安捷倫液相常見問題

1、.HPLC故障排除癥狀類型可能的原因解決方案基線噪聲大隨機性-污染物積聚沖洗柱;凈化樣品;使用HPLC級溶劑連續(xù)性-檢測器燈故障更換紫外燈(壽命為1000小時)偶然性-外部電氣干擾使用LC系統(tǒng)專用穩(wěn)壓器樣品量過大進樣量應為流動相進樣量的1/6雙峰樣品量過大進樣量應為流動相進樣量的1/6進樣溶劑過強使用較弱的進樣溶劑或流動相濾芯堵塞更換并使用0.5m孔隙率的在線過濾器柱有空隙或氣溝用玻璃珠或填料填充空隙;重填柱進樣器流路不通暢更換進樣器轉子柱頭有空隙使用填料或玻璃珠填充柱頂部柱上樣品超載使用更高負載量的固定相;增加色譜柱內徑;減少樣品量單峰-存在干擾性組分凈化樣品;預分離拖尾峰開始出雙峰請參見雙

2、峰存在未掃的死體積減少接頭的數(shù)量;確保進樣器密封墊緊密;確保接頭正確固定堿性化合物-硅醇相互作用換成聚合物固定相堿性物質-硅醇相互作用使用更強的流動相或添加競爭堿(例如,三甲胺)硅膠基-柱降解使用特種色譜柱;聚合物柱或空間位阻峰展寬進樣量過大降低進樣溶劑的強度以集中溶質進樣閥中的峰擴散在進樣前/后引入氣泡以減少擴散數(shù)據(jù)系統(tǒng)的采樣速率過低增大采樣檢測器時間常數(shù)低調節(jié)時間常數(shù)使之與峰寬匹配流動相粘度過高提高柱溫檢測器流通池容積過大使用盡可能小的池容積(系統(tǒng)中無熱交換器)注射器體積過大減少進樣量保留時間長使用梯度洗脫或較強的流動相壓力波動單向閥泄漏更換單向閥泵密封墊泄漏更換泵密封墊微粒積聚過濾樣品；

3、在線過濾器;過濾流動相壓力漸增微粒積聚過濾樣品；在線過濾器;過濾流動相水/有機系統(tǒng)-緩沖液沉淀測試緩沖液-有機混合物;確保兼容性保留時間超出總滲透體積體積排阻-特異性相互作用添加流動相改性劑或更改溶劑保留時間不斷變動柱溫不斷變化使柱恒溫;絕緣;保證實驗室溫度恒定平衡時間不足以適應梯度洗脫要求,或梯度洗脫流動相起變化確信在溶劑改變或梯度結束后至少10個柱容積通過色譜柱流動相組分選擇性蒸發(fā)減少氦氣的劇烈脫氣;保持溶劑貯器蓋好;制備新的流動相緩沖能力不足用20mM濃度的緩沖液在線流動相混合不一致保證梯度系統(tǒng)輸送恒定組成;與手動制備流動相核對污染積聚沖洗色譜柱以去除污染物最初幾次進樣-吸附在活性部位用

4、濃樣品進樣沖洗柱,使其處于正常狀態(tài)保留時間逐漸縮短流速在增加檢查泵以確保正確;否則需重調柱上進樣超載減少樣品鍵合固定相的流失保持流動相pH值在2-8.5間保留時間逐漸增加流速在減慢解決液流中的漏液現(xiàn)象,更換泵密封墊,檢查泵的渦流和氣泡硅膠填料的活化點使用流動相改性劑鍵合固定相的流失保持流動相pH值在2-8.5間流動相組成在變化確保流動相容器蓋好硅膠填料的活化點流動相中加競爭堿硅膠填料的活化點固定相用更高覆蓋度的填充料靈敏度問題峰位于檢測器線性范圍之外稀釋或濃縮使之處于線性區(qū)內最初幾次進樣-樣品在樣品池或柱中被吸附;自動進樣器;流路阻塞用濃樣品處理樣品池/柱自動進樣器流路阻塞檢查流量情況,確保無

5、阻塞現(xiàn)象進樣器樣品定量管未充滿確保樣品池中已充滿樣品在樣品制品時有關的樣品流失用內標法在制備樣品,優(yōu)化樣品制備方法柱平衡時間減慢（離子對現(xiàn)象）長鏈離子對試劑平衡時間慢使用較短的烷鏈試劑1.常見色譜故障壓力波動可能原因：溶劑進口過濾芯堵塞；溶劑未脫氣；泵的密封墊老化；出口單向閥失效；主動閥失效。最常見原因：泵內有氣泡2. 常見色譜故障壓力過低可能原因：溶劑進口過濾芯堵塞；連接管路泄漏或其它備件（泵頭密封墊）；溶劑或流速改變；主動閥失靈；四元比例閥失靈；單向出口閥失靈；色譜柱失效（固定相流失）。3. 常見色譜故障壓力過高可能原因：柱子進口過濾芯被污染；PURGE（排氣）閥過濾芯被污染；色譜柱被污染

6、；連接管路，尤其是針座毛細管堵塞；進樣器旋轉密封閥被堵塞；進樣針或針座被阻塞4. 常見色譜故障基線噪音 是檢測器？基線噪音停泵噪音是否依然存在- 否泵或流動相？其它要考慮的問題：是否改變了流動相的組成？是否改變了檢測波長？在你的儀器上使用的最后的流動相是什么？流動相是否相溶？流動相是否干凈？ 如何排除流動相中的氣泡？如何排出流動池中的氣泡？避免流動相中產生氣泡的最佳方式是將流動相經脫氣裝置進行脫氣。如果沒有脫氣裝置，則可以在流動相溶劑瓶中通入氦氣進行脫氣。也可以在檢測器的出口端加一根細管線以調節(jié)流動池中的背壓，但必須注意不要超過流動池的最大壓力，否則會造成流動池漏液或流動池損壞。如果流動池中出

7、現(xiàn)氣泡，則先摘下色譜柱，用一根管線直接將流動相接入檢測器的入口。將異丙醇以較大的流速注入流動池。直到基線上看不到毛刺為止。氣泡就應該清除掉了。如何減少基線噪音？無規(guī)律噪音可能與污染有關。請沖洗色譜柱，對樣品做合適的前處理以避免污染，并使用 HPLC 級別的溶劑。連續(xù)噪音有可能由檢測器或泵造成。要確定問題是否發(fā)生在檢測器還是在泵，請先關泵停掉流量，監(jiān)測基線。如果此時基線平穩(wěn)，則噪音可能與泵有關系。使用 ChemStation 在線診斷或 LC 手持控制器檢查泵方面的故障。如果停泵后噪音繼續(xù)存在，則說明噪音與檢測器有關。首先，請嘗試更換燈。如果問題依然存在，則請與安捷倫科技公司聯(lián)系。在中國，請撥打

8、 800 820 3278。什么原因導致基線毛刺？這很有可能是流動池內有氣泡。請先停泵來進行確認，如果毛剌消失，則很有可能是由于流動池內有氣泡。需要沖洗流動池。如果毛剌仍然存在，則需檢查檢測器本身的電噪音有關。如果需要更多幫助，則請致電安捷倫科技公司。在中國，請撥打 800 820 3278。色譜圖上出現(xiàn)鬼峰。如何消除？可能的原因：上次進樣遺留組分產生；有污染；有氣泡；色譜柱問題；保護柱失效。建議用戶：做樣品后應保證有足夠時間沖洗色譜柱，有必要的話在運行結束后使用更強溶劑沖洗色譜柱；洗脫原色譜柱中得原有污染；為確保系統(tǒng)中沒有氣泡，只使用徹底脫氣后的溶劑；更換色譜柱；更換保護柱；檢查流動相純度；

9、檢查樣品中的其它成分。如何決定何時更換保護柱？許多色譜人員在測試一定數(shù)量的樣品和標準樣后更換保護柱。樣品數(shù)量通常由實驗決定，在長時間未更換保護柱而造成分析柱破損時或樣品分析數(shù)量增加，而保護柱需要更換。保護柱的更換頻率通常根據(jù)經驗而定，按照每個方法/樣品類型綜合考慮，但是許多分析人員會在完成一定數(shù)量的樣品分析或測試一些柱的性能指標（例如增加10%峰展寬或拖尾因子，或降低10%的柱效（塔板數(shù)）后更換保護柱。如何開發(fā)一個反相 HPLC 的方法？有什么經驗或建議嗎開發(fā)一個RPLC方法有很多不同的途徑。目前，很多HPLC專家的一般經驗建議，方法開發(fā)可從一個低 pH值(pH 2-3.5)開始，使用C8或C

10、18色譜柱。他們還建議使用共軛酸-共軛堿作緩沖溶液，如濃度為20-50mM的NaH2PO4/H3PO4。其他可用于控制pH值的添加劑包括但不限于：0.05-0.1% v/v三氟乙酸(TFA)、0.1-0.4%甲酸、0.1-1%乙酸和用磷酸調節(jié)pH值的水（pH最高為2.9以確保pH控制正常）。有關更多信息，請參考小分子方法開發(fā)指南。由于方法的重要性、范圍和/或使用的不斷增加，請務必記住始終同時進行方法開發(fā)和方法確認。方法確認可以在方法開發(fā)的開始階段就進行簡單的選擇性、進樣和分析重復性測試。什么原因導致液相色譜儀壓力過高？可能的原因：吹掃閥的PTFE濾芯堵塞；壓力上限設置太低；壓力傳感器堵塞建議的

11、措施：打開排氣閥。如果壓力依然很高，則更換排氣閥的PTFE濾芯；查看軟件的壓力上限設置并確保設置值適于分析；檢查系統(tǒng)內的堵塞部位（如下所述）：要檢查是否堵塞，請采用隔離系統(tǒng)的方法來排除故障：將安裝的色譜柱、預色譜柱和預色譜柱過濾器摘開。1.如果壓力恢復到正常值，則在色譜柱的位置安裝ZDV接頭。 如果壓力正常，則色譜柱、預色譜柱或過濾器是產生問題的原因。請進行更換。 如果壓力依然很高，則在色譜柱的另一端查找堵塞位置（例如：通入檢測器或從其通出的管路）。2.如果取出色譜柱后壓力依然很高，則檢查從排氣閥到自動進樣器的管路。如果壓力正常，則使用進樣步驟命令將自動進樣器的取樣閥切換到路模式。 如果壓力正

12、常，則說明自動進樣器堵塞。請檢查針、針座、針座毛細管和轉子密封墊。 如果壓力依然很高，則檢查從進樣六通閥到色譜柱入口之間的管路。何時應更換泵密封圈？泵密封圈應定期更換。建議每個液相色譜儀用戶建立一個泵密封圈更換的定期檢修計劃。這應根據(jù)泵的使用和流動相組成情況而定。由于它們易磨損的特點，鹽緩沖大大加速密封圈和活塞的磨損。在活塞下面的泵頭上檢測到泄漏時，保留時間不穩(wěn)定時，或系統(tǒng)壓力不穩(wěn)定時，都應更換密封圈。請按照以下程序更換所維護的泵的密封圈。當LC檢測器燈強度測試沒有通過時我該如何辦?強度測試是內置的UV / Vis檢測器診斷測試功能. 是用于測試光學單元在全波長范圍內的性能。安捷倫化學工作站在

13、多個波長范圍測量檢測器的光譜強度，針對每個范圍的極限值報告Pass（通過）/ Fail（失?。顟B(tài)。這一測試的失敗是由于：燈老化了；流通池中有吸光的溶劑/空氣泡；流通池臟了/污染了；光學窗口/透鏡等被污染了。要糾正這些問題，需要在流通池充滿水/并用足夠的時間讓檢測器穩(wěn)定。檢查開燈的運行時間，并當其壽命到期時更換之。用甲醇/無棉布清洗光學窗口。1200VWD和1200VWD S有什么區(qū)別?1200 VWD SL能夠實現(xiàn)超快速LC分析，因為其數(shù)據(jù)采集速率為27Hz到55Hz。而1100 VWD的數(shù)據(jù)采集速率為14HZ。標準HPLC柱和RRLC柱有何區(qū)別?一般來說，RRLC (快速分離液相色譜)柱有

14、較小的填料粒度- 1.8微米，而傳統(tǒng)的柱為2到10微米。由于填料粒度小，故比普通柱的操作壓力(400 Bar)高(600 Bar )。我剛剛更換了1100模塊的主板，得到出錯信息Synchronization Lost或者它不能與其他模塊通訊. 問題是什么?如果一個固件版本為A.05.11或更高的主板安裝在已有的模塊上，所有模塊都必須升級為固件版本A.05.11或更高，固件版本A.05.11不允許采用混合版本。注意：如果使用非安捷倫軟件，請咨詢軟件生產商有關固件兼容性的問題。我什么時候應當更換自動進樣器閥的轉子密封件?最經常的進樣閥維護之一就是更換轉子密封件。需要更換的標志包括：轉子密封墊堵塞

15、；轉子密封墊中接頭點之間泄漏通過觀察注射針從樣品瓶抽取樣品后抬起時，針頭有流動相液滴滲出，就可判斷接頭點之間有泄漏。注意：接頭點之間泄漏也可通過壓力測試來判斷。當您發(fā)現(xiàn)進樣體積精度變差時，您可能首先要考慮接頭點之間有泄漏。1200LC RIFD有什么特點?1200系列VWD SL，MWD SL，DAD SL檢測器的燈和流通池有輻射頻率識別（RFID）標簽。RFID標簽記錄一次運行的必要儀器條件數(shù)據(jù)。這些數(shù)據(jù)儲存在原始數(shù)據(jù)文件中。我的安捷倫1100HPLC能使用新的快速分離HT(1.8-m)HPLC柱嗎? 若能, 我需要做什么來為快速分析改進儀器?安捷倫1100采用新的ZORBAX快速分離（RR

16、HT）柱既是可能的也是實用的。然而，要完全實現(xiàn)RRHT色譜柱的優(yōu)點，最重要的是要對標準1100HPLC作幾處小的改進。對于等度或梯度分離，檢測器響應時間必須從默認值(2秒)減少到較小的值(0.1秒)。這很容易在化學工作站的檢測器設置屏幕實現(xiàn)。此外，柱外體積和其他流路的效應必須最小化，比如連接管的長度和內徑，檢測器流通池體積和進樣量。從進樣口到色譜柱和從色譜柱到檢測器的管線必須從“綠色”管線(0.17mm i.d.)改用“紅色”管線(0.12 mm i.d.)。應該采用5-uL DAD流通池(部件號G1315-60011)替換安捷倫1100DAD標準配置的13-uL流通池。進樣體積應當與色譜柱長

17、度的減小成比例地減小。對于梯度分離，需要有幾個額外的改進以優(yōu)化性能和最小化循環(huán)時間。為了實現(xiàn)快速梯度并最小化重新平衡時間，系統(tǒng)的死體積應當最小化。所以，推薦使用二元泵而不是四元泵，要么不用混合器，要么采用體積較小的混合器替代，如LC/MS混合器 (部件號5022-2165)。應當使用孔板自動進樣器（也可采用樣品瓶板）達到最短的循環(huán)時間(短至15秒)，以實現(xiàn)RRHT色譜柱的最高通量應用。在我的二極管陣列檢測器上，為什么在更換了新燈和流通池以后仍然有基線噪聲和漂移？該問題應該與流速有關。拆下流通池檢查基線。如果問題消除了，說明流通池被污染了(更換/清洗檢測窗口)，或者泵/進樣器有問題?；蛘咴搯栴}在

18、光學系統(tǒng)或光學系統(tǒng)的部件。或者更換整個光源透鏡組件（部件號G1315-65201）(或者組件的單個部件，如光譜窗口，部件號79880-28111以及單色器透鏡，部件號1000-0486)，或者更換檢測池支持窗口G1315-65202。如果問題仍然存在，請聯(lián)系您最近的安捷倫技術代表。我什么時候需要更換溶劑輸送模塊（泵）的沖洗閥中的過濾芯?確定沖洗閥濾芯是否需要更換的常見方法是打開沖洗閥，設定甲醇流速為1 ml/min。如果壓力大于7 BAR，就應該更換濾芯。在進樣過程中HPLC的自動進樣器為什么有壓力的突變?自動進樣器進樣閥中的轉子密封墊可能部分堵塞了。請清洗轉子密封墊或者更換之。從我的HPLC

19、系統(tǒng)卸下色譜柱并用1ml/min 的溶劑沖洗系統(tǒng)后, 為什么我發(fā)現(xiàn)泵沖洗閥關閉時壓力高，而打開時沖洗閥時壓力很小?當關閉泵沖洗閥時出現(xiàn)高壓的原因有多個，某些可能的原因是：如果系統(tǒng)有自動進樣器模塊，針底座、注射針或樣品定量環(huán)可能堵塞了，需要清洗或更換。一般來說，針底座出現(xiàn)這種問題的可能性較大。 連接該模塊的毛細管之一可能部分被堵塞，需要清洗或更換。 檢測器流通池的入口和出口可能堵塞。一般來說，流通池的出口毛細管易出現(xiàn)這種問題。什么是1100/1200自動進樣器馬達溫度錯誤？傳動部分的馬達運行時所需電流過大，引起過熱。處理器將馬達關掉，以免損壞它?？赡艿脑? 機械故障；傳動部分摩擦力過大；馬達皮

20、帶張力過高；馬達損壞；傳動部分彎板損壞建議: 關掉自動進樣器電源開關。等至少10秒鐘之后再開開關；確認傳動部分的運動不受阻礙；更換傳動部分。怎樣知道UV檢測器的流動池被污染了？用工作站診斷功能作池體測試，是比較流動池二極管的樣品邊與參考邊所測到的氘燈強度。強度比值的結果(樣品:參考)是測試流動池吸收的光的量。測試可用來檢驗流動池窗口是臟了或者被污染了。用水通過流動池作測試。工作站自動計算強度比值。強度比取決于流動池窗口污染的程度。以及所用的流動池的類型。理想的比值是1，比值為7或更大也可以接受。比值較低，說明流動池窗口有一些涂層或者流動池里有氣泡。更多的光被流動池吸收。用水沖洗流通池以去除污染

21、物。這樣可以來代替溶劑，用水來沖洗。這時樣品溶解在水中。為什么我的燈點不著？最大的可能是它已經超過使用期限了或者壞了。根據(jù)檢測器類型作診斷測試。如果需要，更換燈。如果問題依然存在，請聯(lián)系Agilent公司。什么時候需要更換泵密封件？更換泵密封件有一個規(guī)則。建議每一個液相使用者建立一個更換泵密封件的預先維護時間表。這要以泵的使用情況和流動相兩項為準。由于它們的磨損本性，含鹽的緩沖液會大大加速密封墊和柱塞的磨損。當泵頭柱塞下面檢查出漏液時，當保留時間不穩(wěn)定時，或者當系統(tǒng)的壓力不穩(wěn)定時，就應更換密封墊。用什么溶劑沖洗LC管線，以去除污染？已發(fā)現(xiàn)各含50%的IPA和水的混合溶液，能有效地除去HPLC系

22、統(tǒng)的溶液管線里，毛細管里，以及流動池里的污染物。水能清除鹽類和其他的污染物，IPA能清除極性和非極性的污染物。準備一瓶各含50%的IPA和水的混合溶劑，并對溶劑脫氣。將所有的溶劑管線連到這個瓶子里(例如連四元泵的A,B,C和D溶劑管線，連二元泵的A和B溶劑管線，連單元泵的溶劑管線)。可以關掉所有檢測器的燈，如果不希望IPA和水的混合液通過柱子時，可以在柱子的位置安裝一個兩通接頭替換它。更換柱塞密封墊之后推薦什么樣的插入或磨合過程？*注意這個過程適用于標準密封墊而非正向密封墊。這種過程會損壞正向密封墊。當新的密封墊安裝之后，初始的磨合過程仍然是需要的。Pump ISOPROPANOL經受至少35

23、0 bar的背壓15-30分鐘。此時最好使用一根舊柱子或者一個流量阻尼器。為示差折光檢測器選擇正確的泵，要考慮哪些因素？為了獲得最好的性能，示差需要混合溶液，建議首選單元泵。用梯度泵混合溶劑會使基線不穩(wěn)定。如果是二元泵，只用一個通道，將另一個通道關閉。在四元泵的情況下，只接一個通道，并將比例閥旁路關掉。這需要一個附加的接頭(part no. 0100-1847) 接到主動進口閥上，直接將溶劑管線連到進口閥上 (代替接到比例閥上)。樣品打進去了但沒有收集到數(shù)據(jù)。可能是什么問題？化學工作站軟件有一個在線的圖譜窗口，顯示從所連的檢測器收到的信號。當樣品打進去之后，一根紅色的垂直起始線就會顯示在在線圖

24、譜窗口中。紅色線表明軟件開始收集原始數(shù)據(jù)。如果這根紅色線不出現(xiàn)，數(shù)據(jù)將不會被收集。檢查所有連接到1100/1200系列LC的CAN電纜。如果安裝了A/D轉換器(35900 ADC)，在ADC與一個1100/1200組件之間要連一根遙控電纜。我使用PSI的壓力單位讀數(shù)，如何與BAR轉換？14.6 psi = 1 bar易彎折的不銹鋼毛細管線外表面上的顏色標記是什么意思？Agilent 易彎折的不銹鋼毛細管線外表面上的顏色標記，指示管子的內徑 (ID) 紅色 指示內徑為 0.12 mm 或者 0.005 英寸。綠色 指示內徑為 0.17 mm.或者 0.007 英寸。藍色 指示內徑為 0.25 m

25、m 或者 0.010英寸。桔色 指示內徑為 0.50 mm 或者 0.020 英寸。我的1100/1200LC組件顯示一個錯誤Timeout Error。怎么出現(xiàn)這個錯誤的？G1314A/B VWD時間溢出錯誤：由于在未準備好的情況下，VWD不能初始化一次運行，就出現(xiàn)這個錯誤。未準備好的狀態(tài)可以從系統(tǒng)中任一組件產生。檢查所有組件的準備狀態(tài)。最普通的原因是，柱溫箱的溫度設置，它保持有困難，或連到A/D轉換器或非Agilent產品的遙控電纜松動 。一旦未準備好的情況被糾正，就可以簡單的再次啟動運行。如果不能糾正問題，建議聯(lián)系Agilent公司技術支持。什么時候要使用連續(xù)密封墊清洗選件？高濃度的緩蝕

26、液會減少四元泵的密封墊及柱塞的壽命。密封墊清洗選項，用清洗溶液沖洗密封墊的另一側，以維護密封墊的壽命。 如果緩蝕液的濃度為0.01 M或更高，常時間地用于四元泵，則強力推薦使用密封墊清洗選項，作為二元泵的通用部件。連續(xù)密封墊清洗選項可用訂貨號01018-68722訂貨（它包括用于一個泵頭的零件）。密封墊清洗選項，包括一個支持環(huán)，第二級密封墊，密封膜, 以及每個柱塞一側的密封墊固定件。清洗瓶裝水/異丙醇(90/10vol%)溶液放在四元泵上邊的溶劑瓶箱里，重力將使溶液流過泵頭。可以將1100/1200單元泵升級為四元泵嗎？可以。G1352A是將一臺1100/1200單元泵升級為四元泵所需要的產品

27、號。這個套件包括比例閥，溶劑瓶，過濾頭和管線。蒸發(fā)光散射檢測法的好處是什么？實質上可以檢測到所有的化合物。檢測基于所有分析物的通用屬性，不需要存在發(fā)色基團和電活化基團等。檢測器的響應直接與洗提過的化合物質量相關。可以獲得無法識別化合物的精確定量分析數(shù)據(jù)。安捷倫1200系列ELSD和安捷倫RRLC是否兼容？安捷倫1200系列ELSD完全兼容于高分離度液相色譜（RRLC）（寬度為1秒或以上）的快速發(fā)展應用領域。在RRLC色譜柱中，使用填裝亞二微米微粒的色譜柱。支持專利氣體的聚焦，聚焦樣品分子，改進的光學頭設計讓檢測器準備好處理RRLC中生成的快速色譜圖。柱室溫度最高可設置為100C，以便優(yōu)化分離度

28、和最小化背壓。我們是否需要利用額外的硬件把安捷倫1200系列ELSD連接至1200系列HPLC和數(shù)據(jù)系統(tǒng)？不需要。安捷倫1200系列 ELSD可以直接連接至安捷倫1200系列HPLC，并且可以通過RS232電纜直接與安捷倫色譜數(shù)據(jù)進行通信。安捷倫1200系列ELSD涵蓋哪些HPLC技術或模式？安捷倫1200系列ELSD帶有四個霧化器，因而可以使用從5 L/min 到5 mL/min的流速。因此，它適用于所有的HPLC模式，包括 RRLC（只需簡單地更換霧化器）。安捷倫ELSD與UV或FLD檢測器相比如何？相比于其它檢測類型，例如 UV 或者熒光（FLD），蒸發(fā)光散射（ELSD）檢測器更加通用，

29、它能夠檢測揮發(fā)性低于流動相的任何化合物。通過 UV 或者熒光檢測，用戶根本無法確定是否檢測到樣品中的所有化合物。蒸發(fā)光散射檢測法解決了這種不確定性。推薦哪些適用于安捷倫1200系列ELSD的霧化氣？建議安捷倫1200系列ELSD將分析級氮氣用作霧化。低溫蒸發(fā)對于安捷倫1200系列ELSD有什么幫助？安捷倫1200系列 ELSD中的低溫技術把揮發(fā)作用降低到最低程度，并且能夠顯著提高靈敏性。什么是蒸發(fā)光散射檢測器或ELSD？對于揮發(fā)性低于流動相的化合物，蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）能夠有效地執(zhí)行敏感檢測。 它提供了一種在等度和梯度條件下實質上通用的測量法，獨立于化合物的吸收、熒光性或電活性。低溫蒸

30、發(fā)技術能夠檢測半揮發(fā)性性和低水平感熱性化合物。如何從化學工作站控制1100系列自動取樣器恒溫器？1100 溫控自動取樣器設定點LC化學工作站，A.05.0x-B.02.01Sr-1版本1.拉下【View(視圖)】菜單，并且選擇【Method and Run Contro(方法和運行控制)】2. .拉下【Instrument(儀器)】菜單，然后選擇【More Injector(更多注射器)】3.從【More Injector(更多注射器)】菜單，選擇【Sample Thermostat(樣品恒溫器)】4.出現(xiàn)【Sample Thermostat(樣品恒溫器)】對話框，讓您指定注射器托盤中的樣品溫

31、度。恒溫器：Volumes（體積）組讓您ON（打開）和OFF（關閉）溫度控制器。溫度：Temperature（溫度）組讓您設置溫度，或者OFF（關閉）溫度控制器。At Power On（接通電源時）：選擇Turn Thermostat on（打開恒溫器），當儀器接通電源時打開恒溫器。Automatic Turn On（自動打開）：您可以設置用于自動打開燈的日期和時間。選擇 Turn thermostat on at（打開恒溫器的日期和時間）：啟用日期和時間字段，并且在適當?shù)淖侄沃休斎胫付ǜ袷降娜掌诤蜁r間。什么是1100/1200系列FLD燈強度測試？能否介紹化學工作站的使用步驟？燈強度測試通過

32、參照二極管掃描強度光譜，波長范圍為200到650 nm，共分三個步驟。掃描圖保存在診斷緩沖器中，并且在圖形窗口中顯示出來。不執(zhí)行進一步的評估。為了消除由于吸收溶劑而帶來的影響，執(zhí)行這種測試時，流通池中應裝有水；可以通過化學工作站軟件執(zhí)行FLD燈強度測試。1.如果尚未顯示出來，請下拉View(視圖)菜單，然后選擇Diagnosis(診斷)2.拉下Diagnosis(診斷)菜單，然后選擇Tests(測試)3.選擇Detector(檢測器)選項卡和FLD Lamp Intensity Test(FLD燈強度測試)4.通過選擇Start(開始)啟動FLD燈強度測試如何為手控式1100 HPLC注射器挑

33、選右轉子密封圈？許多 Rheodyne 手控閥中的標準轉子密封圈用 Vespel 混合物制成。這種聚酰亞胺具有低磨損度和高化學穩(wěn)定性等特點。Vespel可接受的pH值范圍是0到10。堿性高于pH10的溶液會溶解Vespel，這會損壞轉子密封圈。如果使用堿性高于pH 10的溶液，Rheodyne 建議使用PEEK（聚醚醚酮）混合物制成的轉子密封圈。PEEK（聚醚醚酮）具有高化學穩(wěn)定性和通用性，可接受從0到14的整個pH值范圍。Tefzel混合物制成的轉子密封圈可能適用于某些用途。正宗的Rheodyne轉子密封圈可提供無與倫比的性能和產品使用壽命。在四分之一的世紀里，這些密封圈很好地滿足了色譜儀操

34、作員的需求并且超出了他們的期望。這種轉子密封圈經過嚴格的制造和質量保證過程之后，才被安裝到我們的閥門上或提供給我們的客戶。只有正宗的Rheodyne部件才能確保Rheodyne閥具有持續(xù)精確的性能。Rheodyne工程師開發(fā)出嚴格的產品規(guī)格和設計，包括工廠安裝的轉子密封圈，有助于優(yōu)化轉子密封圈的效率。Rheodyne轉子密封圈必須通過苛刻得讓人難以置信的性能標準。Rheodyne轉子密封圈由采用專利技術的聚合物制成，這種材料經過特別配制而成，可在0到14的整個pH值范圍內抵抗反復的化學和物理應力。本人的1100折光率檢測器出現(xiàn)不平衡二極管錯誤。為什么會這樣？折光率檢測器二極管平衡值超出運行范圍

35、，因此被報告為發(fā)生錯誤。利用正在使用的流動相沖洗參比池。執(zhí)行RID光學平衡程序。H3PO4清洗HPLC色譜柱有什么目的？經證明，磷酸洗滌劑能有效減少由于樣品與HPLC系統(tǒng)中的金屬絡合而導致的拖尾。一般建議用1% 磷酸來清洗系統(tǒng)和色譜柱，以此消除這種脫尾現(xiàn)象，這很有效。在安捷倫ZORBAX StableBond反相HPLC 產品上使用這些推薦的清洗條件會取得非常理想的效果。StableBond HPLC色譜柱在低PH條件下性能非常穩(wěn)定- SB-C18色譜柱在0.8 PH值和9.0PH條件下可保持穩(wěn)定。如何肯定峰拖尾是由于金屬絡合而引起的？只要辨別N或O原子上的孤對電子能否與金屬螯合并形成5或者6

36、元環(huán)。金屬絡合物是一個普遍被忽視的峰拖尾成因，每個HPLC系統(tǒng)中都存在金屬。如果色譜圖中的一個峰出現(xiàn)拖尾，但是其它峰正常，可能出現(xiàn)什么故障？由于我不了解樣品的化學性和有關流動相或色譜柱的詳細情況，所以我很難回答這個問題。峰拖尾可能由多種原因引起，在回答您的問題之前，我想問您幾個有關樣品的問題。由于您色譜圖中大多數(shù)峰的形狀都是完好的，只有一個峰出現(xiàn)拖尾，我猜想色譜柱和樣品的化學性引起二次反應，從而導致峰拖尾。 更改流動相或選擇另一個HPLC色譜柱能夠減少這些二次反應。如何利用本人的安捷倫1100/1200制備泵來優(yōu)化密封墊沖洗選購件？為了防止過度加熱泵，必須根據(jù)流動相的特性和持續(xù)時間來操作密封墊

37、沖洗選購件。附帶文件提供了一些有關密封墊沖洗問題的解釋說明。請參考附帶文件。為了使用LC診斷軟件，應該如何連接HPLC和非安捷倫軟件？可以通過一根串行電纜實現(xiàn)控制計算機和儀器之間的通信。 可以供應一根8米長的RS-232電纜（零件號5181-1561）。為什么為LC發(fā)行新的LC診斷軟件？實現(xiàn)獨立性應用，并且向受化學工作站或者非安捷倫軟件控制的所有LC提供相同的診斷能力適應測試，并且為各個級別用戶提供一種有效的診斷工具。為研發(fā)（R&D）的開發(fā)者和最終生產測試的工程師提供一個獨特的SW構架，為現(xiàn)場工程師和最終用戶提供支持。安捷倫1200系列二元泵SL中使用的壓力測試（Pressure Test）是

38、什么？壓力測試是一種快速的嵌入式測試，專門用來驗證系統(tǒng)的密封性。 這種測試將監(jiān)控流量剖面，與此同時二元泵SL將傳輸一個六角空白螺母。 結果將顯示泵的泄漏速度，并且提供關于二元泵SL和六角空白螺母出口球閥之間的系統(tǒng)密封性信息。六角空白螺母可以放置于泵的放氣閥和檢測器入口之間的任意位置，對系統(tǒng)的指定部位進行壓力測試。請注意切勿將流體槽包含在壓力測試內，因為施加的壓力可能會導致許多類型的檢測器流體槽（例如FLD、RID等）永久性泄漏或爆裂。如何處理HPLC中的鹽帶來的問題?現(xiàn)在有很多問題是由于用戶的流動相含有鹽成分造成的。建議用戶在清洗時將水加熱后再沖洗，這樣既可以將鹽溶解的更好，也可以溶解一些脂溶

39、性物質，會減少很多問題的發(fā)生，包括管路堵塞，鹽析出，基線噪音HPLC出“鬼峰”，如何排除？HPLC出“鬼峰” 大部分發(fā)生在反相體系（甲醇， 乙腈， 水），是溶劑被污染造成的。還有一種原因是進樣系統(tǒng)有殘留。-讓用戶運行一個空白梯度洗脫的方法，從100%水過渡到100%有機溶劑，如果“鬼峰”出現(xiàn)，可以判斷是水被污染了（水中有藻類Algae的污染）。如果用戶是使用純水機制作的水，這種現(xiàn)象是最常見的。建議更換“娃哈哈”純凈水。-進樣系統(tǒng)有殘留很容易判斷，建議用戶加強或改善洗針程序，延長沖洗Loop的時間。紫外檢測器（DAD，VWD）信號波動大，噪音大，光強度檢測通不過，如何處理？引起這種問題的因素很多

40、，要一步一步排除，直到找到問題真正原因。-確定柱前壓穩(wěn)定；溶劑（高純度的有機溶劑，水）使用正確。流動相脫氣良好（請參考第2條）；-檢查檢測器的氘燈是否已經到了使用壽命，是否更換過新的氘燈。DAD光強度測試可見光不通過，也可能是氘燈問題，因為氘燈用久了外部發(fā)黑擋住了可見光的通過。-用異丙醇清洗整個系統(tǒng)，更換過濾芯，排除污染源。-清洗流通池和有關的透鏡（需要工程師去現(xiàn)場服務）自動進樣器的針頭或針座經常堵塞，如何處理？1.如果針頭或針座經常堵塞，請檢查您使用的進樣瓶隔墊。質量不好和已經破損的隔墊易產生很多碎屑。進樣時，這些細小的碎屑很容易將針頭，針座堵塞。使用Agilent的正規(guī)隔墊并且經常更換舊的

41、隔墊就可以避免這類問題。2.如果您的樣品經過離心處理，用針頭吸取上清液進樣，請將針頭進樣位置提高。3.如果針頭或針座發(fā)生了堵塞，可以用以下簡單的辦法處理：通過Chemstation診斷界面的更換針頭，針座的程序將其取下，反接到泵的出口，用反吹的辦法將其疏通。大部分是可以順利解決的。峰面積或峰高重現(xiàn)性不好，偏差大?如果HPLC系統(tǒng)配有自動進樣器，這種情況主要是自動進樣器的問題。-首先確認柱前壓是穩(wěn)定的，保留時間的重現(xiàn)性號（參見第1,2條）-將自動進樣器的抽樣速度降低到50ul/min以下（默認值是200ul/min）.您的樣品有可能粘度較大，降低抽樣速度可以極大地改善粘度較大的樣品的進樣精度。-

42、如果進樣針或針座有輕微的堵塞，對進樣精度的影響也非常大。請參考第5條的處理辦法。-如果是手動進樣器，請確認一定要使用Agilent配的標準進樣針，且進樣器的廢液出口要與進樣口水平，避免虹吸的影響。如果是滿Loop進樣，建議注射5倍Loop的進樣體積。排氣閥里的過濾芯經常堵塞?如果是排氣閥里的過濾芯堵塞引起的壓力升高，請仔細檢查一下?lián)Q下來的過濾芯。正常情況下，一個過濾芯可以使用6個月左右，如果經常更換就有問題。-如果過濾芯的顏色發(fā)黑，說明是被柱塞密封墊磨損下來的碎屑堵塞的，請確認流動相使用的緩沖鹽的濃度是否太高了，是否使用了柱塞清洗裝置。緩沖液在泵頭內部析出的鹽的結晶會加速密封墊的磨損。-如果過

43、濾芯的顏色是乳白色的，非常干凈。說明過濾芯很有可能是被流動相污染了。請檢查一下您是否使用了過期的溶劑（水，有機溶劑），或質量不好的溶劑。請馬上更換別的品牌的溶劑或使用純凈水（推薦：娃哈哈純凈水）。 如果流動相經過了濾膜過濾，請確認是否使用了正確的，優(yōu)質的濾膜。建議您先不要使用濾膜過濾流動相，看看是否可以解決過濾芯堵塞的問題。-如果存放緩沖液或水的溶劑瓶不經常清洗，該通路會生長藻類，藻類會污染整個流路系統(tǒng)和脫氣機的腔體，藻類及其代謝產物也會堵塞過濾芯。如果發(fā)生了這種情況，建議用60度的熱水清洗溶劑瓶，并用異丙醇清洗整個管路和脫氣機。建議以后一定要用棕色瓶存放緩沖溶液，避光，并且定期清洗溶劑瓶。-

44、用戶換了白頭壓力升高很快，還可以加一點，讓用戶檢查一下白頭是否太長，因為太長的白頭如果不切平加進去壓力也會升高很快。柱前壓不穩(wěn)定，壓力上下波動?引起這種故障最常見的原因是泵里有氣泡，建議用以下的方法排除。-如果您的系統(tǒng)沒有配置脫氣機（二元泵），溶劑一定要經常超聲脫氣。-脫氣機的效率不夠，特別是用甲醇/水的系統(tǒng)最容易發(fā)生?？梢詫，B通道串聯(lián)；C，D通道串聯(lián)用來延長脫氣的時間，效果非常明顯。主動閥閥芯污染?？梢詫㈤y芯取下，用甲醇超聲清洗。保留時間重現(xiàn)性不好?保留時間不重現(xiàn)還會影響到峰面積的重現(xiàn)性，導致實驗無法進行。引起這種現(xiàn)象因素很多，建議檢查以下幾個方面：確認流動相是新鮮配置的，比例沒有錯誤；

45、確認色譜柱是好的；檢查一下溶劑瓶里的溶劑過濾器沒有長菌，沒有被堵塞；如果您使用梯度洗脫方法，請確認平衡時間足夠長；仔細觀察柱前壓的變化，如果壓力穩(wěn)定，就可以判斷泵的系統(tǒng)沒有問題，請更換新的色譜柱試試；如果是壓力不穩(wěn)定，一定會影響保留時間，解決方法請參見第2條。HPLC維護（安捷倫）一、如何處理HPLC中的鹽帶來的問題？很多問題是由于流動相含有鹽成分造成的。建議在清洗時將水加熱后再沖洗，這樣既可以將鹽溶解的更好，也可以溶解一些脂溶性物質，會減少很多問題的發(fā)生,包括管路堵塞,鹽析出，基線噪音二、安捷倫1100及1200液相泵的日常維護泵是液相色譜的核心，泵將流動相從溶劑瓶輸送到液相流路系統(tǒng)中，并要

46、在高壓下保持流量和壓力的穩(wěn)定。泵的狀態(tài)正常是液相色譜準確分析的基礎，所以平日一定要重視對泵的維護。下面就安捷倫1100/1200液相色譜泵的日常維護進行簡要的介紹。1.流動相的準備為了防止顆粒性物質對泵組件的磨損，流動相（特別是水相）應該新鮮配置并且過濾。上機前對流動相進行適當?shù)某暶摎?，以保證更好的在線脫氣和在線混合的效果。2.比例閥溶劑通道的分配四元泵的比例閥有A、B、C、D四個通道，建議將鹽溶液接在下面的通道（A或D），將有機溶劑接在上面的通道（B或C）上,也就是有機通道最好在鹽溶液通道的上面。且建議用水定期沖洗所有比例閥通道除去可能在閥口析出的鹽結晶。3.過濾白頭的維護過濾白頭位于排氣

47、閥內，是一種聚四氟乙烯材質的微孔過濾芯，用于過濾流動相中的微粒，是經常需要維護的地方。當系統(tǒng)壓力有異常增高時，首先需要檢查過濾白頭是否阻塞了。判斷的方法是：打開排氣閥，以純水作流動相，將流速設為5mL/min，如果泵壓超過10bar，則說明過濾白頭需要更換了。對過濾白頭的預防性維護通?？梢允?2個月更換1次，更換時同時檢查一下過濾白頭前面的密封金墊，如果發(fā)現(xiàn)變形，也應及時更換。如果過濾白頭更換過于頻繁，則需要認真檢查一下流動相的品質，確保流動相上機前過濾，確保使用了合適的過濾膜。如果流動相有長菌現(xiàn)象，除了配置新的溶劑，還應對相應的溶劑管線和脫氣機通道進行徹底的清洗。4.柱塞桿與柱塞密封圈的維護

48、柱塞密封圈套在柱塞桿上用于隔離泵與外界，工作時，它和柱塞桿進行頻繁的往復摩擦，使用一段時間后，會有一定的磨損，因而密封圈需要定期更換以保證系統(tǒng)的密封性。更換活塞密封墊時檢查活塞桿上是否有劃痕。有劃痕的活塞將導致輕度滲漏，并降低密封墊的使用壽命。應盡早更換有劃痕的活塞。柱塞密封圈有反相和正相之分，反相密封圈為黑色，石墨Teflon材質；正相呈橘黃色，聚乙烯材質，更適用于正相溶劑。1100/1200標配的是反相密封圈，正相應用時，需要更換為正相密封圈。鹽溶液對柱塞密封圈的壽命有著很大的影響，使用有鹽溶液作為流動相的體系時，要注意鹽溶液通道的清洗，千萬不能讓鹽溶液在系統(tǒng)中過夜，常常一個晚上析出的鹽粒

49、就會造成系統(tǒng)堵塞，對泵產生較大的損害。為了延長密封圈和柱塞桿的壽命，在經常使用較高濃度的緩沖鹽溶液的情況下，建議安裝柱塞清洗附件。柱塞清洗的原理在于：柱塞泵在工作時，雖然有密封圈密封，但由于毛細作用，還是會有一些流動相滲入到密封圈與柱塞桿之間。如果流動相中有緩沖鹽，當柱塞桿壁上的溶劑揮發(fā)掉后，極細小的鹽粒留了下來。這樣的鹽粒就象砂紙一樣磨損著柱塞桿和柱塞密封圈，會大大降低柱塞桿和密封圈的壽命。柱塞清洗附件是在柱塞桿的中間加入了一個可以有水流過的腔體，通過水不斷的流動，就可以帶走滲進來的鹽溶液，防止了鹽粒的析出，保護了柱塞桿和柱塞密封圈。通常我們往柱塞清洗的水里加入10的異丙醇，可以減小水的張力

50、，便于清洗液流動，并且抑制長菌。但有一點要注意的是，裝有柱塞清洗附件的泵頭，清洗液流量可以很小（如沒分鐘幾滴），但一定不要讓清洗通道里干涸，如果水流光了，應該盡快換上新的溶液。否則會減少柱塞桿和密封圈的壽命。5.主動閥的維護主動閥是流動相進入泵體的門戶。如果我們發(fā)現(xiàn)流量為零，流量不穩(wěn)，或泵壓波動特別大，常常都是因為主動閥漏或是堵了。主動閥里面裝有一個小的單向閥芯，我們將其取下，在異丙醇內超聲清洗一下，一般能解決這樣的問題。如果超聲不能解決問題的話，可以更換該閥芯。對于經常使用緩沖鹽體系的用戶，手頭常備一個這樣的閥芯是非常有用的，往往可以及時解決問題，大大的降低停機帶來的損失。6.出口閥的維護出

51、口閥內部也有，如果有鹽?；蚱渌s質滲入其中，也會造成出口閥的堵或漏，常常表現(xiàn)為壓力的異常波動。通常我們可以用異丙醇或60度左右的熱水沖洗系統(tǒng)，如果無效，在異丙醇中超聲清洗它常常會解決這樣的問題。三、保留時間重現(xiàn)性不好，可能的原因有哪些？保留時間不重現(xiàn)還會影響到峰面積的重現(xiàn)性，導致實驗無法進行。引起這種現(xiàn)象因素很多，建議檢查以下幾個方面：-確認流動相是新鮮配置的，比例沒有錯誤。-確認色譜柱是好的。-檢查一下溶劑瓶里的溶劑過濾器沒有長菌，沒有被堵塞。-如果使用梯度洗脫方法，請確認平衡時間足夠長。-仔細觀察柱前壓的變化，如果壓力穩(wěn)定，就可以判斷泵的系統(tǒng)沒有問題，請更換新的色譜柱試試。-如果是壓力不穩(wěn)定，一定會影響保留時間。四、柱前壓不穩(wěn)定，壓力上下波動的常見原因？引起這種故障