臨床用血前交叉配血不合50例原因的探討

1、臨床用血前交叉配血不合50例原因的探討輸血治療是現(xiàn)在臨床上一種不可替代的常用治療手段，在患者出現(xiàn)大量失血的情況時(shí)，常采用輸血的方式挽救病人的生命。近些年，隨著醫(yī)療水平的提高，術(shù)中需要輸血的手術(shù)數(shù)量也隨之增加，臨床對(duì)于血液的需求量在與日俱增【1】。但是在輸血的過(guò)程中，也存在一定的安全隱患，安全輸血成為輸血關(guān)注的首要問(wèn)題。交叉配血，指體外對(duì)于血液相容性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行模擬，以了解供體血與受體血之間是否存在抗原抗體反應(yīng)，此方法是在血型鑒定的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，是臨床上常用于確保臨床用血安全的方法。在臨床工作中，常出現(xiàn)交叉配血不相符合的情況，即供血者的血清可以使患者的紅細(xì)胞發(fā)生凝集或者患者的血清使供血者的紅細(xì)胞

2、發(fā)生凝集。筆者對(duì)2013年1月至2014年12月進(jìn)行交叉配血出現(xiàn)不合的病例進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。1 資料與方法1.1 一般資料 2013年1月至2014年12月在我院進(jìn)行交叉配血的患者共15352例，其中有50例出現(xiàn)交叉配血不合的情況。50例患者，年齡1958歲，平均年齡為（45.32±2.43）歲，其中男性25例，女性25例。排除有血液病史的患者。1.2 檢測(cè)試劑與標(biāo)本 單克隆抗體A、單克隆抗體B（上海血液生物醫(yī)藥公司，（98）衛(wèi)藥準(zhǔn)字（血）S-01號(hào)）、微凝膠柱卡、不規(guī)則抗體篩選卡長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)、抗體篩選細(xì)胞、抗人球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥公司，a/

3、sAANR002-2002）。可以篩選鑒定抗體的不抗凝血，EDTA-Na2抗凝標(biāo)本血。1.3 檢測(cè)儀器 微柱凝膠卡專(zhuān)用離心機(jī)、孵育器（中山市生科試劑儀器有限公司），TD-2Y多功能離心機(jī)（中山市生科試劑儀器有限公司）1.4 實(shí)驗(yàn)方法 按照全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程【3】進(jìn)行抗人球蛋白檢測(cè)、交叉配血、紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選。采用鹽水介質(zhì)配血和抗人球蛋白卡配血法進(jìn)行交叉配血。為確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性，兩種檢測(cè)方法均需進(jìn)行，操作過(guò)程按照試劑的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。1.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià) 對(duì)于患者出現(xiàn)交叉配血不合格的情況進(jìn)行分析，若患者紅細(xì)胞發(fā)生凝集是由于患者自身多發(fā)骨髓瘤疾病、靜脈注射甘露醇、血小板含量過(guò)高、白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高、纖

4、維蛋白原含量過(guò)高或血液樣本發(fā)生溶血dyLw.nET所導(dǎo)致的假陽(yáng)性，應(yīng)在消除干擾后重新進(jìn)行血液配型。若患者產(chǎn)生紅細(xì)胞真凝集或自身產(chǎn)生抗體所導(dǎo)致的凝集，配血不合格則不可進(jìn)行輸血。2 結(jié)果進(jìn)行交叉配血的患者15352例，有50例出現(xiàn)交叉配血不合的情況。其中有27例患者是假陽(yáng)性的凝集，占總數(shù)的54%： 4例是由于患者自身患有多發(fā)性骨髓瘤疾病，5例患者靜脈注射甘露醇造成的假陽(yáng)性聚集，2例患者血小板含量過(guò)高引起假陽(yáng)性聚集，6例患者血液中白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高引起的假陽(yáng)性，2例患者含有高纖維蛋白原引發(fā)的假陽(yáng)性，7例患者血液樣本發(fā)生溶血引發(fā)的假陽(yáng)性溶血；10例患者是由于紅細(xì)胞凝集引發(fā)的凝集；3例是由于具有不規(guī)則抗體引

5、發(fā)的凝集；2例患者是由于藥物過(guò)敏引起的紅細(xì)胞凝集；2例患者是發(fā)生冷凝集；2例患者是產(chǎn)生了溫自身抗體；1例患者是由于移植引發(fā)的凝集；1例患者是由于紅細(xì)胞多凝集；1例患者是發(fā)生紅細(xì)胞全凝集；1例患者配血過(guò)程中是供血者DAT抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。3 討論3.1 紅細(xì)胞凝集造成的假陽(yáng)性 很多血液配型實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)假陽(yáng)性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾，造成這種情況的發(fā)生的原因有很多，如抽血所加抗凝劑劑量不足或抗凝劑沒(méi)有與血液充分混勻、患者自身血液中含有某種特殊的物質(zhì)會(huì)使血液發(fā)生凝集等，下面對(duì)原因進(jìn)行具體分析：3.1.1 患者自身血液中含有某種特殊的物質(zhì) 有些患者患有高免疫球蛋白血癥或靜脈注射過(guò)高分子藥物，患有多發(fā)性骨髓瘤

6、或巨球蛋白血癥、嚴(yán)重的肝臟疾病及霍奇金病等，此類(lèi)疾病會(huì)增加血清中蛋白的分泌量，使體內(nèi)白蛋白與球蛋白的比例發(fā)生失調(diào)，交叉配血過(guò)程中會(huì)使紅細(xì)胞表面的ζ點(diǎn)位發(fā)生降低，使紅細(xì)胞發(fā)生聚集。當(dāng)靜脈中注入高分子量的藥物如右旋糖酐、羥乙基淀粉及甘露醇等時(shí)，也會(huì)增加血液粘稠度出現(xiàn)假陽(yáng)性的現(xiàn)象。臨床上為避免此類(lèi)情況的發(fā)生，常用鹽水法進(jìn)行配血，配血過(guò)程中，主管經(jīng)離心后棄去血漿，加入23滴的生理鹽水進(jìn)行觀察。3.1.2 患者血液中的血小板或白細(xì)胞的含量升高 此情況常發(fā)生在慢性粒細(xì)胞性白血病患者中，血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果常顯示此具有較高的白細(xì)胞數(shù)。血液標(biāo)本經(jīng)離心處理后，有大量的白細(xì)胞混在血漿中。由于白細(xì)胞具有較大的細(xì)

7、胞形態(tài)和極弱的變形能力，在使用微柱凝膠卡進(jìn)行配血的過(guò)程中，白細(xì)胞常堵塞微孔導(dǎo)致游離的紅細(xì)胞不能順利通過(guò)微孔到達(dá)底部，造成假陽(yáng)性的結(jié)果。若患者具有較高的血小板計(jì)數(shù)，在交叉配血前對(duì)于樣本處理過(guò)程中，離心的速度、離心的時(shí)間都會(huì)對(duì)結(jié)果有影響【7】。臨床上對(duì)于此類(lèi)情況的處理辦法是在交叉配血前先使患者的血漿中白細(xì)胞和血小板充分沉淀，就可以消除其對(duì)配血結(jié)果的影響，具體處理辦法是在患者血清中加入EDTA-NaZ抗凝標(biāo)本血，2000r離心10min。3.1.3 高纖維蛋白原對(duì)于結(jié)果的影響 若患者血漿中的纖維蛋白原含量高，在交叉配血的過(guò)程中，患者的纖維蛋白原可能被激活轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，進(jìn)而使凝血酶原被激活產(chǎn)生凝血酶

8、造成血液凝集，對(duì)配血結(jié)果造成影響。臨床dyLw.nET對(duì)于此類(lèi)情況的處理辦法有以下幾種：采用加溫孵育以消除纖維蛋白原對(duì)于配血結(jié)果造成的干擾，將樣本方在37的溫箱孵育20min，離心再進(jìn)行后續(xù)的配血實(shí)驗(yàn)。通過(guò)血清交叉配血也可以消除纖維蛋白原對(duì)于實(shí)驗(yàn)的干擾。3.1.4 樣本發(fā)生溶血 若采血過(guò)程不當(dāng)，患者患有溶血性貧血等，樣本中大量的紅細(xì)胞碎片在進(jìn)行微柱凝膠法時(shí)會(huì)堵住凝膠微孔，紅細(xì)胞不能完全到達(dá)底部造成假陽(yáng)性。臨床對(duì)于此類(lèi)情況的解決辦法是改變配血方法，用凝聚胺法進(jìn)行配血，對(duì)于發(fā)生凝集的現(xiàn)象，應(yīng)在顯微鏡下觀察是否真凝集。3.2 紅細(xì)胞真凝集3.2.1 不規(guī)則抗體 在紅細(xì)胞血型抗體中，存在除了ABO系統(tǒng)

9、以外的同種抗體，其特異性經(jīng)譜細(xì)胞可以得到鑒定。此種抗體常由于進(jìn)行同種異體輸血、妊娠等發(fā)生。在對(duì)于無(wú)償獻(xiàn)血人血型中不規(guī)則抗體的篩查中發(fā)現(xiàn)，約有0.3%的人有不規(guī)則抗體，且女性不規(guī)則抗體的檢出率明顯高于男性。若供體血中含有與受體血不規(guī)則抗體相對(duì)應(yīng)的抗原，在交叉配血中會(huì)出現(xiàn)凝集的現(xiàn)象，配血時(shí)應(yīng)注意不規(guī)則抗體對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響。3.2.2 藥物影響 有些無(wú)輸血史、自身免疫系統(tǒng)疾病等，血漿總蛋白、白細(xì)胞、血小板及纖維蛋白原等的含量正常，但在檢查過(guò)程中，出現(xiàn)DAT陽(yáng)性，對(duì)于此類(lèi)患者要考慮其是否對(duì)于某些藥物有過(guò)敏史。有些患者紅細(xì)胞膜受到如頭孢菌素等的影響，會(huì)對(duì)蛋白產(chǎn)生非特異性的吸附，導(dǎo)致DAT結(jié)果顯陽(yáng)性。增加

10、了配血的難度。出現(xiàn)此類(lèi)情況，應(yīng)使患者停藥觀察，再進(jìn)行DAT檢測(cè)，看實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否是陰性。3.3 自身抗體3.3.1 冷凝集紅細(xì)胞在寒冷的環(huán)境下會(huì)出現(xiàn)凝集成團(tuán)的現(xiàn)象，稱(chēng)為冷凝集。主要由于紅細(xì)胞的表面物質(zhì)會(huì)隨溫度改變。低溫的環(huán)境下會(huì)使紅細(xì)胞膜表面的抗原決定簇發(fā)生暴露，與相應(yīng)的抗體發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，在人體溫度下，抗原抗體之間的相互作用被細(xì)胞膜表面的物質(zhì)所阻斷。冷凝集常發(fā)生在04的條件下，凝集現(xiàn)象隨溫度的升高發(fā)生降解。臨床上對(duì)于此類(lèi)情況的處理辦法常采用采血后立即離心，獲得紅細(xì)胞用37的整理鹽水洗滌，聚集現(xiàn)象若未得到緩解，45水浴3min，而且實(shí)驗(yàn)交叉配血過(guò)程要保持在37進(jìn)行。3.3.2 患有免疫性疾病的

11、患者 在患者的血清及紅細(xì)胞有自身抗體，這些抗體會(huì)使紅細(xì)胞發(fā)生凝集，造成在交配過(guò)程中發(fā)生凝集。臨床對(duì)于此類(lèi)疾病的處理方式有以下幾種：與多人ABO血型相同的血液進(jìn)行配型實(shí)驗(yàn)，選擇凝集性較弱的供血者的血液作為供體。患者自身抗體干擾ABO血型的測(cè)定，若用于急救，可給予O型洗滌紅細(xì)胞進(jìn)行輸血。3.4 干細(xì)胞移植術(shù)后植 移患者接受ABO血型不同的干細(xì)胞移植后，由于原有血型紅細(xì)胞的衰亡，受體者的血型會(huì)轉(zhuǎn)為供體者的血型，在受體者完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┭咧埃诉^(guò)程的輸血要十分注意，要根據(jù)患者的血型抗體制定合理的輸血策略。若受體者體內(nèi)存在供體ABO血型抗原的相應(yīng)抗體，紅細(xì)胞血液制品的血型要與受體dyLw.nET者相同，

12、為了使受體的紅細(xì)胞血型轉(zhuǎn)變成供體者的血型，應(yīng)先對(duì)紅細(xì)胞經(jīng)輸血柱洗滌。若供體者體內(nèi)存在受體者ABO血型抗原的抗體，在移植后3周內(nèi)應(yīng)隨時(shí)監(jiān)測(cè)受體者血型抗體的效價(jià)，進(jìn)行DAT實(shí)驗(yàn)。若為陽(yáng)性結(jié)果，可以輸O型血。若受體體內(nèi)存在對(duì)抗供體者ABO血型的抗原的抗體，也供體者體內(nèi)存在對(duì)抗受體者ABO血型的抗體，當(dāng)受體者血清完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣w者血清前輸血應(yīng)輸O型血。3.5 紅細(xì)胞出現(xiàn)多凝集或全部凝集的現(xiàn)象 其出現(xiàn)原因與紅細(xì)胞被細(xì)菌及細(xì)菌酶等污染或基因變異等有關(guān)，導(dǎo)致細(xì)胞膜發(fā)生改變，T抗原暴露，產(chǎn)生免疫原性。由于在人血清中，幾乎都含有T抗體，所以在此種情況下，交叉配血的結(jié)果幾乎是與所有的供體者血清發(fā)生凝集。全凝集的鑒定

13、方法是與嬰兒的臍帶血或者6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒血清進(jìn)行反應(yīng)，觀察是否有凝集現(xiàn)象的產(chǎn)生，因?yàn)門(mén)抗體在6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒體內(nèi)是不存在的，不會(huì)出現(xiàn)全凝集的現(xiàn)象。若全凝集是由于疾病引起的，這種情況一般是暫時(shí)性的，主要與疾病的恢復(fù)有關(guān)。3.6 供體血DAT陽(yáng)性 有實(shí)驗(yàn)研究表明，在正常人群中，約有千分之一的供體血呈DAT陽(yáng)性【2】，其紅細(xì)胞應(yīng)盡量避免輸給其他的患者。此類(lèi)情況極易發(fā)生輸血危險(xiǎn)，臨床工作中應(yīng)引起注意。輸血前的交叉配血對(duì)于臨床輸血是十分必要的，準(zhǔn)確的血液配型可減少由于輸血帶來(lái)的危險(xiǎn)，可以有效的保障患者的健康與生命安全。在配血過(guò)程中，存在很多對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果有干擾的因素，臨床實(shí)際工作中，要注意對(duì)各種干擾因素的

14、分析、排查及預(yù)防，以確保得到準(zhǔn)確有效的篩查結(jié)果，對(duì)臨床輸血提供有效的依據(jù)。參考文獻(xiàn)【1】何子毅，劉赴平，車(chē)嘉琳.電子交叉配血的現(xiàn)狀和展望.臨床輸血與檢驗(yàn)，2009，11（4）：380-381.【2】胡飄萍.交叉配血不合原因分析及處理.實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31（1）：59-60.【3】吳勇，吳遠(yuǎn)軍，陳寶嬋.紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的檢測(cè)和分析.臨床輸血與檢驗(yàn)，2010，10（14）：343-346.【4】夏兵，戴書(shū)萍，裴寶芹.慢性粒細(xì)胞白血病致微柱凝膠法交叉配血假陽(yáng)性1例.中國(guó)輸血雜志，2011，24（2）：152-153.【5】鄒海虹，甘福生.凝聚胺法在交叉配血試驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（22），2889-2891.【6】王晶吉.dyLw.nET交叉配血試驗(yàn)中纖維蛋白原的干擾原因分析和去除方法的探討中國(guó)醫(yī)藥指南2011，9（10）：96-97.【7】楊瑩，譚雅