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1、結(jié)核菌素及結(jié)核菌素試驗(yàn),朝陽(yáng)市結(jié)核病防治所,結(jié)核菌素,結(jié)核菌素簡(jiǎn)稱(chēng)結(jié)素,是由結(jié)核桿菌濾液制成的一種試劑,即用人型結(jié)核桿菌培養(yǎng)后加熱殺死結(jié)核菌所提煉的濃縮液,不含任何死菌或活菌,在臨床和結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查中廣泛應(yīng)用,一、目前我國(guó)常用的結(jié)核菌素種類(lèi),1、舊結(jié)核菌素(Old Tuberculin OT): 是從生長(zhǎng)過(guò)結(jié)核菌的液體培養(yǎng)基中提煉出來(lái)的結(jié)核菌代謝產(chǎn)物.它由結(jié)核菌的菌體全部和培養(yǎng)基等成分構(gòu)成,主要有:(1)菌體蛋白、多糖、核酸、脂類(lèi);(2)菌體代謝產(chǎn)物;(3)培養(yǎng)基成分。試驗(yàn)中易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。80年代前使用,現(xiàn)在已不用,2、結(jié)核菌素純蛋白衍生物(PPD): 結(jié)核菌純蛋白衍生物,它是將舊結(jié)

2、素過(guò)濾后,再用硫酸銨等加以沉淀而獲得的純度較高的結(jié)核桿菌分泌蛋白質(zhì)。 其制作過(guò)程:菌株培養(yǎng)滅菌、濾過(guò)濃縮鹽析、脫鹽干燥、保存分裝。 我國(guó)從人型結(jié)核菌制成PPD(PPD-C),又從卡介苗制成卡介菌純蛋白衍生物(BCG-PPD),0.1ml為5IU用于臨床診斷。 應(yīng)用中特異性反應(yīng)更加敏感和準(zhǔn)確,90年代后至今一直在使用,二、結(jié)核菌素試驗(yàn)方法,一)、試驗(yàn)方法分類(lèi) 皮上劃痕法(Pirquet) 軟膏粘貼法(Moro) 皮上多刺法(Heaf) 皮內(nèi)注射法(C.Mantoux,二)、皮內(nèi)注射的部位和方法 選擇1ml一次性注射器,在左前臂掌側(cè)前1/3中央皮膚處,用75%的酒精消毒,注射時(shí)繃緊皮膚,針管平放,

3、注射器刻度和針孔斜面一致向上,淺淺地與皮膚平行刺入皮內(nèi),不見(jiàn)針孔即可,將0.1mlPPD緩慢注入皮內(nèi),劑量準(zhǔn)確時(shí),局部可出現(xiàn)直徑6-8mm大小的橘皮樣皮丘。 不能把皮丘的大小作為衡量劑量的指標(biāo) (注意:在注射前應(yīng)詢(xún)問(wèn)患者以前曾否做過(guò)該試驗(yàn),如做過(guò)應(yīng)問(wèn)清時(shí)間、部位,以免引起促進(jìn)反應(yīng)。同時(shí)了解是否存在接種禁忌癥。,三.結(jié)素試驗(yàn)禁忌癥: a.患有重癥或熱性疾病,體溫超過(guò)37.5度,及各種傳染病的恢復(fù)期,結(jié)素試驗(yàn)可能發(fā)生不良反應(yīng),使其病情加重。 b.有器質(zhì)性疾病如:心血管、腎臟病、胃腸病的急性期。 C.有過(guò)敏反應(yīng)史、特別是預(yù)防注射過(guò)敏史和免疫缺陷的人員。 d.明顯營(yíng)養(yǎng)不良,體弱和嚴(yán)重衰弱者。 e.正在

4、使用激素等免疫抑制劑治療者。 f.在既往結(jié)素試驗(yàn)中出現(xiàn)水泡、壞死等非常強(qiáng)烈反應(yīng)者。 g.患有彌漫性皮膚病者或注射部位有皮膚病。家族皮膚病史。 h.有癲癇、癔病等神經(jīng)系統(tǒng)疾病,四.結(jié)果觀察 試驗(yàn)結(jié)果需在皮試后4896小時(shí)觀察,我國(guó)通常規(guī)定在皮試后72小時(shí)為觀測(cè)反應(yīng)時(shí)間,測(cè)量時(shí)以硬結(jié)(橫徑+縱徑/2)大小為主,不以紅暈大小作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。因?yàn)橛步Y(jié)為特異性變態(tài)反應(yīng),而紅暈為非特異性反應(yīng)。有的情況下硬結(jié)和紅暈大小一致。反應(yīng)大小以mm記錄,不應(yīng)記錄為+、-號(hào),硬結(jié)示意圖,平均直徑=橫徑+縱徑/2,五.結(jié)素反應(yīng)結(jié)果分類(lèi): 1)陰性反應(yīng):注射部位無(wú)硬結(jié)或硬結(jié)平均直徑5mm. 2)陽(yáng)性反應(yīng):硬結(jié)平均直徑5mm_

5、陽(yáng)性 5-9mm_一般陽(yáng)性 10-19mm_中度陽(yáng)性 20mm(5歲以下兒童15mm)_強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng) 20mm,但是出現(xiàn)水泡、潰瘍、壞死或淋巴管炎-強(qiáng)陽(yáng)性 陽(yáng)性和陰性之間不可能有精確的科學(xué)分界。但是一般反應(yīng)越強(qiáng)則結(jié)核菌感染的可能性越大,但皮試陽(yáng)性并不意味著就是結(jié)核病人,六.影響結(jié)素反應(yīng)強(qiáng)度的因素,1.結(jié)素試驗(yàn)的假陰性反應(yīng) a.機(jī)體處于變態(tài)反應(yīng)前期感染后3-8周,機(jī)體沒(méi)有形成免疫 b.重癥或進(jìn)展期的結(jié)核病:傳遞免疫作用的致敏淋巴細(xì)胞減少。結(jié)腦 粟粒 干酪性肺炎 c.有HIV感染、AIDS、麻疹、猩紅熱、腮腺炎等急性傳染病 免疫機(jī)制受到抑制,結(jié)素陰性 d.某些疾?。喊籽?、結(jié)節(jié)病、癌癥等,免疫系統(tǒng)受

6、干擾,結(jié)素可陰性 e.藥物因素:應(yīng)用免疫抑制劑,如激素等結(jié)素可陰性 f.其他因素:老年、營(yíng)養(yǎng)不良、高燒等均能使結(jié)素反應(yīng)成陰性 g.技術(shù)因素:結(jié)素效價(jià)低、注射劑量不足、判斷和記錄錯(cuò)誤 h.非典型抗酸桿菌感染:約占結(jié)素陰性病人的50,2.結(jié)素試驗(yàn)的假陽(yáng)性 a.非典型分支桿菌感染 對(duì)結(jié)素試驗(yàn)有交叉反應(yīng) b.結(jié)素試驗(yàn)的復(fù)強(qiáng)作用 (接種卡介苗或受感染,弱陽(yáng)性-重復(fù)試驗(yàn)-增強(qiáng)過(guò)敏反應(yīng)強(qiáng)度) c.同一部位重疊試驗(yàn)(促進(jìn)反應(yīng))(特點(diǎn);出現(xiàn)早、反應(yīng)大,消失快) d.紫外線照射、或因注射引起的非特異性刺激導(dǎo)致判斷錯(cuò)誤,3.結(jié)素試驗(yàn)的促進(jìn)和復(fù)強(qiáng) a.促進(jìn)反應(yīng):當(dāng)在同一部位反復(fù)注射結(jié)素時(shí),反應(yīng)與初次注射相比出現(xiàn)早、程

7、度強(qiáng),但消退快。6小時(shí)出現(xiàn),12-24小時(shí)高峰,持續(xù)4-6年,更換注射部位可以避免 b.復(fù)強(qiáng)作用:不同部位重復(fù)注射結(jié)素 已經(jīng)致敏的機(jī)體經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后過(guò)敏性已經(jīng)減弱或消失,當(dāng)再次注射結(jié)素時(shí)使減弱的過(guò)敏反應(yīng)恢復(fù),這種現(xiàn)象稱(chēng)為復(fù)強(qiáng)作用。 未接種卡介苗,未受自然感染的機(jī)體無(wú)復(fù)強(qiáng)作用,七、結(jié)素試驗(yàn)結(jié)果的意義,1.陰性的意義 a.未受結(jié)核菌感染,非結(jié)核病人; b.已受結(jié)核菌感染但處于結(jié)核感染早期(38周); c.老年人; d.營(yíng)養(yǎng)不良、HIV感染、尿毒癥、惡性腫瘤接受放、化療者 等免疫功能低下者(免疫系統(tǒng)受干擾); f.使用腎上腺皮質(zhì)激素的患者; g.有發(fā)高熱的急性傳染?。檎睢⑿杉t熱、水痘)或重癥結(jié)核病

8、(粟粒型肺結(jié)核、結(jié)核性腦膜炎)患者; h.技術(shù)誤差注射劑量不足或結(jié)核菌素失效。 * 結(jié)素試驗(yàn)陰性并不100%意味著未受結(jié)核菌感染。(存在著結(jié)素試驗(yàn)假陰性的問(wèn)題,2.陽(yáng)性的意義:人為或自然感染,對(duì)結(jié)核菌有免疫力 (1)接種卡介苗后; (2)結(jié)核病病人; (3)無(wú)明顯臨床癥狀僅呈一般陽(yáng)性反應(yīng),表示曾感染過(guò)結(jié)核桿菌; (4)嬰幼兒尤其是未接種卡介苗者(5歲以下),并伴有發(fā)燒等不適,陽(yáng)性反應(yīng)多表示體內(nèi)有活動(dòng)性結(jié)核病灶。年齡愈小,活動(dòng)性結(jié)核可能性愈大; (5)強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)者,表示體內(nèi)可能有活動(dòng)性結(jié)核??;結(jié)合臨床 (6)由陰性反應(yīng)轉(zhuǎn)為陽(yáng)性反應(yīng),或反應(yīng)強(qiáng)度由原來(lái)小于10mm增至大于10mm,且增幅超過(guò)6mm時(shí),表示新近有感染。 由于廣泛推行卡介苗接種,結(jié)核菌素試驗(yàn)的診斷價(jià)值受到一定限制。接種卡介苗與自然感染陽(yáng)性反應(yīng)的主要區(qū)別見(jiàn)表1; (7) 技術(shù)誤差及其他原因引起的假陽(yáng)性反應(yīng),接種卡介苗與自然感染陽(yáng)性反應(yīng)的主要區(qū)別,八、結(jié)素反應(yīng)的付作用及其處理,1.結(jié)素副反應(yīng): 1)、全身反應(yīng) 暈厥或暈針 過(guò)敏性休克 發(fā)熱及淋巴細(xì)胞減少 全身出疹(猩紅色丘疹) 2).局部反應(yīng):水泡、潰瘍、壞死和淋巴管炎,2.副反應(yīng)的處理 水泡:水泡較小用紅霉素藥膏涂抹即可,如較大,可用一次 性滅菌注射器將液體抽出,再涂上藥膏并無(wú)菌包

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