藥劑學課件-脂質(zhì)體制備技術(shù)

1、脂質(zhì)體制備技術(shù),內(nèi)容提要,脂質(zhì)體的概念 脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分類 脂質(zhì)體的制備方法 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究 特殊性能脂質(zhì)體 脂質(zhì)體的作用機理 脂質(zhì)體的特點,第一節(jié)概述,脂質(zhì)體(liposomes) 將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層內(nèi)而形成的微型囊泡,脂質(zhì)體的研究進展,1965年，英國Banghan作為研究生物膜的模型提出的。 20世紀70年代初期，Gregoriadis首先提出用脂質(zhì)體作為-半乳糖苷酶載體治療糖原積累疾病,脂質(zhì)體的研究進展,第一個藥用脂質(zhì)體制劑(1988年,瑞士) 益康唑脂質(zhì)體凝膠 第一個脂質(zhì)體注射劑(1990年美國) 兩性霉素B脂質(zhì)體 第一個抗癌藥物脂質(zhì)體(1995年，美國)

2、阿柔比星脂質(zhì)體,一、脂質(zhì)體的組成,磷脂,親水的頭部,磷酸骨架,水溶性分子（膽堿、絲氨酸等,疏水的尾部,膽固醇,脂質(zhì)體,第二節(jié) 脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分類,兩條脂肪酸鏈， （10-24個C原子，0-6個雙鍵,磷脂示意圖,脂質(zhì)體的組成,膽固醇的結(jié)構(gòu)圖,脂質(zhì)體材料,中性磷脂,負電荷磷脂 （酸性磷脂,正電荷脂質(zhì),膽固醇（Ch,大豆甾醇及其葡萄糖苷,磷脂酰膽堿（PC,磷脂酰乙醇胺（PE,鞘磷脂（SM,磷脂酸（PA） 磷脂酰甘油（PG） 磷脂酰肌醇 (PI) 磷脂酰絲氨酸(PS,硬脂酰胺（SA） 膽固醇衍生物,大豆甾醇葡萄糖苷(SG） 大豆甾醇SS,脂質(zhì)體的組成,1、中性磷脂 磷脂酰膽堿(phos

3、phatidyl choline,PC，) 天然的PC a. 脂質(zhì)體的主要組成部分 b. 從蛋黃、大豆、牛心臟和脊髓提取 c.是一種混合物，每一種PC具有不同長度、不同飽和度的脂肪鏈。 植物性PC的脂肪鏈具有高度不飽和性 動物性PC的脂肪鏈大部分是飽和的 合成的PC 二棕櫚酰膽堿（DPPC)、二硬脂酰膽堿(DSPC) 二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿（DMPC,脂質(zhì)體的組成（中性磷脂,脂質(zhì)體的組成（中性磷脂,磷脂酰膽堿(PC,a)全飽和磷脂 （緊密排列,b)非飽和磷脂 （不能緊密列,磷脂脂肪鏈的飽和度對磷脂膜排列的影響,脂質(zhì)體的組成（中性磷脂,磷脂酰乙醇胺 (phosphatid ethanolamine

4、, PE) 特性; 頭部基團小； 非飽和的PE容易形成非雙層結(jié)構(gòu)型 形成六角相（制備特殊脂質(zhì)體,六角相,磷脂酰乙醇胺（PE,鞘磷脂（sphingomyelin,SM） 特性：酰胺鍵和羥基基團之間形成氫鍵相互作用，因此，比PC具有更高秩序的膠相,脂質(zhì)體的組成（中性磷脂,SM,脂質(zhì)體的組成,磷脂酸(phosphatidic acid,PA,磷脂酰肌醇(phosphatidyl inositol,PI,磷脂酰絲氨酸(phosphatidyl serine, PS,2、負電荷磷脂（酸性磷脂,3、膽固醇(cholesterol, Ch)膜的另一類重要組成成分。 存在：動物細胞的質(zhì)膜中含量較高，植物中含量

5、較少。 性質(zhì)：為中性脂質(zhì)，亦屬于雙親性分子，但親油性大于親水性。 在脂質(zhì)體中的狀態(tài)：作為兩性分子，能嵌鑲?cè)肽?，羥基團朝向親水面，脂肪族的鏈朝向并平行于磷脂雙層中心的烴鏈。膽固醇本身不形成脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)，但它能以高濃度方式摻入磷脂膜。 在脂質(zhì)體中的作用：主要與磷脂相結(jié)合，阻止磷脂凝集成晶體結(jié)構(gòu)。減弱膜中類脂與蛋白質(zhì)復合體之間的連接，像“緩沖劑”一樣起著調(diào)節(jié)膜結(jié)構(gòu)“流動性”的作用,脂質(zhì)體的組成,脂質(zhì)體的組成,膽固醇與磷脂的排列示意圖,4、正電荷脂質(zhì) 硬脂酰胺(sterylamine,SA)、膽固醇衍生物。 普遍應用于基因的傳遞系統(tǒng) 5、大豆甾醇及其葡萄糖苷 為純天然品，較安全，價格便宜。 大豆甾醇葡

6、萄糖苷(SG) 是從提煉豆油殘渣中分離出來的甾醇葡萄糖苷的混合物。 能提高脂質(zhì)體的肝靶向性。 大豆甾醇（soybean sterol,SS） 是SG去葡萄糖殘基的水解產(chǎn)物。與Ch結(jié)構(gòu)相似，能提高脂質(zhì)體穩(wěn)定性，其膜穩(wěn)定作用大于Ch,脂質(zhì)體的組成,二、脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu) 雙分子結(jié)構(gòu)：磷脂分子的親水端呈 彎曲的弧形，形似“手杖”，與 膽固醇分子的親水基團相結(jié)合，形 成“U”形結(jié)構(gòu)。兩個“U”形結(jié)構(gòu)相對 排列，則形成雙分子結(jié)構(gòu),第二節(jié) 脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分類,卵磷脂與膽固醇在脂質(zhì)體中的排列形式,脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)類似生物膜，在脂質(zhì)體的水相和脂質(zhì)雙分子層組成的膜內(nèi)可以包裹多種物質(zhì),包裹物質(zhì),脂溶性藥物

7、定位于雙分子層脂質(zhì)膜間,兩性化合物 定位在水相與膜內(nèi)部交界磷脂上,水溶性藥物 包裹在水相,不能包裹物質(zhì),在水相和有機溶劑中都不溶的物質(zhì),在兩種介質(zhì)中溶解性都非常好的物質(zhì),脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu),單室脂質(zhì)體,多室脂質(zhì)體,三、脂質(zhì)體的理化性質(zhì),第二節(jié) 脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分類,理化性質(zhì),相變溫度,膜的通透性,膜的流動性,脂質(zhì)體荷電性,1、相變溫度(phase transition temperature, Tc,脂質(zhì)體,升高溫度,至一定溫度,膜的物理性質(zhì)改變 膜的橫切面增加、雙分子層厚度減少、膜流動性加,脂質(zhì)雙分子層中?；鶄?cè)鏈排列改變 有序排列變?yōu)闊o序排列,相變溫度Tc,脂質(zhì)體的理化性質(zhì)（相變溫度

8、,決定Tc的因素 （1）磷脂的種類。磷脂都具有特定的Tc值。 （2）極性基團的性質(zhì)。 （3）?；鶄?cè)鏈的長度和不飽和度。 ?；鶄?cè)鏈長 Tc高 鏈的飽和度高 Tc高,脂質(zhì)體的理化性質(zhì)（相變溫度,Tc以下時，為“膠晶態(tài)”（脂肪鏈全反式，排列緊密，剛性和厚度增加） Tc以上時，為 “液晶態(tài)” （脂肪鏈伸縮、彎曲、外扭） 磷脂發(fā)生相變時， “膠晶態(tài)” “液晶態(tài)” “液態(tài)”共存， 出現(xiàn)相分離，使膜的流動性增加，易導致內(nèi)容物泄漏,脂質(zhì)體的理化性質(zhì)（相變溫度,相變溫度與脂質(zhì)體膜穩(wěn)定性,脂質(zhì)體的理化性質(zhì)（相變溫度,2、膜的通透性 (1)半通透性脂質(zhì)體膜： 不同離子穿膜和分子擴散過膜速率不同。 (2)膜兩側(cè)的滲透

9、壓： 導致分子量較小的物質(zhì)滲漏或磷脂膜破裂 (3)對于在水中和有機溶劑中溶解度都非常高的分子， 磷脂膜是一種非常弱的屏障,脂質(zhì)體的理化性質(zhì),3.膜的流動性 Tc時膜的流動性增加： 包裹在脂質(zhì)體內(nèi)的藥物具有最大釋放速率。 膽固醇可調(diào)節(jié)膜的流動性： a.高于Tc時，減少膜的流動性 b.低于Tc時，增加膜的流動性 4、荷電性 含酸性脂質(zhì)的脂質(zhì)體荷負電 含堿基的脂質(zhì)體荷正電 不含離子的脂質(zhì)體顯電中性,脂質(zhì)體的理化性質(zhì),脂質(zhì)體分類,按結(jié)構(gòu)類型分類,單室（層）脂質(zhì)體,多室（層）脂質(zhì)體（MLVs,多囊脂質(zhì)體（MVLs,小單室（層）脂質(zhì)體(SUVs,大單室（層）脂質(zhì)體(LUVs,1、按結(jié)構(gòu)類型分類 單室（層）

10、脂質(zhì)體，是由一層雙分子膜形成的囊泡。 小單室（層）脂質(zhì)體（SUVs） 最小粒徑 20 nm 80nm - 納米脂質(zhì)體 包封容積低 體內(nèi)循環(huán)時間長 大單室（層）脂質(zhì)體(LUVs) 一般粒徑100nm 1000nm 對水溶性藥物的包封率高，包封容積大。 如果粒徑較大(500nm)，膜不穩(wěn)定,脂質(zhì)體的分類（按結(jié)構(gòu)類型分類,2多室（層）脂質(zhì)體(MLVs), 雙分子脂質(zhì)膜與水交替形成的多層結(jié)構(gòu)的囊泡。 一般由五層、或更多層的同心板組成。 較少層數(shù)(兩到四層)的又稱為寡層脂質(zhì)體。 粒徑一般為100nm5m。 包封容積相對較低,脂質(zhì)體的分類（按結(jié)構(gòu)分類,3多囊脂質(zhì)體 (multivescular lipos

11、omes,MVLs) 由許多非同心囊泡構(gòu)成，每個囊泡中包裹著被裝載藥物的水溶液。 粒徑為550m 。 適用于包裹水溶性物質(zhì)。 載藥量比單層脂質(zhì)體 和多層脂質(zhì)體高得多 具有緩釋作用,脂質(zhì)體的分類（按結(jié)構(gòu)分類,多囊脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu),脂質(zhì)體的分類,按結(jié)構(gòu)性能分類,特殊性能脂質(zhì)體 （特殊的脂質(zhì)材料制成,普通脂質(zhì)體(一般脂質(zhì)材料制成,熱敏感性脂質(zhì)體 pH敏感脂質(zhì)體 多糖被復的脂質(zhì)體 免疫脂質(zhì)體 長循環(huán)脂質(zhì)體 光敏脂質(zhì)體 磁性脂質(zhì)體,脂質(zhì)體的分類,按荷電性分類,正電荷脂質(zhì)體,負電荷脂質(zhì)體,中性脂質(zhì)體,脂質(zhì)體的分類,按給藥途徑分類,靜脈給藥脂質(zhì)體 口服給藥脂質(zhì)體 肺部吸入給藥脂質(zhì)體 眼部用藥脂質(zhì)體 黏膜給藥脂質(zhì)

12、體 外用脂質(zhì)體和經(jīng)皮給藥脂質(zhì)體 局部注射用脂質(zhì)體（肌注、關(guān)節(jié)腔、脊髓腔、腫瘤內(nèi)等） 免疫診斷用脂質(zhì)體 基因工程和生物工程用脂質(zhì)體,第三節(jié) 脂質(zhì)體的制備方法,薄膜分散法,制備方法,逆相蒸發(fā)法,溶劑注入法,冷凍干燥法,pH梯度法,前體脂質(zhì)體法,干膜超聲法 薄膜-振蕩分散法 薄膜-勻化法 薄膜-擠壓法,乙醇注入法 乙醚注入法,一.薄膜分散法,膜材,有機溶劑（氯仿等） （脂溶性藥物,膜材溶液,減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑,器壁上形成薄膜,加入緩沖液（水溶性藥物,振搖,大多層脂質(zhì)體,多層脂質(zhì)體,各種機械方法分散,脂質(zhì)體的制備方法,1干膜超聲法 超聲波儀（探針型和水浴型）超聲處理 脂質(zhì)體混懸液 葡聚糖凝膠柱層析（

13、分離除去未包入的藥物） 脂質(zhì)體混懸液 2薄膜-振蕩分散法 干膜 加入緩沖溶液 液體快速混合器振蕩（252min） 脂質(zhì)體 3薄膜-勻化法 將薄膜-振蕩分散法制備的較大粒徑脂質(zhì)體 組織搗機或高壓乳勻機勻化 較小粒徑的脂質(zhì)體。 此法較適合工業(yè)生產(chǎn),脂質(zhì)體的制備方法（薄膜法,脂質(zhì)體的制備方法,膜材,W/O型乳劑,溶于有機溶劑（氯仿、乙醚,加入待包封藥物的水溶液,膠態(tài),短時超聲,減壓蒸發(fā)有機溶劑,脫落凝膠液,滴加緩沖液,繼續(xù)減壓蒸發(fā),旋轉(zhuǎn),充氮氣至氣味消失,水性混懸液,超速離心 或凝膠色譜法,除去未包入的藥物,大單層脂質(zhì)體,工藝流程,二、逆相蒸發(fā)法,三、溶劑注入法 1、乙醇注入法 脂質(zhì)乙醇液 細針頭快

14、速注入到緩沖液中 SUVs。 （殘存的乙醇用透析法除去） 優(yōu)點：簡單快速,脂質(zhì)濃度受限。缺點: 水相包封率極低，乙醇難除。 2、乙醚注入法 脂質(zhì)乙醚液 細孔針頭慢慢注入5560的緩沖液中 乙醚蒸發(fā) 單層脂質(zhì)體(直徑50200nm)。 優(yōu)點：脂質(zhì)濃度不受限，水相包封率高； 缺點：制備時間長,脂質(zhì)體的制備方法,四、冷凍干燥法 磷脂 高度分散在緩沖鹽溶液中 超聲波處理 冷凍干燥（干燥物） 分散到含藥物的水性介質(zhì)中 脂質(zhì)體 冷凍溫度、速度及時間等因素影響脂質(zhì)體的包封率和穩(wěn)定性。 加入凍結(jié)保護劑，能降低凍融過程對脂質(zhì)體的損害。 甘露醇 、D-葡萄糖 此外還有：pH梯度法和前體脂質(zhì)體法等,脂質(zhì)體的制備方法

15、,一、脂質(zhì)體的粒徑和分布 脂質(zhì)體的粒徑大小和分布均勻程度，直接影響脂質(zhì)體在機體組織的行為和處置。 粒徑100nm，在血液循環(huán)時間長； 粒徑200nm，在血液循環(huán)時間短（易被巨嗜細胞作為外來異物吞噬,第四節(jié) 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究,檢測方法,1、光學顯微鏡法 2、電子顯微鏡法 3、激光散射法（塵粒計數(shù)法） 4、電感應法（庫爾特計數(shù)器） 5、光感應法（如粒度測定儀,負染法 冰凍蝕刻法,1、光學顯微鏡法 將脂質(zhì)體混懸液稀釋（約5倍），取1滴放入載玻片上或滴入細胞計數(shù)板內(nèi)，放上蓋玻片，觀察脂質(zhì)體粒徑大小和數(shù)目，然后按其大小分檔計數(shù)，以視野見到的粒子總數(shù)，求出各檔次百分數(shù)。 僅適用于大的脂質(zhì)體。 2、電子顯微

16、鏡法 用負染法和冰凍蝕刻法，用于分析小脂質(zhì)體。 負染法：用溶液懸浮脂質(zhì)體，樣品滴在有支持膜的銅網(wǎng)上，濾紙吸去 多余的液體，再滴重金屬染料，濾紙吸去多余液體，自然干燥30min， 用電鏡觀察脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)和粒徑分布,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（粒徑和分布,3、激光散射法（塵粒計數(shù)法） 將脂質(zhì)體混懸液稀釋后霧化，定量噴到計數(shù)儀散射腔， 自動計數(shù)儀記錄各檔次粒子的粒徑、數(shù)目，計算分布概率或 繪制粒徑分布圖。 此外，還有電感應法（庫爾特計數(shù)器）、光感應法（粒 度測定儀）等,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（粒徑和分布,二、脂質(zhì)體的包封率（重量包封率） 1、包封率：是指包入脂質(zhì)體內(nèi)的藥物量與投料量的重量百分比。 方法：測定脂質(zhì)體中

17、的藥量，經(jīng)色譜柱或離心分離測定介質(zhì)中未包入的藥量，計算,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（包封率,包封率,脂質(zhì)體中包封的藥量,脂質(zhì)體中包封與未包封的總藥量,100,2、影響脂質(zhì)體包封率的因素 脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)類型 脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)類型不同，其包封率也不同。 順序：LUVs(大單）MLV（多層）SUVs（小單） 脂質(zhì)體制備方法 處方擬訂后，制備方法就可決定結(jié)構(gòu)類型。故制備方法也與包封率有關(guān)，順序為： 乙醚注入法逆相蒸發(fā)法干膜法乙醇注入法超聲法 冷凍干燥法的冷凍過程使包封率下降,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（包封率,類脂膜的組成與電性 膜的組成 與脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，因此，對包封率有影響。 如 PC中加入Ch可提高包封率； 脂質(zhì)材

18、料與脂質(zhì)體表面的電性對離子型藥物的包封率影響很大 如：如水相離子型藥物的電性與脂質(zhì)體表面的電性相反時， 可能由于靜電結(jié)合的原因，包封率高,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（影響包封率的因素,藥物的性質(zhì)和濃度 膜材固定、制備方法固定的脂質(zhì)體，其包封率則由 被包封的藥物的性質(zhì)決定。 溶解性：脂溶性的藥物包封率高； 電性：藥物的電性與脂質(zhì)體膜的電性相反時，藥物包封率高； 分子量：分子量大的比分子量小的藥物包封率高； 一般情況下，藥物濃度增加，包封率下降,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（影響包封率的因素,三、脂質(zhì)體的包封容積 包封容積為每摩爾脂質(zhì)形成脂質(zhì)體后所包裹溶液的體積。 測定方法：用脂質(zhì)體包封水溶性的熒光標記物，直接測定水

19、相的體積。 四、脂質(zhì)體的藥脂包封比率 指一定重量的脂質(zhì)所包封藥物重量百分比,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究,藥脂包封比率,100,脂質(zhì)體中包封的藥量,處方中類脂的總量,五、脂質(zhì)體的滲漏率 滲漏率表示脂質(zhì)體在貯存期間包封率的變化情況，是 脂質(zhì)體不穩(wěn)定性的重要指標。 （在膜材中加入一定量的膽固醇，能夠加固脂質(zhì)雙層膜， 減少膜的流動性，可降低滲漏率。,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究,滲漏率,貯存后滲漏到介質(zhì)中的藥量,貯存前包封的藥量,100,六、磷脂的氧化程度 采用氧化指數(shù)為指標。 氧化指數(shù)=A233nm /A215nm 氧化指數(shù)0.2 避免脂質(zhì)氧化的措施： 用純化的脂質(zhì)和新鮮蒸餾的有機溶劑。 制備過程中避免高溫。在無氧條件下

20、制備。 用氮氣使水溶液脫氧。脂質(zhì)體在惰性氣體中保存。 加入抗氧化劑，減少膜氧化脂質(zhì)水平。 盡量使用飽和脂質(zhì)。 去除殘余有機溶劑,脂質(zhì)體的質(zhì)量研究,欖香烯脂質(zhì)體的質(zhì)量研究,欖香烯脂質(zhì)體透射電鏡照片,欖香烯脂質(zhì)體 粒度分布圖,欖香烯脂質(zhì)體電位,92.960.15),三批樣品平均包封率,158.536.6) nm,67.33.9）mV,形態(tài),粒徑,表面電位,包封率,穩(wěn)定性 考察,冰箱（4）4周后滲漏約5,第五節(jié) 特殊性能脂質(zhì)體,熱敏感性脂質(zhì)體（溫度敏感脂質(zhì)體,pH敏感脂質(zhì)體（酸敏感脂質(zhì)體,多糖被復的脂質(zhì)體（糖基脂質(zhì)體,免疫脂質(zhì)體,長循環(huán)脂質(zhì)體（長效脂質(zhì),光敏脂質(zhì)體,磁性脂質(zhì)體,特殊性能脂質(zhì)體,一、熱

21、敏感性脂質(zhì)體（溫度敏感脂質(zhì)體）。 設計原理：當溫度提高到某特定溫度（相變溫度Tc） 時，脂質(zhì)體膜由“膠晶態(tài)”轉(zhuǎn)變到“液晶態(tài)” ，磷脂的 ?；湹奈蓙y度和活動度增加，膜的流動性增加，脂質(zhì) 體所包封的藥物釋放率增大，低于Tc時，藥物的釋放相 對緩慢。 選用不同長度碳鏈的脂質(zhì)，如二棕櫚酰磷脂酰膽堿 (DPPC)和二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)，按一定比例混合, 通過適當方法制成相變溫度稍高于體溫的脂質(zhì)體。應用 時，通過適當?shù)募夹g(shù)使靶部位溫度與熱敏感脂質(zhì)體的相 變溫度相同，導致脂質(zhì)體迅速釋放內(nèi)含藥物,特殊性能脂質(zhì)體,熱敏感脂質(zhì)體釋放藥物示意圖,特殊性能脂質(zhì)體,二、pH敏感脂質(zhì)體（酸敏感脂質(zhì)體）。 組成

22、：不飽和的磷脂酰乙醇胺（PE）和脂肪酸。 特性：pH7.4時穩(wěn)定，在低pH時不穩(wěn)定，pH6.5的酸性 條件下，與相應的膜發(fā)生融合，釋放包裹的藥物到胞漿。 原理：脂質(zhì)體中含有不飽和的PE，在生理環(huán)境下可形成 六角相，需加入某些脂肪酸制成穩(wěn)定的脂質(zhì)體。當pH6.5 時，脂肪酸的羥基質(zhì)子化，脂質(zhì)形成六角相，引起膜的融合,特殊性能脂質(zhì)體,pH敏感脂質(zhì)體示意圖,病理組織的pH比正常組織低（如感染部位、原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移腫瘤組織），炎癥反應后60h的pH降低至6.5。細胞內(nèi)吞空泡的pH范圍為5.06.5。 脂質(zhì)體主要通過內(nèi)吞被細胞攝取，脂質(zhì)體達到的細胞內(nèi)位點是溶酶體，在溶酶體，脂質(zhì)體逐漸被破壞，多數(shù)情況下藥物

23、不能直接到達細胞漿. 而pH-敏感脂質(zhì)體在內(nèi)吞體酸性環(huán)境下不穩(wěn)定，脂質(zhì)體膜即與內(nèi)吞體膜融合，將內(nèi)容物釋放至胞漿,特殊性能脂質(zhì)體（pH敏感脂質(zhì)體,三、多糖被復的脂質(zhì)體（摻入糖基脂質(zhì)體）。 在脂質(zhì)體雙分子層中摻入多糖或糖脂的脂質(zhì)體。 特點： 1、糖基不同可改變脂質(zhì)體的組織分布： 如半乳糖為肝實質(zhì)細胞所攝取； 甘露糖為NK細胞所攝??； 膽固醇氨基甘露糖衍生物具有高度的向肺性。 2、能抑制給藥后在血流中某些崩解過程，使脂質(zhì)體穩(wěn)定,特殊性能脂質(zhì)體,四、長循環(huán)脂質(zhì)體（長效脂質(zhì)）。 1.含有神經(jīng)節(jié)苷脂GM1的脂質(zhì)體（隱蔽脂質(zhì)體） 在脂質(zhì)體膜上摻入神經(jīng)節(jié)苷脂GM1，引入了唾液酸殘基。 特點： 增強了膜的穩(wěn)定性

24、; 降低了血漿成分誘發(fā)的脂質(zhì)體溶解的敏感度; 降低了脂質(zhì)體內(nèi)容物的泄漏率; 減少了網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞對脂質(zhì)體的攝取; 延長了脂質(zhì)體的體內(nèi)循環(huán)時間。 缺點：GM1的價格昂貴，而且難以大量提取或合成,特殊性能脂質(zhì)體,2 、PEG衍生物脂質(zhì)體 脂質(zhì)體被PEG衍生物（PEG-DSPE二硬脂酸磷脂酰乙醇 胺,PEG-PE）修飾。 極性的PEG基：增強了脂質(zhì)體膜的親水性， 減少了血漿蛋白與脂質(zhì)體膜的相互作用， 阻止了脂質(zhì)體的凝聚和融合， 避免了網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細胞對脂質(zhì)體的攝取， 也延長了脂質(zhì)體的體內(nèi)循環(huán)時間,特殊性能脂質(zhì)體（長循環(huán)脂質(zhì)體,PEG修飾脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)示意圖,特殊性能脂質(zhì)體（長循環(huán)脂質(zhì)體,五、光敏脂質(zhì)體 將

25、光敏感物質(zhì)的藥物包裹在脂質(zhì)體內(nèi)進行光學治療。 當一定的波長照射時，脂質(zhì)體膜與囊泡物質(zhì)間或脂質(zhì)體之間 發(fā)生融合作用而釋放藥物。 六、免疫脂質(zhì)體。 摻入抗體形成被抗體修飾的具有免疫活性的脂質(zhì)體。 將抗體結(jié)合于脂質(zhì)體表面，可以提高人體的免疫機能，加快 免疫應答，增強脂質(zhì)體結(jié)合于靶細胞和釋藥的能力,特殊性能脂質(zhì)體,七、磁性脂質(zhì)體 將藥物和磁鐵性物質(zhì)包入脂質(zhì)體。 應用于體內(nèi)后，利用體外磁場的效應，引導藥物在體內(nèi)定向 移動和定位集中，在磁場區(qū)釋放藥物，從而起到靶區(qū)局部濃集作 用或靶區(qū)截流作用。 磁性藥物制劑可因響應外磁場作用而定位于預期的位置，猶 如“磁性導彈”，把網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的干擾降到最低程度。 脂質(zhì)體

26、雖然對腫瘤細胞具有靶向性，但注射給藥后，常富 集于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，不可避免的被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的巨噬細胞所 清除，磁性脂質(zhì)體可克服,特殊性能脂質(zhì)體,超微磁粉的制備方法： FeCl3和 FeCl2分別溶于水中，過濾后 混合，加入適量分散劑（如葡聚糖，防止磁化過 程黏結(jié)），經(jīng)超聲、攪拌等過程，制成磁流體 （Fe3O4黑色膠體），干燥后為超微磁粉,特殊性能脂質(zhì)體（磁性脂質(zhì)體,第六節(jié) 脂質(zhì)體的作用機理及影響因素,一. 脂質(zhì)體的作用機理,作用機理,吸附 脂質(zhì)交換 內(nèi)吞/吞噬 融合 擴散 磷酸酯酶消化,1吸附（adsorption） 吸附是脂質(zhì)體作用的開始。 脂質(zhì)體通過靜電疏水的作用，非特異性吸附到細胞表面；

27、通過脂質(zhì)體特異性配體與細胞表面結(jié)合，而特異吸附到細胞表面; 吸附在細胞表面的脂質(zhì)體僅在蛋白溶解酶作用下才能與 細胞脫離。吸附使細胞周圍藥物濃度增高，藥物可慢慢地 滲到細胞內(nèi),脂質(zhì)體的作用機理,2脂質(zhì)交換（lipid exchange） 脂質(zhì)體的脂質(zhì)成分與細胞膜的脂質(zhì)成分進行交換，而 不釋放水相內(nèi)容物進入細胞。 脂質(zhì)交換過程為脂質(zhì)體首先吸附在細胞上，然后在 細胞表面特異交換蛋白介導下，特異性交換脂質(zhì)的極性 頭部集團或非特異性地交換酰基鏈。 3融合（fusion） 融合是指脂質(zhì)體的膜插入細胞膜的脂質(zhì)層中而釋放出水相 內(nèi)容物到細胞內(nèi),脂質(zhì)體的作用機理,4、內(nèi)吞/吞噬（endocytosis / ph

28、agocytosis） 脂質(zhì)體作用的主要機制。 具有吞噬活動的細胞攝取脂質(zhì)體進入吞噬體 質(zhì)膜內(nèi)陷形成的亞細胞空泡 吞噬體與溶酶體融合 形成次級溶酶體(發(fā)生細胞消化) 溶酶體溶解脂質(zhì)體 釋放藥物,脂質(zhì)體的作用機理,5、擴散 皮膚用脂質(zhì)體凝膠劑，類脂膜成了控制釋藥膜，內(nèi)含藥物通 過擴散方式釋放進入體內(nèi)。 口服脂質(zhì)體，大多數(shù)在胃腸道破壞，但也可通過脂質(zhì)體與胃 腸道黏膜吸附、擴散或融合釋放內(nèi)容物。 6磷酸酯酶消化 脂質(zhì)體的磷脂膜可被磷酸酯酶消化。腫瘤組織中磷酸脂酶水平 明顯高于正常組織，所以脂質(zhì)體在腫瘤組織中更容易釋放藥物,脂質(zhì)體的作用機理,二.影響脂質(zhì)體作用的因素 1、脂質(zhì)體的大小 脂質(zhì)體的大小不同

29、，在體內(nèi)的分布不同。以靜脈給藥為例： 50nm，可透過肝內(nèi)皮，RES的巨噬細胞內(nèi)吞，轉(zhuǎn)到肝枯否氏細胞融酶體中； 1m，趨向于肺內(nèi)停留； 2-7m ，被毛細血管網(wǎng)攝取后，積聚于肺、脾和肝； 7-12m，多被肺機械性攝?。?15m，經(jīng)腸系膜、肝門靜脈或腎動脈給入，分別被腸、肝或腎攝取。 脂質(zhì)體的大小不同，在循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)停留的時間不同。粒徑愈小，體內(nèi)停留時間愈長。脂質(zhì)體小，分布廣，代謝率低,脂質(zhì)體的作用機理(影響因素,2、脂質(zhì)體的表面電荷 脂質(zhì)體的表面電荷和荷電量影響脂質(zhì)體與細胞膜的吸附作用。 靶細胞與脂質(zhì)體帶相反電荷時，會顯示靜電親和力。 用正電荷脂質(zhì)可降低藥物對心、腎、和骨髓的毒性。 3.脂質(zhì)體的

30、組成 膜成分可直接影響脂質(zhì)體所有作用機制和脂質(zhì)體在體內(nèi)的行為,脂質(zhì)體的作用機理(影響因素,4.藥物的包封方式 藥物是嵌入雙分子層親油部分還是包入水層，會影響其分布 和釋放。體外試驗證明，藥物包入水層中，比嵌入脂相親油基中 釋放速率快。 5.給藥途徑 靜脈給藥：受血漿蛋白、酶和血清等多種因素影響。 口服：受飲食、膽鹽、酶和pH的影響； 靜脈給藥：以小粒徑作用時間長； 眼、鼻和皮膚給藥：以大粒徑的脂質(zhì)體作用時間長； 氣霧化脂質(zhì)體:吸入時不論大小，均多滯留于肺,脂質(zhì)體的作用機理(影響因素,一、細胞親和性和組織相容性 二、緩釋性 三、降低藥物毒性 四、提高藥物穩(wěn)定性 五、靶向性,第七節(jié) 脂質(zhì)體的特點,

31、一）靶向性的概念 利用載體藥物釋放系統(tǒng)改變藥物的動力學，僅使藥物 作用于病變部位的靶細胞，而避免對正常細胞的作用。 1.藥物靶向性傳遞的三種方法： 藥物本身具有靶向能力。 將活性藥物以藥理惰性的形式（即“前藥” ）給予，在靶部位經(jīng)化學或酶活化后發(fā)揮治療作用。例如多巴胺的前藥L-多巴，脂溶性高，可透過血腦屏障，在紋狀體脫羧酶的作用下轉(zhuǎn)變成多巴胺，發(fā)揮療效。 利用生物惰性大分子載體系統(tǒng)將藥物靶向于特定部位,脂質(zhì)體的靶向性,2、靶向性分級： 級：器官組織靶向性，將藥物靶向到特定的組織器官 的毛細血管床； 級：細胞靶向性，將藥物選擇性輸送到特定的細胞（如腫瘤細胞、血管內(nèi)皮細胞、心肌細胞等）； 級：細胞

32、內(nèi)靶向性，將藥物導入細胞內(nèi)亞細胞位點，（如溶酶體、線粒體或核等,脂質(zhì)體的靶向性,二）脂質(zhì)體作為靶向藥物載體的特點 1、細胞毒性很低，無免疫原性，無致熱原性，能正常代謝和消除；（脂質(zhì)體的主要成分是磷脂和膽固醇，它們是哺乳動物細胞膜的天然成分）。 2、脂質(zhì)體的大小、成分、表面電荷等有很大的選擇空間； 3、脂質(zhì)體能包囊親水性和親脂性的很多藥物，包括酶、激 素、維生素、抗生素和細胞因子等； 4、制備簡單,脂質(zhì)體的靶向性,5、不同于固體的聚合物載體系統(tǒng)（如微粒、納米粒），脂質(zhì)體雙層脂膜是動態(tài)的結(jié)構(gòu)，允許表面結(jié)合的靶向分子有更大的自由度，因此靶向分子能以最優(yōu)構(gòu)型與 靶部受體結(jié)合； 6、脂質(zhì)體為所包囊藥物的靶向性提供了新的可能性，包括細胞外釋放、細胞膜融合和內(nèi)吞，藥物的靶