動物細(xì)胞工程專題復(fù)習(xí)

1、動物細(xì)胞工程專題復(fù)習(xí),動物細(xì)胞培養(yǎng),動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,胰蛋白酶,單個細(xì)胞,加培養(yǎng)液,制成,細(xì)胞懸浮液,10代 細(xì)胞,部分細(xì)胞“癌變”，遺傳物質(zhì)改變，無限傳代,動物細(xì)胞培養(yǎng)不能 最終培養(yǎng)成動物體,50代細(xì)胞,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),細(xì)胞貼壁,剝離、分瓶,細(xì)胞株,細(xì)胞,細(xì)胞系,1、過程,如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細(xì)胞株和細(xì)胞系,遺傳物質(zhì)改變,幾個有關(guān)概念,原代培養(yǎng)：從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞。培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。 傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng),細(xì)胞株：原代細(xì)胞一般傳

2、至10代左右細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到4050代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng),1、無菌、無毒,2、全部的營養(yǎng)物質(zhì),3、適宜的溫度和PH值,4、必要的氣體條件,添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液,葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清等。,保證細(xì)胞順利的生長增殖,36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4,O2和CO2（95%空氣和5% CO2,2

3、、條件,維持培養(yǎng)液的PH,元貝駕考 http:/ 元貝駕考2016科目一 科目四駕考寶典網(wǎng) http:/ 駕考寶典2016科目一 科目四,3、應(yīng)用,大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體） 作為基因工程中的受體細(xì)胞 培養(yǎng)的動物細(xì)胞可以用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性 用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù),細(xì)胞的全能性,細(xì)胞株、細(xì)胞系,植株,培養(yǎng)結(jié)果,獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物,快速繁殖、培育無病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細(xì)胞增殖,原理,動物細(xì)胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項(xiàng)目,植物組

4、織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,1.動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是（ ） A、動物細(xì)胞融合 B、胚胎移植 C、動物細(xì)胞培養(yǎng) D、核移植 2.下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中正確的是（ ） A、動物細(xì)胞培育的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白 B、動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細(xì)胞分散 C、細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中 D、培養(yǎng)至50代后的傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株,C,B,3.下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（ ） A、用于培養(yǎng)的細(xì)胞大多取自胚胎或幼齡動物的器官或組 織 B、將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單 個細(xì)胞 C、在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離， 制成懸浮液 D、動

5、物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞會衰 老死亡,D,4.下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此回答： （1）容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自 _。 （2）容器A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是 ，然后用 酶處理，這是為了使細(xì)胞 分散開來，這樣做的目的是 （3）培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行，瓶中的培養(yǎng)基成分有 _等,幼齡動物或胚胎的組織或器官,剪碎組織,胰蛋白,使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸,葡萄糖、氨基酸、水、無機(jī)鹽、促生長因子 與微量元素和動物血清,在此瓶中培養(yǎng)一段時間后，有許多細(xì)胞衰老死亡，這是培 養(yǎng)到第 代，到這時的培養(yǎng)稱為_。 為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用 處理 然后配置

6、成 ，再分裝。 在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡， 原因是,10,原代培養(yǎng),胰蛋白酶,細(xì)胞懸液,細(xì)胞沒有發(fā)生癌變,核移植技術(shù)和克隆動物,1. 概念：將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體,核移植,難度高,受體細(xì)胞：M期的卵母細(xì)胞,細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易,用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物 原理：動物體細(xì)胞核的全能性,取供體細(xì)胞,取卵母細(xì)胞,供體細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)到 M中期,卵母細(xì)胞去核,供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞,供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,重組胚胎,代孕母牛,生出與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體,

7、2.過程,3.克隆動物的研究意義,1.克隆動物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白 2.改良動物品種 3.治療人類疾病，作為供體 4.保護(hù)瀕危動物,4體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題,1.許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型 過大，異常肥胖，發(fā)育困難，免疫失調(diào)等。 2.成功率非常低及克隆動物食品的安全性問題,1.下列哪項(xiàng)屬于克?。?） A將雞的某個DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細(xì)胞內(nèi) C將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤 細(xì)胞 D將某腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個細(xì)胞系,D,2.（多選）美國杜克大學(xué)醫(yī)療中心的一個研究小組利用 成年豬的動脈血管細(xì)胞和模擬胚胎環(huán)境

8、的新型生物反應(yīng) 器,成功地在實(shí)驗(yàn)室里培育出新的動脈血管，這種血管的 外形和功能都與真的血管一樣,這一研究成果是生物組織 培養(yǎng)領(lǐng)域的重大進(jìn)展。下列關(guān)于以上技術(shù)的敘述中，正 確的是（ ） A屬于“克隆” B可能要利用去核卵細(xì)胞 C關(guān)鍵是激發(fā)血管細(xì)胞的全能性 D關(guān)鍵是激發(fā)血管細(xì)胞發(fā)育成血管的潛能,ABD,3 .從母羊甲的體細(xì)胞中取出細(xì)胞核，注入到母羊乙去掉 核的卵細(xì)胞中，融合后的細(xì)胞經(jīng)卵裂形成早期胚胎，再植 入到另一只母羊丙的子宮內(nèi)，出生小羊的大多數(shù)性狀 （ ） A、難以預(yù)測 B、像甲 C、像乙 D、像丙 4.生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復(fù)生”將不再 是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，

9、以下較易成功 “復(fù)生”野驢的方法是 （ ） A將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分 化、再分化，培育成新個體 B將野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個 體 C取出野驢的體細(xì)胞核移植到母家驢的去核卵細(xì)胞中， 經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個體 D將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個體,B,C,5.下圖所示為用兩棲動物卵所做的實(shí)驗(yàn)圖解，據(jù)圖回答 下列問題,蝌蚪腸上皮細(xì)胞核中含有青蛙發(fā)育所需的_，重新組合的細(xì)胞相當(dāng)于蛙的_ 細(xì)胞，經(jīng)過 _ 和_形成組織和器官,全部基因,受精卵,細(xì)胞分裂,細(xì)胞分化,本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明_具有全能性，圖中A過程采用的技術(shù)手段稱做_,動物體細(xì)胞核,核移植技術(shù),動物細(xì)胞融合

10、,1.過程,動物細(xì)胞A 動物細(xì)胞B,誘導(dǎo)，融合,2個完整的雜交細(xì)胞AB,有絲分裂,膜融合、質(zhì)融合,核融合,注意：動物細(xì)胞的融合也需要把多個兩種細(xì)胞放在一起，讓它們隨機(jī)融合后，再從中篩選雜交細(xì)胞,2.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能,3.應(yīng)用：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體,植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合比較,細(xì)胞膜的流動性、 植物細(xì)胞的全能性,細(xì)胞膜的流動性,用纖維素酶、 果膠酶去壁,用胰蛋白酶 使細(xì)胞分散,物理、化學(xué)方法,物理、化學(xué)、 生物方法,獲得部分或完整植株,主要用于制備

11、單克隆抗體,1、基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細(xì)胞混合，用滅活 的仙臺病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細(xì)胞 AAAaa BAaBb CAabb DBBbb 2、動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是 誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞 A.B. C. D. 3、動物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動物細(xì)胞融合中有特殊性的是 A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點(diǎn) C、融合的誘導(dǎo)手段 D、融合的過程,C,C,C,4.科學(xué)工作者用綠色和紅色熒光材料，分別標(biāo)記人和鼠的 細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)。當(dāng)兩個標(biāo)記細(xì)胞融合成一個細(xì)胞后， 起初一半膜發(fā)出綠色

12、熒光，另一半膜發(fā)出紅色熒光，一段 時間后，兩種顏色的熒光點(diǎn)均勻分布，如圖所示。請分析 回答,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明了細(xì)胞膜 ，這是因?yàn)?若在兩個細(xì)胞融合成一個細(xì)胞后，將融合細(xì)胞置于0 條件下再保持40min，則融合細(xì)胞仍然是一半膜發(fā)綠色熒 光，另一半膜發(fā)紅色熒光，這說明,具有一定的流動性,構(gòu)成細(xì)胞膜的磷脂分子和蛋白質(zhì)大都是可以運(yùn)動的,膜的流動性受溫度影響，在低溫下分子的運(yùn)動受抑制,單克隆抗體,1.單克隆抗體制備過程,誘導(dǎo)其融合的方法有哪些,融合后培養(yǎng)液中有幾種細(xì)胞,怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn),注射抗原的目的是什么,為何要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，多次篩選,大量增殖雜交瘤細(xì)胞獲得單克隆

13、抗體的方法,過程,B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)融合,B-B細(xì)胞,B-瘤細(xì)胞,瘤-瘤細(xì)胞,選擇培養(yǎng),雜交瘤細(xì)胞（ B-瘤細(xì)胞,克隆化培養(yǎng),抗體檢測,產(chǎn)生所需抗 體的雜交瘤 細(xì)胞,體外培養(yǎng),單克隆抗體,2.單克隆抗體的應(yīng)用,作為診斷試劑：準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)，并與抗原特異性結(jié)合,2.用于,運(yùn)載藥物：制成“生物導(dǎo)彈,治療疾病：主要用于癌癥治療,優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡易、快速,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高,優(yōu)點(diǎn):療效高、毒副作用小,1、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱為(,A、抗體、T淋巴細(xì)胞 B、抗原、T淋巴細(xì)胞 C、抗體、B淋巴細(xì)胞 D、抗原、漿細(xì)胞,D,2

14、、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是 A、可以制成診斷盒用于疾病的珍斷 B、可以與藥物結(jié)合，用于病變細(xì)胞的定向治療 C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn) 3、“生物導(dǎo)彈”是指 A、單克隆抗體 B、帶有特定藥物的單克隆抗體 C、雜交細(xì)胞 D、B淋巴細(xì)胞,D,B,4.單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究 中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯誤 的是 A特異性強(qiáng)、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體 D由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌,C,5.下圖為細(xì)胞融合的簡略過程（只考慮兩個細(xì)胞的融合） 請據(jù)圖回答,I若A、B是基因型分別為rrHH、RRhh兩個煙草品種細(xì)胞 的花粉，且這兩對基因位于非同源染色體上，由于一對 隱性純合基因(rr或hh) 的作用，在光照強(qiáng)度大于800勒 克斯時，都不能生長。 實(shí)驗(yàn)開始時必須用 除去不利于原 生質(zhì)體融合的物質(zhì)。 實(shí)驗(yàn)中除獲得雜種細(xì)胞外，還有基因型 為 的融合細(xì)胞,纖維素酶和果膠酶,rrHH、RRhh,6.右圖是制備分泌抗X抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題,給小鼠注射