水中揮發(fā)酚的測定

1、實驗二水中揮發(fā)酚的測定一. 實驗目的1 了解酚污染對水環(huán)境的影響。2 掌握用萃取比色法和直接光度法測定酚的原理和操作技術。二. 實驗原理酚是水體中的重要污染物，會影響水生生物的正常生長，使水產(chǎn)品發(fā)臭。水中酚含量超過0.3毫克/升時，可引起魚類的回避。水體中酚的種類較多，部分酚可以揮發(fā)，本實驗僅測定可被蒸餾的揮發(fā)酚。在堿性條件和氧化劑鐵氰化鉀作用下，酚類與4-氨基安替比林反應，生成桔紅色的吲哚酚安替比林染料，在510nm處有最大吸收。若用氯仿萃取此染料，可以增加顏色的穩(wěn)定性，提咼靈敏度，在 460nm處有最大吸收。該方法可測定苯酚及鄰、 間位取代的酚，但不能測定對位有取代基的酚。 由于樣品中各

2、種酚的相對含量不同，因而不能提供一個含混合酚的通用標準。通常選用苯酚作標準，任何其它酚在反應中產(chǎn)生的顏色都看作苯酚的結(jié)果。取代酚一般會降低響應值， 因此，用該方法測出的值僅代表水樣中揮發(fā)酚的最低濃度。三. 儀器和試劑1. 721型分光光度計及1厘米和3厘米比色皿2. 500毫升全玻璃蒸餾器3. 無酚水本實驗均用無酚水，制備方法如下：(1) 置水于全玻璃磨口蒸餾器內(nèi)，加氫氧化鈉溶液至強堿性，滴加高錳酸鉀溶液至深紫 色，加熱蒸餾，餾出液貯于硬質(zhì)玻璃瓶中。(2) 于每升重蒸餾水中加入0.2克活性炭，充分振搖，放置過夜，過濾，貯于硬質(zhì)玻璃瓶中。4. 硫酸銅溶液稱取100克硫酸銅(CUSO45H2O)溶

3、解于1升水中。5. 磷酸溶液量取10.0毫升85%的磷酸溶液用水稀釋至 100毫升。6. 0.02M溴酸鉀-溴化鉀溶液稱取3.2克無水溴酸鉀溶于水中，加入10克溴化鉀，溶解后移入 1000毫升容量瓶內(nèi)，稀釋至刻度。7. 0.0250M硫代硫酸鈉標準溶液稱取6.2克硫代硫酸鈉，溶于1升煮沸后冷卻的水中，加入0.4克氫氧化鈉，貯于棕色瓶內(nèi)，標定方法如下：于250毫升碘量瓶中加入 100毫升水、1.0克碘化鉀、10毫升0.0250M重鉻酸鉀溶液和 5毫 升3M硫酸，搖勻，加塞后置于暗處5分鐘，用待標定的硫代硫酸鈉溶液滴定至淺黃色。然后加入1%淀粉溶液1.0毫升，繼續(xù)滴定至藍色剛好消失，記錄用量，平行

4、做三份。硫代硫酸鈉溶液的摩爾M1為：M1=2X MX V2/V1&酚標準貯備液稱取1.0克苯酚溶于煮沸后冷卻的水中，稀釋至 1升。按下法標定：取10.00毫升酚貯備液于 250毫升碘量瓶中，加入 100毫升水，10.00亳升0.02M溴酸鉀一 溴化鉀溶液，立即加入 5亳升濃鹽酸，蓋好瓶塞，搖勻，于暗處靜置10分鐘，加入1克碘化鉀搖勻，5分鐘后，用0.0250M硫代硫酸鈉滴定呈淡黃色，再加 1毫升淀粉溶液，繼續(xù)滴 定呈藍色剛好消失，記錄用量。用水代替酚貯備液，做空白滴定，記錄用量。酚標準貯備液(毫克 /毫升)=(A-B )X M/VX( 94/6 ) 式中：A為空白滴定值(毫升)；B為滴定體積(

5、毫升)；M為硫代硫酸鈉摩爾濃度；V為貯備酚溶液體積(10.00毫升)；94為苯酚的摩爾質(zhì)量(克)。9 酚標準中間液將酚標準貯備液稀釋至濃度為0.10毫克/毫升。10.酚標準使用液吸取5.00毫升酚標準中間液于500毫升容量瓶中，用煮沸后冷卻的水稀釋至刻度，此溶液含酚量為1.00微克/毫升。用前2小時配制。11 緩沖溶液稱取20克氯化氨溶于100毫升濃氨水中，調(diào)節(jié) pH為9.8。12. 4氨基安替比林溶液稱取2.0克4 氨基安替比林溶于水中，稀釋到100毫升，用時配制。該溶液貯于棕色瓶內(nèi)，在冰箱中可保存一周。13. 鐵氰化鉀溶液稱取8.0克鐵氰化鉀溶于100毫升水中，可保存一周。14. 氯仿四.

6、 實驗步驟1預蒸餾量取250亳升待測水樣于蒸餾瓶中，加兩滴甲基橙指示劑，用磷酸溶液水樣調(diào)呈橙紅色(此時pH約為4)。加入5.0毫升硫酸銅溶液(如取樣時已加過，則不必再加)及數(shù)粒玻璃珠，加熱蒸餾，以250亳升量筒或容量瓶收集餾出液。待蒸餾出約225毫升后，停止加熱。液面靜止后，加入25毫升水，繼續(xù)蒸餾到餾出液250毫升為止。2. 萃取比色法(1 )將250毫升餾出液轉(zhuǎn)入 500毫升分液漏斗中，或用移液管取部分餾出液稀釋到250亳升，使溶液的酚含量不大于15微克。(2) 分別取酚的標準使用液0,0.50,1.00,2.00,4.00,6.00,8.00,10.00,15.00 毫升，用 250 毫

7、升煮沸后冷卻的水稀釋，移入500毫升分液漏斗中。(3) 在分液漏斗內(nèi)依次加入2毫升緩沖溶液，1.5毫升4-氨基安替比林溶液，混勻，加入1.5毫升鐵氰化鉀溶液，再混勻。靜置10分鐘顯色。(4) 分別加入13.00毫升氯仿，劇烈振搖 2分鐘萃取，靜置分層。(5) 擦干分液漏斗的導管內(nèi)壁，塞入一小團脫脂棉，將有機相直接放入比色皿中。(6) 在460nm波長處，以氯仿為參比，用3厘米比色皿測定各標準系列的吸光度，繪制標 準曲線。同時測定樣品的吸光度，從標準曲線上查出對應的含酚量。標準系列和樣品的吸光度都應扣除試劑的空白值。3. 直接光度法水樣含酚濃度在 0.1 5毫克/升時，可采用此法。(1)繪制標準

8、曲線于50亳升比色管中分別加入 0,0.50,1.00,1.50,2.00,2.50毫升酚標準中間液，加入 0.5毫升緩 沖溶液，1毫升4氨基安替比林溶液，混勻。加入 1毫升鐵氰化鉀溶液，用水稀釋到50 毫升，再混勻。放置 15分鐘后，于510nm波長處，用1厘米比色皿，以試劑空白為參比， 測定吸光度。繪制標準曲線。(2 )水樣測定取50毫升餾出液(含酚量小于 0.25毫克)或分取適量餾出液用水稀釋到50毫升，置于比色管中，按標準系列的步驟操作，測定吸光度。五. 數(shù)據(jù)處理酚(毫克/升)=測得的酚含量/水樣的體積六. 注意事項1 水樣中的酚不穩(wěn)定，易揮發(fā)和氧化，并受微生物作用而損失。因此，水樣采

9、集后應加氫 氧化鈉保存劑，并盡快測定。2氧化性，還原性物質(zhì)，金屬離子及芳香胺類化合物對于測定有干擾，預蒸餾可除去大多數(shù)干擾物。但對污染嚴重的水樣，蒸餾前要用下述方法消除干擾物：(1 )除氧化劑加入碘化鉀和酸后如游離出碘，說明有氧化劑存在。這時可用過量的硫酸亞鐵和亞砷酸鈉除去。(2 )除硫化物用磷酸調(diào)節(jié)水樣pH=4,攪拌曝氣，除去二氧化硫及硫化氫。(3)除油類用濃氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)水樣pH為12 13,以四氯化碳提取油類，棄去有機相。加熱蒸去水相中殘余的四氯化碳。3. 一次蒸餾足以凈化樣品。若出現(xiàn)餾出液渾濁，需用磷酸酸化后再蒸餾。4. 樣品和標準溶液中加入緩沖液和4氨基安替比林后要混勻才能加入鐵氰化鉀，否則結(jié) 果偏低。5. 萃取比色法中，試劑空白以氯仿為參比的吸光度應在0.10以下，否則4 氨基安替比林 溶液應重新配制或采用新出廠產(chǎn)