臨床用血前交叉配血不合50例原因的探討

1、臨床用血前交叉配血不合50例原因的探討輸血治療是現(xiàn)在臨床上一種不可替代的常用治療手段，在患者出現(xiàn)大量失血的情況時，常采用輸血的方式挽救病人的生命。近些年，隨著醫(yī)療水平的提高，術中需要輸血的手術數(shù)量也隨之增加，臨床對于血液的需求量在與日俱增【1】。但是在輸血的過程中，也存在一定的安全隱患，安全輸血成為輸血關注的首要問題。交叉配血，指體外對于血液相容性實驗進行模擬，以了解供體血與受體血之間是否存在抗原抗體反應，此方法是在血型鑒定的基礎上發(fā)展起來的，是臨床上常用于確保臨床用血安全的方法。在臨床工作中，常出現(xiàn)交叉配血不相符合的情況，即供血者的血清可以使患者的紅細胞發(fā)生凝集或者患者的血清使供血者的紅細胞

2、發(fā)生凝集。筆者對2013年1月至2014年12月進行交叉配血出現(xiàn)不合的病例進行回顧性分析，現(xiàn)報道如下。1 資料與方法1.1 一般資料 2013年1月至2014年12月在我院進行交叉配血的患者共15352例，其中有50例出現(xiàn)交叉配血不合的情況。50例患者，年齡1958歲，平均年齡為（45.32±2.43）歲，其中男性25例，女性25例。排除有血液病史的患者。1.2 檢測試劑與標本 單克隆抗體A、單克隆抗體B（上海血液生物醫(yī)藥公司，（98）衛(wèi)藥準字（血）S-01號）、微凝膠柱卡、不規(guī)則抗體篩選卡長春博迅生物技術有限責任公司生產(chǎn)、抗體篩選細胞、抗人球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥公司，a/

3、sAANR002-2002）?？梢院Y選鑒定抗體的不抗凝血，EDTA-Na2抗凝標本血。1.3 檢測儀器 微柱凝膠卡專用離心機、孵育器（中山市生科試劑儀器有限公司），TD-2Y多功能離心機（中山市生科試劑儀器有限公司）1.4 實驗方法 按照全國臨床檢驗操作規(guī)程【3】進行抗人球蛋白檢測、交叉配血、紅細胞不規(guī)則抗體篩選。采用鹽水介質(zhì)配血和抗人球蛋白卡配血法進行交叉配血。為確保實驗準確性，兩種檢測方法均需進行，操作過程按照試劑的說明書進行。1.5 實驗結(jié)果評價 對于患者出現(xiàn)交叉配血不合格的情況進行分析，若患者紅細胞發(fā)生凝集是由于患者自身多發(fā)骨髓瘤疾病、靜脈注射甘露醇、血小板含量過高、白細胞數(shù)量過高、纖

4、維蛋白原含量過高或血液樣本發(fā)生溶血dyLw.nET所導致的假陽性，應在消除干擾后重新進行血液配型。若患者產(chǎn)生紅細胞真凝集或自身產(chǎn)生抗體所導致的凝集，配血不合格則不可進行輸血。2 結(jié)果進行交叉配血的患者15352例，有50例出現(xiàn)交叉配血不合的情況。其中有27例患者是假陽性的凝集，占總數(shù)的54%： 4例是由于患者自身患有多發(fā)性骨髓瘤疾病，5例患者靜脈注射甘露醇造成的假陽性聚集，2例患者血小板含量過高引起假陽性聚集，6例患者血液中白細胞數(shù)量過高引起的假陽性，2例患者含有高纖維蛋白原引發(fā)的假陽性，7例患者血液樣本發(fā)生溶血引發(fā)的假陽性溶血；10例患者是由于紅細胞凝集引發(fā)的凝集；3例是由于具有不規(guī)則抗體引

5、發(fā)的凝集；2例患者是由于藥物過敏引起的紅細胞凝集；2例患者是發(fā)生冷凝集；2例患者是產(chǎn)生了溫自身抗體；1例患者是由于移植引發(fā)的凝集；1例患者是由于紅細胞多凝集；1例患者是發(fā)生紅細胞全凝集；1例患者配血過程中是供血者DAT抗人球蛋白試驗陽性。3 討論3.1 紅細胞凝集造成的假陽性 很多血液配型實驗中出現(xiàn)假陽性對實驗結(jié)果造成干擾，造成這種情況的發(fā)生的原因有很多，如抽血所加抗凝劑劑量不足或抗凝劑沒有與血液充分混勻、患者自身血液中含有某種特殊的物質(zhì)會使血液發(fā)生凝集等，下面對原因進行具體分析：3.1.1 患者自身血液中含有某種特殊的物質(zhì) 有些患者患有高免疫球蛋白血癥或靜脈注射過高分子藥物，患有多發(fā)性骨髓瘤

6、或巨球蛋白血癥、嚴重的肝臟疾病及霍奇金病等，此類疾病會增加血清中蛋白的分泌量，使體內(nèi)白蛋白與球蛋白的比例發(fā)生失調(diào)，交叉配血過程中會使紅細胞表面的ζ點位發(fā)生降低，使紅細胞發(fā)生聚集。當靜脈中注入高分子量的藥物如右旋糖酐、羥乙基淀粉及甘露醇等時，也會增加血液粘稠度出現(xiàn)假陽性的現(xiàn)象。臨床上為避免此類情況的發(fā)生，常用鹽水法進行配血，配血過程中，主管經(jīng)離心后棄去血漿，加入23滴的生理鹽水進行觀察。3.1.2 患者血液中的血小板或白細胞的含量升高 此情況常發(fā)生在慢性粒細胞性白血病患者中，血細胞計數(shù)結(jié)果常顯示此具有較高的白細胞數(shù)。血液標本經(jīng)離心處理后，有大量的白細胞混在血漿中。由于白細胞具有較大的細

7、胞形態(tài)和極弱的變形能力，在使用微柱凝膠卡進行配血的過程中，白細胞常堵塞微孔導致游離的紅細胞不能順利通過微孔到達底部，造成假陽性的結(jié)果。若患者具有較高的血小板計數(shù)，在交叉配血前對于樣本處理過程中，離心的速度、離心的時間都會對結(jié)果有影響【7】。臨床上對于此類情況的處理辦法是在交叉配血前先使患者的血漿中白細胞和血小板充分沉淀，就可以消除其對配血結(jié)果的影響，具體處理辦法是在患者血清中加入EDTA-NaZ抗凝標本血，2000r離心10min。3.1.3 高纖維蛋白原對于結(jié)果的影響 若患者血漿中的纖維蛋白原含量高，在交叉配血的過程中，患者的纖維蛋白原可能被激活轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，進而使凝血酶原被激活產(chǎn)生凝血酶

8、造成血液凝集，對配血結(jié)果造成影響。臨床dyLw.nET對于此類情況的處理辦法有以下幾種：采用加溫孵育以消除纖維蛋白原對于配血結(jié)果造成的干擾，將樣本方在37的溫箱孵育20min，離心再進行后續(xù)的配血實驗。通過血清交叉配血也可以消除纖維蛋白原對于實驗的干擾。3.1.4 樣本發(fā)生溶血 若采血過程不當，患者患有溶血性貧血等，樣本中大量的紅細胞碎片在進行微柱凝膠法時會堵住凝膠微孔，紅細胞不能完全到達底部造成假陽性。臨床對于此類情況的解決辦法是改變配血方法，用凝聚胺法進行配血，對于發(fā)生凝集的現(xiàn)象，應在顯微鏡下觀察是否真凝集。3.2 紅細胞真凝集3.2.1 不規(guī)則抗體 在紅細胞血型抗體中，存在除了ABO系統(tǒng)

9、以外的同種抗體，其特異性經(jīng)譜細胞可以得到鑒定。此種抗體常由于進行同種異體輸血、妊娠等發(fā)生。在對于無償獻血人血型中不規(guī)則抗體的篩查中發(fā)現(xiàn)，約有0.3%的人有不規(guī)則抗體，且女性不規(guī)則抗體的檢出率明顯高于男性。若供體血中含有與受體血不規(guī)則抗體相對應的抗原，在交叉配血中會出現(xiàn)凝集的現(xiàn)象，配血時應注意不規(guī)則抗體對檢驗結(jié)果的影響。3.2.2 藥物影響 有些無輸血史、自身免疫系統(tǒng)疾病等，血漿總蛋白、白細胞、血小板及纖維蛋白原等的含量正常，但在檢查過程中，出現(xiàn)DAT陽性，對于此類患者要考慮其是否對于某些藥物有過敏史。有些患者紅細胞膜受到如頭孢菌素等的影響，會對蛋白產(chǎn)生非特異性的吸附，導致DAT結(jié)果顯陽性。增加

10、了配血的難度。出現(xiàn)此類情況，應使患者停藥觀察，再進行DAT檢測，看實驗結(jié)果是否是陰性。3.3 自身抗體3.3.1 冷凝集紅細胞在寒冷的環(huán)境下會出現(xiàn)凝集成團的現(xiàn)象，稱為冷凝集。主要由于紅細胞的表面物質(zhì)會隨溫度改變。低溫的環(huán)境下會使紅細胞膜表面的抗原決定簇發(fā)生暴露，與相應的抗體發(fā)生抗原抗體反應，在人體溫度下，抗原抗體之間的相互作用被細胞膜表面的物質(zhì)所阻斷。冷凝集常發(fā)生在04的條件下，凝集現(xiàn)象隨溫度的升高發(fā)生降解。臨床上對于此類情況的處理辦法常采用采血后立即離心，獲得紅細胞用37的整理鹽水洗滌，聚集現(xiàn)象若未得到緩解，45水浴3min，而且實驗交叉配血過程要保持在37進行。3.3.2 患有免疫性疾病的

11、患者 在患者的血清及紅細胞有自身抗體，這些抗體會使紅細胞發(fā)生凝集，造成在交配過程中發(fā)生凝集。臨床對于此類疾病的處理方式有以下幾種：與多人ABO血型相同的血液進行配型實驗，選擇凝集性較弱的供血者的血液作為供體。患者自身抗體干擾ABO血型的測定，若用于急救，可給予O型洗滌紅細胞進行輸血。3.4 干細胞移植術后植 移患者接受ABO血型不同的干細胞移植后，由于原有血型紅細胞的衰亡，受體者的血型會轉(zhuǎn)為供體者的血型，在受體者完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┭咧埃诉^程的輸血要十分注意，要根據(jù)患者的血型抗體制定合理的輸血策略。若受體者體內(nèi)存在供體ABO血型抗原的相應抗體，紅細胞血液制品的血型要與受體dyLw.nET者相同，

12、為了使受體的紅細胞血型轉(zhuǎn)變成供體者的血型，應先對紅細胞經(jīng)輸血柱洗滌。若供體者體內(nèi)存在受體者ABO血型抗原的抗體，在移植后3周內(nèi)應隨時監(jiān)測受體者血型抗體的效價，進行DAT實驗。若為陽性結(jié)果，可以輸O型血。若受體體內(nèi)存在對抗供體者ABO血型的抗原的抗體，也供體者體內(nèi)存在對抗受體者ABO血型的抗體，當受體者血清完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣w者血清前輸血應輸O型血。3.5 紅細胞出現(xiàn)多凝集或全部凝集的現(xiàn)象 其出現(xiàn)原因與紅細胞被細菌及細菌酶等污染或基因變異等有關，導致細胞膜發(fā)生改變，T抗原暴露，產(chǎn)生免疫原性。由于在人血清中，幾乎都含有T抗體，所以在此種情況下，交叉配血的結(jié)果幾乎是與所有的供體者血清發(fā)生凝集。全凝集的鑒定

13、方法是與嬰兒的臍帶血或者6個月以內(nèi)的嬰兒血清進行反應，觀察是否有凝集現(xiàn)象的產(chǎn)生，因為T抗體在6個月以內(nèi)的嬰兒體內(nèi)是不存在的，不會出現(xiàn)全凝集的現(xiàn)象。若全凝集是由于疾病引起的，這種情況一般是暫時性的，主要與疾病的恢復有關。3.6 供體血DAT陽性 有實驗研究表明，在正常人群中，約有千分之一的供體血呈DAT陽性【2】，其紅細胞應盡量避免輸給其他的患者。此類情況極易發(fā)生輸血危險，臨床工作中應引起注意。輸血前的交叉配血對于臨床輸血是十分必要的，準確的血液配型可減少由于輸血帶來的危險，可以有效的保障患者的健康與生命安全。在配血過程中，存在很多對于實驗結(jié)果有干擾的因素，臨床實際工作中，要注意對各種干擾因素的

14、分析、排查及預防，以確保得到準確有效的篩查結(jié)果，對臨床輸血提供有效的依據(jù)。參考文獻【1】何子毅，劉赴平，車嘉琳.電子交叉配血的現(xiàn)狀和展望.臨床輸血與檢驗，2009，11（4）：380-381.【2】胡飄萍.交叉配血不合原因分析及處理.實驗與檢驗醫(yī)學，2013，31（1）：59-60.【3】吳勇，吳遠軍，陳寶嬋.紅細胞血型不規(guī)則抗體的檢測和分析.臨床輸血與檢驗，2010，10（14）：343-346.【4】夏兵，戴書萍，裴寶芹.慢性粒細胞白血病致微柱凝膠法交叉配血假陽性1例.中國輸血雜志，2011，24（2）：152-153.【5】鄒海虹，甘福生.凝聚胺法在交叉配血試驗中的應用價值檢驗醫(yī)學與臨床，2012，9（22），2889-2891.【6】王晶吉.dyLw.nET交叉配血試驗中纖維蛋白原的干擾原因分析和去除方法的探討中國醫(yī)藥指南2011，9（10）：96-97.【7】楊瑩，譚雅