動物細胞工程專題復習

1、動物細胞工程專題復習,動物細胞培養(yǎng),動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,胰蛋白酶,單個細胞,加培養(yǎng)液,制成,細胞懸浮液,10代 細胞,部分細胞“癌變”，遺傳物質(zhì)改變，無限傳代,動物細胞培養(yǎng)不能 最終培養(yǎng)成動物體,50代細胞,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),細胞貼壁,剝離、分瓶,細胞株,細胞,細胞系,1、過程,如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細胞株和細胞系,遺傳物質(zhì)改變,幾個有關(guān)概念,原代培養(yǎng)：從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞為原代細胞。培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞稱為原代細胞培養(yǎng)。 傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng),細胞株：原代細胞一般傳

2、至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到4050代，這種傳代細胞為細胞株。 細胞系：細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。 細胞株和細胞系的區(qū)別： 細胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng),1、無菌、無毒,2、全部的營養(yǎng)物質(zhì),3、適宜的溫度和PH值,4、必要的氣體條件,添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液,葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。,保證細胞順利的生長增殖,36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4,O2和CO2（95%空氣和5% CO2,2

3、、條件,維持培養(yǎng)液的PH,元貝駕考 http:/ 元貝駕考2016科目一 科目四駕考寶典網(wǎng) http:/ 駕考寶典2016科目一 科目四,3、應用,大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體） 作為基因工程中的受體細胞 培養(yǎng)的動物細胞可以用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性 用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預防疾病提供理論依據(jù),細胞的全能性,細胞株、細胞系,植株,培養(yǎng)結(jié)果,獲得細胞或細胞產(chǎn)物,快速繁殖、培育無病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細胞增殖,原理,動物細胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項目,植物組

4、織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較,1.動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是（ ） A、動物細胞融合 B、胚胎移植 C、動物細胞培養(yǎng) D、核移植 2.下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的敘述中正確的是（ ） A、動物細胞培育的目的是獲得大量的細胞分泌蛋白 B、動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細胞分散 C、細胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中 D、培養(yǎng)至50代后的傳代細胞稱為細胞株,C,B,3.下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（ ） A、用于培養(yǎng)的細胞大多取自胚胎或幼齡動物的器官或組 織 B、將所取的組織先用胰蛋白酶等進行處理使其分散成單 個細胞 C、在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離， 制成懸浮液 D、動

5、物細胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細胞會衰 老死亡,D,4.下圖是動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此回答： （1）容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自 _。 （2）容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是 ，然后用 酶處理，這是為了使細胞 分散開來，這樣做的目的是 （3）培養(yǎng)首先在B瓶中進行，瓶中的培養(yǎng)基成分有 _等,幼齡動物或胚胎的組織或器官,剪碎組織,胰蛋白,使細胞與培養(yǎng)液充分接觸,葡萄糖、氨基酸、水、無機鹽、促生長因子 與微量元素和動物血清,在此瓶中培養(yǎng)一段時間后，有許多細胞衰老死亡，這是培 養(yǎng)到第 代，到這時的培養(yǎng)稱為_。 為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用 處理 然后配置

6、成 ，再分裝。 在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細胞全部死亡， 原因是,10,原代培養(yǎng),胰蛋白酶,細胞懸液,細胞沒有發(fā)生癌變,核移植技術(shù)和克隆動物,1. 概念：將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體,核移植,難度高,受體細胞：M期的卵母細胞,細胞分化程度低，恢復全能性容易,用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物 原理：動物體細胞核的全能性,取供體細胞,取卵母細胞,供體細胞培養(yǎng),培養(yǎng)到 M中期,卵母細胞去核,供體細胞注入去核的卵母細胞,供體核進入受體卵母細胞,重組胚胎,代孕母牛,生出與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體,

7、2.過程,3.克隆動物的研究意義,1.克隆動物作為生物反應器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白 2.改良動物品種 3.治療人類疾病，作為供體 4.保護瀕危動物,4體細胞核移植技術(shù)存在的問題,1.許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型 過大，異常肥胖，發(fā)育困難，免疫失調(diào)等。 2.成功率非常低及克隆動物食品的安全性問題,1.下列哪項屬于克隆（ ） A將雞的某個DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細胞內(nèi) C將鼠骨髓瘤細胞與經(jīng)過免疫的脾細胞融合成雜交瘤 細胞 D將某腫瘤細胞在體外培養(yǎng)繁殖成一個細胞系,D,2.（多選）美國杜克大學醫(yī)療中心的一個研究小組利用 成年豬的動脈血管細胞和模擬胚胎環(huán)境

8、的新型生物反應 器,成功地在實驗室里培育出新的動脈血管，這種血管的 外形和功能都與真的血管一樣,這一研究成果是生物組織 培養(yǎng)領(lǐng)域的重大進展。下列關(guān)于以上技術(shù)的敘述中，正 確的是（ ） A屬于“克隆” B可能要利用去核卵細胞 C關(guān)鍵是激發(fā)血管細胞的全能性 D關(guān)鍵是激發(fā)血管細胞發(fā)育成血管的潛能,ABD,3 .從母羊甲的體細胞中取出細胞核，注入到母羊乙去掉 核的卵細胞中，融合后的細胞經(jīng)卵裂形成早期胚胎，再植 入到另一只母羊丙的子宮內(nèi)，出生小羊的大多數(shù)性狀 （ ） A、難以預測 B、像甲 C、像乙 D、像丙 4.生物技術(shù)的發(fā)展速度很快，已滅絕生物的“復生”將不再 是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，

9、以下較易成功 “復生”野驢的方法是 （ ） A將野驢的體細胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分 化、再分化，培育成新個體 B將野驢的體細胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個 體 C取出野驢的體細胞核移植到母家驢的去核卵細胞中， 經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個體 D將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個體,B,C,5.下圖所示為用兩棲動物卵所做的實驗圖解，據(jù)圖回答 下列問題,蝌蚪腸上皮細胞核中含有青蛙發(fā)育所需的_，重新組合的細胞相當于蛙的_ 細胞，經(jīng)過 _ 和_形成組織和器官,全部基因,受精卵,細胞分裂,細胞分化,本實驗結(jié)果說明_具有全能性，圖中A過程采用的技術(shù)手段稱做_,動物體細胞核,核移植技術(shù),動物細胞融合

10、,1.過程,動物細胞A 動物細胞B,誘導，融合,2個完整的雜交細胞AB,有絲分裂,膜融合、質(zhì)融合,核融合,注意：動物細胞的融合也需要把多個兩種細胞放在一起，讓它們隨機融合后，再從中篩選雜交細胞,2.意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能,3.應用：成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體,植物體細胞雜交和動物細胞融合比較,細胞膜的流動性、 植物細胞的全能性,細胞膜的流動性,用纖維素酶、 果膠酶去壁,用胰蛋白酶 使細胞分散,物理、化學方法,物理、化學、 生物方法,獲得部分或完整植株,主要用于制備

11、單克隆抗體,1、基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細胞混合，用滅活 的仙臺病毒處理后，不可能獲得下列哪種基因型的細胞 AAAaa BAaBb CAabb DBBbb 2、動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是 誘導融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細胞 A.B. C. D. 3、動物細胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較，在動物細胞融合中有特殊性的是 A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點 C、融合的誘導手段 D、融合的過程,C,C,C,4.科學工作者用綠色和紅色熒光材料，分別標記人和鼠的 細胞膜上的蛋白質(zhì)。當兩個標記細胞融合成一個細胞后， 起初一半膜發(fā)出綠色

12、熒光，另一半膜發(fā)出紅色熒光，一段 時間后，兩種顏色的熒光點均勻分布，如圖所示。請分析 回答,該實驗結(jié)果說明了細胞膜 ，這是因為 若在兩個細胞融合成一個細胞后，將融合細胞置于0 條件下再保持40min，則融合細胞仍然是一半膜發(fā)綠色熒 光，另一半膜發(fā)紅色熒光，這說明,具有一定的流動性,構(gòu)成細胞膜的磷脂分子和蛋白質(zhì)大都是可以運動的,膜的流動性受溫度影響，在低溫下分子的運動受抑制,單克隆抗體,1.單克隆抗體制備過程,誘導其融合的方法有哪些,融合后培養(yǎng)液中有幾種細胞,怎樣篩選出雜交瘤細胞，雜交瘤細胞有何優(yōu)點,注射抗原的目的是什么,為何要進行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，多次篩選,大量增殖雜交瘤細胞獲得單克隆

13、抗體的方法,過程,B淋巴細胞 骨髓瘤細胞,誘導融合,B-B細胞,B-瘤細胞,瘤-瘤細胞,選擇培養(yǎng),雜交瘤細胞（ B-瘤細胞,克隆化培養(yǎng),抗體檢測,產(chǎn)生所需抗 體的雜交瘤 細胞,體外培養(yǎng),單克隆抗體,2.單克隆抗體的應用,作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質(zhì)，并與抗原特異性結(jié)合,2.用于,運載藥物：制成“生物導彈,治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療,優(yōu)點：準確、高效、簡易、快速,單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高,優(yōu)點:療效高、毒副作用小,1、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細胞的名稱為(,A、抗體、T淋巴細胞 B、抗原、T淋巴細胞 C、抗體、B淋巴細胞 D、抗原、漿細胞,D,2

14、、關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是 A、可以制成診斷盒用于疾病的珍斷 B、可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治療 C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn) 3、“生物導彈”是指 A、單克隆抗體 B、帶有特定藥物的單克隆抗體 C、雜交細胞 D、B淋巴細胞,D,B,4.單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學研究 中具有廣泛的應用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述，錯誤 的是 A特異性強、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導彈” C體外培養(yǎng)B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體 D由效應B細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌,C,5.下圖為細胞融合的簡略過程（只考慮兩個細胞的融合） 請據(jù)圖回答,I若A、B是基因型分別為rrHH、RRhh兩個煙草品種細胞 的花粉，且這兩對基因位于非同源染色體上，由于一對 隱性純合基因(rr或hh) 的作用，在光照強度大于800勒 克斯時，都不能生長。 實驗開始時必須用 除去不利于原 生質(zhì)體融合的物質(zhì)。 實驗中除獲得雜種細胞外，還有基因型 為 的融合細胞,纖維素酶和果膠酶,rrHH、RRhh,6.右圖是制備分泌抗X抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題,給小鼠注射