準化,9,1、實驗動物微生物學質量的影響,（1）

3、威脅人的健康和生命 流行性出血熱病毒 （Epidemic hemorrhagic fever virus) 淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒（Lymphocytic choriomeningitis virus） 猴B病毒(B virus) 狂犬病病毒(Rabies virus) 布氏桿菌(Brucella),10,流行性出血熱病毒 宿主動物主要是小型嚙齒動物，實驗動物中小鼠和大鼠比較常見 傳播途徑以接觸感染為主，常由帶毒動物咬傷抓傷為主 典型表現有發(fā)熱、出血和腎臟損害三類主要癥狀，以及發(fā)熱、低壓，少尿、多尿與恢復期等五期臨床過程,11,淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒 病毒屬RNA型病毒，宿主動物主要是倉鼠

4、小鼠、田鼠等鼠類 通過呼吸道及消化道及接觸病鼠皮毛排泄物使人感染 臨床癥狀剛開始為流感型癥狀，后表現為腦膜炎型,12,猴B病毒 病毒屬皰疹病毒型，自然宿主為舊世羿猴，獼猴也可感染，無明顯癥狀 人、猴之間的傳播主要以密切接觸、抓咬為主 人感染后可出現腦炎等嚴重中樞神經癥狀，病死率較高,13,狂犬病病毒 病毒屬彈狀病毒科狂犬病毒屬，自然宿主廣泛狼、狐貍、鼬鼠、蝙蝠等及家養(yǎng)動物狗、貓、牛等均可感染 人主要被病獸或帶毒動物咬傷后感染 一旦感染，如不及時采取有效防治措施，可導致嚴重的中樞神經系統(tǒng)急性傳染病，病死率極高,14,（2）影響動物生產 結核分枝桿菌(M.tuberculosis) 鼠痘病毒(Mo

5、usepox virus) 泰澤氏菌(Tyzzers organism) 犬細小病毒(Canine Distemper Virus) 犬瘟熱病毒(Canine distemper virus) 巴氏桿菌(Pasteurella),15,（3）干擾實驗結果 隱性感染，不表現臨床癥狀。但改變動物生物學參數，影響實驗準確性、規(guī)律性、重復性。實驗刺激下感染顯性化，得病、死亡，實驗終止。 裸鼠慢性感染一些微生物 綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)感染免疫抑制動物,16,按微生物學控制標準，實驗動物在我國分為四級 一級動物 普通動物 二級動物 清潔動物 三級動物 SPF動物 四級動物

6、 無菌動物,17,2、實驗動物遺傳學質量的影響,動物實驗結果的重復性取決于動物個體差異，而動物個體特征主要受遺傳基因控制，故實驗動物的遺傳學質量對動物實驗結果有重要影響。 不同基因型動物，生物學特性有明顯差異，對實驗刺激有不同反應。,18,BALB/c對放射線比其他品系更為敏感。 C57BL/6腫瘤發(fā)生率低，A系高。 DMBA可致BALB/c產生白血病，對A系卻產生皮膚潰瘍 BALB/c和C3H小鼠對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性存在顯著差異 SHR為自發(fā)性高血壓大鼠，心血管疾病發(fā)生率高,19,必須推廣應用標準品系動物，防止各種品系動物發(fā)生遺傳污染、基因型及生物學特性的改變，保證動物的遺傳質量,20,

7、按遺傳學控制標準即基因的純合程度，實驗動物分為 近交系 封閉群 雜交群動物,21,近交系 經至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配或親代與子代交配培育而成，品系內所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數的一對共同祖先。,代表動物：BALB/c、C57BL/6、DBA/2,22,封閉群：以非近親交配方式繁殖生產的一個實驗動物種群，在不從其外部引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為一個封閉群，或叫遠交群,代表動物：ICR小鼠、SD大鼠、畢格犬,23,雜交群：不同品系或種群之間雜交產生的后代稱為雜交群。用于醫(yī)學生物學研究常指兩個近交系雜交后生育的第一代動物,代表動物：如C3H/HeJAKR/J,2

8、4,實驗動物生產與實驗條件的標準化是對干擾動物實驗的周圍環(huán)境因素進行控制,二、實驗動物生產條件和動物實驗條件的標準化,25,環(huán)境因素包括： 氣候因素（溫度、濕度、氣流、風速） 理化因素（換氣、粉塵、臭味、噪音、照明） 居住條件（籠具、墊料、房舍） 營養(yǎng)因素（飼料、水） 同種和異種動物之間的關系,26,環(huán)境因素對實驗動物和動物實驗的影響,/ac_cbt/guide3.htm#lightMost species of laboratory animals thrive when they are consistently exposed to cycles

9、 of 12 hours of light and 12 hours of darkness during each 24 hour period. Interruptions in the established light cycle can cause significant physiological responses from the animals. For example, reproductive cycles in many species respond directly to seasonal fluctuations in available sunlight. In

10、 a laboratory setting the number of hours of exposure to light and dark may purposely be altered to affect the breeding cycle of the animals. Consequently, if you turned the lights on to work in a room containing animals on such an experiment and you failed to turn the lights off when you leave the

11、room, you can greatly alter the outcome of the study.,27,Environmental FactorsTemperature and Humidity:Room temperature and humiditylevels are selected to meet theneeds of the species of animalshoused there and the Heating Ventilation and Air Conditioning (HVAC) system is balancedthroughout the buil

12、ding to maintain the established settings. If doors or windows are left open the systemgets out of balance and the correctconditions cannot be maintained.,28,/ac_cbt/guide3.htm#noiseSeparation of human and animal areas minimizes disturbances to both the human and animal occupant

13、s of the facility. Noisy animals such as dogs, swine, and non-human primates are usually housed away from quieter animals such as rodents, rabbits, and cats. Noise can have very detrimental effects on certain animals as illustrated by the recognition that certain strains of mice will go into convuls

14、ions when exposed to sudden loud noises.,29,溫度對藥物毒性反應LD50的影響 微量元素對動物健康的影響 環(huán)境潔凈程度對腫瘤接種成功率的影響 動物社會關系的影響,30,31,按微生物控制程度分類，實驗動物的環(huán)境可分為 開放系統(tǒng) 屏障系統(tǒng) 隔離系統(tǒng),32,屏障系統(tǒng),隔離系統(tǒng),33,屏障環(huán)境特點： 恒溫（2026）恒濕（4070） 足夠的換氣次數（1020次/小時）保證有害氣體濃度降低到最小 正向梯度壓差（2050)使屏障外污染源不能進入 萬級空氣潔凈度保證空氣潔凈 適合的動物照度(1520)和對時明暗交替（12h/12h)符合動物生活習性。 隔離環(huán)境特點

15、： 百級空氣潔凈度 正向梯度壓差（100150) 換氣次數（2050次/小時） 人員不與動物直接接觸,34,第二節(jié) 實驗動物標準化的研究內容,一、實驗動物微生物學的控制 二、實驗動物遺傳質量的控制 三、實驗動物環(huán)境的控制 四、實驗動物營養(yǎng)的控制,35,實驗動物按微生物寄生蟲控制分級： 普通動物 清潔動物 SPF動物 無菌動物 小鼠，大鼠：清潔級，SPF級，無菌級 豚鼠，兔，地鼠：普通級，清潔級，SPF級，無菌級 犬，猴：普通級，SPF級,36,實驗動物環(huán)境分級： 開放環(huán)境 屏障環(huán)境 隔離環(huán)境 開放環(huán)境：普通動物 屏障環(huán)境：清潔動物， SPF動物 隔離環(huán)境：無菌動物,37,按實驗動物遺傳學控制標

16、準分級： 近交系 （1）普通近交系 （2）重組近交系 （3）同源突變近交系 （4）同源導入近交系 （5）分離近交系 封閉群 （1）遠交種 （2）突變種 雜交群,38,實驗動物營養(yǎng)控制 飼料中蛋白質、脂肪、鈣、磷、氨基酸、維生素等各類營養(yǎng)物質含量應符合各種實驗動物品種品系的生理需要，含有的有害物質及污染物質不能超過最大安全限量標準。 清潔級及清潔以上級動物的飼料應作滅菌處理。,39,40,第三節(jié) 實驗動物標準化的實施,一、法規(guī)體系 實驗動物管理條例，88年，國家科委頒布，國務院批準。 2001版國家標準，2002年5月1日起實施。 國家質量技術監(jiān)督檢疫檢驗總局。 實驗動物質量管理辦法，97年，國

17、家科委、國家技術監(jiān)督局聯合制定。,41,國家實驗動物種子中心管理辦法，98年，國家科技部。 國家嚙齒類實驗動物種子中心引種、供種實施細則，98年，科技部。 實驗動物許可證管理辦法（試行），2001年，7部門聯合頒發(fā)。 各部門法規(guī) 各地方法規(guī),42,2001版國家標準 GB 14922.1- 14922.22001 實驗動物 寄生蟲和微生物等級及監(jiān)測 GB 149232001 哺乳類動物的遺傳質量控制 GB 14924.1-14924.82001 飼料質量標準 GB 149252001 實驗動物 環(huán)境及設施 GB/T 14927.22001 近交系小鼠、大鼠皮膚移植法,43,標準:為在一定的范圍內獲得最佳秩序，對活動或其結果規(guī)定共同的和重復使用的規(guī)則、導則或特性的文件，稱為標準。該文件經協(xié)商一致制定并經一個公認機構的批準。標準應以科學、技術和經驗的綜合成果為基礎，以促進最佳社會效益為目的 標準的代號和編號 GB（ GB/T） XXXXXXXXX XX（XX/T） 標準發(fā)布 標準發(fā)布 DBXX（DBXX/T） 順序號 年代號 Q/XXX,44,45,二、管理體系 科技部條財司 省科技廳條財處 各部委科教司 省動管會 行業(yè)動管會 各單位動管會 各單位動管會,46,組織機構,47,三、實驗動物標準化工作要點 1、推行