家兔氣管插管實(shí)驗(yàn)[技術(shù)相關(guān)]

1、兔的固定方法背位固定用棉繩拉住兔的上門(mén)牙齒固定于手術(shù)臺(tái)柱上。也可用兔頭架，先將兔頸嵌入半圓形鐵圈，再將兔嘴套入可調(diào)節(jié)鐵環(huán)內(nèi)。擰緊固定螺絲，再將長(zhǎng)柄固定于手術(shù)臺(tái)的定柱上（四）常用手術(shù)的基本操作1.備皮（1）剪毛法：常用于急性實(shí)驗(yàn)。用一般彎剪刀貼皮膚依次將手術(shù)范圍內(nèi)的皮毛剪去。勿用手提起毛剪之，以免剪破皮膚。（2）拔毛法：適用于大、小白鼠和家兔耳緣靜脈，以及后肢皮下靜脈的注射、取血等。（3）剃毛法：用于大動(dòng)物的慢性實(shí)驗(yàn)，用電剃刀順著毛方向剃毛。（4）脫毛法：用于無(wú)菌手術(shù)野備皮。小動(dòng)物脫毛，脫毛劑配方：硫化鈉8g，淀粉7g，糖4g，甘油5g，硼酸1g，水75g，調(diào)成糊狀。用法：先將手術(shù)野的毛剪短，后

2、用棉球涂一薄層脫毛劑，23分鐘后用溫水洗凈，擦干，涂一薄層油脂。鼠類亦可不用剪毛，直接涂脫毛劑。狗等大動(dòng)物脫毛，配方：硫化堿10g，生石灰15g，加水至100ml拌勻。用法：術(shù)者戴耐酸手套，用紗布涂之，使狗毛浸透，等23分鐘后洗凈擦干，涂一薄層油脂。注意切不可在脫毛前用水弄濕脫毛部位，以免脫毛劑滲入毛根造成炎癥。2.消毒常用于慢性實(shí)驗(yàn)，一般用3%碘酊和75%乙醇常規(guī)法消毒。（五）常用動(dòng)物的給藥方法及采血方法1.常用動(dòng)物的給藥方法（1）淋巴囊內(nèi)注射法 常用于蟾蜍。注入藥物易于吸收。方法為左手取動(dòng)物，右手持注射器以150角斜挑刺入尾骨兩側(cè)皮下淋巴囊，緩慢推入，量宜小于0.5ml，因動(dòng)物皮薄，彈性差

3、，拔針后應(yīng)用棉球按壓針孔片刻。（2）皮下注射法 常用于鼠類、兔、貓、狗等。鼠類注射法為左手提起其頭部皮膚，右手握注射器，以約15角刺入皮下，緩緩注入藥液，拔針后輕壓針孔。小白鼠注入量應(yīng)小于0.4ml藥液。大白鼠、豚鼠要用大號(hào)針頭。鼠類亦可從背部皮下注射，但需兩個(gè)人合作完成。兔、狗、貓常在背部或大腿內(nèi)側(cè)等皮下脂肪少的部位進(jìn)行皮下注射，禽類常選翼下注射。（3）肌肉注射法 鼠類常選后肢外側(cè)肌肉。兔、貓、狗多選臀部肌肉，鳥(niǎo)類選胸肌和腓腸肌。方法為左手固定動(dòng)物，右手持注射器，垂直刺入肌肉，緩慢注射，注射完畢用手輕輕按摩注射部位，以利藥物吸收。（4）腹腔注射法 除蛙類外，幾乎所有動(dòng)物都可使用此法給藥。（5

4、）靜脈注射法 1）鼠類：常選用尾靜脈。先將鼠固定于特制的鼠筒內(nèi)或倒置的玻璃罩下，使鼠尾外露，用75%乙醇擦之使血管擴(kuò)張。左手拉住尾端，右手持注射器（44.5號(hào)針頭），以約15角刺入擴(kuò)張最明顯的血管內(nèi)，輕推藥液，阻力不大，血管變色，說(shuō)明已注入靜脈內(nèi)，如果阻力大，局部變白，應(yīng)重新刺入注射部位先從遠(yuǎn)端開(kāi)始，以便失敗后逐步上移注射部位。2）狗：常選用前肢內(nèi)側(cè)的皮下頭靜脈和后肢外側(cè)的小隱靜脈。剪毛消毒，在血管近心端先扎一條繃帶，使血管充盈，左手握肢體，拇指向遠(yuǎn)端輕輕繃緊皮膚，右手持注射器，順血管方向向心性刺入皮下，沿血管外平行走約0.5cm后，再刺入血管，有回血后即表明進(jìn)入血管，放松近心端繃帶，緩慢注入

5、藥液。3）兔：常選用耳緣靜脈。先拔毛，左手食指和中指夾住耳緣靜脈近心端，使血管充盈；拇指和無(wú)名指固定耳朵，并與食、中指繃緊注射部位，右手持注射器，順血管方向刺入靜0.51cm，左手固定針頭，右手緩慢注射。如阻力大或局部腫脹蒼白，說(shuō)明針頭在血管外，應(yīng)重新注射。應(yīng)從血管遠(yuǎn)心端開(kāi)始，以便逐次向近心端重復(fù)注射。2.常用的采血方法（1）剪尾采血 常用于小白鼠和大白鼠。小量采血時(shí)用本法。固定動(dòng)物并露出鼠尾，將尾部浸于45的溫水中數(shù)分鐘（也可用二甲苯棉球擦拭或用燈光照射片刻），使尾部血管擴(kuò)張，擦干后，用手術(shù)剪剪去尾尖0.30.6cm，讓血液滴入盛器或直接用吸管吸取。（2）耳緣靜脈取血 常用于家兔。將家兔放在

6、固定箱內(nèi)，拔毛或用二甲苯棉球擦拭耳廓，使耳部血管擴(kuò)張，用粗針頭刺破耳緣靜脈，或用刀片在血管上切口（方向可與血管平行或垂直）。血液自然流出。采血完畢，用干棉球壓迫止血。（3）心臟取血 常需兩人合作。一人將動(dòng)物背位固定，一人持配7號(hào)針頭的10ml注射器，于胸壁心跳最明顯處，將針頭刺入心臟，直至取夠血量，迅速拔出針頭。實(shí)驗(yàn) ABO血型的鑒定實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)會(huì)ABO血型的鑒定方法2.掌握ABO血型的分型依據(jù)實(shí)驗(yàn)原理根據(jù)抗原抗體反應(yīng)來(lái)進(jìn)行的。紅細(xì)胞表面存在的特異性抗原決定了血型，而血清中存在著與紅細(xì)胞本身相對(duì)應(yīng)的抗體，如A 型血的人其紅細(xì)胞膜表面存在A 抗原，而血清中則存在B抗體，因此不會(huì)發(fā)生血液凝集現(xiàn)象

7、。血型是由先天遺傳決定的，因此血型的鑒定在鑒定血源關(guān)系中有著重要作用。如果同種抗原和抗體同時(shí)存在，就會(huì)發(fā)生抗原抗體的凝集反應(yīng)，使血細(xì)胞凝集，進(jìn)而出現(xiàn)溶血反應(yīng)，危機(jī)生命。因此，在臨床上，輸血前必須進(jìn)行血型鑒定和交叉配血試驗(yàn)，以確保輸血安全。應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)血清鑒定未知者的血型。實(shí)驗(yàn)對(duì)象：人實(shí)驗(yàn)器材及藥品：ABO標(biāo)準(zhǔn)血清、玻璃片、采血針、75%酒精等。實(shí)驗(yàn)方法：1.將抗A與抗B標(biāo)準(zhǔn)血清各一滴滴于玻璃片兩側(cè)，分別標(biāo)明“抗A”與“抗B”字樣。2.用75%酒精消毒左手無(wú)名指端，用一次性采血針刺破皮膚，用平玻璃片兩對(duì)角分別取血分別放置“抗A”與“抗B”側(cè)血清中并混合均勻。3.室溫靜止510分鐘后觀察結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果

8、實(shí)驗(yàn)討論與分析八、注意事項(xiàng)：抗A與抗B血清絕對(duì)不能混合；務(wù)必辨別清楚是否有凝集現(xiàn)象影響血液凝固的因素目的和原理通過(guò)測(cè)定不同條件下的血液凝固時(shí)間，了解血液凝固的一些影響因素。血液凝固是一種發(fā)生在血漿中有許多因子參與的復(fù)雜的生物化學(xué)連鎖反應(yīng)過(guò)程。其最終結(jié)果是血漿中的纖維蛋白原變成纖維蛋白，即血漿由流體狀態(tài)變成膠凍狀態(tài)。根據(jù)激發(fā)凝血反應(yīng)的原因和凝血酶原復(fù)合物形成途徑的不同，可將血液凝固分為內(nèi)源性凝血系統(tǒng)和外源性凝血系統(tǒng)。內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是指參與凝血過(guò)程的全部因子存在于血漿中，而外源性凝血系統(tǒng)是指在組織因子的參與下的血凝過(guò)程，凝血時(shí)間較前者短。本實(shí)驗(yàn)采用頸動(dòng)脈放血取血，血液幾乎未與組織因子接觸，其發(fā)生的

9、凝血過(guò)程基本上可以看作是由血漿中凝血因子啟動(dòng)的內(nèi)源性凝血。肺組織浸液含有豐富的組織因子，在血液中加入肺組織浸液時(shí)，可以觀察外源性凝血系統(tǒng)的作用。血液凝固過(guò)程受許多因素的影響，除凝血因子可直接參與血凝過(guò)程外，還受溫度、接觸面光滑度等得影響。器材與藥品兔手術(shù)臺(tái)，哺乳動(dòng)物手術(shù)器械1套，動(dòng)脈夾，動(dòng)脈插管，20毫升注射器，試管8支，50毫升小燒杯2個(gè)，滴管，竹簽1支，冰塊，棉花。石蠟油，肝素，草酸鉀，生理鹽水，0.025mol/L CaCL2，20%氨基甲酸乙酯，肺組織浸液。實(shí)驗(yàn)對(duì)象家兔步驟與方法1.麻醉和固定：用20%氨基甲酸乙酯按每公斤體重1克耳緣靜脈麻醉，待動(dòng)物麻醉后，仰臥固定在兔臺(tái)上。2.手術(shù)：

10、減去頸前部兔毛，頸部正中切口，分離出一側(cè)頸總動(dòng)脈，頭端用線結(jié)扎阻斷血流，近心端勇動(dòng)脈夾夾閉動(dòng)脈，在結(jié)扎線下方剪一斜行切口，向心方向插入動(dòng)脈插管，予以結(jié)扎固定，準(zhǔn)備取血之用。3.觀察纖維蛋白原在凝血過(guò)程中的作用：取動(dòng)脈血10毫升分別注入兩小燒杯內(nèi)，一杯放置，另一杯用竹簽或小試管刷不斷攪拌，2-3分鐘后，用誰(shuí)洗凈竹簽上的血，觀察有無(wú)纖維蛋白產(chǎn)生，經(jīng)過(guò)這樣處理的血液是否再會(huì)發(fā)生凝固？4.將8支試管按下表準(zhǔn)備好后，每管加入血液2毫升，即刻開(kāi)始計(jì)時(shí)。每個(gè)15秒，將試管傾斜一次，觀察血液是否凝固，至血液成為凝膠狀，試管倒立時(shí)血液不流出為止。記下所經(jīng)歷的全程時(shí)間，即為凝血時(shí)間（見(jiàn)下表）內(nèi)源性凝血與外源性凝血觀察以及理化因素對(duì)血凝的影響實(shí)驗(yàn)儀器試管編號(hào)實(shí)驗(yàn)條件凝血時(shí)間10毫升試管，每管加血2毫升1對(duì)照管2粗糙面放棉花少許3石蠟油潤(rùn)滑內(nèi)表面4溫度至于370C水浴槽中5至于成有碎冰塊的燒杯中6加肝素8U（加血后搖勻）7加1%草酸鉀2毫升（加血后搖勻）8肺組織浸液1毫升（加血后搖勻）比較2管和3管，4管和5管，1管和8管得凝血時(shí)間，分析產(chǎn)生差別的原因。如果加入肝素及草酸鉀管不出現(xiàn)血凝，兩管各加0.025 mol/L CaCL2溶液23滴，觀察血液是否發(fā)生凝固？本實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1.記錄凝血時(shí)間應(yīng)力求準(zhǔn)