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1、幽門螺桿菌以及臨床檢驗(yàn)方法 【摘要】幽門螺桿菌,簡(jiǎn)稱Hp,是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的細(xì)菌。長(zhǎng)2.54.0m,寬0.51.0m。在胃粘膜上皮細(xì)胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。被幽門螺桿菌感染的患者常出現(xiàn)下列癥狀:反酸、燒心以及胃痛、口臭,或者引起慢性胃炎。本研究即和大家探討一下幽門螺桿菌以及其臨床檢驗(yàn)方法。 【關(guān)鍵詞】 幽門螺桿菌 臨床檢驗(yàn) 【中圖分類號(hào)】R573.3 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949(2014)05-0242-01 自1983年分離出幽門螺桿菌( Hp )以來,目前認(rèn)為 Hp 與消化性潰瘍、慢性胃炎、胃癌及粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤的發(fā)生密切相關(guān)。所以H

2、p 感染的準(zhǔn)確診斷在臨床工作中 顯得尤其重要。目前 Hp 感染的診斷方法分為內(nèi)窺鏡依賴性檢查方法和非內(nèi)窺鏡依賴性檢查方法,但每種檢查方法各有優(yōu)點(diǎn)及不足。 1 幽門螺桿菌的介紹 電子顯微鏡下,菌體的一端可伸出26條帶鞘的鞭毛。在分裂時(shí),兩 端均可見鞭毛。鞭毛長(zhǎng)約為菌體11.5倍。粗約為30nm。鞭毛的頂端有時(shí)可見一球狀物,實(shí)為鞘的延伸物。每一鞭毛根部均可見一個(gè)圓球狀根基伸入菌體頂端細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)。在其內(nèi)側(cè)尚有一電子密度降低區(qū)域。鞭毛在運(yùn)動(dòng)中起推進(jìn)器作用,在定居過程中起拋錨作用。許多固體培養(yǎng)基可作幽門螺桿菌分離培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,布氏瓊脂使用較多,但需加用適量全血或胎牛血清作為補(bǔ)充物方能生長(zhǎng)。在胃粘膜上

3、皮細(xì)胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),除典型的形態(tài)外,有時(shí)可出現(xiàn)桿狀或圓球狀。Hp是微需氧菌,環(huán)境氧要求58%,在大氣或絕對(duì)厭氧環(huán)境下不能生長(zhǎng)。許多固體培養(yǎng)基可作Hp分離培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,布氏瓊脂使用較多,但需加用適量全血或胎牛血清作為補(bǔ)充物方能生長(zhǎng)。常以萬古霉素、TMP、兩性霉素B等組成抑菌劑防止雜菌生長(zhǎng)。 2 幽門螺桿菌的檢驗(yàn)方法 幽門螺旋桿菌感染的檢查方法很多,主要包括細(xì)菌的直接檢查、尿毒酶活性測(cè)定、免疫學(xué)檢測(cè)等方法。 2.1.直接檢查細(xì)菌 指通過胃鏡檢查鉗取胃粘膜(多為胃竇粘膜)作直接涂片、染色,組織切片染色及細(xì)菌培養(yǎng)來檢測(cè)幽門螺旋桿菌。其中胃粘膜細(xì)菌培養(yǎng)是診斷幽門螺

4、旋桿菌最可靠的方法,可作為驗(yàn)證其他診斷性試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,同時(shí)又能進(jìn)行藥敏試驗(yàn),指導(dǎo)臨床選用藥物 2.2. 檢查尿毒酶 根據(jù)抗原-抗體雜交免疫法原理,因?yàn)橛拈T螺旋桿菌是人胃內(nèi)唯一能夠產(chǎn)生大量尿毒酶的細(xì)菌,故可通過檢測(cè)尿毒酶來診斷幽門螺旋桿菌感染。尿毒酶分解胃內(nèi)尿毒生成氨和二氧化碳,使尿素濃度降低、氨濃度升高?;诖嗽硪寻l(fā)展了多種檢測(cè)方法:胃活檢組織尿毒酶試驗(yàn):有些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解、產(chǎn)生2個(gè)分子的氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅呈粉紅色。尿素酶不是誘導(dǎo)酶,因?yàn)椴徽摰孜锬蛩厥欠翊嬖?,?xì)菌均能合成此酶。其活性最適pH為7.0。試驗(yàn)方法是挑取1824h待試菌培養(yǎng)物大量接種于液體培養(yǎng)基管中,搖均

5、,于361培養(yǎng)10,60和120min,分別觀察結(jié)果。或涂布并穿刺接種于瓊脂斜面,不要到達(dá)底部,留底部作變色對(duì)照。培養(yǎng)2,4和24h分別觀察結(jié)果,如陰性應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至4天,作最終判定,變?yōu)榉奂t色為陽性。呼吸試驗(yàn):呼氣試驗(yàn)是進(jìn)行呼吸肌張力、呼氣流速、重復(fù)呼吸試驗(yàn)進(jìn)行的并根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果判斷是否有呼吸系統(tǒng)病變的檢查方法。胃液尿素或尿素氮測(cè)定:血尿素氮-腎功能主要指標(biāo)之一 。所以尿素氮的變化對(duì)非蛋白氮數(shù)值的影響較大。臨床上常選用尿素氮的檢測(cè)來代替非蛋白氮的測(cè)定。尿素測(cè)定是檢查胃有無幽門螺桿菌(helicobacter pylori,Hp)。胃液中尿素酶是細(xì)菌代謝產(chǎn)物,而非胃黏膜本身所固有。幽門螺桿菌是人胃

6、內(nèi)惟一產(chǎn)生大量尿素的細(xì)菌。目前已發(fā)現(xiàn)Hp脂多糖、尿素酶、空泡毒素與黏附素等是重要的定植致病因子,Hp的提取物可以引起胃黏膜細(xì)胞DNA的損傷。 2.3.免疫學(xué)方法檢測(cè) 幽門螺桿菌免疫學(xué)檢查是通過測(cè)定血清中的幽門螺旋桿菌抗體來檢測(cè)幽門螺旋桿菌感染,包括補(bǔ)被動(dòng)血凝測(cè)定、免疫印跡技術(shù)和酶聯(lián)合吸附測(cè)定(ELISA)等。幽門螺旋桿菌抗體檢測(cè)是利用膠體金技術(shù)定性檢測(cè)人血清、血漿或全血中抗胃幽門螺旋桿菌抗體。免疫學(xué)檢測(cè)的過程為:一被動(dòng)血凝測(cè)定患者刺取腦脊液,采用稀釋抗原固定血清法用96孔V型微量血凝板, 將乙腦抗原作倍比稀釋, 使每孔含25uL, 被檢血清用稀釋液作1:10稀釋, 每孔加人25uL產(chǎn), 再滴加

7、凍干乙腦單克隆抗體致敏羊血紅細(xì)胞25uL,37下放置數(shù)小時(shí)后觀察結(jié)果。 3如何預(yù)防感染幽門螺桿菌 幽門螺旋桿菌患者平時(shí)應(yīng)注意飲食定時(shí)定量,營(yíng)養(yǎng)豐富,食物軟爛易消化,少量多餐,細(xì)嚼慢咽;忌過飽,忌生冷酸辣、油炸刺激的食物,忌煙熏、腌制食物。含亞硝胺的腌制食品等也具有致癌作用,加上幽門螺桿菌陽性的作用,就會(huì)增加癌變的幾率。 3.1.改變用餐方式 亞洲人使用筷子在一個(gè)大碗里吃菜的習(xí)俗,使唾液里的細(xì)菌有機(jī)會(huì)通過筷子傳播到食物上并在相互傳染。當(dāng)然,這種用餐方式還可傳播其他疾病,所以我國(guó)醫(yī)學(xué)家早就呼吁:要改變用餐方式,宜選擇分餐制或使用公筷。 3.2.注意口腔衛(wèi)生 幽門螺旋桿菌是經(jīng)口腔進(jìn)入人體的,因?yàn)檫@種

8、細(xì)菌常存在于病人和帶菌者的牙垢與唾液中。因此,注意口腔衛(wèi)生、防止病從口入,就是預(yù)防幽門螺桿菌感染、預(yù)防胃病與胃癌的重要措施。在中國(guó)都有不少嬰兒感染幽門螺桿菌,經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn),嬰兒感染幽門螺桿菌都與大人口對(duì)口喂食有關(guān)系。因此如果有幽門螺桿菌存在的父母?jìng)?,一定要注意這一點(diǎn),以免影響自己孩子的身體健康。非洲小孩的幽門螺桿菌感染率高,也是母親習(xí)慣先咀嚼再喂食的緣故。 3.3.養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣 養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣,做到飯前便后洗手。經(jīng)常使用的餐具也一定要嚴(yán)格的消毒。 4總結(jié) 綜上所述,Hp的檢測(cè)有很多種方法,各有優(yōu)缺點(diǎn)。雖然說隨著醫(yī)學(xué)研究的不斷深入,Hp的檢測(cè)方法必將不斷取得突破性進(jìn)展。但是各位在平時(shí)還要多

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