總醫(yī)院可行性論證報告書

1、. 冀中能源峰峰集團總醫(yī)院 年度新技術(shù)、新項目 可行性論證報告書新技術(shù)項目名稱：血管內(nèi)皮生長因子（VEGF） 測定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法） 項 目 負(fù) 責(zé) 人：_ 彭吉芳 科 室：_檢驗科_ _審 核 日 期：_2017.07._ _冀中能源峰峰集團總醫(yī)院醫(yī)務(wù)部醫(yī)療新技術(shù)項目名稱血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）測定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）項目水平國內(nèi)先進水平.省/市先進水平 院內(nèi)先進水平項目負(fù)責(zé)人姓 名彭吉芳性 別女年 齡54專業(yè)技術(shù)職稱主任檢驗技師主攻方向免疫新技術(shù)、新項目基本情況【產(chǎn)品名稱】通用名稱：血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)測定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）英文名稱：Diagnostic Kit for V

2、ascular Endothelial Growth Factor (Chemiluminescent Immunoassay)【包裝規(guī)格】96 人份/盒【預(yù)期用途】 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)測定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）用于體外定量測定人血清中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的含量。血管內(nèi)皮生長因子是一種分子量 3446KD 的二聚 體可溶性糖蛋白。正常人血清中血管內(nèi)皮生長因子含量甚 微，研究發(fā)現(xiàn) VEGF 在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過程中具 有十分重要的作用，因此 VEGF 在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的活動性和早期診斷等方面有重要的臨床意義。【檢驗原理】本試劑盒采用雙抗體夾心法定量測定人血清中VEGF 的含量

3、。用一株單抗包被微孔板制成固相抗體，用另一株單抗標(biāo)記辣根過氧化物酶（HRP）制成酶標(biāo)記物。 在包被板微孔中加入含有 VEGF 的標(biāo)準(zhǔn)品或待測血清及 酶標(biāo)記物，溫育后即形成固相抗體抗原酶標(biāo)抗體的復(fù) 合物，充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液，于 310 分鐘內(nèi) 測定其發(fā)光強度（RLU 值），樣品的 RLU 值隨 VEGF 濃度的增加而升高，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可算出樣品中 VEGF的含量?！局饕M成成分】組分名稱規(guī)格說明1.測 VEGF 預(yù)包被板96 人份包被抗VEGF 抗體的化學(xué)發(fā)光板含有辣根過氧化物2.測 VEGF 酶結(jié)合物6mL酶標(biāo)記抗VEGF 抗體的溶液3.VEGF 校準(zhǔn)品(S0-S5)0.5mL*6

4、 瓶含有不同濃度 VEGF的 PBS 緩沖液4.化學(xué)發(fā)光底物 A 液3mL/瓶含魯米諾的緩沖液5.化學(xué)發(fā)光底物 B 液3mL/瓶含過氧化脲的緩沖液6.濃縮洗液（20）30mL/瓶20PBS 稀釋液注：不同批號和不同廠家的試劑盒內(nèi)各組份不可以互換混用。試劑盒不包含試驗過程所需的蒸餾水或去離子水， 用戶需自行提供。 校準(zhǔn)品 (S0-S5) 濃度為 ：0pg/ml 、 50pg/mL 、 100pg/mL、200pg/mL、400pg/mL、800pg/mL，可溯源到國 際約定校準(zhǔn)品世界衛(wèi)生組織英國國家生物制品檢定所的 重組人血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）WHO/NIBSC-UK-EN63QG?！緝Υ?/p>

5、條件及有效期】1. 試劑盒于 28避光保存，有效期 12 個月。2. 試劑盒開封后于 28避光保存，有效期 30 天。 【適用儀器】適用于中生百克 BK-L96C 化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。 【樣本要求】血清樣本應(yīng)空腹采集，并于采集后 24 小時內(nèi)分離完畢；樣本在檢測前可置于 28環(huán)境下密封保存 7 天，若不能及時檢測，應(yīng)密封置于-20保存，一個月內(nèi)有效。 忌反復(fù)凍融，樣本運輸過程中也應(yīng)符合此要求。經(jīng)研究 20mg/dL 抗壞血酸、100mg/dL 血色素、60mg/dL膽紅素、2000mg/dL 人血清白蛋白、500mg/dL 甘油三酯 對檢測結(jié)果無影響，但為了確保檢測的準(zhǔn)確性，應(yīng)該盡量 避免使用

6、高度溶血和高血脂的樣本。新技術(shù)、新項目臨床應(yīng)用的意義、范圍、適應(yīng)癥、禁忌癥項目臨床意義：早期：在腫瘤發(fā)生過程中即可及早發(fā)現(xiàn)； 廣譜：可以為各種血管新生相關(guān)疾病，如腫瘤治療康復(fù)過程的動態(tài)監(jiān)測、療效評 價、預(yù)后評估等提供輔助依據(jù)；在健康體檢對各種實體腫瘤進行廣譜篩查； 量化：明確提供單位血清中的VEGF標(biāo)記物的濃度，檢測范圍優(yōu)于ELISA,反應(yīng)時間1小時，優(yōu)于同類產(chǎn)品； 動態(tài)：通過不同時期標(biāo)記物濃度的變化透視疾病的變化； 個性化：用患者自身的數(shù)據(jù)變化進行病情的分析、評價 ；適應(yīng)癥：VEGF試劑盒與幾種癌癥的監(jiān)測意義早期篩查療效監(jiān)測預(yù)后評估肺癌胃癌肝癌甲狀腺癌宮頸癌卵巢癌結(jié)腸癌前列腺癌胰腺癌白血病目

7、的： VEGF近些年被作為一種能反應(yīng)腫瘤發(fā)生發(fā)展變化的物質(zhì)，研究較為廣泛。在檢索英文280余篇，中文230余篇的VEGF相關(guān)文獻中，95%以上的文獻證實了腫瘤病人血清VEGF水平增高的事實。腫瘤類型幾乎涵蓋了目前臨床大部分實體腫瘤和部分非實體腫瘤。VEGF被認(rèn)為是最有意義的血液腫瘤篩查的標(biāo)記物意義： 早期：在腫瘤發(fā)生過程中即可及早發(fā)現(xiàn)； 廣譜：可以為各種血管新生相關(guān)疾病，如腫瘤治療康復(fù)過程的動態(tài)監(jiān)測、療效評價、預(yù)后評估等提供輔助依據(jù)；在健康體檢對各種實體腫瘤進行廣譜篩查； 量化：明確提供單位血清中的VEGF標(biāo)記物的濃度，檢測范圍優(yōu)于ELISA,反應(yīng)時間1小時，優(yōu)于同類產(chǎn)品； 動態(tài)：通過不同時期

8、標(biāo)記物濃度的變化透視疾病的變化； 個性化：用患者自身的數(shù)據(jù)變化進行病情的分析、評價 ；新技術(shù)、新項目分析（理論性、安全性、有效性、適宜性、可行性）與效益預(yù)測血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）測定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）采用化學(xué)發(fā)光法對人血清中VEGF的含量進行檢測，具有快速、準(zhǔn)確、操作方法簡便等優(yōu)點。在臨床試驗中，試劑盒檢測結(jié)果與病理結(jié)果的陽性符合率為79.4%，陰性符合率為97.3%。表明試劑盒對癌腫的治療效果評價和輔助監(jiān)測具有重要意義。另外試劑盒采用化學(xué)發(fā)光法對血清中VEGF含量進行檢測該方法學(xué)和試劑盒檢測水平處于國內(nèi)領(lǐng)先地位，目前該試劑盒在國內(nèi)僅此一家。在這一檢測方面是處于前沿領(lǐng)先地位的。新技術(shù)操

9、作規(guī)范、操作規(guī)程1. 試劑配制：所有的試劑應(yīng)在使用前置于室溫平衡至少30分鐘。取濃縮洗液，用蒸餾水或去離子水將濃縮洗液（20）稀釋20倍，充分混勻備用。發(fā)光底物A液和發(fā)光底物B液按1：1比例配成發(fā)光底物工作液，充分混勻備用。校準(zhǔn)品已稀釋好，不需要再進行稀釋。2. 試驗過程：事先做好實驗設(shè)計，準(zhǔn)備好板條，指定孔位，校準(zhǔn)品需做復(fù)孔；試劑盒液體組份使用前應(yīng)充分搖勻。用微量加樣器取50mL校準(zhǔn)品、樣品到相應(yīng)的包被板微孔中。每孔加入50mL酶結(jié)合物，充分混合30秒。用封板模封好板孔，37溫育60分鐘。工作洗液清洗5次后，在吸水紙上拍干板孔中殘留的液體。向包被板每孔中加入50mL發(fā)光底物工作液，充分混合，室溫（18 25）避光反應(yīng)3分鐘。加入發(fā)光底物后3-10分鐘內(nèi)檢測，讀數(shù)時間設(shè)定為1秒/孔。診療指南：1、VEGF正常參考范圍為0-160pg/ml正常，處于腫瘤風(fēng)險安全期內(nèi)。建議12個月內(nèi)復(fù)檢。2、VEGF濃度值在160-400pg/ml輕度異常，提示有患腫瘤風(fēng)險。需排除其他影響因素，結(jié)合其他腫瘤標(biāo)記物結(jié)果給出結(jié)論。建議一個月復(fù)檢1次，動態(tài)監(jiān)測2次，根據(jù)動態(tài)監(jiān)測綜合評定。3、VEGF濃度值400pg/ml異常，提示有